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人PSP94与TNFα衍生物联合治疗人前列腺癌的实验研究被引量：1: 1; 作者刘丽刘庆鑫 +4 位作者刘立忠石缨谢宝树冷爱军曹颖《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第4期546-550,共5页; 构建了表达人 PSP94、TNFα衍生物 ( TNFα D1 1 a)及 PSP94与 TNFα D1 1 a( PSP94- TNFαD1 1 a)双功能蛋白真核表达质粒 pc DNA- TNFα D1 1 a、pc DNA- PSP94和 pc DNA- PSP94- TNFαD1 1 a,与 rh PSP94和 rh TNFα D1 1 a蛋白分别... 展开更多; 关键词 PSP94 tnfα衍生物基因治疗前列腺癌; 在线阅读下载PDF 职称材料

人PSP94全长cDNA的获得及PSP94-TNF~Δ融合蛋白的构建被引量：7: 2; 作者刘庆鑫刘丽 +4 位作者刘建香刘立忠王颖谢宝树冷爱军《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第3期359-364,共6页; 利用ＲＴ－ＰＣＲ从人肥大前列腺组织钓取９４个氨基酸的人前列腺分泌蛋白（ＰＳＰ９４）全长ｃＤＮＡ，序列分析结果与文献报道的完全一致．将ＰＳＰ９４成熟肽与人ＴＮＦα衍生物（ＴＮＦΔ）通过Ｌｉｎｋｅｒ－ＳＡＰＧＴＰ在基因水... 展开更多; 关键词 tnf衍生物融合蛋白 PSP94 前列腺癌细胞毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

PSP94-TNFαD11a质粒DNA注射体内表达规律被引量：2: 3; 作者刘庆鑫刘丽 +3 位作者刘立忠谢玉树王颖冷爱军《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期60-61,共2页; 将带有目的基因PSP94 TNFαD11a的 pcDNA3 0质粒DNA ,以 5 0 μg/只剂量注射到 39只雄性昆明小鼠的股四头肌内 ,第 2、3、4、5、10、15、2 0、2 5天分别摘眼球取血收集血清 ,每组 3只动物血清混合。同时取注射部位骨骼肌 ,研磨后离心取... 展开更多; 关键词 PSP94 tnf衍生物基因治疗前列腺癌 PSP94-tnf; 在线阅读下载PDF 职称材料

PSP94-TNFαD11a融合基因在NIH3T3细胞中的表达及其产物活性分析被引量：2: 4; 作者刘庆鑫刘丽 +4 位作者石缨刘立忠王烨杨彦曹颖《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期194-197,共4页; 为了分析 PSP94- TNFαD1 1 a融合基因的表达和表达产物的生物学活性 ,将含该融合基因的质粒 pc DNA- PSP94- TNFα D1 1 a转染 NIH3T3细胞 ,72 h后收集细胞培养上清 ,并提取细胞总RNA,经 RT- PCR,得到与目的基因长度相符合的 c DNA片... 展开更多; 关键词前列腺分泌蛋白 tnfα衍生物融合基因表达活性前列腺癌; 在线阅读下载PDF 职称材料

人PSP94的分泌表达及其表达产物抗前列腺癌作用被引量：2: 5; 作者刘丽刘建香 +4 位作者刘立忠石缨谢宝树冷爱军曹颖《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第4期542-545,共4页; 将编码人 94个氨基酸的前列腺分泌蛋白 ( PSP94) c DNA与酵母整合载体 p PICZαA重组 ,构建的重组质粒线性化后转染酵母细胞 GS1 1 5,获得了 PSP94在酵母细胞中遗传性稳定表达酵母工程细胞 .诱导后的培养物中 ,rh PSP94表达量约为 0 .9m... 展开更多; 关键词前列腺分泌蛋白 tnf衍生物前列腺癌抗肿瘤; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人PSP94与TNFα衍生物联合治疗人前列腺癌的实验研究被引量：1: 1; 作者刘丽刘庆鑫刘立忠石缨谢宝树冷爱军曹颖; 机构空军总医院空军临床分子生物学研究中心; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第4期546-550,共5页; 文摘构建了表达人 PSP94、TNFα衍生物 ( TNFα D1 1 a)及 PSP94与 TNFα D1 1 a( PSP94- TNFαD1 1 a)双功能蛋白真核表达质粒 pc DNA- TNFα D1 1 a、pc DNA- PSP94和 pc DNA- PSP94- TNFαD1 1 a,与 rh PSP94和 rh TNFα D1 1 a蛋白分别在人前列腺癌裸鼠移植瘤动物模型上进行了 PSP94与 TNFαD1 1 a联合治疗人前列腺癌的实验研究 .当动物肿瘤直径长至约 1 0 mm时 ,将以上 3种真核表达质粒分别以 50 μg/只的量给相应组动物的左右四头肌内注射一次 ,同时设 pc DNA3.0空载体对照组 ;rh PSP9450μg/kg、rh TNFαD1 1 a 1 0 0万单位 /kg、rh PSP94和 rh TNFαD1 1 a以同样剂量联合给药 ,肌肉注射 ,每 d一次 ,连续 1 0 d,同时设环磷酰胺阳性对照组和生理盐水阴性对照组 .基因治疗动物给药后第 1 5d处死 ,蛋白治疗组停药后第 2 d处死 ,观察疗效 ,计算抑瘤率 .结果显示 ,以上述方式给药 ,无论是基因治疗组还是重组蛋白组 ,给 PSP94的动物肿瘤虽然未见明显缩小 ,但肿瘤组织均出现不同程度的坏死和液化现象 ;给 TNFαD1 1 a的未见明显的抑瘤效果 ;PSP94-TNFαD1 1 a融合基因或 rh PSP94+ rh TNFαD1 1 a联合给药 ,不仅肿瘤有所缩小 ,而且也有不同程度的坏死和液化现象出现 .初步认为 :( 1 ); 关键词 PSP94 tnfα衍生物基因治疗前列腺癌; Keywords PSP94 tnfα derivative Gene therapy Prostate carcinoma; 分类号 R737.250.5 [医药卫生—肿瘤] R394.8 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人PSP94全长cDNA的获得及PSP94-TNF~Δ融合蛋白的构建被引量：7: 2; 作者刘庆鑫刘丽刘建香刘立忠王颖谢宝树冷爱军; 机构空军总医院空军临床分子生物学研究中心; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第3期359-364,共6页; 文摘利用ＲＴ－ＰＣＲ从人肥大前列腺组织钓取９４个氨基酸的人前列腺分泌蛋白（ＰＳＰ９４）全长ｃＤＮＡ，序列分析结果与文献报道的完全一致．将ＰＳＰ９４成熟肽与人ＴＮＦα衍生物（ＴＮＦΔ）通过Ｌｉｎｋｅｒ－ＳＡＰＧＴＰ在基因水平上融合成５′ＰＳＰ９４－ＴＮＦΔ，融合基因ＤＮＡ序列分析结果与设计的相符合．５′ＰＳＰ９４－ＴＮＦΔ在大肠杆菌中表达产物分子量约为３１ｋＤ，表达量约占菌体总蛋白量的３５％．以Ｌ９２９细胞和人前列腺癌细胞株ＰＣ－３为靶细胞进行细胞毒分析结果表明，５′ＰＳＰ９４－ＴＮＦΔ融合蛋白既具有ＴＮＦ的细胞毒活性。; 关键词 tnf衍生物融合蛋白 PSP94 前列腺癌细胞毒; Keywords PSP94 tnf mutant Fusion protein Anti tumor; 分类号 R737.250.5 [医药卫生—肿瘤] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名PSP94-TNFαD11a质粒DNA注射体内表达规律被引量：2: 3; 作者刘庆鑫刘丽刘立忠谢玉树王颖冷爱军; 机构空军总医院空军总医院院; 出处《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期60-61,共2页; 文摘将带有目的基因PSP94 TNFαD11a的 pcDNA3 0质粒DNA ,以 5 0 μg/只剂量注射到 39只雄性昆明小鼠的股四头肌内 ,第 2、3、4、5、10、15、2 0、2 5天分别摘眼球取血收集血清 ,每组 3只动物血清混合。同时取注射部位骨骼肌 ,研磨后离心取上清。用ELSIA方法检测血清和骨骼肌上清中融合蛋白的表达 ,观察不同时间的蛋白表达水平。提取 14天骨骼肌组织的总RNA ,进行RT PCR分析目的基因mRNA的表达水平。结果 ,在裸质粒注射后 9天可检出目的蛋白的表达 ,第 14天出现表达高峰 ,观察至 2 5天仍可检察到蛋白表达。; 关键词 PSP94 tnf衍生物基因治疗前列腺癌 PSP94-tnf; Keywords prostatic carcinoma:gene theraphy plasmid intramuscular injection; 分类号 R737.25 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名PSP94-TNFαD11a融合基因在NIH3T3细胞中的表达及其产物活性分析被引量：2: 4; 作者刘庆鑫刘丽石缨刘立忠王烨杨彦曹颖; 机构空军总医院空军分子生物学重点实验室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期194-197,共4页; 文摘为了分析 PSP94- TNFαD1 1 a融合基因的表达和表达产物的生物学活性 ,将含该融合基因的质粒 pc DNA- PSP94- TNFα D1 1 a转染 NIH3T3细胞 ,72 h后收集细胞培养上清 ,并提取细胞总RNA,经 RT- PCR,得到与目的基因长度相符合的 c DNA片段 ;以 PSP94c DNA为探针 ,对 RT-PCR产物进行 Southern印迹分析 .结果表明 :转染 PSP94- TNFαD1 1 a融合基因的 NIH3T3细胞 ,其 RT- PCR产物杂交信号为阳性 .细胞培养上清用 TNF抗体行 Western印迹和 ELISA分析 ,检测结果为阳性 .生物学活性分析表明 ,细胞培养上清不仅具有 PSP94抑制人前列腺癌细胞 PC- 3生长的活性 ,而且显示出 TNFα对 L92 9细胞的细胞毒作用 .以上结果表明 ,pc DNA- PSP94- TNFαD1 1 a质粒能够正确表达目的基因 PSP94- TNFα D1 1 a,且表达的 PSP94- TNFαD1 1 a融合蛋白具有预期的双重生物学活性 .; 关键词前列腺分泌蛋白 tnfα衍生物融合基因表达活性前列腺癌; Keywords prostate secretory protein of 94 amino acids, tnf α derivative, fusion gene, expression, activity; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学] R737.25 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人PSP94的分泌表达及其表达产物抗前列腺癌作用被引量：2: 5; 作者刘丽刘建香刘立忠石缨谢宝树冷爱军曹颖; 机构空军总医院空军临床分子生物学研究中心; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第4期542-545,共4页; 文摘将编码人 94个氨基酸的前列腺分泌蛋白 ( PSP94) c DNA与酵母整合载体 p PICZαA重组 ,构建的重组质粒线性化后转染酵母细胞 GS1 1 5,获得了 PSP94在酵母细胞中遗传性稳定表达酵母工程细胞 .诱导后的培养物中 ,rh PSP94表达量约为 0 .9mg/L,分子量约 1 6.5k D.培养上清经离子交换层析纯化后 ,目的蛋白的纯度为 92 % .体外在人前列腺癌细胞上活性分析表明 ,rh PSP94以1 0 0μg/L ,对该细胞的抑制率 2 0 .4% ;单纯新型 TNF,以 1 0 3 U/ml,抑制率 2 9.8% ;rh PSP94和新型 TNF以上述同样剂量联合应用 ,抑制率为 86.3% .提示 PSP94在体外对抗前列腺癌细胞有杀伤作用 ,但不明显 ;PSP94与新型 TNF联合应用 ,可使抑制率明显提高 ,可能 PSP94与新型 TNF有协同抗前列腺癌的作用 .; 关键词前列腺分泌蛋白 tnf衍生物前列腺癌抗肿瘤; Keywords Prostate secretory protein of 94 amino acids, tnf derivative, Prostate carcinoma, Antitumor; 分类号 R737.25 [医药卫生—肿瘤] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人PSP94与TNFα衍生物联合治疗人前列腺癌的实验研究	刘丽刘庆鑫刘立忠石缨谢宝树冷爱军曹颖	《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD	2000	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	人PSP94全长cDNA的获得及PSP94-TNF~Δ融合蛋白的构建	刘庆鑫刘丽刘建香刘立忠王颖谢宝树冷爱军	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD	1999	7	在线阅读下载PDF 职称材料
3	PSP94-TNFαD11a质粒DNA注射体内表达规律	刘庆鑫刘丽刘立忠谢玉树王颖冷爱军	《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2001	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	PSP94-TNFαD11a融合基因在NIH3T3细胞中的表达及其产物活性分析	刘庆鑫刘丽石缨刘立忠王烨杨彦曹颖	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2001	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	人PSP94的分泌表达及其表达产物抗前列腺癌作用	刘丽刘建香刘立忠石缨谢宝树冷爱军曹颖	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD	2000	2	在线阅读下载PDF 职称材料