目的探究肾气丸对Zucker糖尿病肥胖(ZDF)大鼠肾损伤的改善作用。方法20只8周龄ZDF大鼠(fa/fa)给予5C08高脂饲料诱导4周后,随机分为模型组和肾气丸组,每组10只;7只Zucker瘦型大鼠(fa/+)给予普通维持饲料喂养4周,均给予普通维持饲料喂养,...目的探究肾气丸对Zucker糖尿病肥胖(ZDF)大鼠肾损伤的改善作用。方法20只8周龄ZDF大鼠(fa/fa)给予5C08高脂饲料诱导4周后,随机分为模型组和肾气丸组,每组10只;7只Zucker瘦型大鼠(fa/+)给予普通维持饲料喂养4周,均给予普通维持饲料喂养,肾气丸组灌胃给予肾气丸水煎液(8.12 g/kg),对照组和模型组灌胃给予生理盐水,连续4周。给药结束后,检测空腹血糖(FBG)、24 h尿微量白蛋白(24 h U-mAlb)及血清尿酸(UA)、血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6水平,HE染色、Masson染色、PAM染色观察肾组织病理变化。通过生物信息学预测肾气丸改善糖尿病肾病的潜在分子通路,RT-qPCR法检测肾组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达,Western blot法检测肾组织TLR4、MyD88、TRAF6、NF-κB蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠FBG、24 h U-mAlb、UA、BUN、Scr、TNF-α、IL-6水平升高(P<0.01),肾小管细胞坏死、变性,炎细胞浸润,肾间质充血水肿,纤维组织增多,肾组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达升高(P<0.01),TLR4、MyD88、TRAF6、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,肾气丸组大鼠FBG、24 h U-mAlb、UA、BUN、Scr、TNF-α、IL-6水平降低(P<0.05,P<0.01),病理损伤得到改善,肾组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达降低(P<0.01),TLR4、MyD88、TRAF6、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达降低(P<0.01)。结论肾气丸能改善糖尿病ZDF大鼠肾功能,减轻肾损伤,其作用机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路活化有关。展开更多
文摘目的:探究右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)对博莱霉素(bleomycin,BLM)诱导的肺纤维化小鼠的保护作用以及对Toll样受体4/髓样分化因子(toll-like receptor 4/myeloid differentiation factor88,TLR4/MyD88)信号通路的影响。方法:通过注射BLM诱导实验性小鼠肺纤维化。将小鼠分为生理盐水(Sham)组、BLM组、BLM+DEX组、BLM+PFD组和BLM+DEX+LPS组。苏木素-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色和Masson染色分析肺组织病理学变化;免疫组织化学检测纤连蛋白(fibronectin,Fn)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)表达情况;原位缺口末端标记法(TdT mediated d UTP nick end labeling,TUNEL)检测肺组织中细胞凋亡;检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中总细胞数量及蛋白质含量;Western blot检测肺组织中TLR4/MyD88信号通路和细胞凋亡相关蛋白水平。结果:与Sham组相比,BLM刺激后肺组织中肺泡炎评分[(2.56±0.24)分vs.(0.15±0.02)分]和Ashcroft评分[(5.68±0.52)分vs.(0.09±0.01)分]明显增高,Fn[(63.63±5.48)%vs.(25.12±2.16)%]、α-SMA[(58.63±5.03)%vs.(17.56±1.25)%]和collagenⅠ[(55.32±5.16)%vs.(12.03±1.20)%]表达升高(P<0.05),肺部炎症程度和纤维化程度增加;同时TUNEL阳性细胞率增高,细胞中bcl-2相关X蛋白(bcl-2 associated X protein,Bax)水平增高,B淋巴细胞瘤-2蛋白(B-cell lymphoma-2 protein,Bcl-2)水平降低(P<0.05);BALF中总细胞数量[(3.54±0.06)×10^(5)个/mL vs.(0.98±0.07)×10^(5)个/mL]和蛋白质含量[(2.85±0.20)mg/mL vs.(0.29±0.03)mg/mL]升高(P<0.05);肺组织中TLR4和MyD88蛋白水平升高(P<0.05)。DEX治疗可减轻BLM诱导的小鼠肺纤维化和炎症,降低TUNEL阳性细胞率,并逆转Fn、α-SMA、collagenⅠ、Bax和Bcl-2表达(P<0.05);同时DEX也降低BLM诱导的小鼠BALF中总细胞数量和蛋白质含量(P<0.05)。此外,DEX降低BLM诱导的小鼠肺组织中TLR4和MyD88蛋白水平(P<0.05)。吡非尼酮(pirfenidone,PFD)与DEX具有相似的作用效果。脂肪酶(lipase,LPS)可以部分逆转DEX对BLM诱导的肺纤维化小鼠保护作用(P<0.05)。结论:DEX可能通过抑制TLR4/MyD88信号通路改善BLM诱导的小鼠肺纤维化。
文摘目的探究肾气丸对Zucker糖尿病肥胖(ZDF)大鼠肾损伤的改善作用。方法20只8周龄ZDF大鼠(fa/fa)给予5C08高脂饲料诱导4周后,随机分为模型组和肾气丸组,每组10只;7只Zucker瘦型大鼠(fa/+)给予普通维持饲料喂养4周,均给予普通维持饲料喂养,肾气丸组灌胃给予肾气丸水煎液(8.12 g/kg),对照组和模型组灌胃给予生理盐水,连续4周。给药结束后,检测空腹血糖(FBG)、24 h尿微量白蛋白(24 h U-mAlb)及血清尿酸(UA)、血尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6水平,HE染色、Masson染色、PAM染色观察肾组织病理变化。通过生物信息学预测肾气丸改善糖尿病肾病的潜在分子通路,RT-qPCR法检测肾组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达,Western blot法检测肾组织TLR4、MyD88、TRAF6、NF-κB蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠FBG、24 h U-mAlb、UA、BUN、Scr、TNF-α、IL-6水平升高(P<0.01),肾小管细胞坏死、变性,炎细胞浸润,肾间质充血水肿,纤维组织增多,肾组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达升高(P<0.01),TLR4、MyD88、TRAF6、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,肾气丸组大鼠FBG、24 h U-mAlb、UA、BUN、Scr、TNF-α、IL-6水平降低(P<0.05,P<0.01),病理损伤得到改善,肾组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表达降低(P<0.01),TLR4、MyD88、TRAF6、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达降低(P<0.01)。结论肾气丸能改善糖尿病ZDF大鼠肾功能,减轻肾损伤,其作用机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路活化有关。
