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TLR3激动剂poly(I:C)对胃癌BGC-823细胞生物学特征的影响
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作者 屈静 张建 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期792-796,806,共6页
目的:poly(I:C)是双链RNA(dsRNA)的结构类似物,可被模式识别受体TLR3、RLRs识别,具有抗肿瘤作用。本文旨在研究poly(I:C)对胃癌BGC-823细胞生物学特征的影响并进行机制探讨。方法:以胃腺癌细胞系BGC-823细胞为模型,采用半定量RT-PCR检测... 目的:poly(I:C)是双链RNA(dsRNA)的结构类似物,可被模式识别受体TLR3、RLRs识别,具有抗肿瘤作用。本文旨在研究poly(I:C)对胃癌BGC-823细胞生物学特征的影响并进行机制探讨。方法:以胃腺癌细胞系BGC-823细胞为模型,采用半定量RT-PCR检测TLR1-TLR10 mRNA基础表达水平,然后用MTT法、CCK-8法、EdU掺入法检测poly(I:C)对BGC-823细胞的增殖能力的影响;MTT法、CFSE-7-AAD法评价NK细胞对poly(I:C)处理后的BGC-823细胞杀伤能力的影响;实时定量PCR法检测细胞因子mRNA水平的变化;流式细胞术分析BGC-823细胞中TLR3、Cyclin D1表达水平以及NKL细胞中CD107a、Perforin和TNF-α的表达水平。结果:TLR3在BGC-823细胞有明显表达。poly(I:C)可抑制BGC-823细胞的增殖,这一过程的主要分子特征是DNA合成减弱、Cyclin D1的表达水平降低、炎症因子的mRNA表达水平下降;同时NK细胞对于poly(I:C)处理后的BGC-823细胞的杀伤功能增强,NK细胞表达CD107a、Perforin、TNF-α的能力提高。结论:poly(I:C)可直接抑制肿瘤的生长并提高BGC-823细胞对NK细胞杀伤的敏感性,为设计和利用基于TLR的抗肿瘤治疗药物提供有益的启示。 展开更多
关键词 poly(I:c) BGc-823细胞 tlr3 NK细胞
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体外TLR3配体增强鸭坦布苏病毒灭活苗效果的免疫机制研究
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作者 提金凤 李志杰 +1 位作者 王海燕 王莉莉 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第1期20-29,共10页
为了阐明TLR3配体对鸭坦布苏病毒(DTMUV)灭活苗的免疫增强作用,以TLR3配体poly(I:C)和灭活DTMUV作用雏鸭外周血单个核细胞(PMBC),通过体外检测TLR3相关信号蛋白和细胞因子转录及表达水平,明确TLR3配体发挥免疫增强作用的主要信号通路。... 为了阐明TLR3配体对鸭坦布苏病毒(DTMUV)灭活苗的免疫增强作用,以TLR3配体poly(I:C)和灭活DTMUV作用雏鸭外周血单个核细胞(PMBC),通过体外检测TLR3相关信号蛋白和细胞因子转录及表达水平,明确TLR3配体发挥免疫增强作用的主要信号通路。制备雏鸭PMBC,选择TLR3配体poly(I:C)与灭活DTMUV的不同组和与雏鸭PBMC相互作用,通过SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和间接ELISA方法对细胞因子(IL-6)和干扰素(α-IFN、β-IFN、γ-IFN)的mRNA转录水平和蛋白表达水平进行测定,结果显示各细胞因子和干扰素的mRNA转录水平和蛋白表达均升高。通过SYBR GreenⅠ荧光定量PCR对TLR3相关信号蛋白(TLR3、TRIF、MyD88、NF-κB)的mRNA转录水平测定,结果显示TLR3、TRIF的mRNA转录水平升高显著,MyD88的mRNA转录水平升高不明显。抑制NF-κB的试验组,细胞因子和干扰素mRNA的转录水平显著降低,可见,NF-κB对poly(I:C)+灭活DTMUV组细胞因子和干扰素的产生发挥重要的调节作用。TLR3配体poly(I:C)通过与TLR3结合,激活了TRIF-NF-kB通路,从而引起细胞因子和Ⅰ型干扰素的产生。 展开更多
关键词 坦布苏病毒 tlr3配体poly(I:c) 细胞因子 免疫增强机制
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