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松果菊苷对TNFα诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用 被引量：34
1
作者 邓敏 赵金垣 +2 位作者 屠鹏飞 姜永 陈静 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期169-174,共6页
　目的　探讨肉苁蓉提取物松果菊苷对TNFα诱导的SH SY5Y细胞凋亡的保护作用。方法　用MTT法检测细胞存活率,DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡的发生,以激光共聚焦显微镜荧光染色法检测细胞内活性氧的产生和线粒体膜电位的变... 　目的　探讨肉苁蓉提取物松果菊苷对TNFα诱导的SH SY5Y细胞凋亡的保护作用。方法　用MTT法检测细胞存活率,DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测细胞凋亡的发生,以激光共聚焦显微镜荧光染色法检测细胞内活性氧的产生和线粒体膜电位的变化,并用荧光酶标仪测定caspase 3的活性。结果　100μg·L-1 TNFα处理细胞 36h显著降低细胞的存活率;诱导细胞发生凋亡,凋亡率达37%;细胞内活性氧水平及caspase 3的活性升高;而线粒体膜电位却明显降低,红 /绿荧光强度的比值由正常的 5 97降低为 0 35左右。而预先给予 1, 10或者 100mg·L-1浓度的松果菊苷处理细胞 2h,可提高细胞存活率;并可有效抑制DNAladder的发生;流式细胞仪检测凋亡率分别降低到25 9%, 18 3% 和 8 2%;激光共聚焦显微镜结果显示松果菊苷可明显抑制细胞内活性氧产生;并可逐渐恢复线粒体的高能量状态;caspase 3的活性不断降低,并呈现了一定的剂量依赖性。结论　松果菊苷能抑制TNFα诱导的SH SY5Y细胞凋亡,其神经细胞保护作用可能与降低细胞内活性氧水平,抑制caspase 3的活性和维持线粒体膜电位的高能状态有关。 展开更多
关键词 松果菊苷 细胞凋亡 TNFΑ SH-SY5Y细胞 线粒体 膜电位 活性氧 caspase-3
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昆明山海棠对人单核细胞TNFα、IL-8及基因表达的影响 被引量：15
2
作者 万屏 肖农 +1 位作者 朱明华 胡凤仙 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期3-5,共3页
应用体外细胞培养方法、ELISA及RT-PCR技术,观察昆明山海棠对健康人外周血单核细胞IL-8、TNFα释放及IL-8mRNA表达的影响。结果表明昆明山海棠(0.2mg/mL～1mg/mL)可抑制脂多糖(LPS)诱导的外周血单核细胞IL-8、TNFα释放及IL-8mRNA表达,... 应用体外细胞培养方法、ELISA及RT-PCR技术,观察昆明山海棠对健康人外周血单核细胞IL-8、TNFα释放及IL-8mRNA表达的影响。结果表明昆明山海棠(0.2mg/mL～1mg/mL)可抑制脂多糖(LPS)诱导的外周血单核细胞IL-8、TNFα释放及IL-8mRNA表达,提示昆明山海棠可从转录水平抑制细胞因子表达,从而实现其抗炎机制。 展开更多
关键词 昆明山海棠 IL-8 TNFΑ IL-8MRNA 人单核细胞 基因表达 中药
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限局性硬皮病血清sIL-2R、TNFα水平和T淋巴细胞亚群的检测 被引量：7
3
作者 苏有明 于民 +3 位作者 阎锋 李达 郭翠英 包图雅 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期8-10,共3页
应用免疫学的方法检测了39例限局性硬皮病患者sIL－2R、TNFα、T淋巴细胞正群和淋巴细胞增殖率。结果示：（1）限局性硬皮病外周血T细胞亚群CD3、CD4、和CD8明显低于正常人，CD4／CD8高于正常对照组；（2）血清sIL－2R、TN-Fα含量较对... 应用免疫学的方法检测了39例限局性硬皮病患者sIL－2R、TNFα、T淋巴细胞正群和淋巴细胞增殖率。结果示：（1）限局性硬皮病外周血T细胞亚群CD3、CD4、和CD8明显低于正常人，CD4／CD8高于正常对照组；（2）血清sIL－2R、TN-Fα含量较对照组增高；（3）限局性硬皮病患者血清可明显抑制淋巴细胞的增殖。上述结果的异常可引起免疫功能的紊乱，免疫抑制因子参与了限局性硬皮病的发生和发展，可能是本病的诱因之一。 展开更多
关键词 硬皮病 限局性 T细胞亚群 SIL-2R TNFΑ
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慢性肝病、肝癌患者IL－1、IL－8及TNFα活性测定 被引量：15
4
作者 李东复 徐淑芹 +1 位作者 王丽英 宋玉芳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期257-258,共2页
对２８例慢性肝炎、２３例肝炎性肝硬化及２６例原发性肝癌患者血清中ＩＬ－１、ＩＬ－８及ＴＮＦα活性进行了测定。结果表明，慢性肝炎患者ＩＬ－１、ＩＬ－８及ＴＮＦα活性分别为１５３８．３±３８６．５ｐｇ／ｍｌ，５０６．... 对２８例慢性肝炎、２３例肝炎性肝硬化及２６例原发性肝癌患者血清中ＩＬ－１、ＩＬ－８及ＴＮＦα活性进行了测定。结果表明，慢性肝炎患者ＩＬ－１、ＩＬ－８及ＴＮＦα活性分别为１５３８．３±３８６．５ｐｇ／ｍｌ，５０６．５±１３１．３ｐｇ／ｍｌ及２１２．６±９８．４ｐｇ／ｍｌ，明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）；肝炎性肝硬化患者ＩＬ－１、ＩＬ－８及ＴＮＦα活性分别为２１６２．８±４３６．６ｐｇ／ｍｌ，６８２．６±２０４．５ｐｇ／ｍｌ及２４１．５±１０９．６ｐｇ／ｍｌ，明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）；原发性肝癌患者ＩＬ－１、ＩＬ－８活性分别为６３２．６±１０７．６ｐｇ／ｍｌ，３１２．８±９５．８ｐｇ／ｍｌ，与对照组比较，ＩＬ－１活性明显升高（Ｐ＜０．０５），ＩＬ－８活性程度升高，但无明显差异（Ｐ＞０．０５）ＴＮＦα活性为３２１．６±１８３．２ｐｇ／ｍｌ，明显高于对照组。亦对上述３种细胞因子与慢性肝炎、肝硬化发生发展关系进行了初步分析与探讨。 展开更多
关键词 肝炎 肝硬化 细胞因子 肝肿瘤 TNFΑ IL
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氧化苦参碱对TNFα、IL-6和IL-8的影响 被引量：53
5
作者 黄秀梅 李波 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期903-906,共4页
目的 :研究氧化苦参碱对不同状态下的TNFα、IL 6和IL 8的影响。方法 :利用脂多糖 (lipopolysaccharide,LPS)刺激小鼠腹腔巨噬细胞和人早幼粒白血病细胞作为过度炎症反应的体外模型 ,用角叉菜胶引起的小鼠足肿胀作为炎症反应的体内模型 ... 目的 :研究氧化苦参碱对不同状态下的TNFα、IL 6和IL 8的影响。方法 :利用脂多糖 (lipopolysaccharide,LPS)刺激小鼠腹腔巨噬细胞和人早幼粒白血病细胞作为过度炎症反应的体外模型 ,用角叉菜胶引起的小鼠足肿胀作为炎症反应的体内模型 ,采用生物学方法和放射免疫分析法测定体外细胞培养上清液和局部炎症渗出液中TNFα、IL 6和IL 8。结果 :氧化苦参碱对体外细胞培养上清液和局部炎症渗出液中TNFα、IL 6和IL 8均具有一定的抑制作用。结论 :氧化苦参碱的抗炎免疫作用可能与其抑制早期致炎性细胞因子的产生有关。 展开更多
关键词 TNFΑ IL-6 IL-8 氧化苦参碱 小鼠 脂多糖 白血病 炎症
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离心机训练对大鼠脑及其它组织IL-6和TNFα基因表达水平的影响 被引量：6
6
作者 刘建彬 王洪波 +2 位作者 刘丽 梁雪清 于立身 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期649-653,共5页
为了解离心机训练前后大鼠脑及心、肺、肾和小肠组织中IL 6和TNFα基因表达水平的变化 ,对雄性SD大鼠进行动物离心机训练 ,刺激值从 + 7Gz～ + 12Gz ,每天增加 + 0 5Gz ,第 12d重复 + 12Gz刺激 ,第 13d离心机训练后 ,断头处死 ,取心、... 为了解离心机训练前后大鼠脑及心、肺、肾和小肠组织中IL 6和TNFα基因表达水平的变化 ,对雄性SD大鼠进行动物离心机训练 ,刺激值从 + 7Gz～ + 12Gz ,每天增加 + 0 5Gz ,第 12d重复 + 12Gz刺激 ,第 13d离心机训练后 ,断头处死 ,取心、脑、肺、肾和小肠组织 ,分别提取mRNA并定量 .用地高辛标记IL 6和TNFαcDNA作为探针 ,进行狭缝杂交 ,杂交结果通过光密度扫描定量后 ,进行统计学处理 .离心机训练不同时间 ,比较大鼠各组织IL 6和TNFα基因表达水平的变化 .结果显示随着训练时间的延长 ,表达水平均有所差异 .提示训练对大鼠脑及其它主要组织IL 6和TNFα基因表达水平有影响 。 展开更多
关键词 离心机训练 大鼠脑 IL-6 TNFΑ 基因表达水平 脑组织 心肌组织 加速度耐力
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山莨菪碱对LPS诱导的急性肺损伤大鼠肺组织TNFα、IL-8表达的影响 被引量：23
7
作者 郭振辉 洪新 +2 位作者 毛宝龄 钱桂生 陈正堂 《第三军医大学学报》 CSCD 北大核心 2000年第5期410-413,共4页
目的　探讨山莨菪碱 (6 5 4 2 )对内毒素致伤急性肺损伤 (ALI)大鼠的防治作用和可能机制。方法　观察 6 5 4 2对ALI大鼠血气分析和肺组织损伤的影响 ,并采用原位杂交法检测肺组织TNFα、IL 8mRNA表达和ELISA检测肺组织匀浆TNFα、IL 8... 目的　探讨山莨菪碱 (6 5 4 2 )对内毒素致伤急性肺损伤 (ALI)大鼠的防治作用和可能机制。方法　观察 6 5 4 2对ALI大鼠血气分析和肺组织损伤的影响 ,并采用原位杂交法检测肺组织TNFα、IL 8mRNA表达和ELISA检测肺组织匀浆TNFα、IL 8含量的改变。结果　 6 5 4 2干预后可减轻ALI大鼠肺组织损伤程度 ,减少肺组织TNFα、IL 8mRNA表达及其肺组织匀浆含量。结论　 6 5 4 2可能通过抑制TNFα、IL 8mRNA表达 ,减少肺组织中TNFα、IL 展开更多
关键词 急性肺损伤 山莨菪碱 TNFΑ IL-8 LPS
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脊髓TNFα、IL-1β和IL-6在神经病理性疼痛过程中的表达变化 被引量：26
8
作者 钟敏 曾因明 +1 位作者 柳垂亮 招伟贤 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 2010年第1期42-44,共3页
关键词 神经病理性疼痛 IL-1Β TNFΑ 表达变化 IL-6 脊髓 坐骨神经慢性压迫 细胞因子
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黄芪多糖对细菌脂多糖诱导大鼠腹腔巨噬细胞释放TNFα、NO及IL-1的影响 被引量：41
9
作者 路景涛 杨雁 陈敏珠 《安徽医科大学学报》 CAS 2004年第2期139-141,共3页
目的　研究黄芪多糖 (APS)对细菌脂多糖 (LPS)诱导大鼠腹腔巨噬细胞释放肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素 1(IL 1)及一氧化氮 (NO)的影响。方法　 10mg/LLPS体外诱导大鼠腹腔巨噬细胞 ,小鼠成纤维细胞瘤株 (L92 9)杀伤法检测TNFα的... 目的　研究黄芪多糖 (APS)对细菌脂多糖 (LPS)诱导大鼠腹腔巨噬细胞释放肿瘤坏死因子α(TNFα)、白细胞介素 1(IL 1)及一氧化氮 (NO)的影响。方法　 10mg/LLPS体外诱导大鼠腹腔巨噬细胞 ,小鼠成纤维细胞瘤株 (L92 9)杀伤法检测TNFα的含量、小鼠胸腺细胞增殖法检测IL 1的活性、Griess法检测NO的水平。结果　APS能不同程度地抑制激活巨噬细胞对TNFα、NO与IL 1的分泌。结论　APS抑制巨噬细胞的分泌功能可能是其保肝作用的机制之一。 展开更多
关键词 黄芪多糖 细菌脂多糖 诱导 大鼠 腹腔巨噬细胞 TNFΑ NO IL-1
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二硫键稳定的抗肝癌人源化scFv-hTNFα突变体融合基因在大肠杆菌中表达 被引量：5
10
作者 孙志伟 俞炜源 +3 位作者 孙岩 吴涛 林建波 刘彦仿 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期221-224,共4页
目的　提高抗肝癌抗体靶向人肿瘤坏死因子(hscFv2 5-hTNFα)的稳定性和杀伤活性 ,并探讨该新型靶向细胞因子在大肠杆菌中的可溶性表达。方法　以引物PCR法和重叠延伸PCR法 ,对人源化抗肝癌hscFv2 5及hTNFα基因进行定点突变 ,构建重组... 目的　提高抗肝癌抗体靶向人肿瘤坏死因子(hscFv2 5-hTNFα)的稳定性和杀伤活性 ,并探讨该新型靶向细胞因子在大肠杆菌中的可溶性表达。方法　以引物PCR法和重叠延伸PCR法 ,对人源化抗肝癌hscFv2 5及hTNFα基因进行定点突变 ,构建重组表达载体 pGEX -hFvT ,并以IPTG在大肠杆菌中诱导表达。用免疫组化染色和MTT比色法 ,分别检测重组蛋白的抗体和hTNFα突变体的双重活性。结果　重组基因在大肠杆菌中获得高效可溶性表达。表达产物具有抗体和hTNFα突变体的双重活性 ,重组蛋白的稳定性得到大幅度提高 ,抗体活性于 4℃放置 3个月活性无明显下降 ,抗肿瘤活性较天然hTNFα高 4倍。结论　重组基因在大肠杆菌中获得了高效功能性表达 ;重组蛋白稳定性及抗肿瘤活性得到大幅度提高 。 展开更多
关键词 肝细胞肝癌 单链抗体 TNFΑ 突变体 靶向细胞因子 可溶性表达
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多囊卵巢综合征患者血浆TNFα、sTNFR2水平与胰岛素抵抗的相关性 被引量：9
11
作者 王竹晨 顾熊飞 +1 位作者 杨冬梓 邝健全 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期268-271,280,共5页
【目的】 探讨血浆肿瘤坏死因子α(TNFα)?可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ(sTNFR2)与多囊卵巢综合征(PCOS)患者胰岛素抵抗和血清雄激素(T)水平的相互关系?【方法】 PCOS患者和对照者根据体重指数(BMI)分为PCOS肥胖组(21例)?PCOS非肥胖组(25例... 【目的】 探讨血浆肿瘤坏死因子α(TNFα)?可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ(sTNFR2)与多囊卵巢综合征(PCOS)患者胰岛素抵抗和血清雄激素(T)水平的相互关系?【方法】 PCOS患者和对照者根据体重指数(BMI)分为PCOS肥胖组(21例)?PCOS非肥胖组(25例)? 肥胖对照组和非肥胖对照组,各25例,采用ELISA法测定血浆TNFα ?sTNFR2水平,化学发光法测定血清性激素6项,已糖激酶终点法测定血清葡萄糖浓度,时间分辨免疫分析法测定血清胰岛素浓度,按Cederholm的方法计算胰岛素敏感指数(ISI)?【结果】 ①PCOS肥胖组血浆TNFα和sTNFR2水平及PCOS非肥胖组血浆sTNFR2水平均较非肥胖对照组明显升高,且以肥胖者升高更为明显?②血浆TNFα与其ISI在PCOS肥胖组和肥胖对照组均呈负相关(P< 0.05)?③血浆sTNFR2与其ISI在PCOS肥胖组?PCOS非肥胖组和肥胖对照组均呈负相关(P< 0.05)?【结论】 PCOS肥胖组血浆TNFα和sTNFR2水平及PCOS非肥胖组血浆sTNFR2水平均较非肥胖对照组明显升高,且与其ISI呈负相关,提示二者可能与PCOS患者发生胰岛素抵抗有关? 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 血浆 TNFΑ 细胞因子 STNFR2 胰岛素抵抗 相关性 ELISA法
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慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌患者粘膜组织IL-1、IL-8及TNFα活性测定 被引量：6
12
作者 于建勋 李东复 +3 位作者 刘佰纯 陈永胜 王炜佳 赵玉贞 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期374-375,共2页
慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌患者粘膜组织ＩＬ┐１、ＩＬ┐８及ＴＮＦα活性测定于建勋李东复刘佰纯陈永胜王炜佳赵玉贞（白求恩医科大学第二临床学院消化内镜科，长春１３００４１）细胞因子是泛指由机体免疫或非免疫细胞产生的与造血... 慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌患者粘膜组织ＩＬ┐１、ＩＬ┐８及ＴＮＦα活性测定于建勋李东复刘佰纯陈永胜王炜佳赵玉贞（白求恩医科大学第二临床学院消化内镜科，长春１３００４１）细胞因子是泛指由机体免疫或非免疫细胞产生的与造血、炎症和免疫应答密切相关的小分子多... 展开更多
关键词 胃炎 消化性溃疡 胃肿瘤 粘膜 白细胞介素 TNFΑ
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独立于RANKL/RANK系统的调控根吸收机制:TNFα的可溶性受体抑制根吸收 被引量：8
13
作者 张栋梁 欧阳喈 +2 位作者 汪玲丽 Werner Goetz Andreas Jaeger 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2004年第1期8-12,共5页
目的 :深入探知TNFα ,IL - 1在根吸收过程中的作用及两种骨吸收调控机制 ,即RANKL/RANK调控系统 ,炎症因子IL - 1,TNFα调控系统相互间的关系。方法 :18只雄Wistar大鼠 ,4周龄 ,随机分为 3组 ,正常对照组 ,IL - 1组 ,TNFα组 ,每组 6... 目的 :深入探知TNFα ,IL - 1在根吸收过程中的作用及两种骨吸收调控机制 ,即RANKL/RANK调控系统 ,炎症因子IL - 1,TNFα调控系统相互间的关系。方法 :18只雄Wistar大鼠 ,4周龄 ,随机分为 3组 ,正常对照组 ,IL - 1组 ,TNFα组 ,每组 6只。根据Nakane方法建立大鼠根吸收模型。研究 3组大鼠标本中RANKL ,RANK ,mRNA各自表达程度的差别及相应的ED1(单核巨噬细胞标记物 )阳性细胞在根吸收组织中的分布情况。结果 :T检验证实 :正常组与TNFα组间有显著性差别 ,P <0 .0 1;正常组与IL - 1组无显著性差别。在下列细胞内可以检测到RANKLmRNA的阳性信号 :成骨细胞 ,骨内膜细胞 ,基质细胞 ,近根吸收陷窝处的纺锤状成纤维细胞。3组间的信号表达水平比较无显著差别。结论 :本研究采用ED1作为免疫组化标记物 。 展开更多
关键词 RANKL/RANK系统 调控 根吸收机制 TNFΑ 可溶性受体
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IL-12诱导T细胞凋亡对Fas/FasL和TNFR/TNFα表达的影响 被引量：6
14
作者 刘元生 范洪涛 +5 位作者 郭秋野 郭秀枝 谭广销 陈鹏 周涛 陈孝银 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期517-521,共5页
目的 :探讨白介素 12 (IL - 12 )诱导T细胞凋亡过程中对T细胞的Fas/FasL和TNFR/TNFα表达的影响作用。方法 :dUTP缺口末端标记法和AnnexinV法 ;用FITC标记TNFR1,PE标记CD95 ,生物素标记FasL ,流式细胞仪检测 3种T细胞 (人淋巴瘤T细胞株H... 目的 :探讨白介素 12 (IL - 12 )诱导T细胞凋亡过程中对T细胞的Fas/FasL和TNFR/TNFα表达的影响作用。方法 :dUTP缺口末端标记法和AnnexinV法 ;用FITC标记TNFR1,PE标记CD95 ,生物素标记FasL ,流式细胞仪检测 3种T细胞 (人淋巴瘤T细胞株HTB176、人急性白血病T细胞株TIB15 2和正常人T细胞 )的百分率 ;用半定量PCR的方法检测FasL和TNFα的mRNA的表达作用。结果 :HTB176和TIB15 2的细胞在IL - 12处理 1h ,生物素标记FasL百分率和FasL的mRNA表达率开始增加 ,2 4h达到高峰 ,但正常T细胞在 2 4h后才有反应 ;正常T细胞经IL -12处理 1h内细胞FasL百分率和FasL的mRNA表达率开始增加 ,在以后的试验期 6、12、2 4h始终保持恒定水平 ;但 3种T细胞在IL - 12作用下不促进细胞CD95和TNFR1及TNFα的表达。结论 :IL - 12诱导T细胞凋亡中有许多调节因子的协调作用 。 展开更多
关键词 IL-12 T细胞 FAS/FASL TNFR/TNFα 白血病 膜联蛋白V 细胞凋亡 MRNA
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Xaf1与TNFα协同诱导细胞凋亡机制的初步探索 被引量：3
15
作者 夏焱 马国川 +3 位作者 郭海霞 苏浩彬 方建培 黄绍良 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期374-377,382,共5页
【目的】利用Xaf1诱导细胞株,检测Xaf1与一些细胞凋亡激动剂协同诱导肿瘤细胞凋亡的能力,初步探索Xaf1诱导凋亡的机制。【方法】Xaf1与细胞凋亡激动剂协同诱导的细胞凋亡由流式细胞检测DNA含量来表示,免疫荧光显微镜检测法与细胞核浆分... 【目的】利用Xaf1诱导细胞株,检测Xaf1与一些细胞凋亡激动剂协同诱导肿瘤细胞凋亡的能力,初步探索Xaf1诱导凋亡的机制。【方法】Xaf1与细胞凋亡激动剂协同诱导的细胞凋亡由流式细胞检测DNA含量来表示,免疫荧光显微镜检测法与细胞核浆分离法检测Xaf1诱导细胞中Xaf1与XIAP的亚细胞分布,免疫沉淀法检测Xaf1与XIAP的关联性。【结果】流式细胞术DNA含量检测发现Xaf1与TNFα显著协同诱导细胞凋亡,凋亡峰值为49%,而Xaf1与阿霉素无协同作用,凋亡峰值为27%,免疫荧光显微镜检测及细胞核浆分离法结果显示Xaf1位于细胞核内,而XIAP却位于细胞质。【结论】Xaf1与TNFα显著协同诱导细胞凋亡,其协同机制可能不是解除XIAP对胱冬肽酶活性的抑制。 展开更多
关键词 XAF1 XIAP 凋亡 TNFΑ
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oridonin部分通过TNFα信号转导途径诱导小鼠成纤维L929细胞凋亡 被引量：4
16
作者 黄健 吴立军 +2 位作者 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期471-475,共5页
目的比较冬凌草甲素(oridonin)和TNFα诱导小鼠成纤维L929细胞凋亡的分子机制。方法MTT法、Hoechst33258荧光染色、DNA片断化分析和Western blot分析法。结果Oridonin和TNFα均能诱导L929细胞发生凋亡,其半数有效抑制浓度IC50分别为(24&... 目的比较冬凌草甲素(oridonin)和TNFα诱导小鼠成纤维L929细胞凋亡的分子机制。方法MTT法、Hoechst33258荧光染色、DNA片断化分析和Western blot分析法。结果Oridonin和TNFα均能诱导L929细胞发生凋亡,其半数有效抑制浓度IC50分别为(24·8±1·2)μmol·L-1和(20·9±1·9)μg·L-1。Oridonin和TNFα均能引起L929细胞凋亡形态学变化,TNFα处理过的细胞在琼脂糖凝胶电泳上可见典型的凋亡DNA梯状条带,但是oridonin处理的细胞却不能,称之为非典型凋亡;caspase-3,-8抑制剂和caspase家族抑制剂能明显得促进25μmol·L-1oridonin和20μg·L-1TNFα诱导的L929细胞凋亡,caspase-9抑制剂只能促进oridonin诱导的L929细胞凋亡;ERK的抑制剂PD98059能明显的抑制oridonin和TNFα诱导的L929细胞凋亡,但是p38的抑制剂SB203580只能抑制TNFα诱导的L929细胞凋亡;在L929细胞中oridonin能促进内源性pro-TNFα的表达和其上游蛋白IκB的磷酸化。结论Oridonin通过激活转录因子NF-κB而促进内源性pro-TNFα的表达,并且部分通过细胞因子TNFα信号转到途径诱导L929细胞凋亡。 展开更多
关键词 ofidonin TNFΑ L929细胞 凋亡 CASPASE MAPK
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重症肌无力患者外周血单个核细胞Fas及血清sFas、TNFα检测 被引量：3
17
作者 胡军 阮丽荣 +3 位作者 张清勇 李倩如 杜英 张国荣 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2005年第1期4-6,共3页
目的:探讨外周血淋巴细胞凋亡与重症肌无力(MG)发生的关系。方法: 收集 20例MG患者及 20例健康献血者的外周血,分离单个核细胞和血清,用流式细胞仪测定单个核细胞膜Fas,用双抗体夹心ELISA法测定血清中sFas、TNFα水平。结果:MG患者血清s... 目的:探讨外周血淋巴细胞凋亡与重症肌无力(MG)发生的关系。方法: 收集 20例MG患者及 20例健康献血者的外周血,分离单个核细胞和血清,用流式细胞仪测定单个核细胞膜Fas,用双抗体夹心ELISA法测定血清中sFas、TNFα水平。结果:MG患者血清sFas、TNFα水平较对照组高(P<0. 01);单个核细胞表面Fas分子的表达率低于对照组(P<0. 05)。结论:MG患者单个核细胞膜Fas分子和血清sFas、TNFα水平异常,可能与疾病的发生有关。 展开更多
关键词 重症肌无力 SFAS FAS TNFΑ
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TNFα、IL-1β及IL-6对心脏微血管内皮细胞与中性粒细胞粘附的影响 被引量：4
18
作者 吴弘 沈茜 +2 位作者 章同华 秦永文 张国元 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期647-650,共4页
目的和方法：应用心脏微血管内皮细胞体外培养模型，研究不同浓度的ＴＮＦα、ＩＬ－１β、ＩＬ－６对微血管内皮与中性粒细胞粘附的调节。结果：５×１０４Ｕ／Ｌ的ＴＮＦα和ＩＬ－１β可明显增加内皮细胞与中性粒细胞的粘附（诱... 目的和方法：应用心脏微血管内皮细胞体外培养模型，研究不同浓度的ＴＮＦα、ＩＬ－１β、ＩＬ－６对微血管内皮与中性粒细胞粘附的调节。结果：５×１０４Ｕ／Ｌ的ＴＮＦα和ＩＬ－１β可明显增加内皮细胞与中性粒细胞的粘附（诱导内皮６ｈ），并分别于１０５Ｕ／Ｌ、２×１０５Ｕ／Ｌ浓度时使中性粒细胞粘附数达高峰，但不同浓度的ＩＬ－６均未使粘附增加，免疫组化ＡＢＣ法证实了同样的结果。进一步用抗ＩＣＡＭ－１和抗ＬＦＡ－１单克隆抗体阻断实验表明，两种抗体在５ｍｇ／Ｌ浓度下可显著阻断中性粒细胞与内皮细胞间的粘附。结论：心脏微血管内皮细胞与中性粒细胞的粘附主要通过粘附分子ＩＣＡＭ－１／ＬＦＡ－１介导。 展开更多
关键词 内皮细胞 TNFΑ IL 中性粒细胞 心血管病
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抗胸腺细胞血清性肾炎模型大鼠肾小球中C5b-9的沉积及NO、TNFα含量分析 被引量：5
19
作者 王迎伟 徐静华 +1 位作者 汤仁仙 高丰光 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期54-59,共6页
目的 :探讨抗胸腺细胞血清性肾炎 (ATSN)大鼠肾小球内C5b -9复合物的沉积与某些炎症介质和细胞因子如 :一氧化氮 (NO)和肿瘤坏死因子α(TNFα)的含量情况。方法 :大鼠一次性静脉注射抗胸腺细胞抗血清(ATS)建立ATSN模型 ,定期对ATSN大鼠... 目的 :探讨抗胸腺细胞血清性肾炎 (ATSN)大鼠肾小球内C5b -9复合物的沉积与某些炎症介质和细胞因子如 :一氧化氮 (NO)和肿瘤坏死因子α(TNFα)的含量情况。方法 :大鼠一次性静脉注射抗胸腺细胞抗血清(ATS)建立ATSN模型 ,定期对ATSN大鼠肾小球中的补体C5b -9复合物进行免疫组化染色定位、显微图像扫描半定量分析 ;并对有C5b -9包绕的肾小球系膜细胞 (MC)进行计数。测定ATSN大鼠肾中诱生型NO合酶 (iNOS)mRNA的表达、尿液中NO的代谢产物 (NO-2 /NO-3 )及TNFα的排泄量。结果 :ATSN模型大鼠肾小球MC先溶解坏死后继发增生 ,病变早期 (溶解时相 )补体C5b -9复合物主要定位于肾小球系膜区及MC表面 ;随着病程的进展 ,被C5b -9包绕的MC逐渐减少 ,病程初期ATSN大鼠肾小球MC有明显的iNOSmRNA表达 ,尿液中NO-2 /NO-3 和TNFα的排泄量也明显增加。在ATSN病变的增生阶段 (一般 7d后 ) ,上述指标的变化逐渐趋缓。结论 :ATSN模型大鼠肾小球中MC逐渐溶解与补体C5b 展开更多
关键词 抗胸腺细胞血清性肾炎 补体膜攻击复合物 一氧化氮 肿瘤坏死因子Α 大鼠 肾小球 C5B-9 NO TNFΑ
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丹参酚酸B抑制TLR4-NFκB-TNFα炎症损伤通路防治心肌细胞的缺氧损伤 被引量：9
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作者 张云 王阶 +1 位作者 吴广均 刘瑞华 《辽宁中医杂志》 CAS 2012年第1期20-22,共3页
目的:探讨TLR4-NFκB-TNFα损伤通路和HSP70在体外缺氧培养心肌细胞中的变化规律以及丹参酚酸B的调节作用。方法:分离纯化出生1～3天Wistar乳鼠心肌细胞并复制体外缺氧培养心肌细胞模型。丹参酚酸B(SalB)大、中、小剂量浓度分别为10-5mo... 目的:探讨TLR4-NFκB-TNFα损伤通路和HSP70在体外缺氧培养心肌细胞中的变化规律以及丹参酚酸B的调节作用。方法:分离纯化出生1～3天Wistar乳鼠心肌细胞并复制体外缺氧培养心肌细胞模型。丹参酚酸B(SalB)大、中、小剂量浓度分别为10-5mol.L-1、10-6mol.L-1和10-7mol.L-1并在缺氧培养前6h进行干预。细胞爬片免疫组化法检测tool样受体4(TLR4)和核因子κB(NFκB)蛋白的表达,ELISA法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNFα)和热休克蛋白70(HSP70)的浓度,分光光度计法检测细胞上清液中丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)的含量。结果:与正常组比较,缺氧培养6h后心肌细胞上清液中MDA、LDH、TNFα含量均显著升高(3.71±0.84)VS(1.78±0.56)(,561.41±129.31)VS(36.80±10.22)(,89.39±21.65)VS(49.42±4.16),P<0.055或P<0.051);心肌细胞TLR4和NFκB蛋白的表达量也显著升高(P<0.055或P<0.051)。与单纯缺氧培养组比较,丹参酚酸B大剂量组MDA含量显著下降(1.94±0.49)VS(3.71±0.84),P<0.051;大、中、小剂量组LDH含量均显著下降(P<0.051);大、中剂量组TNFα含量显著下降(P<0.055);丹参酚酸B大、中、小剂量组NFκB及TLR4蛋白的表达面积或强度均有明显的下降(P<0.055或P<0.051)。结论:TLR4-NFκB-TNFα炎症通路在缺氧培养6h后即明显激活,该通路的激活在缺氧损伤初期(6h内)是不依赖HSP70存在的。丹参酚酸B预防给药对缺氧培养的体外心肌细胞炎症损伤有明显的保护作用。该作用可能与抑制TLR4-NFκB-TNFα炎症通路有关。 展开更多
关键词 丹参酚酸B 缺氧 心肌细胞 TLR4-NFκB-TNFα通路
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