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铽-钛铁试剂络合物荧光猝灭法测定辅酶Ⅱ
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作者 李启忠 郑洁 +2 位作者 吕雪飞 郭祥群 赵一兵 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期377-380,共4页
辅酶与酶蛋白组成结合蛋白酶,而结合蛋白酶催化反应的专一性取决于所含的辅酶,因此有必要建立辅酶的灵敏测定方法,并用于结合蛋白酶的催化动力学行为、构象及活性等化学特性的表征.实验表明辅酶II显著猝灭铽钛铁试剂络合物的荧光.本文... 辅酶与酶蛋白组成结合蛋白酶,而结合蛋白酶催化反应的专一性取决于所含的辅酶,因此有必要建立辅酶的灵敏测定方法,并用于结合蛋白酶的催化动力学行为、构象及活性等化学特性的表征.实验表明辅酶II显著猝灭铽钛铁试剂络合物的荧光.本文推导了ΔF与辅酶II初始浓度的线性关系式(ΔF=nk[Q]0 ),并据此建立了辅酶II的高灵敏荧光分析方法.研究了荧光光谱、缓冲液、pH范围、铽离子和钛铁试剂最佳浓度、灵敏度、检测限和干扰等分析化学特性.辅酶II在40. 0nmol/L^1. 0μmol/L浓度范围内呈良好的线性,线性回归方程:ΔF=0. 868C(nmol/L) -13. 1(R2 =0. 994),检测限:1. 63×10-8 mol/L,且牛血清白蛋白及其它生物学中的常见离子在一定范围内均不干扰测定.结果表明,该方法用于测定辅酶II操作简便,测定快速,并预示着该方法可应用于若干含磷酸基的重要辅酶的测定. 展开更多
关键词 钛铁试剂 辅酶Ⅱ 络合物 荧光猝灭法 牛血清白蛋白 线性回归方程 化学特性 酶催化反应 动力学行为 线性关系式 蛋白组成 结合蛋白 测定方法 初始浓度 荧光分析 荧光光谱 pH范围 最佳浓度 浓度范围 蛋白酶 检测限 专一性
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