虎杖总蒽醌对肺间质纤维化大鼠上皮间质转化过程中TGFβ1-smad信号通路的影响 被引量：10

1

作者 黄莺 徐芳 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期204-207,共4页

目的观察虎杖总蒽醌对肺间质纤维化大鼠上皮间质转化过程中TGFβ1-smad信号通路的影响。方法大鼠随机分为空白组、博来霉素组、虎杖总蒽醌组、Smad3 siRNA+虎杖总蒽醌组、Smad3抑制剂+虎杖总蒽醌组。除空白组外,其余各组大鼠切开气管注... 目的观察虎杖总蒽醌对肺间质纤维化大鼠上皮间质转化过程中TGFβ1-smad信号通路的影响。方法大鼠随机分为空白组、博来霉素组、虎杖总蒽醌组、Smad3 siRNA+虎杖总蒽醌组、Smad3抑制剂+虎杖总蒽醌组。除空白组外,其余各组大鼠切开气管注入博来霉素(BLM,10 mg/kg)建立肺纤维化大鼠模型。造模后次日虎杖总蒽醌组给予虎杖总蒽醌(400 mg/kg)灌胃,每日1次,Smad3 siRNA+虎杖总蒽醌组给予虎杖总蒽醌灌胃并于造模后次日尾静脉注射Smad3 siRNA质粒(3 mL/kg),Smad3抑制剂+虎杖总蒽醌组每天给予虎杖总蒽醌灌胃基础上于造模后次日腹腔注射Smad3抑制剂(2 mg/kg)。4周后大鼠处死,取右肺,RT-PCR检测肺组织匀浆中上皮细胞标志物(E-cad)、间皮细胞标志物(α-SMA)及信号通路相关分子Smad3、TGF-β1、CTGF的mRNA的蛋白表达变化。取左肺组织匀浆后离心,碱裂解法检测肺组织中羟脯胺酸(HYP),大鼠摘眼球取血,酶联免疫吸附法检测血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、间质胶原蛋白Ⅰ、间质胶原蛋白Ⅲ的表达。结果RT-PCR显示,虎杖总蒽醌可提高模型大鼠肺组织中E-cad水平,降低TGF-β、Smad3、a-SMA、CTGF水平,而SiRNA+虎杖总蒽醌组及Smad3抑制剂+虎杖总蒽醌组与虎杖总蒽醌组形成相反趋势。酶联免疫吸附法显示,虎杖总蒽醌组肺组织HYP、血清CollagenⅠ、CollagenⅢ、TNF-α、VEGF、MMP-2水平均有所降低,SiRNA+虎杖总蒽醌组与Smad3抑制剂+虎杖总蒽醌组与虎杖总蒽醌组形成相反趋势。结论虎杖总蒽醌可能通过阻断TGFβ1-smad信号通路来抑制肺纤维化的发生,并通过抑制TGFβ1-smad信号通路的激活及降低肺组织HYP及血清TNF-α炎症因子达到减轻肺纤维化的作用。 展开更多

关键词 虎杖总蒽醌 肺间质纤维化 上皮间质转化 tgfβ1-smad信号通路

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白藜芦醇对糖尿病肾病大鼠Wnt/β-catenin和TGF-β1-Smad2/3信号通路的影响 被引量：33

2

作者 肖伟伟 奚悦 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期3033-3038,共6页

目的探究白藜芦醇对糖尿病肾病大鼠Wnt/βcatenin和TGFβ1 Smad2/3信号通路的影响。方法利用链脲佐菌素一次性注射制作糖尿病肾病模型,40只SD大鼠随机分成白藜芦醇组(5mg/kg)、氯沙坦组(30mg/kg)、白藜芦醇联合氯沙坦组(5mg/kg藜芦醇联... 目的探究白藜芦醇对糖尿病肾病大鼠Wnt/βcatenin和TGFβ1 Smad2/3信号通路的影响。方法利用链脲佐菌素一次性注射制作糖尿病肾病模型,40只SD大鼠随机分成白藜芦醇组(5mg/kg)、氯沙坦组(30mg/kg)、白藜芦醇联合氯沙坦组(5mg/kg藜芦醇联合30mg/kg氯沙坦)和模型组,每组小鼠10只,1次/d,均持续作用8周。检测尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、24 h尿蛋白及空腹血糖水平,计算肾脏指数,实时荧光定量PCR、Western blot法及免疫组化法检测Wnt4、βcatenin及TGFβ1、Smad2/3表达。结果与模型组比较,白藜芦醇组、氯沙坦组、白藜芦醇联合氯沙坦组的BUN、Scr、24h尿蛋白和空腹血糖水平显著降低(P<0.05),肾脏指数降低(P<0.05),Wnt4、βcatenin、TGFβ1、Smad2/3mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05);与白藜芦醇联合氯沙坦组比较,白藜芦醇组以上指标差异无统计学意义(P>0.05),而氯沙坦组以上指标明显增加(P<0.05)。结论白藜芦醇能够降低Wnt/βcatenin和TGFβ1 Smad2/3信号通路的表达水平,改善DN肾脏病理进程,减少肾脏受到的损害。 展开更多

关键词 白藜芦醇 糖尿病肾病 Wnt4/βcatenin信号通路 tgfβ1 SMAD2/3

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TGFβ1/Smad3信号通路介导的赖氨酸羟化酶2活性变化在肺纤维化胶原沉积中的作用 被引量：14

3

作者 邵松军 方海燕 +5 位作者 叶贤伟 饶姗姗 张帮艳 袁国航 刘维佳 张湘燕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1858-1863,共6页

目的:探讨TGFβ1/Smad3信号通路对赖氨酸羟化酶2(lysyl hydroxylase 2,LH2)活性变化的影响,以及这一变化在肺纤维化胶原沉积中的作用及机制。方法:用含10%胎牛血清的F12培养基培养人肺成纤维细胞株HFL1。实验分为对照组、TGFβ1(10μg/L... 目的:探讨TGFβ1/Smad3信号通路对赖氨酸羟化酶2(lysyl hydroxylase 2,LH2)活性变化的影响,以及这一变化在肺纤维化胶原沉积中的作用及机制。方法:用含10%胎牛血清的F12培养基培养人肺成纤维细胞株HFL1。实验分为对照组、TGFβ1(10μg/L)刺激组和米诺地尔(5μmol/L)干预组,对照组加等量培养基;48 h后收集各组RNA及蛋白,采用RT-qPCR检测PLOD2、α-SMA及COLⅠ的mRNA表达水平,Western blot检测LH2、总Smad3、磷酸化Smad3、α-SMA、COLⅠ和COLⅣ的蛋白水平变化,ELISA检测细胞中羟基赖氨酰吡啶酚(hydroxylysylpyridinoline,HP)的含量变化。结果:TGFβ1刺激后,PLOD2、α-SMA及COLⅠ的mRNA表达上调(P<0.01);其对应的蛋白水平如LH2、磷酸化Smad3、α-SMA、COLⅠ和COLⅣ蛋白水平增高,而总Smad3的蛋白水平没有变化。米诺地尔干预后上述基因的mRNA及蛋白表达减少(P<0.01)。TGFβ1刺激后ELISA检测到HP含量较对照组增加,米诺地尔干预后合成减少(P<0.05)。结论:TGFβ1/Samd3信号通路激活,使LH2表达增多;而米诺地尔通过抑制TGFβ1/Samd3信号转导,减少LH2的表达,减少羟基化胶原吡啶链的合成,从而减轻肺纤维化病变。 展开更多

关键词 肺纤维化 赖氨酸羟化酶2 胶原沉积 tgfβ1/Smad3信号通路

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TGFβ1/Smads信号转导通路的变化在原发性肝癌发病机制中的作用 被引量：4

4

作者 孔丽 姚树坤 +2 位作者 马英 王容琦 张玉果 《临床肝胆病杂志》 CAS 2007年第4期270-273,共4页

探讨TGFβ1/Smads信号转导通路的改变在原发性肝癌发病机制中的作用。应用western blotting法和RT-PCR法对肝癌组织TGFβ受体Ⅰ、TGFβ受体Ⅱ、Smad2,Smad4,Smad7蛋白和mRNA水平进行检测,并与正常肝组织和癌旁组织比较。结果显示肝癌组... 探讨TGFβ1/Smads信号转导通路的改变在原发性肝癌发病机制中的作用。应用western blotting法和RT-PCR法对肝癌组织TGFβ受体Ⅰ、TGFβ受体Ⅱ、Smad2,Smad4,Smad7蛋白和mRNA水平进行检测,并与正常肝组织和癌旁组织比较。结果显示肝癌组织TGFβRⅡ、Smad4 mRNA和蛋白表达较正常及癌旁组织显著降低,Smad7 mRNA和蛋白表达、Smad7/Smad4比值显著升高。提示TGFβ1/smads信号转导通路被抑制,使TGFβ1介导的抗增殖信号不能正常下传,可能是肝癌发生的机制之一。 展开更多

关键词 原发性肝癌 肝组织 tgfβ受体 SMADS tgfβ1/Smads信号通路

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TGFβ-SMAD信号通路基因在梅山猪与杜洛克猪不同级别卵泡中的表达分析 被引量：8

5

作者 徐梦思 黄涛 +3 位作者 刘丽娟 杨飞 翟腾蛟 马力鹏 《家畜生态学报》 北大核心 2016年第2期12-18,共7页

为探索TGFβ-SMAD信号通路基因在卵泡中的表达规律,采用Real-time PCR方法检测TGFβ-SMAD信号通路基因THBS1、DCN、LTBP1、TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3、TGFβRⅠ、TGFβRⅡ、SMAD2、SMAD3、SMAD4基因在梅山、杜洛克S、M1、M2、L卵泡中的表... 为探索TGFβ-SMAD信号通路基因在卵泡中的表达规律,采用Real-time PCR方法检测TGFβ-SMAD信号通路基因THBS1、DCN、LTBP1、TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3、TGFβRⅠ、TGFβRⅡ、SMAD2、SMAD3、SMAD4基因在梅山、杜洛克S、M1、M2、L卵泡中的表达量变化。结果表明:TGFβ配体1、2、3型及正向调控因子THBS1、LTBP1、负向调控因子DCN、受体TGFβRⅠ、TGFβRⅡ以及受体调控SMAD2、SMAD3和辅SMAD4都在梅山与杜洛克的中等卵泡中存在表达差异,TGFβ1基因、TGFβRⅠ基因在梅山猪各级卵泡中的表达量均极显著高于杜洛克(P<0.01)。研究提示,TGFβ-SMAD基因可能参与卵泡发育过程。 展开更多

关键词 猪 tgfβ-smad信号通路 卵泡 表达量

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坎地沙坦酯对酒精性肝纤维化小鼠TGF-β1/Smads信号通路的影响 被引量：9

6

作者 徐旭东 段光琦 +2 位作者 刘洁 杨辉 钱叶本 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第3期305-310,共6页

目的探讨坎地沙坦酯对酒精性肝纤维化(alcoholic liver fibrosis,ALF)小鼠TGF⁃β1/Smads信号通路及相关生化指标的影响。方法将42只C57小鼠随机分为空白对照组(n=8)和模型组(n=34),成功构建ALF小鼠模型后,随机分为模型对照组、阳性对照... 目的探讨坎地沙坦酯对酒精性肝纤维化(alcoholic liver fibrosis,ALF)小鼠TGF⁃β1/Smads信号通路及相关生化指标的影响。方法将42只C57小鼠随机分为空白对照组(n=8)和模型组(n=34),成功构建ALF小鼠模型后,随机分为模型对照组、阳性对照组和实验组。阳性对照组和实验组分别给予水飞蓟素和坎地沙坦酯干预,其余正常饲养。干预结束后,异氟烷吸入麻醉小鼠,腹主动脉取血,离心,ELISA法检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和甘油三酯(TG)的水平,解剖分离肝脏,计算肝脏指数;并切取部分肝组织制作石蜡切片,苏木精-伊红和天狼星红染色,光镜下观察病理改变,其余肝组织裂解、匀浆,分离上清液,Western blot检测TGF⁃β1和Smad3蛋白的表达水平,TR⁃PCR检测TGF⁃β1 mRNA和Smad3 mRNA水平。结果光镜下可见,模型对照组小鼠肝组织局部可见大量炎性细胞浸润、出血、肝细胞坏死和胶原沉积;模型对照组ALT、AST和TG水平显著高于空白对照组、阳性对照组和实验组,差异均有统计学意义(P<0.01),阳性对照组与实验组ALT、AST和TG水平无明显差异,差异无统计学意义(P>0.05);肝脏指数、TGF⁃β1和Smad3蛋白的表达水平和TGF⁃β1 mRNA和Smad3 mRNA水平均与上述统计结果一致。结论实验结果表明,坎地沙坦酯可以改善肝纤维化,降低血清ALT、AST和TG水平,并通过抑制TGF⁃β1/Smads信号通路关键分子表达而发挥作用。 展开更多

关键词 坎地沙坦酯 酒精 肝纤维化 tgf⁃β1 SMADS 信号通路

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基于TGF-β1/Smad信号通路初步探讨虎杖醇提物对腺嘌呤诱导小鼠肾间质纤维化的改善作用 被引量：11

7

作者 段艳华 陈云祥 +8 位作者 郑高利 温磊 陈浩 张丽丽 秦荔 王佳虹 刘芳 夏道宗 张立将 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期10-19,共10页

目的研究虎杖醇提物(ethanolic extract of Polygonum cuspidatum,PCE)对小鼠肾间质纤维化的保护作用及其潜在分子机制。方法将50只雄性C57BL/6N小鼠随机分为5组(n=10):正常对照组、模型组、虎杖醇提物低、中、高(75、150、300 mg/kg)... 目的研究虎杖醇提物(ethanolic extract of Polygonum cuspidatum,PCE)对小鼠肾间质纤维化的保护作用及其潜在分子机制。方法将50只雄性C57BL/6N小鼠随机分为5组(n=10):正常对照组、模型组、虎杖醇提物低、中、高(75、150、300 mg/kg)剂量组。除正常对照组外,其他各组灌胃腺嘌呤构建肾间质纤维化模型,虎杖醇提物低、中、高剂量组同时灌胃给予不同剂量的虎杖醇提物混悬液。各组经灌胃给药42 d后用生化试剂盒测定血清肌酐(serum creatinine,Scr)和尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平,通过苏木精伊红染色和Masson三色染色分别观察小鼠肾组织病理学变化及胶原沉积情况,采用Western Blot法检测小鼠肾组织中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Smad6、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、I型胶原蛋白(Collagen I)的表达情况。结果与正常对照组比较,模型组小鼠BUN、Scr水平显著增高(P<0.01)。肾组织病理学HE染色可见肾小管结构破坏,炎细胞浸润肾间质,完整的健存肾单位明显减少;Masson染色可见胶原纤维蓝色阳性染色面积明显增多。肾组织TGF-β1的表达明显增多(P<0.01),而TGF-β/Smad通路的负调节因子Smad6的表达显著下调(P<0.01)。上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)标志蛋白之一α-SMA、细胞外基质(extracellular matrix,ECM)蛋白之一Collagen I的表达明显增加(P<0.01)。与模型组相比,虎杖醇提物各给药组BUN、Scr水平以及肾组织TGF-β1、α-SMA及Collagen I的蛋白表达水平呈剂量依赖性降低,Smad6的表达水平呈剂量依赖性升高。肾组织的病理改变及纤维沉积面积均有不同程度的改善。结论虎杖醇提物能减轻腺嘌呤诱导的小鼠肾功能损伤,改善肾间质纤维化,其机制与干预TGF-β1/Smad信号通路,抑制EMT及ECM蛋白沉积有关。 展开更多

关键词 肾间质纤维化 虎杖醇提物 tgfβ1/Smad信号通路 上皮-间充质转化

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TGFβR 1介导TGF-β/Smad信号通路对绵羊颗粒细胞功能的影响 被引量：2

8

作者 李悦欣 刘爱菊 +4 位作者 马晓菲 郑忠 胡伯欣 智云霞 田树军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3335-3347,共13页

旨在探究TGFβR1介导TGF-β/Smad信号通路调控绵羊颗粒细胞功能的机制。本试验收集绵羊卵巢颗粒细胞,通过构建pcDNA3.1(+)-TGFβR1和pcDNA3.1(+)-SMAD4过表达质粒载体及shRNA-TGFβR1和shRNA-SMAD4干扰表达质粒载体,对绵羊颗粒细胞中TGF... 旨在探究TGFβR1介导TGF-β/Smad信号通路调控绵羊颗粒细胞功能的机制。本试验收集绵羊卵巢颗粒细胞,通过构建pcDNA3.1(+)-TGFβR1和pcDNA3.1(+)-SMAD4过表达质粒载体及shRNA-TGFβR1和shRNA-SMAD4干扰表达质粒载体,对绵羊颗粒细胞中TGFβR1和SMAD4基因分别进行过表达和干扰,利用CCK-8细胞增殖检测、流式细胞术、Annexin-V FITC/PI双染技术检测绵羊颗粒细胞增殖、细胞周期及凋亡功能,并结合Real-Time PCR及Western blot检测TGFβR1、SMAD4的mRNA水平和细胞凋亡相关蛋白BAX、BCL2、Caspase3的表达水平及TGF-β/Smad信号通路中TGFβR1、TGFβR2、SMAD2/3的磷酸化水平。结果显示,过表达TGFβR1和SMAD4均极显著促进颗粒细胞从G0/G1期进入S期的能力(P<0.01)、颗粒细胞增殖及抗凋亡蛋白BCL2的表达(P<0.01),抑制凋亡蛋白BAX和Caspase3表达(P<0.01)。干扰TGFβR1和SMAD4均极显著促进颗粒细胞凋亡及凋亡蛋白BAX和Caspase3的表达(P<0.01),抑制抗凋亡蛋白BCL2的表达(P<0.01)。进一步研究发现,过表达TGFβR1可促进TGF-β/Smad信号通路中TGFβR1、TGFβR2及SMAD2/3磷酸化水平(P<0.01),并极显著促进SMAD4的蛋白表达水平(P<0.01);干扰TGFβR1则显著抑制TGFβR1、TGFβR2(P<0.01)及SMAD2/3的磷酸化水平(P<0.05),并抑制SMAD4的蛋白表达(P<0.01);过表达SMAD4则会显著促进TGFβR1蛋白的表达(P<0.01)。研究表明,TGFβR1促进绵羊颗粒细胞的增殖及周期进程,抑制颗粒细胞凋亡,通过介导TGF-β/Smad信号通路中SMAD2/3及SMAD4的表达正向调控绵羊颗粒细胞的增殖与周期,并负向调控其凋亡。 展开更多

关键词 tgfβR1 绵羊 颗粒细胞 tgf-Β/SMAD信号通路

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TGF/Smad信号通路与肝纤维化的研究进展 被引量：21

9

作者 黄越龙 周春光 +2 位作者 陈燕 张谊 张启瑜 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第10期1883-1884,共2页

肝纤维化是由于细胞外基质（extracellular matrix,ECM）合成和降解失衡,ECM过度沉积而发生的,是许多慢性肝脏疾病发展为肝硬化的主要病理过程。

关键词 SMAD信号通路 肝纤维化 tgf 转化生长因子β1 matrix 细胞外基质 病理过程 疾病发展

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DAPT对肺成纤维细胞表型转化中Wnt信号通路的影响 被引量：3

10

作者 龚文颖 曾林祥 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第2期184-186,共3页

目的:探讨Wnt/β-catenin信号通路与Notch信号通路之间存在间接或直接的相互作用以及该信号通路在DAPT抑制肺成纤维细胞增殖中的作用表达。方法:通过使用TGF-β1刺激SD大鼠胚肺成纤维细胞发生表型转化为肌成纤维细胞,并采用DAPT抑制Wnt/... 目的:探讨Wnt/β-catenin信号通路与Notch信号通路之间存在间接或直接的相互作用以及该信号通路在DAPT抑制肺成纤维细胞增殖中的作用表达。方法:通过使用TGF-β1刺激SD大鼠胚肺成纤维细胞发生表型转化为肌成纤维细胞,并采用DAPT抑制Wnt/β-catenin信号通路,体外纯化肺成纤维细胞,使用细胞免疫荧光检测波形蛋白进行鉴定;分别采用5ng/mLTGF-β1和500nmol/L的DAPT作用于肺成纤维细胞24h,观察其形态学改变;分别采用RT-PCR及Western blot检测wnt1、β-catenin在肺成纤维细胞经TGF-β及DAPT作用24h后的表达情况。结果:与正常组相比较TGF-Β1能显著增加肺成纤维细胞中β-catenin的表达(P<0.05),但加用DAPT后wnt1及β-catenin在肺成纤维细胞中的表达下降(P<0.05)。结论:Wnt/β-catenin信号通路与Notch信号通路之间是存在相互关系的,TGF-β1可使肺成纤维细胞中的β-catenin表达增高;DAPT对于抑制肺成纤维细胞中的wnt/β-catenin信号通路发挥了作用。 展开更多

关键词 tgf—B1 wnt Β-CATENIN信号通路 DAPT 抑制 增殖

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人工冬虫夏草对特发性肺纤维化上皮-间质转分化中信号通路的影响 被引量：12

11

作者 黄莺 徐芳 袁文胜 《世界中医药》 CAS 2021年第24期3611-3614,共4页

目的:观察肺纤维化动物模型中人工冬虫夏草(Ccs)是否通过TGFbeta1-Smad途径来影响肺间质纤维化上皮-间质转化。方法:将50只SD大鼠随机分为空白对照组、博来霉素组(BLM组)、博来霉素+冬虫夏草组(Ccs组)、空白质粒组、siRNA组(Smad3siRNA... 目的:观察肺纤维化动物模型中人工冬虫夏草(Ccs)是否通过TGFbeta1-Smad途径来影响肺间质纤维化上皮-间质转化。方法:将50只SD大鼠随机分为空白对照组、博来霉素组(BLM组)、博来霉素+冬虫夏草组(Ccs组)、空白质粒组、siRNA组(Smad3siRNA+博来霉素+冬虫夏草),采用气管内注入博来霉素(5 mg/kg)复制大鼠肺纤维化模型,对照组给予生理盐水1.25 mL/kg。Ccs组于造模当日开始灌胃人工冬虫夏草溶液5 g/(kg·d),空白质粒组于造模第二天进行空白质粒尾静脉快速注射(3 mL/kg)。siRNA组在每天Ccs灌胃基础上于造模次日尾静脉注射Smad3 siRNA质粒(3 mL/kg)。于第28天处死动物。行HE染色,并用RT-PCR检测肺组织匀浆中上皮细胞标志物E-cad、间皮细胞标志物α-SMA以及信号通路相关分子Smad3、转化生长因子(TGF)-β_(1)、结缔组织生长因子(CTGF)的mRNA的蛋白表达变化。结果:BLM组纤维化程度较重,Ccs组炎症程度明显减轻,纤维组织大量减少,siRNA组同Ccs组比较肺泡炎及纤维化程度有所加重;RT-PCR结果显示BLM组TGF-β_(1)、α-SMA表达较对照组明显增高,siRNA组的α-SMA、CTGF表达较Ccs组有显著上升。结论:Ccs可能通过阻断TGFbeta1-Smad信号通路抑制肺纤维化的发生。 展开更多

关键词 成纤维细胞 表型转化 tgfbeta1-smad信号通路 人工冬虫夏草 肺间质纤维化 上皮-间质转化 转化生长因子 博来霉素

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回回甘松饮对糖尿病肾病大鼠miR⁃192及TGF⁃β1/Smads的调控作用

12

作者 袁玲 李嘉欣 +1 位作者 鲁玉梅 南一 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第2期164-169,共6页

目的探究回回甘松饮(Hui⁃hui Gan⁃song Yin,HGY)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾小球的保护作用。方法随机选取10只大鼠作为空白对照组(NC)。选用高脂饲料喂养SD大鼠联合链脲佐菌素的方法复制大鼠早期DN模型,DN模型复制成... 目的探究回回甘松饮(Hui⁃hui Gan⁃song Yin,HGY)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾小球的保护作用。方法随机选取10只大鼠作为空白对照组(NC)。选用高脂饲料喂养SD大鼠联合链脲佐菌素的方法复制大鼠早期DN模型,DN模型复制成功的大鼠随机分为:DN模型组(DN)、格列喹酮组(DN+Gli,10 mg/kg)及回回甘松饮高剂量组(DN+HH,10 g/kg)、回回甘松饮低剂量组(DN+HL,5 g/kg),每组10只。采用实时荧光定量PCR方法检测肾组织中miR⁃192、靶基因Zeb2及TGF⁃β1/Smads信号通路中TGF⁃β1、Smad3、Smad7 mRNA的表达,采用Western blot方法检测所对应蛋白的表达。结果与空白对照组比较,模型组大鼠肾组织TGF⁃β1、Smad3蛋白及miR⁃192、TGF⁃β1、Smad3 mRNA表达水平显著升高(P<0.01),而Smad7、SIP1蛋白及Zeb2和Smad7 mRNA表达水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,给予HGY及格列喹酮干预后,大鼠TGF⁃β1及miR⁃192、TGF⁃β1、Smad3 mRNA水平显著下降(P<0.01),Smad7、S1P1蛋白及Zeb2、Smad7 mRNA表达水平显著升高。结论HGY在DN大鼠肾脏中可能通过调控miR⁃192介导的TGF⁃β1/Smads信号通路改善肾脏细胞外基质堆积,从而起到保护早期DN大鼠肾脏的作用。 展开更多

关键词 回回甘松饮 糖尿病肾病 miR⁃192 tgf⁃β1/Smads信号通路

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豚鼠进展性近视眼巩膜中Smad3和I型胶原的动态表达变化 被引量：11

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作者 姜波 吴章友 +2 位作者 朱子诚 胡威 展欣 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期491-497,共7页

背景巩膜重塑过程中导致眼轴的伸长是轴性近视进展的主要病理机制之一。研究证实转化生长因子p，（TGF—β，）参与巩膜重塑过程，而Smad3是TGF—β，的下游信号转录基因之一，探讨其在近视眼巩膜重塑过程中的作用对于近视发病机制和防... 背景巩膜重塑过程中导致眼轴的伸长是轴性近视进展的主要病理机制之一。研究证实转化生长因子p，（TGF—β，）参与巩膜重塑过程，而Smad3是TGF—β，的下游信号转录基因之一，探讨其在近视眼巩膜重塑过程中的作用对于近视发病机制和防治研究具有重要意义。目的研究近视眼巩膜重塑过程中Smad3和I型胶原的表达情况，探讨TGF—β1-Smad3-CollagenI信号途径在近视巩膜胶原重塑中的作用。方法将出生后7d的豚鼠75只任意分为空白对照组（25只）和形觉剥夺性近视（FDM）组（50只）。FDM组豚鼠采用半透明乳胶遮盖左眼的方法制备单眼FDM模型，右侧未遮盖眼作为自身对照。FDM组分别遮盖2、4、6周，另一组动物遮盖4周后去遮盖1周，分别于遮盖前及上述时间点采用检影法测量各组豚鼠双眼屈光度，采用A型超声手动模式测量豚鼠眼轴长度。于上述时间点分别处死5只豚鼠并制备巩膜组织切片，分别采用免疫组织化学法及逆转录PCR法检测各组豚鼠巩膜组织中Smad3和I型胶原蛋白及其mRNA的相对表达量。结果遮盖前空白对照组与FDM组豚鼠屈光度均为远视状态，差异无统计学意义（P〉0．05），空白对照组豚鼠远视屈光度逐渐下降，而FDM组豚鼠在遮盖前，遮盖2、4、6周及遮盖4周后去遮盖1周屈光度从（＋2．09±0．31）D逐渐改变为（-1．23±0．69）、（-4．17±0．59）、（-7．07±0．56）和（-4．30±0．58）D，眼轴长度从（5．93±0．39）mm逐渐改变为（6．62±0．36）、（7．30±0．34）、（7．99±0．32）和（7．21±0．36）mm，与空白对照组比较，遮盖后各时间点FDM组豚鼠近视度明显升高，眼轴测量值明显增加，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。与自身对照组比较，遮盖2周、4周、遮盖4周后去遮盖1周及遮盖6周时FDM组近视度均明显升高，眼轴明显增长，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。遮盖前空白对照组与FDM组豚鼠后极部巩膜组织中I型胶原和Smad3蛋白及其mRNA相对表达量的差异均无统计学意义（均P〉0．05），FDM组豚鼠遮盖2、4、6周及遮盖4周后去遮盖1周巩膜组织中I型胶原和Smad3蛋白及其mRNA相对表达量均明显低于空白对照组和自身对照组，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。豚鼠巩膜组织中I型胶原蛋白与Smad3蛋白及其mRNA相对表达量均呈明显正相关（蛋白：r=0．993，P〈0．05；mRNA：r=0．954，P〈0．05）。结论FDM豚鼠模型眼随着遮盖时间的延长近视度明显增加，眼轴明显增长，豚鼠巩膜组织中Smad3和I型胶原的表达相应减弱，且Smad3和I型胶原表达量的变化趋势高度一致。Smad3和I型胶原可能通过TGF-β1-Smad3-CollagenI信号途径参与近视眼巩膜重塑过程的调控。 展开更多

关键词 形觉剥夺 近视 巩膜/代谢 疾病进展 转化生长因子β1-smad3-I性胶原信号通路 动 物模型 豚鼠

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Cx43基因敲除胎鼠心脏近端流出道隔心肌化过程中的关键基因 被引量：4

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作者 陈伟呈 张颖 黄国英 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期52-58,共7页

目的研究Cx43基因纯合敲除(Cx43-/-)小鼠胚胎心脏近端流出道组织中基因表达谱的改变,筛选可能导致Cx43-/-小鼠流出道梗阻的关键基因。方法以胎龄(embryonic day,ED)14.5的Cx43-/-和野生型(Cx43+/+)鼠胚心脏近端流出道部分为研究对象,分... 目的研究Cx43基因纯合敲除(Cx43-/-)小鼠胚胎心脏近端流出道组织中基因表达谱的改变,筛选可能导致Cx43-/-小鼠流出道梗阻的关键基因。方法以胎龄(embryonic day,ED)14.5的Cx43-/-和野生型(Cx43+/+)鼠胚心脏近端流出道部分为研究对象,分别提取总RNA,逆转录成cDNA,并在体外转录为cRNA,同时进行生物素标记及片段化,再与Affymetrix-430 2.0基因芯片进行杂交。杂交信号经扫描后,应用相关生物信息软件分析基因表达情况。结果与Cx43+/+组相比,Cx43-/-组中表达上调2倍以上的基因共有143个,表达下调2倍以上的基因有235个。其中表达差异的基因参与转录调控、细胞周期、细胞黏附、细胞活动和细胞骨架的信号通路等主要生理过程。进一步筛查表达差异1.5倍以上的基因发现,与圆锥动脉干畸形相关的TGFβ/BMP信号通路上的多个基因以及Ssr1、Ptk2、Bmp6等基因在Cx43-/-组有明显变化。对这些基因进行荧光定量PCR验证,结果与基因芯片一致(P<0.05)。结论利用基因芯片技术初步筛选出与Cx43-/-鼠胚心脏近端流出道发育有关的多个基因,并经荧光定量PCR验证。其中TGFβ/BMP信号通路上的多个基因以及Ssr1、Ptk2、Bmp6等基因可能与Cx43-/-小鼠流出道梗阻的发生有关。 展开更多

关键词 心脏发育 CX43 基因芯片 tgfβ BMP Ssr1 Ptk2 信号通路 小鼠

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SIRT6对椎间盘退变的作用及机制 被引量：4

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作者 谢明忠 戚力升 +3 位作者 肖常明 张开权 赵檬 李森 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期935-943,共9页

目的:探讨Sirtuin(SIRT)6对椎间盘退变的作用及机制。方法:32只C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、SIRT6激动剂组、SIRT6抑制剂组,每组8只。造模小鼠采用穿刺法构建Co5/6椎间盘退变模型,造模成功后,SIRT6激动剂组和SIRT6抑制剂组分... 目的:探讨Sirtuin(SIRT)6对椎间盘退变的作用及机制。方法:32只C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组、SIRT6激动剂组、SIRT6抑制剂组,每组8只。造模小鼠采用穿刺法构建Co5/6椎间盘退变模型,造模成功后,SIRT6激动剂组和SIRT6抑制剂组分别腹腔注射SIRT6激动剂(20mg/kg)和SIRT6抑制剂(20mg/kg),假手术组、模型组均腹腔注射等量生理盐水,连续7d。干预结束后,对小鼠进行影像学观察,并采集椎间盘组织,采用免疫组化检测椎间盘组织SIRT6阳性百分比;苏木精-伊红(hematoxylin eosin,HE)染色、Masson染色及甲苯胺蓝染色观察椎间盘组织病理学改变;生化检测椎间盘组织丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)及活性氧(ROS)含量;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测椎间盘组织SIRT6、转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β)1、smad1、smad5 mRNA表达;Western blot检测椎间盘组织骨胶原(collagen)Ⅱ、collagen X、TGF-β1、smad1、smad5、p-smad1、p-smad5蛋白表达。结果:影像学观察发现假手术组尾椎排列有序,无骨赘形成;模型组出现骨赘形成,相较于模型组,SIRT6激动剂组骨赘形成受到明显抑制,而SIRT6抑制剂组骨赘形成更明显。与假手术组相比,模型组小鼠椎间盘组织SIRT6表达及GSH-Px、SOD含量明显降低,而MDA、ROS含量及collagenⅡ、collagen X、TGF-β1、smad1、smad5、p-smad1、p-smad5表达明显升高(P<0.01);模型组椎间盘组织软骨终板局部软骨减少,胶原纤维紊乱、致密,形态模糊;与模型组相比,SIRT6激动剂组椎间盘组织SIRT6表达及GSH-Px、SOD含量明显升高,MDA、ROS含量及collagenⅡ、collagen X、TGF-β1、smad1、smad5、p-smad1、p-smad5表达明显降低(P<0.05);SIRT6抑制剂组则呈现与激动剂组相反的结果。结论:SIRT6过表达可有效调节氧化应激,抑制TGFβ-smad1/5信号通路,进而助于减缓椎间盘退变。 展开更多

关键词 椎间盘退变性病变 SIRT6 氧化应激 tgfβ-smad1/5信号通路

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