肥大细胞改变THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇含量及抑制胆固醇流出 被引量：3

1

作者 赵战芝 杨永宗 +1 位作者 王佐 危当恒 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1457-1463,共7页

目的:以THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象,探讨肥大细胞(MC)对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量、分配和流出的影响及机制。方法:THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞在MC颗粒释放物存在或缺乏下与高密度脂蛋白3(HDL3)共育。高效液相... 目的:以THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象,探讨肥大细胞(MC)对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量、分配和流出的影响及机制。方法:THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞在MC颗粒释放物存在或缺乏下与高密度脂蛋白3(HDL3)共育。高效液相色谱检测泡沫细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)和酯化胆固醇(EC)含量,用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出,运用逆转录聚合酶链反应检测三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的mRNA水平,采用琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测HDL3及apoA-Ⅰ的降解。结果:MC组泡沫细胞内TC、FC明显高于对照组(TC对照组为527.3 mg/g,MC组为917.9 mg/g);EC/TC比值低于对照组(7.6%vs47.5%);细胞内胆固醇流出少于对照组(26.92%±2.6%vs40.98%±3.4%,P<0.05);而泡沫细胞ABCA1的mRNA水平与对照组无明显差异。MC颗粒释放物处理HDL3后,聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示,约有28%的apoA-Ⅰ被降解,在分子量26 kD左右处出现了新的条带,产生了1个26 kD的小多肽。结论:肥大细胞可通过降解HDL3及apoA-Ⅰ抑制细胞内胆固醇流出而增加细胞内胆固醇蓄积,这个作用与ABCA1表达无直接关系。 展开更多

关键词 肥大细胞 thp-1巨噬细胞源性泡沫细胞 胆固醇 脂蛋白类 HDL ATP结合匣式转运体

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仙人掌多糖对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇蓄积及其相关基因表达的影响 被引量：3

2

作者 李恒 罗齐军 +1 位作者 卢向阳 曾富华 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期135-139,共5页

采用PMA和ox–LDL构建THP–1巨噬细胞源性泡沫细胞模型,观察不同浓度(5、10、15 nmol/L)仙人掌多糖(ODP–Ia)对泡沫细胞内脂质、胆固醇蓄积以及介导胆固醇流出的ABCA1、ABCG1、SR–BI基因表达的影响。结果显示:THP–1巨噬细胞泡沫化后... 采用PMA和ox–LDL构建THP–1巨噬细胞源性泡沫细胞模型,观察不同浓度(5、10、15 nmol/L)仙人掌多糖(ODP–Ia)对泡沫细胞内脂质、胆固醇蓄积以及介导胆固醇流出的ABCA1、ABCG1、SR–BI基因表达的影响。结果显示:THP–1巨噬细胞泡沫化后胞内蓄积了大量脂质,高剂量(15 nmol/L)ODP–Ia能够显著减少胞内脂质、胆固醇蓄积,并增强ABCA1、ABCG1、SR–BI m RNA及蛋白表达(与单独ox–LDL处理组比较,P<0.05),但效果均次于阳性对照依折麦布组(P<0.05),低、中剂量(5、10 nmol/L)ODP–Ia作用效果均不显著。本研究结果表明,ODP–Ia可通过增强ABCA1、ABCG1、SR–BI基因表达来减少胞内胆固醇蓄积。 展开更多

关键词 仙人掌多糖 THP–1巨噬细胞源性泡沫细胞 胆固醇蓄积

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不对称二甲基精氨酸上调THP-1来源的巨噬细胞和泡沫细胞内胆固醇酰基转移酶-1的表达(英文) 被引量：2

3

作者 朱振东 贾俊琴 +2 位作者 张旋 王庸晋 王殿华 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期2613-2618,共6页

目的观察不对称二甲基精氨酸(ADMA)对单核细胞THP-1来源的巨噬细胞和泡沫细胞中胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)的表达及胆固醇含量的影响。方法分别采用RT-PCR和Western blot技术检测ACAT-1mRNA和蛋白表达水平。采用酶偶联比色法检测细胞... 目的观察不对称二甲基精氨酸(ADMA)对单核细胞THP-1来源的巨噬细胞和泡沫细胞中胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)的表达及胆固醇含量的影响。方法分别采用RT-PCR和Western blot技术检测ACAT-1mRNA和蛋白表达水平。采用酶偶联比色法检测细胞内胆固醇含量。结果不同浓度的ADMA(0,3.75,7.5,15,or30μmol/L)对THP-1来源的巨噬细胞和泡沫细胞作用不同时间(6、12、24h)后,巨噬细胞和泡沫细胞内ACAT-1mRNA和蛋白的表达明显上调,细胞内总胆固醇的含量明显升高。结论 ADMA在巨噬细胞形成泡沫细胞过程中可能发挥了重要作用。抑制巨噬细胞和泡沫细胞内ACAT-1可能成为治疗动脉粥样硬化的潜在靶点。 展开更多

关键词 不对称二甲基精氨酸 单核细胞thp-1 巨噬细胞 泡沫细胞 酰基辅酶A 胆固醇酰基转移酶-1

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刺梨汁对巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响 被引量：10

4

作者 张春妮 吉维民 +3 位作者 庄一义 陈大宁 刘小转 强红娟 《医学研究生学报》 CAS 2000年第6期366-368,共3页

目的 :探讨刺梨汁的抗动脉粥样硬化机制。　方法 :在刺梨汁参与下 ,氧化的极低密度脂蛋白 (Ox- VL DL)与小鼠腹腔巨噬细胞孵育一段时间 ,通过测定细胞胆固醇含量和观察细胞形态改变 ,分析刺梨汁对 Ox- VL DL 促泡沫细胞形成的影响。　结... 目的 :探讨刺梨汁的抗动脉粥样硬化机制。　方法 :在刺梨汁参与下 ,氧化的极低密度脂蛋白 (Ox- VL DL)与小鼠腹腔巨噬细胞孵育一段时间 ,通过测定细胞胆固醇含量和观察细胞形态改变 ,分析刺梨汁对 Ox- VL DL 促泡沫细胞形成的影响。　结果 :较低浓度的刺梨汁能明显抑制 Ox- VL DL 对小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇酯的堆积 (P<0 .0 0 1) ,并呈浓度依赖性。刺梨汁浓度为 2 μl/m l和 4μl/ml时 ,Ox- VL DL 堆积的细胞胆固醇酯含量分别被抑制了 5 9.8%和 90 .1%。形态学观察显示 ,经刺梨汁处理的巨噬细胞猩红阳性染色显著减少。　结论 :刺梨汁通过抑制Ox- VL DL 的促泡沫细胞形成来实现其抗动脉硬化的功能。 展开更多

关键词 刺梨汁 极低密度脂蛋白 氧化修饰 巨噬细胞源性泡沫细胞 动脉粥样硬化

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猪单核源性巨噬细胞受FSL-1刺激后lncRNAs的鉴定与特征分析 被引量：2

5

作者 赵为民 方晓敏 +5 位作者 涂枫 周李生 李碧侠 王学敏 付言峰 任守文 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第2期346-356,共11页

lncRNA是新近发现的一种具有重要功能的RNA分子,在各种生理活动中发挥着重要作用。为鉴定猪单核源性巨噬细胞受FSL-1刺激后相关的lncRNA,利用二代测序技术结合生物信息学对lncRNA进行了组装与特征分析。结果显示FSL-1刺激成功地构建了... lncRNA是新近发现的一种具有重要功能的RNA分子,在各种生理活动中发挥着重要作用。为鉴定猪单核源性巨噬细胞受FSL-1刺激后相关的lncRNA,利用二代测序技术结合生物信息学对lncRNA进行了组装与特征分析。结果显示FSL-1刺激成功地构建了细胞炎症模型,试验组与对照组共鉴定到1 056个lncRNA转录本,其对应于831个基因座,这些lncRNA的平均长度为1 643 bp,平均外显子数为2.4个。相对于对照组,试验组有51个lncRNA上调表达,44个lncRNA下调表达。在上调lncRNA两侧相邻的蛋白质编码基因参与免疫反应、炎症反应、病毒反应等通路,而在下调lncRNA两侧相邻的蛋白质编码基因参与的通路较少,不参与上述通路。定量PCR结果显示挑选的4个lncRNA的差异倍数与RNA-Seq的结果相似,其中上调的lncRNA呈现一定的组织特异表达,而下调的lncRNA呈现多组织表达。这些结果为进一步研究lncRNA在FSL-1介导的炎症反应中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 猪 lncRNA 单核源性巨噬细胞 FSL-1 炎症

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血管紧张素-(1-7)通过AC-cAMP途径增加THP-1源性泡沫细胞ABCA1的表达并减少细胞胆固醇含量 被引量：3

6

作者 阎丰 杨志明 刘娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1012-1017,共6页

目的:构建THP-1源性泡沫细胞模型,探讨血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]和腺苷酸环化酶抑制剂MDL对THP-1源性泡沫细胞胆固醇逆转运相关蛋白——ATP结合盒转运子A1(ABCA1)表达和胆固醇含量的影响。方法:将THP-1源性单核细胞诱导为巨噬细胞,... 目的:构建THP-1源性泡沫细胞模型,探讨血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]和腺苷酸环化酶抑制剂MDL对THP-1源性泡沫细胞胆固醇逆转运相关蛋白——ATP结合盒转运子A1(ABCA1)表达和胆固醇含量的影响。方法:将THP-1源性单核细胞诱导为巨噬细胞,加入氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)建立泡沫细胞模型。实验分为4组:正常泡沫细胞组、MDL组、Ang-(1-7)组和MDL+Ang-(1-7)组。处理24 h后,分别通过ELISA法、荧光定量PCR法和Western blotting检测各组细胞cAMP表达水平、ABCA1 mRNA相对表达量和蛋白含量,闪烁计数法检测各组细胞胆固醇流出率,高效液相色谱法检测各组细胞胆固醇含量。结果:(1)Ang-(1-7)组cAMP表达水平、ABCA1 mRNA相对表达量和蛋白含量较泡沫细胞组有明显升高(P<0.05),胆固醇流出率较泡沫细胞组明显增高(P<0.05),胆固醇含量较泡沫细胞组显著降低(P<0.05)。(2)MDL组cAMP表达水平、ABCA1 mRNA相对表达量和蛋白含量较泡沫细胞组有明显降低(P<0.05),胆固醇流出率较泡沫细胞组明显降低(P<0.05),胆固醇含量较泡沫细胞组增高(P<0.05)。(3)MDL+Ang-(1-7)组数值介于Ang-(1-7)组与泡沫细胞组之间。结论:(1)Ang-(1-7)能促进泡沫细胞ABCA1的表达增加,促进胆固醇外流,减少泡沫细胞胆固醇含量,逆转泡沫细胞的形成。(2)MDL可以抑制腺苷酸环化酶的活性,减少cAMP的生成,从而部分拮抗Ang-(1-7)的上述作用,但不能完全阻断Ang-(1-7)的作用。 展开更多

关键词 血管紧张素-(1-7) ATP结合盒转运子A1 thp-1源性泡沫细胞 环AMP

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炎症应激通过激活mTOR通路诱导THP-1巨噬细胞泡沫化的实验研究 被引量：7

7

作者 赵爽 叶强 +1 位作者 李涛 范忠才 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1105-1110,共6页

目的研究脂多糖(LPS)诱导的炎症应激是否通过激活m TOR通路,增加SCAP/SREBP2表达,干扰SCAP/SREBP2负反馈调控,增加THP-1巨噬细胞对非修饰低密度脂蛋白胆固醇(LDL)摄取,导致泡沫细胞形成。方法诱导分化成功的THP-1源性巨噬细胞在无血清... 目的研究脂多糖(LPS)诱导的炎症应激是否通过激活m TOR通路,增加SCAP/SREBP2表达,干扰SCAP/SREBP2负反馈调控,增加THP-1巨噬细胞对非修饰低密度脂蛋白胆固醇(LDL)摄取,导致泡沫细胞形成。方法诱导分化成功的THP-1源性巨噬细胞在无血清培养基中培养4 h后,分为对照组(5 mg·L^(-1)LDL)、炎症刺激组(5 mg·L^(-1)LDL+200μg·L^(-1)LPS)、炎症+雷帕霉素组(5 mg·L^(-1)LDL+200μg·L^(-1)LPS+10μg·L^(-1)Rapamycin)。以上各组细胞培养24 h后收获。油红O染色法检测各组细胞内脂质沉积情况,Real-time PCR法检测LDLr、SREBP2、SCAP、S6K1和m TOR mRNA水平,Western blot法检测LDLr、S6K1、mTOR蛋白表达,激光共聚焦法检测SCAP在内质网与高尔基体间的转位情况。结果油红O染色发现,炎症应激增加THP-1巨噬细胞内脂质沉积,雷帕霉素抑制炎症应激诱导的脂质聚积。Real-time PCR检测显示,炎症应激上调THP-1巨噬细胞LDLr、SREBP2、SCAP、S6K1和mTOR mRNA水平(P<0.05),雷帕霉素减少炎症应激诱导的LDLr、SREBP2、SCAP、S6K1和mTOR mRNA水平升高(P<0.05)。Western blot检测发现,炎症应激上调LDLr、S6K1和m TOR蛋白表达(P<0.05),雷帕霉素减少炎症应激诱导的LDLr、S6K1和mTOR蛋白表达水平升高(P<0.05)。激光共聚焦检测发现,炎症应激增加SCAP/SREBP2从内质网转位到高尔基体,雷帕霉素则抑制炎症应激诱导的SCAP/SREBP2复合物从内质网转位到高尔基体。结论炎症应激通过激活mTOR通路,上调SCAP/SREBP2表达,致SCAP/SREBP2复合体转位至高尔基体异常增加,LDLr表达上调,致使胆固醇聚积于细胞内,泡沫细胞形成。雷帕霉素能够逆转炎症应激诱导mTOR通路激活,减少细胞内胆固醇沉积,提示炎症应激状态下,mTOR可能是泡沫细胞形成的关键通路。 展开更多

关键词 thp-1巨噬细胞 脂多糖 炎症 LDLR 泡沫细胞 雷帕霉素

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血管紧张素Ⅱ对THP-1源性泡沫细胞ATP结合盒转运子A1表达的调控作用

8

作者 王彦富 陈志坚 +3 位作者 廖玉华 梅春丽 彭红玉 郭和平 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第6期1095-1098,共4页

目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对THP-1源性泡沫细胞ATP结合盒转运子A1(ABCA1)表达的调控作用。方法以50mg/L的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)温育人巨噬细胞系THP-1源性巨噬细胞48h为对照,同时分别加入10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L的AngⅡ... 目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对THP-1源性泡沫细胞ATP结合盒转运子A1(ABCA1)表达的调控作用。方法以50mg/L的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)温育人巨噬细胞系THP-1源性巨噬细胞48h为对照,同时分别加入10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L的AngⅡ,采用RT-PCR和Westernblotting法分别检测THP-1源性泡沫细胞中ABCA1mRNA与蛋白的表达,采用酶法检测细胞内胆固醇含量,应用液体闪烁计数仪检测胆固醇流出的变化。结果与对照组比较,10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/LAngⅡ组ABCA1mRNA和蛋白表达均下降(P<0.05),胞内胆固醇含量增加(P<0.05),胆固醇流出率减少(P<0.05)。结论AngⅡ可下调THP-1源性泡沫细胞ABCA1的表达,促进泡沫细胞形成。 展开更多

关键词 血管紧张素Ⅱ thp-1源性泡沫细胞 ATP结合盒转运子A1 胆固醇含量 胆固醇流出

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丹参总酚酸联合anti-PD-L1调控髓源性巨噬细胞浸润抑制乳腺癌发生发展 被引量：5

9

作者 宋梦瑶 钱程 陆茵 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1884-1890,共7页

目的探究丹参总酚酸(total salvianolic acid,TSA)联合anti-PD-L1通过调控髓源性巨噬细胞瘤内浸润抑制乳腺癌的发生发展。方法构建E0771乳腺癌皮下肿瘤模型。25只小鼠随机分为空白组、模型组、TSA组(TSA 10 g·kg^(-1)),anti-PD-L1... 目的探究丹参总酚酸(total salvianolic acid,TSA)联合anti-PD-L1通过调控髓源性巨噬细胞瘤内浸润抑制乳腺癌的发生发展。方法构建E0771乳腺癌皮下肿瘤模型。25只小鼠随机分为空白组、模型组、TSA组(TSA 10 g·kg^(-1)),anti-PD-L1组(anti-PD-L110 mg·kg^(-1)),TSA联合anti-PD-L1组(TSA 10 g·kg^(-1)+anti-PD-L110 mg·kg^(-1))。TSA组每日灌胃给药,anti-PD-L1每3天1次腹腔注射,连续给药14 d。记录小鼠肿瘤体积变化及肿瘤、肝脏及脾脏重量。ELISA检测小鼠血浆中IL-6,MCP-1的含量,qPCR检测cxcl1,cxcl2,cxcl3,ccl2,gm-csf mRNA的表达,流式、免疫组化检测小鼠肿瘤、淋巴中髓源性巨噬细胞浸润情况,流式检测淋巴、脾脏CD4+T细胞、CD8+T细胞数量变化。结果与模型组相比,TSA,anti-PD-L1,TSA联合anti-PD-L1均可抑制E0771乳腺癌生长,减少IL-6、MCP-1分泌,降低cxcl1,cxcl2,cxcl3,ccl2,gm-csf mRNA表达,抑制髓源性巨噬细胞向肿瘤的募集,增加淋巴及脾脏内CD4+T细胞、CD8+T细胞数量,TSA联合anti-PD-L1治疗效果更佳显著。结论TSA联合anti-PD-L1显著抑制E0771乳腺癌皮下瘤发生发展进程,可能通过抑制髓源性巨噬细胞向肿瘤浸润,增强机体免疫效应发挥作用。 展开更多

关键词 丹参总酚酸 乳腺癌 anti-PD-L1 髓源性巨噬细胞 免疫疗法 中药现代化

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同型半胱氨酸对培养的人单核细胞株THP-1表达巨噬细胞炎性蛋白-1α的影响

10

作者 邢玮 邓仲端 +1 位作者 张韵凤 倪娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期27-31,共5页

目的 :探讨同型半胱氨酸对人单核细胞株THP -1细胞表达巨噬细胞炎性蛋白 -1αmRNA和蛋白的影响。方法 :在体外培养的THP -1单核细胞培养基中加入终浓度为 0 .0 5mmol/L、0 .1mmol/L和 0 .2mmol/L的同型半胱氨酸 ,孵育 8h ;或加入终浓度 ... 目的 :探讨同型半胱氨酸对人单核细胞株THP -1细胞表达巨噬细胞炎性蛋白 -1αmRNA和蛋白的影响。方法 :在体外培养的THP -1单核细胞培养基中加入终浓度为 0 .0 5mmol/L、0 .1mmol/L和 0 .2mmol/L的同型半胱氨酸 ,孵育 8h ;或加入终浓度 0 .1mmol/L的同型半胱氨酸 ,分别孵育 4、8、16h。用逆转录聚合酶链反应检测THP -1单核细胞巨噬细胞炎性蛋白 -1αmRNA ,并测序 ;用免疫细胞化学法检测巨噬细胞炎性蛋白 -1α蛋白的表达。结果 :对照组THP -1单核细胞表达较低水平的巨噬细胞炎性蛋白 -1αmRNA ,加同型半胱氨酸后巨噬细胞炎性蛋白 -1αmRNA表达随浓度增加而增强 ;在浓度为 0 .1mmol/L时 ,巨噬细胞炎性蛋白 -1αmRNA表达于 4h开始升高 ,8h后逐渐降低。反应产物真实性经测序反应证实。免疫细胞化学图像分析结果显示 ,各组细胞平均吸光度值随浓度和时间递增而增加 (P <0 .0 1)。结论 :同型半胱氨酸能诱导THP -1单核细胞表达巨噬细胞炎性蛋白 -1αmRNA和蛋白。 展开更多

关键词 同型半胱氨酸 巨噬细胞炎性蛋白质-1α 单核细胞 逆转录聚合酶链反应 动脉粥样硬化 thp-1 发病机制

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MicroRNA155通过下调清道夫受体表达抑制巨噬细胞泡沫化形成 被引量：11

11

作者 尚菲 曾德意 +5 位作者 杨慧 黄琳燕 刘捷 吕晓飞 关永源 周家国 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期156-162,共7页

【目的】探讨microRNA-155(miR-155)对巨噬细胞泡沫化过程的影响及机制。【方法】实时定量PCR检测miR-155的表达,Western Blot方法检测巨噬细胞A类清道夫受体SR-A和B型清道夫受体CD36的表达,激光共聚焦显微镜观察miR-155对THP-1结合、摄... 【目的】探讨microRNA-155(miR-155)对巨噬细胞泡沫化过程的影响及机制。【方法】实时定量PCR检测miR-155的表达,Western Blot方法检测巨噬细胞A类清道夫受体SR-A和B型清道夫受体CD36的表达,激光共聚焦显微镜观察miR-155对THP-1结合、摄取DiI标记氧化型低密度脂蛋白(DiI-oxLDL)能力的影响。【结果】80μg/mL的氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)时间依赖性地诱导巨噬细胞miR-155表达上调。过表达miR-155抑制SR-A和CD36的表达,同时巨噬细胞结合、摄取DiI-oxLDL的能力明显降低。而反义-miR-155则明显上调SR-A和CD36的表达,同时巨噬细胞结合、摄取DiI-oxLDL的能力明显增强。【结论】MiR-155通过降低巨噬细胞SR-A和CD36的表达抑制巨噬泡沫细胞的形成。 展开更多

关键词 MIR-155 动脉粥样硬化 thp-1巨噬细胞 清道夫受体 泡沫化

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实验性脉络膜新生血管形成过程中巨噬细胞及单核细胞趋化蛋白-1的作用 被引量：4

12

作者 张淑锟 谢平 +1 位作者 袁冬青 刘庆淮 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1095-1101,共7页

背景脉络膜新生血管（CNV）是多种眼底疾病造成视力损害的的主要原因之一。近年来的研究发现单核细胞来源的巨噬细胞（F4／80）和单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）在CNV的形成过程中发挥作用，但它们在新生血管发生早期的动态表达及机制仍... 背景脉络膜新生血管（CNV）是多种眼底疾病造成视力损害的的主要原因之一。近年来的研究发现单核细胞来源的巨噬细胞（F4／80）和单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）在CNV的形成过程中发挥作用，但它们在新生血管发生早期的动态表达及机制仍不明确。目的观察CNV模型小鼠在CNV发展早期局部组织中巨噬细胞和MCP-1表达的动态变化。方法SPF级8周龄雄性野生C57BL／6小鼠105只，用氪离子激光仪对小鼠的任意一侧眼在距视盘2～3倍视盘直径处的3：00、6：00、9：00和12：00方位进行激光光凝以建立CNV动物模型。按照随机数字表法将CNV小鼠模型随机分不同时间点组，分别于光凝后6、12、24、48和72h各处死小鼠，摘取眼球组织后制备眼球壁组织切片、脉络膜铺片和视网膜色素上皮（RPE）-脉络膜复合体切片，采用苏木精-伊红染色，观察视网膜光凝后眼球壁各层的组织病理学改变和炎症反应情况；采用免疫荧光双标记技术测定小鼠视网膜-脉络膜组织中F4／80和MCP-1的表达和分布；采用免疫荧光技术检测小鼠脉络膜铺片中F4／80的表达和分布；采用实时荧光定量PCR技术检测小鼠RPE-脉络膜组织中F4／80mRNA的相对表达量；采用ELISA法定量检测小鼠RPE-脉络膜组织中MCP-1质量分数。以光凝后6h组小鼠非实验眼作为正常对照。结果视网膜光凝后6h光学显微镜下可见光凝区Brueh膜、RPE层和脉络膜层均破裂，视网膜外核层连续性中断，随着光凝后时间的延长，可见局部炎症细胞浸润和组织水肿，光凝后72h可见光凝区边缘出现血管内皮细胞增生。光凝后6h可见光凝区RPE及脉络膜组织中F4／80表达，周围组织中可见MCP-1表达，随着光凝后时间延长MCP-1表达强度减弱，而F4／80表达仍增强。正常对照组及光凝后6、12、24、48和72h组RPE-脉络膜复合体中MCP-1蛋白的质量分数分别为（31．25±4．73）、（276．31±4．20）、（331．95±5．86）、（221．24±4．42）、（179．89±4．10）和（130．80±5．90）pg／mg，总体比较差异有统计学意义（F=1416．46，P=0．00），光凝后12h其质量分数达峰值，之后逐渐下降，但光凝后各时间组MCP-1蛋白的质量分数均明显高于正常对照组，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。各组RPE-脉络膜复合体中174／80mRNA的相对表达量总体比较差异有统计学意义（F=762．72，P=0．00），光凝后随着时间延长F4／80mRNA的相对表达量逐渐升高，与正常对照组比较差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论实验性CNV形成早期伴随着明显的炎症反应，趋化因子MCP-1主要在CNV形成的起始阶段发挥作用，而巨噬细胞的聚积和活化在CNV形成和发展过程中起促进作用。 展开更多

关键词 脉络膜新生血管化 炎症 单核细胞源性巨噬细胞 单核细胞趋化蛋白-1 近交系C57BL小鼠

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壮骨健膝方对巨噬细胞极化的影响及作用机制研究 被引量：1

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作者 张鹏 郭洁梅 +6 位作者 肖艳 陈鹏 张英杰 刘俊 陈雨 邱梦婷 苏友新 《世界中医药》 CAS 北大核心 2024年第13期1959-1965,共7页

目的:探讨壮骨健膝方对巨噬细胞经典活化型(M1)/替代活化型(M2)极化的影响及作用机制。方法:佛波酯诱导人单核白血病细胞分化为非活化巨噬细胞(M0),脂多糖刺激M0复制M1极化模型,将细胞分为空白组(M0+空白血清)、模型组(M1+空白血清)、... 目的:探讨壮骨健膝方对巨噬细胞经典活化型(M1)/替代活化型(M2)极化的影响及作用机制。方法:佛波酯诱导人单核白血病细胞分化为非活化巨噬细胞(M0),脂多糖刺激M0复制M1极化模型,将细胞分为空白组(M0+空白血清)、模型组(M1+空白血清)、抑制剂组(M1+NF-κB抑制剂+空白血清)、壮骨健膝方组(M1+含药血清)。干预24 h后,检测各组M1标志分子诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、主要组织相容性复合体Ⅱ(MHC-Ⅱ)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1),M2标志分子分化簇206、163、209(CD206、163、209)mRNA表达,炎症介质白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α),抗炎因子IL-4、IL-10水平及mRNA表达,核因子κB(NF-κB)信号通路中节点蛋白核内NF-κBp65、NF-κBp50及NF-κB抑制蛋白α(IκBα)表达。结果:模型组M1标志分子、炎症介质及NF-κBp65、NF-κBp50蛋白均高于空白组(P<0.05),CD206、IL-4 mRNA及IκBα蛋白,IL-4水平均低于空白组(P<0.05);抑制剂及壮骨健膝方组M1标志分子、炎症介质及NF-κBp65、NF-κBp50蛋白均低于模型组(P<0.05),M2标志分子、抗炎因子及IκBα蛋白均高于模型组(P<0.05);壮骨健膝方组MHC-Ⅱ、MCP-1 mRNA及炎症介质均低于抑制剂组(P<0.05),CD206、CD209、IL-10 mRNA及IL-4、IL-10水平均高于抑制剂组(P<0.05)。结论:壮骨健膝方可抑制脂多糖诱导的巨噬细胞M1极化,促进M2极化,其机制可能与降低细胞中NF-κB信号通路活性有关。 展开更多

关键词 壮骨健膝方 含药血清 膝骨关节炎 巨噬细胞极化 M1/M2型巨噬细胞 滑膜炎 thp-1源巨噬细胞

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caspase-1影响乳腺癌的生长及其对髓源性抑制细胞发育的调控作用 被引量：3

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作者 陈勇军 郑薇 +2 位作者 牛志远 吴珍 沈萍萍(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1128-1134,共7页

目的:caspase-1能够调控炎症反应和肿瘤生长,但是关于caspase-1对体内髓源性抑制细胞(Myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)发育的调控作用尚不清楚。本研究分析了caspase-1活性对于乳腺癌荷瘤小鼠体内外周血、脾脏以及肿瘤等部位MD... 目的:caspase-1能够调控炎症反应和肿瘤生长,但是关于caspase-1对体内髓源性抑制细胞(Myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)发育的调控作用尚不清楚。本研究分析了caspase-1活性对于乳腺癌荷瘤小鼠体内外周血、脾脏以及肿瘤等部位MDSCs细胞数量比例的影响。方法:运用注射4T1细胞到BALB/c雌性小鼠乳腺脂肪垫部位的方法构建原位乳腺癌种植模型,并在此模型基础上使用caspase-1特异性抑制剂Ac-YVAD-CMK(YVAD,5 mg/kg)对荷瘤小鼠进行腹腔注射给药,分别在第10天、15天和20天时分析脾脏和肿瘤的重量;并分离出外周血、脾脏、骨髓以及肿瘤部位的原代细胞,运用流式细胞仪分析CD11b+Gr-1+细胞(即MDSCs)的比例。同时,还使用H&E染色和免疫组化检测了肿瘤组织中肿瘤相关巨噬细胞(Tumor-associated macrophages,TAMs)的浸润情况。结果:YVAD给药能增加肿瘤重量并加剧脾肿大的程度;YVAD给药能显著增加除了骨髓以外的其他部位的多形核髓源性抑制细胞(PMN-MDSCs)的比例;YVAD不能改变肿瘤部位TAMs(CD11b+F4/80+)的数量,而在体外YVAD对于骨髓起源巨噬细胞的分化也没有调控作用。结论:caspase-1能够通过调控外周组织(外周血、脾脏)和肿瘤微环境中MDSCs细胞的发育而抑制肿瘤的发展,提示caspase-1可作为肿瘤治疗中的潜在靶点。 展开更多

关键词 CASPASE-1 乳腺癌 髓源性抑制细胞 肿瘤相关巨噬细胞

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IL-10对TNF-α诱导的泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1表达的抑制作用 被引量：3

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作者 陈志坚 梅春丽 +2 位作者 廖玉华 彭红玉 王彦富 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2006年第3期520-522,共3页

目的:观察白介素10(IL10)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的THP1巨噬细胞源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达的干预作用。方法:THP1单核细胞经诱导转化为巨噬细胞源性泡沫细胞后随机分为4组:对照组,培养液中不加任何其他物... 目的:观察白介素10(IL10)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的THP1巨噬细胞源性泡沫细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达的干预作用。方法:THP1单核细胞经诱导转化为巨噬细胞源性泡沫细胞后随机分为4组:对照组,培养液中不加任何其他物质;TNF-α组,培养液中加10μg/LTNF-α;IL-10组,培养液中加10μg/LIL10;IL10+TNFα组,培养液中加10μg/LIL10预先孵育2h后,再加10μg/LTN-α。采用RT PCR和Western Blot检测各组0h、6h、12h、24h、48hABCA1mRNA和蛋白表达。结果:TNF-α组ABCA1mRNA和蛋白表达呈时间依赖性降低(F=782.94,F=768.12,P均<0.05)。IL10组ABCA1mRNA表达在24h和48h有轻微增加(P<0.05),但ABCA1蛋白表达在各时间点无明显变化。IL10+TNFα组ABCA1mRNA和蛋白表达也呈时间依赖性降低(F=697.23,F=749.64,P均<0.05),但同TNFα组相比,其下降程度有所减轻(P<0.05)。结论:IL10可部分抑制TNFα所引起THP1巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1表达的下调。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子-α 白介素-10 三磷酸腺苷结合盒转运体A1 thp-1巨噬细胞源性泡沫细胞

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重组人B型利钠肽抑制氧化低密度脂蛋白诱导的巨噬细胞氧化应激及炎症反应 被引量：4

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作者 孟利民 杨华 +5 位作者 信栓力 刘吉祥 赵秀峰 刘丽军 杨瑞波 常超 《中国心血管杂志》 2018年第6期490-494,共5页

目的探讨重组人B型利钠肽(rh BNP)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞氧化应激和炎症反应的抑制作用。方法建立ox-LDL干预THP-1源巨噬细胞的模型,分为3组:对照组、100μg/ml ox-LDL组和100μg/ml ox-LDL+10-9mol/L rh BNP组。收... 目的探讨重组人B型利钠肽(rh BNP)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的巨噬细胞氧化应激和炎症反应的抑制作用。方法建立ox-LDL干预THP-1源巨噬细胞的模型,分为3组:对照组、100μg/ml ox-LDL组和100μg/ml ox-LDL+10-9mol/L rh BNP组。收集各组细胞,应用共聚焦显微镜测定细胞内活性氧(ROS)水平,采用逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)及生物化学法分别检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)基因的表达及活性,采用酶联免疫吸附法检测白细胞介素37(IL-37)的水平。结果与对照组相比,100μg/ml ox-LDL组的ROS水平升高(527. 30%±36. 20%比100. 00%±0. 00%),SOD mRNA的表达和活性降低[0. 53±0. 18比1. 00±0. 00;(256. 60±8. 20) U/ml比(355. 80±9. 58) U/ml],MDA mRNA的表达和含量升高[1. 59±0. 23比1. 00±0. 00;(29. 40±1. 68) nmol/ml比(5. 94±0. 51) nmol/ml],IL-37水平降低[(48. 05±3. 01) ng/L比(57. 82±2. 26) ng/L](均为P <0. 05);与100μg/ml ox-LDL组相比,100μg/ml ox-LDL+10-9mol/L rh BNP组的上述指标均有所改善[237. 30%±30. 62%,0. 90±0. 07,(310. 40±2. 97) U/ml,1. 14±0. 10,(20. 54±1. 55) nmol/ml,(53. 06±1. 87) ng/L,均为P <0. 05]。结论 rh BNP可能通过提高SOD表达及活性,上调IL-37水平,而抑制ox-LDL诱导的THP-1源巨噬细胞的氧化应激及炎症反应。 展开更多

关键词 重组人B型利钠肽 thp-1源巨噬细胞 氧化低密度脂蛋白 超氧化物歧化酶 丙二醛 白细胞介素37

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格列本脲对巨噬细胞载脂蛋白E分泌的影响

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作者 周小琴 董音 袁永辉 《医药导报》 CAS 2004年第11期821-823,共3页

目的 :通过研究格列本脲对巨噬细胞载脂蛋白E(apoE)分泌的影响 ,评价格列本脲在 2型糖尿病治疗中的应用价值。方法 :培养THP 1单核细胞并诱导其分化成为THP 1巨噬细胞 ;通过负载胆固醇制备巨噬细胞源性泡沫细胞。将格列本脲与THP 1巨噬... 目的 :通过研究格列本脲对巨噬细胞载脂蛋白E(apoE)分泌的影响 ,评价格列本脲在 2型糖尿病治疗中的应用价值。方法 :培养THP 1单核细胞并诱导其分化成为THP 1巨噬细胞 ;通过负载胆固醇制备巨噬细胞源性泡沫细胞。将格列本脲与THP 1巨噬细胞和泡沫细胞一起孵育 ,孵育结束时分别通过酶联免疫测定和Northernblot测定格列本脲对细胞apoE的产生、分泌以及apoE基因表达的影响。结果 :格列本脲明显减少THP 1巨噬细胞的apoE分泌 (P <0 .0 1) ,对巨噬细胞源性泡沫细胞亦表现出同样作用 ,同时不改变巨噬细胞和泡沫细胞内apoE含量和apoEmRNA表达水平。结论 :格列本脲影响巨噬细胞apoE的净分泌 ,这可能不利于 2型糖尿病患者血管壁的脂质代谢 ,尤其不宜于治疗已经存在血脂异常的糖尿病患者。 展开更多

关键词 巨噬细胞 格列本脲 分泌 泡沫细胞 thp-1 载脂蛋白E 2型糖尿病 分化 表达 脂质代谢

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槲皮素抑制人胚肺成纤维细胞ERK1/2的激活和PDGF的表达 被引量：3

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作者 彭海兵 张娜 +3 位作者 刘晓光 王建行 赵霞 刘燕 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期42-44,47,共4页

目的探讨槲皮素对人胚肺成纤维细胞(HELF)表达血小板源性生长因子(PDGF)和细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)的调节作用。方法以支气管肺泡灌洗法收集硅肺患者肺泡巨噬细胞(AM),在体外用含有SiO2(50μg/mL)的DMEM培养基和不含SiO2的DMEM培... 目的探讨槲皮素对人胚肺成纤维细胞(HELF)表达血小板源性生长因子(PDGF)和细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)的调节作用。方法以支气管肺泡灌洗法收集硅肺患者肺泡巨噬细胞(AM),在体外用含有SiO2(50μg/mL)的DMEM培养基和不含SiO2的DMEM培养基培养18 h,收集AM上清液,加入不同浓度槲皮素。用组织贴块法获取培养HELF,将HELF分为5组:空白对照组、AM组、SiO2联合AM处理组、槲皮素(10、20、40)μmol/L组。WST-1法检测HELF增殖情况,Western blot法检测HELF中PDGF的表达,免疫细胞化学法检测HELF中p-ERK1/2的表达。结果与SiO2联合AM处理组、AM组相比,各浓度槲皮素组都能抑制HELF增殖,且随浓度增大抑制作用增强,差异有统计学意义(P<0.01)。各种浓度槲皮素均能降低HELF中PDGF的表达、减少HELF中p-ERK1/2的量,呈现剂量-效应关系,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论槲皮素可以抑制人胚肺成纤维细胞PDGF表达和ERK1/2的激活。 展开更多

关键词 槲皮素 SiO 血小板源性生长因子 细胞外调节蛋白激酶1 2 肺泡巨噬细胞 人胚肺成纤维细胞

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EGFR通路在动脉粥样硬化机制中的作用研究 被引量：3

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作者 涂艳虹 程波 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期278-282,共5页

目的:通过巨噬细胞构建泡沫细胞,探讨EGFR通路在动脉粥样硬化机制中的作用。方法:采用C57BL/6J小鼠巨噬细胞诱导泡沫细胞,油红O染色鉴定模型。qRT-PCR、Western blot检测各靶点干扰效率。qRT-PCR检测IL-6和TNF-α表达。Western blot检测... 目的:通过巨噬细胞构建泡沫细胞,探讨EGFR通路在动脉粥样硬化机制中的作用。方法:采用C57BL/6J小鼠巨噬细胞诱导泡沫细胞,油红O染色鉴定模型。qRT-PCR、Western blot检测各靶点干扰效率。qRT-PCR检测IL-6和TNF-α表达。Western blot检测EGFR、p-EGFR、CHOP、ATF4、EIF2α、p-EIF2α和Cyt-C蛋白表达。流式细胞术检测ox-LDL的提取和活性氧的生成。ELISA检测IL-6和TNF-α含量。结果:EGFR抑制剂转染细胞后,EGFR表达下降(P<0.01),其中EGFR sh-RNA3干扰效率最好。EGFR抑制剂(AG1478或EGFR shRNA3)能够显著降低细胞对ox-LDL的提取(P<0.01),显著降低IL-6、TNF-α和活性氧水平(P<0.01),抑制细胞质中Cyt-C表达,显著降低p-EIF2α、Chop和ATF4表达(P<0.01)。结论:EGFR通路可能通过降低炎症和氧化应激减轻动脉粥样硬化。 展开更多

关键词 巨噬细胞源性泡沫细胞 动脉粥样硬化 炎症

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蛹虫草多糖促进CETP-tg小鼠胆固醇逆转运 被引量：6

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作者 邵波 李英 +6 位作者 王效琰 翟晓天 田华 刘伯言 张颖 司艳红 秦树存 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1754-1760,共7页

目的:本研究验证蛹虫草多糖(CMPS)在体内外促进胆固醇逆向转运(RCT)的效应,并探讨相关机制。方法:采用CETP-tg小鼠作为动物模型,通过同位素示踪技术检测体内的RCT效率;酶法测定血浆脂质水平。采用RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞作为细胞... 目的:本研究验证蛹虫草多糖(CMPS)在体内外促进胆固醇逆向转运(RCT)的效应,并探讨相关机制。方法:采用CETP-tg小鼠作为动物模型,通过同位素示踪技术检测体内的RCT效率;酶法测定血浆脂质水平。采用RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞作为细胞模型,油红O染色和总胆固醇试剂盒检测泡沫细胞胆固醇外排后剩余脂质含量。Western blot分析泡沫细胞及小鼠肝脏内涉及胆固醇转运、摄取、转化的相关蛋白水平。结果:CMPS灌胃4周后,高脂饮食CETP-tg小鼠血浆总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇及高密度脂蛋白胆固醇浓度分别降低24%、23%和22%,体内RCT过程加速,血浆、胆汁、肠道及粪便外排通路中3H-胆固醇放射活性明显升高,同时,肝脏中胆固醇受体SR-B1和LDLR及转化酶CYP7A1蛋白表达上调,分别增加了105%、71%和58%。体外实验显示:CMPS促进了巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇外排,细胞内脂质和TC水平明显降低,同时,上调了巨噬细胞PPARγ-LXRα-ABCA1/ABCG1信号通路相关蛋白的表达。结论:CMPS促进了外周巨噬细胞中多余胆固醇的流出和体内胆固醇经肝脏途径外排,其机制可能与PPARγ-LXRα-ABCA1/ABCG1通路激活有关。 展开更多

关键词 蛹虫草多糖 胆固醇逆转运 动脉粥样硬化 巨噬细胞源性泡沫细胞 PPARγ-LXRα-ABCA1/ABCG1信号通路

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