基于miR⁃26a/TRPC6轴探究六味地黄汤对糖尿病肾病大鼠肾脏保护作用机制

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作者 李杨 温伟波 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第3期185-192,共8页

目的:探讨六味地黄汤改善糖尿病肾病大鼠的作用机制。方法:八周龄雄性SD大鼠60只,体质量180~220 g,随机分为6组(n=10),即正常组、模型组、六味地黄汤低剂量组,六味地黄汤中剂量组,六味地黄汤高剂量组以及厄贝沙坦处理组。正常组常规饲... 目的:探讨六味地黄汤改善糖尿病肾病大鼠的作用机制。方法:八周龄雄性SD大鼠60只,体质量180~220 g,随机分为6组(n=10),即正常组、模型组、六味地黄汤低剂量组,六味地黄汤中剂量组,六味地黄汤高剂量组以及厄贝沙坦处理组。正常组常规饲料喂养,联合一次性等剂量枸橼酸缓冲液腹腔注射。其余50只采用高脂饲养加一次性注射链脲佐菌素造模。造模成功后,给予六味地黄汤灌胃治疗,阳性对照使用厄贝沙坦处理。给药结束后先收集24 h尿液,生化法检测尿蛋白含量;ELISA检测空腹血糖、肌酐含量,检测大鼠血清中炎性因子白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素1β(IL-1β)水平。大鼠称重,处死,分离双肾组织,苏木素-伊红(H&E)染色观察各组大鼠肾脏组织变化;qPCR检测miR-26a表达水平;Western blot和免疫组化检测肾脏组织中TRPC6表达。结果:与正常组比较,模型组中空腹血糖、24 h尿蛋白、肌酐水平明显升高,体重降低,肾指数升高,炎性因子IL-6和IL-1β表达显著升高,miR-26a表达降低,TRPC6表达水平升高(P<0.05),模型组大鼠中肾组织损伤严重;与模型组比较,六味地黄汤灌胃处理后,空腹血糖、24 h尿蛋白、肌酐水平降低,体重升高,肾指数降低,炎性因子IL-6和IL-1β表达降低,miR-26a表达增强,TRPC6表达受到抑制(P<0.05),大鼠肾组织损伤得到改善,且高剂量组改善效果优于低剂量组。结论:六味地黄汤可能通过miR-26a/TRPC6分子轴改善大鼠糖尿病肾病。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 六味地黄汤 miR-26a trpc6

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高同型半胱氨酸经TRPC6/NF-κB诱导肾小球足细胞铁死亡的机制 被引量：5

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作者 李小琴 汪乐新 +4 位作者 马小军 李娜 卢冠军 张智涵 张鹏程 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第2期174-181,共8页

目的探讨TRPC6/NF-κB在高同型半胱氨酸(Hcy)介导下诱导肾小球足细胞铁死亡的机制。方法对小鼠肾脏足细胞进行体外培养,将其分成对照组(0μmol/LHcy)和Hcy组(80μmol/LHcy),干预细胞48 h后,采用Western blot检测GPX4、SLC7A11铁死亡相... 目的探讨TRPC6/NF-κB在高同型半胱氨酸(Hcy)介导下诱导肾小球足细胞铁死亡的机制。方法对小鼠肾脏足细胞进行体外培养,将其分成对照组(0μmol/LHcy)和Hcy组(80μmol/LHcy),干预细胞48 h后,采用Western blot检测GPX4、SLC7A11铁死亡相关蛋白以及TRPC6、NFκb蛋白表达情况;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)与免疫荧光检测TRPC6的表达水平;通过流式细胞术检测足细胞凋亡率;采用丙二醛(MDA)试剂盒测定细胞内MDA活性水平。转染TRPC6干扰片段及TRPC6阴性对照(NC)后qRT-PCR分组为Control、si-NC及si-TRPC6(si-TRPC6-1、si-TRPC6-2、si-TRPC6-3),Western blot分组为Control、Hcy、si-NC+Hcy、si-TRPC6+Hcy,采用qRT-PCR检测TRPC6 mRNA的表达;采用Western blot检测GPX4、SLC7A11、NF-κb及TRPC6的表达水平;采用流式细胞术检测干扰后足细胞凋亡水平。结果(1)与Control组相比,Hcy组中铁死亡相关蛋白GPX4、SLC7A11表达水平减低,凋亡水平增加(P<0.05);(2)与Control组相比,Hcy组TRPC6蛋白、mRNA水平及免疫荧光表达均增加,MDA水平增高,NF-κb信号通路蛋白表达增加,两组间比较均差异有统计学意义(P<0.05);(3)与si-NC组相对比,si-TRPC6(si-TRPC6-1、si-TRPC6-2、si-TRPC6-3)组中TRPC6的mRNA表达水平降低,其中si-TRPC6-3干扰效果最佳(P<0.05);转染TRPC6NC与TRPC6干扰片段并给予Hcy干预后,与Hcy组相比,si-NC+Hcy组GPX4、SLC7A11、NFκb、TRPC6表达无差异;与si-NC+Hcy组相比,si-TRPC6+Hcy组中铁死亡相关蛋白:GPX4、SLC7A11表达增高,NFκb、TRPC6表达降低,凋亡率降低(P<0.05)。结论本研究证实了在Hcy作用下TRPC6/NFκb可以调控肾足细胞铁死亡,是导致肾损伤的机制之一。 展开更多

关键词 铁死亡 瞬时受体-6通道 NF-ΚB 肾脏疾病 高同型半胱氨酸

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膜性肾病肾活检组织中TRPC6和podocalyxin表达改变及其意义 被引量：5

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作者 李大勇 曹海霞 +3 位作者 范亚平 王锋 达展云 张天一 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期486-489,共4页

目的检测膜性肾病(membranous nephropathy,MN)患者肾活检组织中肾小球足细胞瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(transient receptor potential cation channel 6,TRPC6)和podocalyxin的表达和分布,探讨足细胞蛋白TRPC6和podocalyxin在MN蛋... 目的检测膜性肾病(membranous nephropathy,MN)患者肾活检组织中肾小球足细胞瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(transient receptor potential cation channel 6,TRPC6)和podocalyxin的表达和分布,探讨足细胞蛋白TRPC6和podocalyxin在MN蛋白尿发生中的作用。方法采用常规组织病理以及免疫组化检查,并行免疫荧光双套色染色于激光共聚焦显微镜下观察TRPC6、podocalyxin在各组肾组织中表达及分布的改变,以计算机图像分析系统进行半定量分析。结果对照组肾组织podocalyxin沿肾小球毛细血管壁连续均匀分布,阳性荧光信号表达强,MN组表达减弱,且分布不均或节段性缺失,部分呈点状、短线状不连续分布,肾病综合征组较非肾病综合征组减弱更明显;TRPC6在对照组肾小球有一定的表达,沿肾小球基膜呈均匀连续线型分布,MN组TRPC6荧光强度有不同程度增强,且呈点状、团块状不均匀分布,肾病综合征组较非肾病综合征组更明显。结论 TRPC6和podocalyxin在正常肾组织沿肾小球基膜呈连续线状均匀分布;MN患者肾小球内TRPC6表达增加,podocalyxin表达减少,且分布形式亦发生变化,提示TRPC6和podocalyxin等足细胞相关蛋白表达改变及分布异常可能是MN蛋白尿发生的重要病理机制。 展开更多

关键词 膜性肾病 蛋白尿 trpc6 PODOCALYXIN

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全反式维甲酸对肾小球硬化大鼠肾小球TRPC6表达的影响 被引量：4

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作者 张磊 陈秀萍 +3 位作者 蒋玲 覃荷 于海绍 覃远汉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第23期3827-3831,共5页

目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对大鼠肾小球瞬时受体电位阳离子通道6(TRPC6)表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠60只,随机分成假手术组、GS组、ATRA组,每组20只,干预12周后处死大鼠。电镜下观察肾小球超微结构改变。免疫组织化学方法检测... 目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)对大鼠肾小球瞬时受体电位阳离子通道6(TRPC6)表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠60只,随机分成假手术组、GS组、ATRA组,每组20只,干预12周后处死大鼠。电镜下观察肾小球超微结构改变。免疫组织化学方法检测肾脏组织TRPC6、TGF-β1、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的蛋白分布及表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肾脏组织TRPC6 mRNA的表达,免疫印迹法(WB)方法检测肾小球TRPC6的蛋白表达。结果 :与GS组相比,ATRA组大鼠GSI显著下降(P<0.01),肾小球TRPC6、TGF-β1、Col-Ⅳ的蛋白表达量显著下降,TRPC6的mRNA表达量显著下降(P<0.05)。结论:ATRA可能通过抑制肾小球TRPC6的表达而减轻GS进展。 展开更多

关键词 肾小球硬化 全反式维甲酸 trpc6 大鼠 阿霉素

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抗TRPC6多肽单克隆抗体的制备及其识别抗原表位分析 被引量：3

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作者 张萃 卢文菊 +4 位作者 李红枝 黄超贤 王华妹 丘世龙 梅俪凡 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期741-744,共4页

目的:制备抗TRPC6多肽单克降抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法:采用TRPC6多肽偶联血蓝蛋白(KLH)为抗原,免疫小鼠后经细胞融合,间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞;单克隆抗体亚类检测试剂盒鉴定Ig亚型;间接ELISA法鉴定该单克隆抗体的特... 目的:制备抗TRPC6多肽单克降抗体,并对其生物学特性进行鉴定。方法:采用TRPC6多肽偶联血蓝蛋白(KLH)为抗原,免疫小鼠后经细胞融合,间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞;单克隆抗体亚类检测试剂盒鉴定Ig亚型;间接ELISA法鉴定该单克隆抗体的特性、效价及其相对亲和力;采用生物信息学进行抗原表位预测,并通过ELISA单抗相加试验分析单抗识别抗原位点的差异性。结果:获得3株能稳定分泌抗TRPC6多肽的单抗杂交瘤细胞株,分别命名为A2、F11和H8;抗体Ig亚类均为IgG1型;染色体鉴定符合杂交瘤细胞的特性;3株单抗相对亲和力比较F11较强,A2和H8接近;抗体识别位点分析结果表明A2与H8、A2与F11的相加指数分别大于50%,可能识别的是不同位点;而F11与H8的相加指数小于50%,可能识别的是同一位点。结论:抗TRPC6多肽单克隆抗体的成功制备及其识别抗原表位分析,为TRPC6蛋白的相关研究提供物质基础。 展开更多

关键词 trpc6 单克隆抗体 抗原表位

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慢性炎性痛诱致小鼠焦虑样行为和前扣带回TRPC3和TRPC6通道的表达上调 被引量：4

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作者 王旭 杜祎康 +3 位作者 吴文斌 王福东 罗层 白占涛 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期283-289,共7页

目的:探讨慢性炎性痛诱致小鼠焦虑样行为情况下前扣带回(anterior cingulate cortex,ACC)TRPC 3/6通道的表达改变。方法:采用小鼠痛行为检测方法、旷场行为检测方法和免疫印迹实验(Western Blot)。结果:小鼠后肢足底皮下注射完全弗氏佐... 目的:探讨慢性炎性痛诱致小鼠焦虑样行为情况下前扣带回(anterior cingulate cortex,ACC)TRPC 3/6通道的表达改变。方法:采用小鼠痛行为检测方法、旷场行为检测方法和免疫印迹实验(Western Blot)。结果:小鼠后肢足底皮下注射完全弗氏佐剂(complete freund’s adjuvant,CFA)建立慢性炎性痛模型。痛行为检测结果显示足底皮下注射CFA可以诱致小鼠产生长时程的机械性和热痛觉过敏现象。旷场实验可见CFA致炎致痛后的小鼠较正常小鼠在旷场中央区活动距离明显降低,停留时间明显减少,提示慢性炎性痛小鼠表现为显著的焦虑样行为。进一步采用Western Blot实验发现炎性痛焦虑样小鼠前扣带回脑区的TRPC3和TRPC6通道蛋白表达水平较对照组动物显著上调。结论:CFA引发的慢性炎性痛模型中,小鼠产生焦虑样情绪,TRPC3和TRPC6通道蛋白在ACC部位的蛋白表达水平明显升高。提示这些焦虑样痛情绪的发生与疼痛痛觉通路中ACC脑区的TRPC3及TRPC6表达密切相关。 展开更多

关键词 CFA 慢性炎性痛 焦虑样行为 ACC TRPC3 trpc6 小鼠

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中枢神经系统内的TRPC6离子通道 被引量：4

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作者 崔龙彪 金晓航 史娟 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期565-570,共6页

TRPC6是TRP（transient receptor potential,TRP）基因超家族C亚家族（canonical）的成员之一,编码钙可通透的非选择性阳离子通道[1,2]。十余年来的研究证明TRPC6分子参与动物体内许多重要的生理和病理调节过程,如血管与气道平滑肌收缩... TRPC6是TRP（transient receptor potential,TRP）基因超家族C亚家族（canonical）的成员之一,编码钙可通透的非选择性阳离子通道[1,2]。十余年来的研究证明TRPC6分子参与动物体内许多重要的生理和病理调节过程,如血管与气道平滑肌收缩、肾小球滤过膜滤过功能、免疫和血液细胞调节等[3];该分子功能异常会导致高血压和局灶性节段性肾小球硬化[4,5]。 展开更多

关键词 trpc6 中枢神经系统 分布 功能

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Calcineurin和TRPC6参与ET-1诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖 被引量：1

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作者 王小闯 李满祥 +4 位作者 党晓燕 李萍 彭卓 高彦霞 古长维 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1191-1195,共5页

目的:探讨Calcineurin和瞬时感受器电位6(TRPC6)的相互作用以及对内皮素-1(ET-1)诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法:以ET-1刺激肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)检测Calcineurin活性以及TRPC6的表达;分别于ET-1刺激前给予Calcineurin特... 目的:探讨Calcineurin和瞬时感受器电位6(TRPC6)的相互作用以及对内皮素-1(ET-1)诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖的影响。方法:以ET-1刺激肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)检测Calcineurin活性以及TRPC6的表达;分别于ET-1刺激前给予Calcineurin特异性抑制剂环孢素A(CsA)和TRPC6 siRNA处理,测定Calcineurin活性、TRPC6的表达以及细胞的增殖情况;采用Calcineurin活性检测试剂盒检测其活性,Western blot和RT-PCR检测TRPC6的表达,MTT法检测PASMCs的增殖。结果:ET-1可激活原代培养的PASMCs中Calcineurin的活性,上调TRPC6的表达;CsA和TRPC6 siRNA可以分别降低TRPC6表达和Calcineurin活性;也可以抑制ET-1刺激的PASMCs增殖。结论:Calcineurin与TRPC6参与ET-1诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖并相互影响。 展开更多

关键词 CALCINEURIN NFAT信号通路 trpc6 ET-1 肺动脉平滑肌细胞

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TRPC6在肺部的生理与病理生理功能 被引量：3

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作者 周丽芬 陈庆梓 李建华 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期77-80,F0003,共5页

经典瞬时受体电位(transient receptor potential canonical,TRPC)通道是一类非选择性钙离子通道,TRPC6是TRPC家族的成员之一,其基因编码的蛋白在人体脑、肾、肝和肺等多个器官均有表达。TRPC6不仅是肺中表达最丰富的TRPC通道,也是目前... 经典瞬时受体电位(transient receptor potential canonical,TRPC)通道是一类非选择性钙离子通道,TRPC6是TRPC家族的成员之一,其基因编码的蛋白在人体脑、肾、肝和肺等多个器官均有表达。TRPC6不仅是肺中表达最丰富的TRPC通道,也是目前肺部疾病中研究最多的TRPC通道。TRPC6参与动物体内许多重要的生理和病理调节过程,TRPC6的基因突变或过表达可引起胞内钙离子信号通路异常,从而导致多种病理生理改变。肺部疾病的病理生理过程有多种细胞共同参与。TRPC6在不同的细胞中表达不同,表现的生理与病理生理功能则有差异。 展开更多

关键词 trpc6 肺脏 细胞 功能

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敲除TRPC6对MPTP诱导小鼠神经炎性损伤的影响 被引量：2

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作者 王淑贞 尹红 +2 位作者 钟耀艺 范伟伟 林庚海 《中国比较医学杂志》 北大核心 2017年第12期1-7,共7页

目的在小鼠MPTP(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine)诱导的神经炎症模型中检测小胶质细胞的TRPC6通道的表达,并探究TRPC6通道对于炎症表达和多巴胺能神经元损伤的影响。方法在MPTP注射的小鼠中,用标记CD11b的磁珠分选出黑... 目的在小鼠MPTP(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine)诱导的神经炎症模型中检测小胶质细胞的TRPC6通道的表达,并探究TRPC6通道对于炎症表达和多巴胺能神经元损伤的影响。方法在MPTP注射的小鼠中,用标记CD11b的磁珠分选出黑质区域的小胶质细胞,并通过蛋白质免疫印迹的方法检测TRPC6的表达。在构建CD11b-TRPC6^(-/-)小鼠后,通过免疫荧光的方法检测MPTP诱导的小胶质细胞的增殖以及多巴胺能神经元的损伤。同时结合蛋白质免疫印迹和实时荧光定量PCR的方法,在MPTP模型中检测TRPC6敲除后cryαB蛋白水平和炎症因子表达。结果在MPTP注射的小鼠中,小胶质细胞中TRPC6通道的表达显著上调。另外,在注射MPTP的CD11b-TRPC6^(-/-)小鼠中,小胶质细胞中的cryαB蛋白水平被上调。同时,MPTP诱导的小胶质细胞的增殖以及炎症因子表达增强被抑制,而多巴胺能神经元的损伤得到缓解。结论小胶质细胞中TRPC6通道表达在MPTP模型中上调,而TRPC6的敲除可增加小胶质细胞中cryαB蛋白水平,并降低炎症因子的表达,从而减少多巴胺能神经元的损伤。 展开更多

关键词 小胶质细胞 trpc6通道 炎症 MPTP 多巴胺能神经元 帕金森病

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益气养阴活血方对糖尿病肾病大鼠肾组织TRPC6、RhoA表达的影响 被引量：15

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作者 宋纯东 喻青 吴晨晨 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第11期2738-2740,I0001,共4页

目的:探讨益气养阴活血方对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织TRPC6、RhoA表达的影响。方法:大鼠喂养1周后分为3组:空白组、模型组、中药组。建立DN大鼠模型,造模成功后空白组和模型组灌服生理盐水,中药组灌服益气养阴活血方颗粒,8周后生化检测2... 目的:探讨益气养阴活血方对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织TRPC6、RhoA表达的影响。方法:大鼠喂养1周后分为3组:空白组、模型组、中药组。建立DN大鼠模型,造模成功后空白组和模型组灌服生理盐水,中药组灌服益气养阴活血方颗粒,8周后生化检测24 h尿蛋白、血肌酐(Scr)、谷丙转氨酶(ALT)、血脂(TC、TG)、空腹血糖(FBG)等;测量肾小球直径,称取左肾重量、计算肥大指数;PAS染色观察大鼠肾脏病理;免疫组化检测肾组织TRPC6、RhoA表达。结果:益气养阴活血方能够降低实验大鼠肾组织TRPC6、RhoA的表达,减少24 h尿蛋白,升高ALB,缩小肾小球直径,改善大鼠体质量及肾脏病理,保护足细胞,降低肥大指数及血脂、血糖。结论:益气养阴活血方可能通过影响DN大鼠肾组织TRPC6、RhoA的表达,而改善上述生化指标,减轻肾脏病理损害,并对肝、肾功能未见明显损害。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 益气养阴活血方 trpc6/RhoA 实验研究

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小鼠子宫中TRPC6通道在离体子宫收缩中的作用 被引量：3

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作者 冯娜 吕伟祯 陈兴娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期827-832,共6页

目的研究小鼠子宫中经典瞬时感受器电位通道6(transient receptor potential canonical 6,TRPC6)离子通道在离体子宫收缩中的作用。方法分离野生型(WT)或TRPC6-KO小鼠子宫,使用等张张力测试系统观察TRPC6通道抑制剂Pyr10和Larixyl对离... 目的研究小鼠子宫中经典瞬时感受器电位通道6(transient receptor potential canonical 6,TRPC6)离子通道在离体子宫收缩中的作用。方法分离野生型(WT)或TRPC6-KO小鼠子宫,使用等张张力测试系统观察TRPC6通道抑制剂Pyr10和Larixyl对离体小鼠子宫收缩的影响;分离WT或TRPC6-KO小鼠子宫平滑肌细胞,使用钙成像技术观察催产素引起的细胞内钙离子浓度的变化。结果Pyr10和Larixyl能明显抑制催产素引起的子宫收缩;催产素引起的TRPC6-KO小鼠子宫的收缩持续时间明显较WT的长;催产素引起TRPC6-KO的子宫平滑肌细胞钙离子浓度升高后减退速度较WT缓慢。结论TRPC6通道介导的钙离子内流参与了小鼠子宫的收缩,并且催产素引起的小鼠子宫收缩随时间的衰减可能与TRPC6通道电流的衰减有关。 展开更多

关键词 trpc6通道 小鼠离体子宫 平滑肌 子宫收缩 催产素 钙离子

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大鼠触液核中TRPC6的分布及其在吗啡依赖与戒断条件下的表达

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作者 吴婷婷 赵子军 +3 位作者 徐春 嵇富海 冯昌栋 张励才 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期644-650,共7页

目的:研究TRPC6在大鼠触液核(cerebrospinal fluid-contacting nucleus,CSF-CN)中的分布及其在吗啡依赖与戒断条件下的表达变化。方法:雄性SD大鼠随机分为4组:正常大鼠组、生理盐水组、吗啡依赖组和吗啡戒断组。每组大鼠进行戒断总评分(... 目的:研究TRPC6在大鼠触液核(cerebrospinal fluid-contacting nucleus,CSF-CN)中的分布及其在吗啡依赖与戒断条件下的表达变化。方法:雄性SD大鼠随机分为4组:正常大鼠组、生理盐水组、吗啡依赖组和吗啡戒断组。每组大鼠进行戒断总评分(total withdrawal scores,TWS);采用侧脑室注射CB-HRP,并结合CB-HRPP/TRPC6免疫荧光双标技术,观察大鼠触液核内TRPC6的表达情况。结果:上述4组大鼠的戒断总评分分别为2.0±0.6、2.1±0.7、2.6±0.7和41.0±4.6,其中吗啡戒断组与其他三组相比,差异具有显著性(P<0.01);在侧脑室注射CB-HRP后,上述4组大鼠触液核内可观察到大量的CB-HRP标记神经元;同时在触液核内也可观察到部分神经元表达TRPC6免疫阳性。经计数,CB-HRP/TRPC6双标神经元的数量分别为81.78±4.93、79.44±7.09、254.61±15.36和260.00±12.04,其中吗啡依赖组和吗啡戒断组分别与其他两组相比,差异具有显著性(P<0.01);但吗啡依赖组和吗啡戒断组相比,差异无显著性(P>0.05)。结论:正常大鼠触液核内表达TRPC6;触液核可能通过上调TRPC6的表达参与吗啡依赖和戒断的形成。 展开更多

关键词 触液核 trpc6 吗啡依赖与戒断 大鼠

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黄芪总苷对TGF-β1诱导下足细胞TRPC6表达的影响 被引量：7

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作者 黄海庭 吴好好 +4 位作者 覃幼玲 林栩 尤燕舞 郭鹏威 汤春荣 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期370-373,共4页

目的:通过观察黄芪总苷对TGF-β1诱导足细胞TRPC6表达的影响,探讨黄芪总苷对足细胞保护作用。方法:体外培养小鼠肾小球足细胞,将成熟的足细胞分为5组:正常对照组、TGF-β1干预组、TGF-β1干预+低剂量黄芪总苷组、TGF-β1干预+中剂量黄... 目的:通过观察黄芪总苷对TGF-β1诱导足细胞TRPC6表达的影响,探讨黄芪总苷对足细胞保护作用。方法:体外培养小鼠肾小球足细胞,将成熟的足细胞分为5组:正常对照组、TGF-β1干预组、TGF-β1干预+低剂量黄芪总苷组、TGF-β1干预+中剂量黄芪总苷组、TGF-β1干预+高剂量黄芪总苷组,48 h后MTT检测各组细胞增殖抑制率,Western blot及RT-PCR检测TRPC6蛋白及mRNA表达水平。结果:TGF-β1干预使足细胞足突回缩、甚至消失,抑制足细胞的增殖(P<0.05),提高TRPC6mRNA和蛋白表达(P<0.05),黄芪总苷能逆转上述变化,对足细胞具有保护作用并且存在一定的量效关系。结论:TPRC6在TGF-β1干预下足细胞损伤作用中起重要作用,黄芪总苷可能通过下调足细胞TRPC6的表达实现对足细胞的保护作用。 展开更多

关键词 足细胞 转化生长因子-Β1 trpc6 黄芪总苷

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TRPC6特异性抑制剂SAR7334对宫颈癌细胞生物学行为影响的研究

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作者 蹇梦婵 范丽 +4 位作者 吴昀 史丹丹 卢敏 刘睿 贺细菊 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第6期674-679,共6页

目的探讨TRPC6在宫颈癌组织中的表达及其抑制剂SAR7334对Siha(人宫颈鳞癌细胞)增殖和迁移的影响。方法选取2017年9月至2019年9月在十堰市人民医院确诊为宫颈鳞癌的11例病例作为实验组,对照组取同一患者正常宫颈组织,免疫印迹法和免疫荧... 目的探讨TRPC6在宫颈癌组织中的表达及其抑制剂SAR7334对Siha(人宫颈鳞癌细胞)增殖和迁移的影响。方法选取2017年9月至2019年9月在十堰市人民医院确诊为宫颈鳞癌的11例病例作为实验组,对照组取同一患者正常宫颈组织,免疫印迹法和免疫荧光法等检测宫颈组织中TRPC6蛋白表达;使用20、100、1000 nmol/L SAR7334处理Siha细胞,CCK8法和Hoechst染色检测细胞增殖与凋亡;划痕实验和Transwell法验检测细胞迁移。免疫印迹法检测TRPC6通道阻断后Siha细胞自噬程度的改变。结果宫颈癌组织中TRPC6表达上调;与对照组相比,用100 nmol/L SAR7334阻断TRPC6后,Siha细胞的增殖和迁移减少,划痕愈合率降低,凋亡率增加(P<0.05)。TRPC6通道阻断后,Siha细胞自噬减弱。结论 TRPC6在宫颈癌中表达上调,其抑制剂SAR7334可能通过影响细胞自噬抑制宫颈癌Siha细胞的增殖与迁移。 展开更多

关键词 trpc6 SAR7334 宫颈癌SIHA细胞 细胞自噬

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TRPC6介导的钙离子紊乱通过激活STAT3促进肾小管上皮细胞损伤后炎症反应及肾间质纤维化 被引量：5

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作者 练飞鸿 付荣 +1 位作者 王雯倩 彭璇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1462-1469,共8页

目的:采用动物及细胞实验探讨肾小管上皮细胞(TECs)中瞬时受体电位阳离子通道C亚族成员6(TRPC6)介导的钙离子(Ca^(2+))紊乱对肾脏纤维化过程中炎症反应及细胞外基质合成的影响及机制。方法:(1)在体实验:建立小鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型... 目的:采用动物及细胞实验探讨肾小管上皮细胞(TECs)中瞬时受体电位阳离子通道C亚族成员6(TRPC6)介导的钙离子(Ca^(2+))紊乱对肾脏纤维化过程中炎症反应及细胞外基质合成的影响及机制。方法:(1)在体实验:建立小鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型,分为假手术组及UUO模型组,分别向两组小鼠腹腔注射TRPC6抑制剂BTP2或溶媒,在手术后14 d取肾组织留检。通过激光共聚焦检测TECs内Ca^(2+)浓度;通过HE染色及Masson染色检测肾组织病理改变;Westernblot法检测TRPC6、纤维化相关蛋白I型胶原(COL1)、信号转导及转录激活因子3(STAT3)及p-STAT3的表达水平;real-timePCR法检测炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA水平。(2)体外实验:应用TGF-β刺激人肾脏近曲小管上皮细胞株HK-2,向HK-2细胞转染TRPC6质粒或TRPC6 siRNA,Westernblot法检测TRPC6、COL1、STAT3及p-STAT3的表达水平;real-timePCR法检测炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α的mRNA水平。结果:(1)UUO模型中,TECs内Ca^(2+)浓度较假手术组显著升高;腹腔注射BTP2可减轻肾小管损伤及肾脏炎症细胞浸润,显著降低肾组织炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α的mRNA水平,降低肾组织COL1及p-STAT3蛋白水平(P<0.05)。(2)体外实验中,TGF-β刺激下,HK-2细胞中炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α的mRNA水平和COL1表达增多,高表达TRPC6进一步增加炎症因子及COL1的表达,沉默TRPC6则降低炎症因子及COL1的表达(P<0.05)。结论:在UUO模型及体外培养的TECs实验中,TRPC6介导的Ca^(2+)紊乱通过促进STAT3磷酸化,加重肾脏炎症反应及肾间质纤维化水平。 展开更多

关键词 trpc6蛋白 肾小管上皮细胞 炎症 肾间质纤维化 信号转导及转录激活因子3

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足细胞损伤中JAK2/STAT3通路与TRPC6相互作用的机制探讨 被引量：6

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作者 吴慢 王先鹤 +1 位作者 高慧 邓芳 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第5期716-723,共8页

目的研究在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的足细胞损伤中,JAK2/STAT3通路与瞬时受体电位非选择性阳离子通道蛋白6(TRPC6)相互作用的机制。方法将小鼠足细胞分为对照、AngⅡ损伤、AngⅡ+氯沙坦、AngⅡ+AG490、AngⅡ+SKF96365组等,通过Western ... 目的研究在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的足细胞损伤中,JAK2/STAT3通路与瞬时受体电位非选择性阳离子通道蛋白6(TRPC6)相互作用的机制。方法将小鼠足细胞分为对照、AngⅡ损伤、AngⅡ+氯沙坦、AngⅡ+AG490、AngⅡ+SKF96365组等,通过Western blot、qRT-PCR检测各分组的TRPC6、JAK2/STAT3通道蛋白及mRNA表达水平,通过ELISA检测各分组的肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6的分泌水平。结果与对照组比较,AngⅡ损伤组的JAK2/STAT3、TRPC6、TNF-α和IL-6表达水平增高(P<0.05);与AngⅡ损伤组比较,AngⅡ+氯沙坦组的JAK2/STAT3、TRPC6、TNF-α和IL-6表达水平降低(P<0.05);AngⅡ+AG490组的JAK2/STAT3、TRPC6、TNF-α和IL-6表达水平降低(P<0.05);AngⅡ+SKF96365组的JAK2/STAT3、TRPC6、TNF-α和IL-6表达水平降低(P<0.05)。结论 AngⅡ能够介导TRPC6通道蛋白激活JAK2/STAT3信号通路,抑制JAK2/STAT3信号通路也能下调TRPC6通道蛋白的表达,两者之间存在正反馈机制。 展开更多

关键词 足细胞 JAK2/STAT3通道 trpc6 血管紧张素Ⅱ

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甲基-β-环糊精抑制AngⅡ诱导肾小球系膜细胞增殖及TRPC6表达 被引量：1

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作者 张娜 纪泽泉 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第12期1897-1900,共4页

目的:探讨MβCD(甲基-β-环糊精)对AngⅡ诱导肾小球系膜细胞(GMC)TRPC6的表达及小窝(caveolae)在GMC增殖中的作用。方法:实验分为:空白对照组(Con组)、AngⅡ组、MβCD预处理组(MβCD组)。根据预实验选定AngⅡ10-7mol/L作用GMC24h作为An... 目的:探讨MβCD(甲基-β-环糊精)对AngⅡ诱导肾小球系膜细胞(GMC)TRPC6的表达及小窝(caveolae)在GMC增殖中的作用。方法:实验分为:空白对照组(Con组)、AngⅡ组、MβCD预处理组(MβCD组)。根据预实验选定AngⅡ10-7mol/L作用GMC24h作为AngⅡ组。MβCD组用10-2mol/LMβCD预处理GMC1h后,用10-7mol/LAngⅡ刺激24h。四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测GMC增殖,WesternBlot检测TRPC6蛋白,实时荧光定量PCR检测TRPC6mRNA表达,免疫荧光检测TRPC6的分布。结果:AngⅡ组较Con组明显促进GMC增殖(P<0.05),MβCD组明显抑制AngⅡ对GMC的增殖作用,抑制率为48.96%(P<0.01)。AngⅡ组TRPC6mRNA及蛋白水平均较Con组升高(P<0.01,P<0.05),而MβCD组TRPC6mRNA及蛋白水平均较AngⅡ组降低(P<0.01)。GMCOD值与TRPC6蛋白表达水平呈正相关(R=0.907,P<0.01)。结论:AngⅡ诱导GMC增殖需要完整的小窝结构,TRPC6与GMC增殖密切相关。 展开更多

关键词 小窝 瞬时受体电位阳离子通道蛋白6 血管紧张素Ⅱ 肾小球系膜细胞

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TLR4-TRPC6在LPS致16HBE细胞内NF-κB P65表达和核转位的作用 被引量：5

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作者 李业盛 凌振威 +6 位作者 陈庆梓 吴佑森 叶绮婷 温启锐 戴永亮 李建华 周丽芬 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1642-1647,共6页

目的:探讨Toll样受体4(TLR4)和瞬时受体电位通道蛋白6(TRPC6)信号通路在细菌脂多糖(LPS)诱导气道上皮细胞16HBE内NF-κB P65表达和核转位的作用,为气道炎症的发生机制提供实验依据。方法:用LPS(1 mg/L)作用16HBE细胞0、0.5、2、6、12和2... 目的:探讨Toll样受体4(TLR4)和瞬时受体电位通道蛋白6(TRPC6)信号通路在细菌脂多糖(LPS)诱导气道上皮细胞16HBE内NF-κB P65表达和核转位的作用,为气道炎症的发生机制提供实验依据。方法:用LPS(1 mg/L)作用16HBE细胞0、0.5、2、6、12和24 h后,分别使用RT-PCR和Western blot法检测核因子κB (nuclear factor-κB,NF-κB) P65的mRNA和蛋白表达情况,并用免疫细胞化学染色法检测NF-κB P65的核转位。用RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学染色法检测TLR4抑制剂CLI-095(5 μmol/L)对LPS(1 mg/L)诱导16HBE细胞NF-κB P65表达以及核转位的影响。用RT-PCR、Western blot和免疫细胞化学染色法检测TRPC6激动剂Hyp9(10 μmol/L)对LPS(1 mg/L)诱导16HBE细胞内NF-κB P65表达以及核转位的影响。结果: LPS上调16HBE细胞NF-κB P65的mRNA和蛋白表达及核转位。TLR4抑制剂CLI-095抑制LPS诱导的16HBE细胞内NF-κB P65的mRNA和蛋白表达及核转位。TRPC6激动剂Hyp9加重LPS诱导的16HBE细胞内NF-κB P65 的mRNA和蛋白表达及核转位。结论: LPS通过TLR4-TRPC6信号通路诱导16HBE细胞内NF-κB P65表达和核转位。 展开更多

关键词 TLR4-trpc6信号通路 气道上皮细胞 核因子-ΚB 核转位 脂多糖

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TRPC6通过AKT/GSK-3β和ERK信号通路抑制心肌纤维化的形成 被引量：1

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作者 吴奇芳 廖燕宏 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期27-32,共6页

目的探讨瞬时受体电位通道6(transient receptor potential canonical 6,TRPC6)介导的蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)/糖原合酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)和胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated ki... 目的探讨瞬时受体电位通道6(transient receptor potential canonical 6,TRPC6)介导的蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)/糖原合酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)和胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)蛋白信号通路在异丙肾上腺素(isoprenaline,ISO)诱导心肌纤维化中的作用。方法取野生型(wild type,WT)和TRPC6基因敲除型(TRPC6 knockout,TRPC6-/-)小鼠各40只,分别使用生理盐水(Saline)和ISO进行注射,根据基因型和注射药物的不同将实验小鼠随机分为以下4组:WT Saline组;WT ISO组;TRPC6-/-Saline组;TRPC6-/-ISO组;用组织免疫荧光技术检测TRPC6通道蛋白在心肌组织中表达水平的差异;用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)、Masson、天狼猩红等组织化学染色法检测心肌组织的纤维化表现;用Western blot(WB)检测小鼠心肌组织蛋白中纤维化及相关通路指标。结果WT ISO组小鼠心肌细胞内出现明显空泡坏死,细胞间炎性细胞浸润,心肌细胞排列紊乱、胶原蛋白纤维沉积明显增加,与之相比,TRPC6-/-ISO组小鼠心肌细胞坏死及炎性细胞浸润较少,胶原纤维沉积显著低于WT ISO组;WB结果显示,WT ISO组小鼠心肌组织内TRPC6表达水平升高;与相应的Saline组相比,WT ISO和TRPC6-/-ISO组小鼠心肌组织中α-平滑肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,COL-1)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated-protein kinase B,p-AKT)、磷酸化糖原合酶激酶-3β(phosphorylated-glycogen synthase kinase-3β,p-GSK-3β)及磷酸化胞外信号调节激酶(phosphorylated-extracellular signal-regulated kinase,p-ERK)蛋白表达量明显增加,但TRPC6-/-ISO组表达水平较WT ISO组明显降低。结论TRPC6基因敲除可通过下调AKT/GSK-3β及ERK信号通路的活性,减轻ISO诱导的心肌纤维化。 展开更多

关键词 异丙肾上腺素 trpc6 心肌纤维化 AKT ERK

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