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Trizol试剂法快速高效提取3种作物不同组织总RNA
被引量：
35
1
作者
吴凯朝
黄诚梅
+2 位作者
李杨瑞
杨丽涛
吴建明
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第12期1934-1939,共6页
【目的】建立适用于禾本科作物不同组织总RNA的快速、高效提取方法,为进行后续的分子生物学研究奠定基础。【方法】采用Trizol试剂法,通过改变抽提上清液吸取量、沉淀方法及沉淀漂洗次数,对甘蔗、玉米和水稻的叶片、茎尖和根尖的总RNA...
【目的】建立适用于禾本科作物不同组织总RNA的快速、高效提取方法,为进行后续的分子生物学研究奠定基础。【方法】采用Trizol试剂法,通过改变抽提上清液吸取量、沉淀方法及沉淀漂洗次数,对甘蔗、玉米和水稻的叶片、茎尖和根尖的总RNA提取方法进行优化。【结果】与吸取0.4mL上清液相比,吸取0.2mL上清液的总RNA OD260/OD280、OD260/OD230值分别在1.95～2.00和2.11～2.44,所获得的总RNA纯度较高。沉淀漂洗两次的OD260/OD230值(2.11～2.47)明显高于沉淀漂洗1次的总RNA OD260/OD230值(1.01～1.61),总RNA纯度较高。经异丙醇沉淀所得的各材料的总RNA28S、18S和5S谱带清晰,无拖尾现象,总RNA完整性较好;LiCl沉淀法的RNA条带较模糊粘连,5S条带明显弥散,总RNA产率相对较低。以Trizol-异丙醇法提取的甘蔗总RNA为模板进行GAPDH基因片段扩增,所获甘蔗的叶片、茎尖和根尖的GAPDH基因表达丰度很强,无特异扩增,目的片段长度为153bp。【结论】改良Trizol-异丙醇法提取甘蔗、玉米和水稻不同组织的总RNA带型清晰、完整性好、纯度和产率高,适用于快速、高效提取禾本科植物不同组织总RNA。
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关键词
RNA
trizol
试剂法
改良
trizol
-异丙醇法
甘蔗
水稻
玉米
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职称材料
酵母破壁酶和蜗牛酶辅助TRIzol试剂法提取酿酒酵母总RNA
被引量：
2
2
作者
安佳星
伍时华
+4 位作者
黄嘉齐
曾令杰
黄锦翔
丰丕雪
易弋
《中国酿造》
CAS
北大核心
2020年第12期46-50,共5页
该研究以酵母破壁酶、蜗牛酶破碎酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)细胞壁,再使用总核糖核酸(RNA)提取试剂(TRIzol)法提取酵母总RNA,通过对总RNA进行浓度与纯度的分析,比较酶处理对RNA提取的影响。结果表明,酵母破壁酶的最佳提取条件...
该研究以酵母破壁酶、蜗牛酶破碎酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)细胞壁,再使用总核糖核酸(RNA)提取试剂(TRIzol)法提取酵母总RNA,通过对总RNA进行浓度与纯度的分析,比较酶处理对RNA提取的影响。结果表明,酵母破壁酶的最佳提取条件为加酶量37.5μL,提取温度27℃,提取时间15 min。在此最佳提取条件下,提取RNA质量浓度为1079.05 ng/μL,A260 nm/A280 nm为2.10,A260 nm/A230 nm为2.15;蜗牛酶的最佳提取条件为加酶量30 mg/mL,提取温度37℃,提取时间30 min。在此最佳提取条件下,提取RNA质量浓度为1673.39 ng/μL,A260 nm/A280 nm为1.99,A260 nm/A230 nm为1.81。结果显示,酵母破壁酶的提取效果优于蜗牛酶。
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关键词
trizol
试剂法
蜗牛酶
酵母破壁酶
酿酒酵母
RNA提取
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职称材料
Trizol试剂法提取金鱼藻总RNA的技术方法改进
被引量：
6
3
作者
姬亚丽
《高原科学研究》
CSCD
2019年第2期51-58,共8页
Trizol试剂法是一种简单有效的总RNA提取方法,由于基因的表达在不同植物或同种植物的不同组织中具有特异性,同种方法很难应用到所有植物中来获得高质量的总RNA,而由于水生植物叶片通常较薄,沉水叶片又常裂为丝状等特点。和陆生植物相比...
Trizol试剂法是一种简单有效的总RNA提取方法,由于基因的表达在不同植物或同种植物的不同组织中具有特异性,同种方法很难应用到所有植物中来获得高质量的总RNA,而由于水生植物叶片通常较薄,沉水叶片又常裂为丝状等特点。和陆生植物相比,在提取水生植物总RNA的过程中,经常出现RNA降解的问题。文章以金鱼藻为实验材料,对Trizol法提取金鱼藻总RNA过程中的若干关键步骤进行了探索,优化了适用于提取金鱼藻总RNA提取的实验方法,得到了可用于转录组分析的高得率、纯度好和完整性高的总RNA,为深入开展后续分子生物学研究提供基础保障。
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关键词
trizol
法
RNA提取
转录组
金鱼藻
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职称材料
题名
Trizol试剂法快速高效提取3种作物不同组织总RNA
被引量：
35
1
作者
吴凯朝
黄诚梅
李杨瑞
杨丽涛
吴建明
机构
广西大学/广西亚热带生物资源保护和利用重点实验室
中国农业科学院甘蔗研究中心/广西农业科学院甘蔗研究所/农业部广西甘蔗生物技术与遗传改良重点实验室/广西甘蔗遗传改良重点实验室
广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室
出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第12期1934-1939,共6页
基金
国家科技支撑计划项目子项目(2012BAD40B04)
广西自然科学基金创新团队项目(2011GXNSFF018002)
+1 种基金
广西自然科学基金项目(2010GXNSFD013034)
广西农业科学院创新团队项目(桂农科2011YT01)
文摘
【目的】建立适用于禾本科作物不同组织总RNA的快速、高效提取方法,为进行后续的分子生物学研究奠定基础。【方法】采用Trizol试剂法,通过改变抽提上清液吸取量、沉淀方法及沉淀漂洗次数,对甘蔗、玉米和水稻的叶片、茎尖和根尖的总RNA提取方法进行优化。【结果】与吸取0.4mL上清液相比,吸取0.2mL上清液的总RNA OD260/OD280、OD260/OD230值分别在1.95～2.00和2.11～2.44,所获得的总RNA纯度较高。沉淀漂洗两次的OD260/OD230值(2.11～2.47)明显高于沉淀漂洗1次的总RNA OD260/OD230值(1.01～1.61),总RNA纯度较高。经异丙醇沉淀所得的各材料的总RNA28S、18S和5S谱带清晰,无拖尾现象,总RNA完整性较好;LiCl沉淀法的RNA条带较模糊粘连,5S条带明显弥散,总RNA产率相对较低。以Trizol-异丙醇法提取的甘蔗总RNA为模板进行GAPDH基因片段扩增,所获甘蔗的叶片、茎尖和根尖的GAPDH基因表达丰度很强,无特异扩增,目的片段长度为153bp。【结论】改良Trizol-异丙醇法提取甘蔗、玉米和水稻不同组织的总RNA带型清晰、完整性好、纯度和产率高,适用于快速、高效提取禾本科植物不同组织总RNA。
关键词
RNA
trizol
试剂法
改良
trizol
-异丙醇法
甘蔗
水稻
玉米
Keywords
RNA
trizol reagent method
modified
trizol
-isopropanol extraction
method
sugarcane
rice
maize
分类号
Q781 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
酵母破壁酶和蜗牛酶辅助TRIzol试剂法提取酿酒酵母总RNA
被引量：
2
2
作者
安佳星
伍时华
黄嘉齐
曾令杰
黄锦翔
丰丕雪
易弋
机构
广西科技大学生物与化学工程学院
广西科技大学广西糖资源绿色加工重点实验室
广西科技大学广西高校糖资源加工重点实验室
出处
《中国酿造》
CAS
北大核心
2020年第12期46-50,共5页
基金
国家自然科学基金(No.31560728)
广西自然科学基金(No.2018GXNSFAA050116)。
文摘
该研究以酵母破壁酶、蜗牛酶破碎酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)细胞壁,再使用总核糖核酸(RNA)提取试剂(TRIzol)法提取酵母总RNA,通过对总RNA进行浓度与纯度的分析,比较酶处理对RNA提取的影响。结果表明,酵母破壁酶的最佳提取条件为加酶量37.5μL,提取温度27℃,提取时间15 min。在此最佳提取条件下,提取RNA质量浓度为1079.05 ng/μL,A260 nm/A280 nm为2.10,A260 nm/A230 nm为2.15;蜗牛酶的最佳提取条件为加酶量30 mg/mL,提取温度37℃,提取时间30 min。在此最佳提取条件下,提取RNA质量浓度为1673.39 ng/μL,A260 nm/A280 nm为1.99,A260 nm/A230 nm为1.81。结果显示,酵母破壁酶的提取效果优于蜗牛酶。
关键词
trizol
试剂法
蜗牛酶
酵母破壁酶
酿酒酵母
RNA提取
Keywords
trizol reagent method
snailase
yeast lyticase
Saccharomyces cerevisiae
RNA extraction
分类号
Q939.5 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
Trizol试剂法提取金鱼藻总RNA的技术方法改进
被引量：
6
3
作者
姬亚丽
机构
西藏大学理学院
出处
《高原科学研究》
CSCD
2019年第2期51-58,共8页
文摘
Trizol试剂法是一种简单有效的总RNA提取方法,由于基因的表达在不同植物或同种植物的不同组织中具有特异性,同种方法很难应用到所有植物中来获得高质量的总RNA,而由于水生植物叶片通常较薄,沉水叶片又常裂为丝状等特点。和陆生植物相比,在提取水生植物总RNA的过程中,经常出现RNA降解的问题。文章以金鱼藻为实验材料,对Trizol法提取金鱼藻总RNA过程中的若干关键步骤进行了探索,优化了适用于提取金鱼藻总RNA提取的实验方法,得到了可用于转录组分析的高得率、纯度好和完整性高的总RNA,为深入开展后续分子生物学研究提供基础保障。
关键词
trizol
法
RNA提取
转录组
金鱼藻
Keywords
trizol reagent method
RNA extraction
Transcriptome sequencing
Ceratophyllum demersum L.
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Trizol试剂法快速高效提取3种作物不同组织总RNA
吴凯朝
黄诚梅
李杨瑞
杨丽涛
吴建明
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
35
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
酵母破壁酶和蜗牛酶辅助TRIzol试剂法提取酿酒酵母总RNA
安佳星
伍时华
黄嘉齐
曾令杰
黄锦翔
丰丕雪
易弋
《中国酿造》
CAS
北大核心
2020
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
Trizol试剂法提取金鱼藻总RNA的技术方法改进
姬亚丽
《高原科学研究》
CSCD
2019
6
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职称材料
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