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异补骨脂素对小鼠胚胎前成骨细胞TGF-β受体影响的实验研究
被引量：
6
1
作者
塔娜
谭明生
+3 位作者
移平
蒋欣
杨峰
唐向盛
《中华中医药学刊》
CAS
2011年第4期820-822,共3页
目的:探讨经不同浓度异补骨脂素干预对小鼠胚胎前成骨细胞(MC3T3-E1)增殖、Ⅰ型骨胶原的表达、TGF-βⅠ、Ⅱ型受体的影响以及与原发性骨质疏松症的关系。方法:细胞分为正常对照组与不同浓度异补骨脂素组。各组细胞采用MTT方法检测MC3T3...
目的:探讨经不同浓度异补骨脂素干预对小鼠胚胎前成骨细胞(MC3T3-E1)增殖、Ⅰ型骨胶原的表达、TGF-βⅠ、Ⅱ型受体的影响以及与原发性骨质疏松症的关系。方法:细胞分为正常对照组与不同浓度异补骨脂素组。各组细胞采用MTT方法检测MC3T3-E1细胞增殖情况,天狼星红染色法测定Ⅰ型骨胶原的表达,荧光素酶报告基因检测TGF-β1通路活性以及Western-Blot法检测TGF-βⅠ、Ⅱ型受体的表达。结果:经不同浓度异补骨脂素刺激,可明显促进MC3T3-E1细胞增殖(P<0.05);Ⅰ型胶原表达逐渐增强;荧光素酶报告基因检测显示TGF-β1通路活性明显增强;Western-Blot结果显示TGF-βⅠ、Ⅱ型受体表达明显增强。结论:异补骨脂素可促进小鼠胚胎前成骨细胞的增殖及Ⅰ型骨胶原表达,对原发性骨质疏松症具有治疗作用。其作用机制可能是通过激活TGF-β信号通路而发挥抗骨质疏松作用。
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关键词
骨质疏松症
报告基因
tgf-β
ⅰ
、Ⅱ
型
受体
ⅰ
型
胶原
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职称材料
犬钩虫(Ancylostoma caninum)daf-1基因的克隆和表达鉴定
2
作者
乔莹
杨玉荣
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期64-68,共5页
目的对犬钩虫(Ancylostoma caninum)TGF-βⅠ型受体daf-1基因进行了克隆和鉴定,并在原核系统中进行表达。方法以犬钩虫总RNA为模板,用RT-PCR对犬钩虫TGF-β受体基因daf-1的cDNA进行扩增和克隆,用PCR筛选阳性克隆,双酶切鉴定并测序。将...
目的对犬钩虫(Ancylostoma caninum)TGF-βⅠ型受体daf-1基因进行了克隆和鉴定,并在原核系统中进行表达。方法以犬钩虫总RNA为模板,用RT-PCR对犬钩虫TGF-β受体基因daf-1的cDNA进行扩增和克隆,用PCR筛选阳性克隆,双酶切鉴定并测序。将测序正确的阳性克隆双酶切后构建到表达载体pET-32m中,转化到E.coli DH5α内,提取质粒,酶切鉴定阳性,再转化入表达宿主E.coli BL21(DE3)菌株内,对转化菌株用IPTG进行诱导培养。收集培养液,破菌、离心进行SDS-PAGE检测重组蛋白的表达。蛋白纯化后进行免疫,并通过免疫印迹检测在钩虫各时期的表达。结果电泳发现转化了重组质粒的菌株在IPTG诱导下表达的重组蛋白为58kDa,在钩虫各时期都有AcDAF-1的表达。结论成功进行了犬钩虫TGF-βⅠ型受体daf-1基因的扩增、克隆和表达并在各期检测到该蛋白的表达。
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关键词
犬钩虫
tgf-βⅰ型受体
Acdaf-1
克隆
表达
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职称材料
题名
异补骨脂素对小鼠胚胎前成骨细胞TGF-β受体影响的实验研究
被引量：
6
1
作者
塔娜
谭明生
移平
蒋欣
杨峰
唐向盛
机构
北京中医药大学
中日友好医院骨科
出处
《中华中医药学刊》
CAS
2011年第4期820-822,共3页
基金
首都医学发展科研基金资助项目(2002-3076)
中日友好医院院内配套资金
文摘
目的:探讨经不同浓度异补骨脂素干预对小鼠胚胎前成骨细胞(MC3T3-E1)增殖、Ⅰ型骨胶原的表达、TGF-βⅠ、Ⅱ型受体的影响以及与原发性骨质疏松症的关系。方法:细胞分为正常对照组与不同浓度异补骨脂素组。各组细胞采用MTT方法检测MC3T3-E1细胞增殖情况,天狼星红染色法测定Ⅰ型骨胶原的表达,荧光素酶报告基因检测TGF-β1通路活性以及Western-Blot法检测TGF-βⅠ、Ⅱ型受体的表达。结果:经不同浓度异补骨脂素刺激,可明显促进MC3T3-E1细胞增殖(P<0.05);Ⅰ型胶原表达逐渐增强;荧光素酶报告基因检测显示TGF-β1通路活性明显增强;Western-Blot结果显示TGF-βⅠ、Ⅱ型受体表达明显增强。结论:异补骨脂素可促进小鼠胚胎前成骨细胞的增殖及Ⅰ型骨胶原表达,对原发性骨质疏松症具有治疗作用。其作用机制可能是通过激活TGF-β信号通路而发挥抗骨质疏松作用。
关键词
骨质疏松症
报告基因
tgf-β
ⅰ
、Ⅱ
型
受体
ⅰ
型
胶原
Keywords
osteoporosis
Report gene
tgf-β
ⅰ
Ⅱreceptor
Type
ⅰ
collagen
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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职称材料
题名
犬钩虫(Ancylostoma caninum)daf-1基因的克隆和表达鉴定
2
作者
乔莹
杨玉荣
机构
厦门大学生命科学学院寄生动物研究室
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期64-68,共5页
基金
国家自然科学基金(No.30972181)资助~~
文摘
目的对犬钩虫(Ancylostoma caninum)TGF-βⅠ型受体daf-1基因进行了克隆和鉴定,并在原核系统中进行表达。方法以犬钩虫总RNA为模板,用RT-PCR对犬钩虫TGF-β受体基因daf-1的cDNA进行扩增和克隆,用PCR筛选阳性克隆,双酶切鉴定并测序。将测序正确的阳性克隆双酶切后构建到表达载体pET-32m中,转化到E.coli DH5α内,提取质粒,酶切鉴定阳性,再转化入表达宿主E.coli BL21(DE3)菌株内,对转化菌株用IPTG进行诱导培养。收集培养液,破菌、离心进行SDS-PAGE检测重组蛋白的表达。蛋白纯化后进行免疫,并通过免疫印迹检测在钩虫各时期的表达。结果电泳发现转化了重组质粒的菌株在IPTG诱导下表达的重组蛋白为58kDa,在钩虫各时期都有AcDAF-1的表达。结论成功进行了犬钩虫TGF-βⅠ型受体daf-1基因的扩增、克隆和表达并在各期检测到该蛋白的表达。
关键词
犬钩虫
tgf-βⅰ型受体
Acdaf-1
克隆
表达
Keywords
Ancylostoma caninum
Acdaf-1
cloning
expression and identification
分类号
R383 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
异补骨脂素对小鼠胚胎前成骨细胞TGF-β受体影响的实验研究
塔娜
谭明生
移平
蒋欣
杨峰
唐向盛
《中华中医药学刊》
CAS
2011
6
在线阅读
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职称材料
2
犬钩虫(Ancylostoma caninum)daf-1基因的克隆和表达鉴定
乔莹
杨玉荣
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
0
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职称材料
已选择
0
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