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猪圆环病毒2型ORF1和ORF3T淋巴细胞抗原表位的克隆与原核表达
1
作者
高娟
王艳玲
+2 位作者
蒋再学
竺薇
罗满林
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期93-97,共5页
根据Stevenson筛选出来的3个具有活性的T淋巴细胞抗原表位(T lymphocyte epitope,TCE)合成tce基因(180 bp),成功插入到pMD18-T Simple载体中,筛选获得重组质粒,命名为pMD-TCE.将tce酶切产物亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,获得重组质...
根据Stevenson筛选出来的3个具有活性的T淋巴细胞抗原表位(T lymphocyte epitope,TCE)合成tce基因(180 bp),成功插入到pMD18-T Simple载体中,筛选获得重组质粒,命名为pMD-TCE.将tce酶切产物亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,获得重组质粒,命名为pET-TCE.用IPTG进行诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE检测,结果显示合成基因在pET-32a(+)中获得了高效融合表达,其表达蛋白相对分子质量约为25 000,Western-blot分析结果表明,获得的融合蛋白可与猪圆环病毒2型(PCV2)阳性血清发生特异性反应,具有良好的免疫原性.
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关键词
猪圆环病毒2型
t淋巴细胞抗原表位
克隆
原核
表
达
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题名
猪圆环病毒2型ORF1和ORF3T淋巴细胞抗原表位的克隆与原核表达
1
作者
高娟
王艳玲
蒋再学
竺薇
罗满林
机构
华南农业大学兽医学院
出处
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期93-97,共5页
基金
省部产学研结合项目(2011A090200117)
文摘
根据Stevenson筛选出来的3个具有活性的T淋巴细胞抗原表位(T lymphocyte epitope,TCE)合成tce基因(180 bp),成功插入到pMD18-T Simple载体中,筛选获得重组质粒,命名为pMD-TCE.将tce酶切产物亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,获得重组质粒,命名为pET-TCE.用IPTG进行诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE检测,结果显示合成基因在pET-32a(+)中获得了高效融合表达,其表达蛋白相对分子质量约为25 000,Western-blot分析结果表明,获得的融合蛋白可与猪圆环病毒2型(PCV2)阳性血清发生特异性反应,具有良好的免疫原性.
关键词
猪圆环病毒2型
t淋巴细胞抗原表位
克隆
原核
表
达
Keywords
PCV2
t
lymphocy
t
e epi
t
ope
cloning
prokaryo
t
ic expression
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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作者
出处
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1
猪圆环病毒2型ORF1和ORF3T淋巴细胞抗原表位的克隆与原核表达
高娟
王艳玲
蒋再学
竺薇
罗满林
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
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