Id2通过PI3K/AKT通路调控Tcm细胞的代谢重编程抑制结肠癌细胞生长

1

作者 刘枋 潘春丽 +2 位作者 周智锋 陈淑萍 叶韵斌 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第6期570-578,共9页

目的:探讨分化抑制因子2(Id2)在诱导生成中央记忆性T(Tcm)细胞及增强T细胞抗肿瘤持久性中的作用。方法:磁珠分选CD8^(+)初始T细胞,与负载癌胚抗原(CEA)的树突状细胞(DC)共培养,经白介素-2(IL-2)或IL-7/15/21/23分别诱导培养效应T(Teff)... 目的:探讨分化抑制因子2(Id2)在诱导生成中央记忆性T(Tcm)细胞及增强T细胞抗肿瘤持久性中的作用。方法:磁珠分选CD8^(+)初始T细胞,与负载癌胚抗原(CEA)的树突状细胞(DC)共培养,经白介素-2(IL-2)或IL-7/15/21/23分别诱导培养效应T(Teff)或Tcm细胞;qPCR和WB法分别检测T细胞中Id2和Id3 mRNA、蛋白表达;慢病毒敲减T细胞中Id2基因,用流式细胞术检测其T细胞记忆表型;WB法检测PI3K/AKT通路相关蛋白的表达;Seahorse能量代谢仪分析细胞外酸化速率(ECAR)和耗氧速率(OCR);斑马鱼结肠癌HCT116细胞移植瘤模型分析Teff和Tcm细胞的抗肿瘤差异,进一步观察敲减Id2基因的Tcm细胞(Tcm-shId2)对第二次移植瘤的生长抑制。结果:Tcm细胞高表达Id3 mRNA(P<0.05),而Teff细胞高表达Id2 mRNA(P<0.001)。成功构建敲减Id2基因的Tcm细胞(Tcm-shId2)且其Id3表达明显上调,敲减Id2可促进Tcm细胞的形成(P<0.05)。Tcm-shId2细胞通过PI3K/AKT通路进行代谢重编程,有效抑制斑马鱼体内结肠癌移植瘤的生长,对第二次移植瘤也能产生显著抑制作用(P<0.01)。结论:Id2可能通过调控PI3K/AKT通路改变T细胞代谢模式,从而促进CD8^(+)T细胞向Tcm细胞分化,有效抑制结肠癌移植瘤的生长。 展开更多

关键词 分化抑制因子2 中央记忆性t细胞 t细胞分化 PI3K/AKt信号通路 代谢重编程

在线阅读 下载PDF 职称材料

IGF-1介导MAPKs通路在C3H10T1/2细胞成骨分化中的作用 被引量：3

2

作者 李冬 董晓俊 徐成栋 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期668-672,共5页

目的探究胰岛素样生长因子1(IGF-1)介导丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路在C3H10T1/2细胞成骨分化中的调控作用及机制。方法不同浓度IGF-1(0、5、10、20 ng/mL)培养C3H10T1/2细胞,碱性磷酸酶(ALP)与茜素红(ARS)染色检测ALP活性、钙盐... 目的探究胰岛素样生长因子1(IGF-1)介导丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路在C3H10T1/2细胞成骨分化中的调控作用及机制。方法不同浓度IGF-1(0、5、10、20 ng/mL)培养C3H10T1/2细胞,碱性磷酸酶(ALP)与茜素红(ARS)染色检测ALP活性、钙盐沉积情况,qRT-PCR法检测成骨特性因子核心结合因子α-1(RUNX2)、成骨分化特异性因子骨桥蛋白(OPN)、骨钙蛋白(OCN)mRNA表达水平,Western Blot法检测MAPK通路蛋白磷酸化表达水平。对数期细胞分为空白组、IGF-1组、ERK通路抑制剂(PD98059)组、PD+IGF-1组、p38通路抑制剂(SB202192)组、SB+IGF-1组,qRT-PCR法检测成骨特性因子RUNX2、成骨分化特异性因子骨桥蛋白(OPN)、骨钙蛋白(OCN)mRNA表达水平。结果不同浓度IGF-1组ALP显色加深,ALP活性升高,钙盐结节形成增多,RUNX2、OPN、OCN mRNA表达水平升高,磷酸化ERK、p38、JNK蛋白表达增加,具有剂量效应(P<0.05)。与空白组比较,PD组、SB组C3H10T1/2细胞RUNX2、OPN、OCN mRNA表达水平明显降低(P<0.05),PD+IGF-1组、SB+IGF-1组C3H10T1/2细胞RUNX2、OPN、OCN mRNA表达水平明显升高(P<0.05);但与IGF-1组比较,PD+IGF-1组、SB+IGF-1组C3H10T1/2细胞RUNX2、OPN、OCN mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。结论IGF-1促进C3H10T1/2细胞成骨分化,其作用机制可能与激活ERK信号通路和p38 MAPK信号通路有关。 展开更多

关键词 胰岛素样生长因子1 丝裂原活化蛋白激酶信号通路 C3H10t1/2细胞 成骨分化

在线阅读 下载PDF 职称材料

E盒结合锌指蛋白2对AsPC-1细胞增殖和EMT的影响

3

作者 王璐瑶 周静 +5 位作者 张荣花 于笑涵 熊亚南 王梅梅 章广玲 刘志勇 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第8期798-805,共8页

目的探讨E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)对AsPC-1胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间充质转化(EMT)的影响。方法按照胰腺癌细胞中转染物不同,将细胞分为4组,分别是si-NC、si-ZEB2、pcDNA3.1、pcDNA3.1-ZEB2。TCGA数据库分析ZEB2在胰腺癌组织... 目的探讨E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)对AsPC-1胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间充质转化(EMT)的影响。方法按照胰腺癌细胞中转染物不同,将细胞分为4组,分别是si-NC、si-ZEB2、pcDNA3.1、pcDNA3.1-ZEB2。TCGA数据库分析ZEB2在胰腺癌组织与癌旁胰腺组织中的表达差异及其与胰腺癌患者预后的关系,并利用Westernblot检测ZEB2在AsPC-1胰腺癌细胞和正常胰腺上皮细胞HPNE中的表达差异。采用qRT-PCR、Westernblot检测ZEB2小干扰RNA(si-ZEB2)及过表达质粒(pcDNA3.1-ZEB2)的转染效率。CCK-8、克隆形成、划痕和Transwell实验检测ZEB2对AsPC-1细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭的影响。qRT-PCR和免疫荧光实验检测ZEB2对AsPC-1细胞中EMT标志物表达的影响。利用生物信息学网站预测与ZEB2有靶定作用的miRNAs并构建ZEB2的蛋白-蛋白互作网络(PPI)。结果ZEB2在胰腺癌组织和AsPC-1胰腺癌细胞中高表达(P<0.05),且其高表达与胰腺癌患者的较差预后相关。qRT-PCR、Westernblot结果表明si-ZEB2和pcDNA3.1-ZEB2能够有效的转染到AsPC-1胰腺癌细胞中(P<0.05)。与si-NC组相比,si-ZEB2组中AsPC-1细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力受到抑制,EMT上皮标志物E-cadherin表达增加、间质标志物Vimentin表达减少(P<0.05)。pcDNA3.1-ZEB2组中AsPC-1细胞的增殖、克隆形成、迁移、侵袭和EMT标志物得到了与上述相反的结果(P<0.05)。共预测到与ZEB2有靶定作用的miRNAs 77个,与ZEB2作用密切的蛋白有10个。结论ZEB2在胰腺癌组织和细胞中高表达且其高表达与胰腺癌患者的较差预后相关,ZEB2作为一种促癌因子,能够促进AsPC-1胰腺癌细胞的增殖、克隆形成、迁移、侵袭和EMT进程。 展开更多

关键词 E盒结合锌指蛋白2 胰腺癌 AsPC-1细胞 增殖 上皮间充质转化

在线阅读 下载PDF 职称材料

维生素D_(3)对实验性自身免疫性甲状腺炎Th1/Th2细胞平衡和MCP-1/CCR2信号的影响 被引量：15

4

作者 侯丽萍 耿建林 +1 位作者 谷巍 刘晴晴 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期921-926,共6页

目的:探讨维生素D_(3)对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠炎症、辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(helper T cell 1/helper T cell 2,Th1/Th2)及单核细胞趋化蛋白1/细胞表面趋化因子受体2(monocyte chemoattractant protein-1/cell surface chemo... 目的:探讨维生素D_(3)对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠炎症、辅助性T细胞1/辅助性T细胞2(helper T cell 1/helper T cell 2,Th1/Th2)及单核细胞趋化蛋白1/细胞表面趋化因子受体2(monocyte chemoattractant protein-1/cell surface chemokine receptor 2,MCP-1/CCR2)信号的影响。方法:将Lewis大鼠按随机数字表法分为对照组(n=10)、模型组(n=15)和治疗组(n=15),采用免疫猪甲状腺球蛋白(porcine thyroglobulin,pTG)诱导建立实验性自身免疫性甲状腺炎(experimental autoimmune thyroiditis,EAT)大鼠模型,治疗组按照每只5 mg/kg的剂量腹腔注射1,25-二羟维生素D_(3)[1,25-(OH)2D_(3)],隔天1次,共用4周,其余2组均给予等体积生理盐水。采用苏木素-伊红(hematoxylin-eosin stain,HE)染色观察大鼠甲状腺组织形态学变化;酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)检测血清中促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)、自身抗体抗甲状腺球蛋白抗体(anti-thyroglobulin antibody,TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(anti-thyroid peroxidase antibody,TPOAb)及细胞因子干扰素-γ(interferon,IFN-γ)、白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10),逐步线性回归分析TSH与自身抗体、细胞因子的关系;免疫组织化学检测甲状腺组织中的NF-κB p65;Western blot检测甲状腺组织中MCP-1/CCR2信号轴。结果:模型组甲状腺滤泡结构破坏、炎性细胞浸润,治疗组甲状腺病理变化明显改善并趋向于对照组。治疗组TSH、TGAb、TPOAb水平与模型组相比均明显降低(t=4.000、2.603、5.279,P=0.000、0.015、0.000),但仍明显高于对照组(t=2.400、2.216、7.392,P=0.025、0.037、0.000)。与模型组相比,治疗组IL-4、IL-10水平明显升高(t=3.522、2.432,P=0.001、0.022),IFN-γ、IL-12水平及IFN-γ/IL-4、IL-12/IL-10比值明显降低(t=2.940、4.700、5.416、8.178,P=0.007、0.000、0.000、0.000),均趋向于对照组水平。逐步回归分析结果显示,TSH与TGAb、TPOAb、IFN-γ、IL-12均呈正相关,与IL-4和IL-10呈负相关(r=0.872、0.868、0.731、0.706、-0.557、-0.236,均P<0.001),其中TGAb、TPOAb和IL-12对TSH的影响最明显。与模型组比较,治疗组大鼠甲状腺组织中的NF-κB p65、MCP-1及CCR2水平均下降,差异具有统计学意义(t=2.432、2.267、5.143,P=0.000、0.031、0.000)。结论:维生素D_(3)可能是通过抑制NF-κB通路以下调Th1型细胞因子、上调Th2型细胞因子进而降低Th1/Th2比值,还可能是通过抑制MCP-1/CCR2信号轴,最终减轻EAT大鼠甲状腺炎,改善甲状腺功能,抑制甲状腺抗体生成,保护甲状腺。 展开更多

关键词 维生素D_(3) 实验性自身免疫性甲状腺炎 辅助性t细胞1/辅助性t细胞2 单核细胞趋化蛋白1/细胞表面趋化因子受体2

在线阅读 下载PDF 职称材料

T-2毒素对小鼠胚胎干细胞线粒体功能的抑制作用 被引量：6

5

作者 方海琴 李利忠 +5 位作者 赵增明 何俊 赵君 杨嵘 耿雪 彭双清 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期415-420,共6页

目的观察T-2毒素对小鼠胚胎干细胞(mESC)线粒体功能的毒性作用,探讨其胚胎毒性的可能作用靶点与作用机制。方法处于分化过程中的mESC加入T-2 0.5μg·L-1分别作用24,72及120 h,同时设Trolox 200μmol·L-1预处理后30 min再加入... 目的观察T-2毒素对小鼠胚胎干细胞(mESC)线粒体功能的毒性作用,探讨其胚胎毒性的可能作用靶点与作用机制。方法处于分化过程中的mESC加入T-2 0.5μg·L-1分别作用24,72及120 h,同时设Trolox 200μmol·L-1预处理后30 min再加入T-2毒素0.5μg·L-1染毒72 h组。透射电子显微镜观察线粒体内结构;罗丹明123荧光探针法流式细胞术检测mESC内线粒体膜电位,氧电极法检测线粒体呼吸速率,计算呼吸控制比,荧光素-荧光素酶发光法测定ATP合成酶活性。结果透射电镜观察可见,T-20.5μg·L-1作用72与120 h组mESC内线粒体数量明显减少,结构变形,线粒体中少见或缺少完整的嵴,与正常对照组相比,mESC内线粒体呼吸控制比分别下降49.5%和55.1%(P<0.05),ATP合成酶活性分别下降84.9%和89.3%(P<0.05),mESC线粒体膜电位下降23.2%和35.2%(P<0.05)。Trolox预处理可以改善T-2毒素对上述线粒体功能指标的抑制作用。结论 T-2毒素可降低mESC的线粒体功能,进而抑制mESC的分化能力,可能是其胚胎发育毒性的作用机制之一。 展开更多

关键词 t-2毒素 毒性作用 胚胎干细胞 线粒体 细胞分化

在线阅读 下载PDF 职称材料

骨形态蛋白9诱导干细胞骨向分化与环氧酶-2及PI3K/Akt的关系研究 被引量：11

6

作者 李洋 陈前昭 +4 位作者 邵英 曾于桦 任文艳 刘荣兴 何百成 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期908-915,共8页

目的研究骨形态蛋白9(BMP9)诱导干细胞成骨分化过程中对PI3K/Akt信号的激活与环氧酶-2(COX-2)的关系。方法利用组织化学染色法、化学发光法或定量PCR检测碱性磷酸酶(ALP)的水平,Western blot检测骨桥素(OPN)、骨钙素(OCN)、COX-2、Akt1/... 目的研究骨形态蛋白9(BMP9)诱导干细胞成骨分化过程中对PI3K/Akt信号的激活与环氧酶-2(COX-2)的关系。方法利用组织化学染色法、化学发光法或定量PCR检测碱性磷酸酶(ALP)的水平,Western blot检测骨桥素(OPN)、骨钙素(OCN)、COX-2、Akt1/2和磷酸化Akt1/2(pAkt1/2)水平,RT-PCR检测COX-2的表达,用免疫组化或免疫荧光分别检测COX-2的表达水平以及Akt1/2的磷酸化水平,用茜素红染色检测钙盐沉积。结果 BMP9在C2C12细胞中明显增加ALP活性,促进OPN和OCN表达以及钙盐沉积;BMP9对Akt1/2总蛋白无明显影响,能明显增加Akt1/2磷酸化水平,PI3K抑制剂呈浓度依赖性减弱BMP9诱导ALP活性增加。BMP9在C2C12细胞中促进COX-2表达,抑制COX-2明显减弱BMP9在C2C12细胞中诱导ALP活性增加和钙盐沉积的作用。外源性过表达COX-2促进BMP9诱导p-Akt1/2水平增加,而抑制COX-2则明显减弱BMP9诱导Akt1/2磷酸化水平增加。结论 BMP9在诱导干细胞成骨化过程中对PI3K/Akt信号的激活可能与其促进COX-2表达有关。 展开更多

关键词 骨形态蛋白9 干细胞 成骨分化 成骨标志物 PI3K/AKt 环氧酶-2

在线阅读 下载PDF 职称材料

白细胞介素-12抗NK/T细胞淋巴瘤的活性及其机制研究 被引量：6

7

作者 王媛 惠双 +3 位作者 张成辉 郭宏强 李敏 郑芝欣 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期365-371,共7页

目的研究白细胞介素-12(IL-12)的抗NK/T细胞淋巴瘤活性及机制。方法培养NK/T细胞淋巴瘤的YTS细胞株并分为对照组、IL-12组、NC siRNA组、JAK2 siRNA组、空白质粒组、JAK2表达质粒组,用含有0.625、1.25、2.5、5.0、10.0、20.0 ng·mL... 目的研究白细胞介素-12(IL-12)的抗NK/T细胞淋巴瘤活性及机制。方法培养NK/T细胞淋巴瘤的YTS细胞株并分为对照组、IL-12组、NC siRNA组、JAK2 siRNA组、空白质粒组、JAK2表达质粒组,用含有0.625、1.25、2.5、5.0、10.0、20.0 ng·mL^-1 IL-12的培养基处理或转染NC siRNA、JAK2 siRNA、空白质粒、JAK2表达质粒,检测细胞活力、细胞凋亡、细胞周期及细胞中JAK2及STAT3的表达;选择C57小鼠并建立移植瘤模型,随机分为对照组及IL-12组后,测定移植瘤质量及JAK2、STAT3的表达。结果在YTS细胞中,IL-12以及JAK2 siRNA能够抑制细胞活力、细胞周期及细胞中p-JAK2、p-STAT3的表达,诱导细胞凋亡(P<0.05);转染JAK2的表达质粒能够使20.0 ng·mL^-1的IL-12抑制细胞活力、细胞周期、细胞中p-JAK2、p-STAT3表达及诱导细胞凋亡的作用减弱;在移植瘤小鼠中,IL-12干预后,移植瘤质量及移植瘤中p-JAK2、p-STAT3的表达均明显下降(P<0.05)。结论IL-12具有抗NK/T细胞淋巴瘤的活性且其机制与抑制JAK2/STAT3信号通路的激活有关。 展开更多

关键词 NK/t细胞淋巴瘤 白细胞介素-12 Janus蛋白质酪氨酸激酶2 信号转导和转录活化蛋白3 凋亡 细胞周期

在线阅读 下载PDF 职称材料

ERK1/2-Runx2信号通路在TNF-α对牙周膜干细胞成骨分化影响中的作用 被引量：11

8

作者 韩耀伦 王璐 马欣 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第21期2587-2592,共6页

目的:探讨ERK1/2-Runx2信号通路在TNF-α对牙周膜干细胞成骨分化影响中的作用。方法:分离和培养牙周膜干细胞,将其分为对照组(成骨诱导液培养)、TNF-α组(成骨诱导液培养+TNF-α培养)和激动剂组(成骨诱导液培养+TNF-α+ERK培养)。ALP和... 目的:探讨ERK1/2-Runx2信号通路在TNF-α对牙周膜干细胞成骨分化影响中的作用。方法:分离和培养牙周膜干细胞,将其分为对照组(成骨诱导液培养)、TNF-α组(成骨诱导液培养+TNF-α培养)和激动剂组(成骨诱导液培养+TNF-α+ERK培养)。ALP和茜素红染色测定成骨分化功能,采用Western blot测定牙周膜干细胞Osterix、OPN、ERK1/2、p-ERK1/2、Runx2蛋白水平。结果:与对照组比较,TNF-α组ALP染色和茜素红染色程度低,ALP活性和矿化结节降低(P<0.05),Osterix和OPN蛋白水平降低(P<0.05),p-ERK1/2、Runx2蛋白水平降低(P<0.05);与TNF-α组比较,激动剂组ALP染色和茜素红染色程度介于对照组和TNF-α组之间,ALP活性和矿化结节升高(P<0.05),Osterix和OPN蛋白水平升高(P<0.05),p-ERK1/2、Runx2蛋白水平升高(P<0.05)。三组牙周膜干细胞ERK1/2蛋白水平比较无明显差异(P>0.05)。结论:TNF-α可能通过影响ERK1/2-Runx2信号通路从而抑制牙周膜干细胞的成骨分化。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子-α 细胞外调节蛋白激酶1/2 Runt相关转录因子2 牙周膜干细胞 成骨分化

在线阅读 下载PDF 职称材料

LASP1下调和ferritin上调在rhBMP-2诱导的比格犬BMSCs成骨分化中起重要作用 被引量：4

9

作者 胡稷杰 刘亚伟 +2 位作者 何敏毅 余斌 王钢 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1207-1212,共6页

目的建立稳定的比格犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)诱导成骨分化模型;鉴定参与比格犬BMSCs细胞成骨分化过调控的蛋白质,探讨其可能的调控机制。方法分离培养比格犬BMSCs细胞,rhBMP-2诱导细胞成骨分化7 d,基于蛋白质双向凝胶电泳的蛋白质组... 目的建立稳定的比格犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)诱导成骨分化模型;鉴定参与比格犬BMSCs细胞成骨分化过调控的蛋白质,探讨其可能的调控机制。方法分离培养比格犬BMSCs细胞,rhBMP-2诱导细胞成骨分化7 d,基于蛋白质双向凝胶电泳的蛋白质组学分析成骨分化组与对照组差异表达的蛋白质,对感兴趣的蛋白质LASP1、ferritin轻链和重链表达情况用Q-PCR、Western blot进行验证。结果成功诱导比格犬BMSCs成骨分化;蛋白质组学分析获得rhBMP-2诱导上调的蛋白质9个,下调的蛋白质11个。荧光定量PCR技术和Western blot对LASP1和ferritin表达情况进行了验证,发现rhBMP-2诱导7 d后,LASP1显著下调而ferritin显著上调,与蛋白质组学结果一致。结论 LASP1在调节细胞骨架活性方面发挥重要功能,而ferritin是细胞铁离子稳态维持的重要分子,提示这两种蛋白质在rhBMP-2诱导的比格犬BMSCs成骨分化过程中发挥重要作用。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 成骨分化 重组人骨形态发生蛋白-2 LASP1 FERRItIN

在线阅读 下载PDF 职称材料

TLR4及MD2反义基因对内毒素诱导的肺泡Ⅱ型细胞活化的影响 被引量：3

10

作者 李永旺 麻莉 +1 位作者 张德明 钱桂生 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1271-1274,共4页

目的观察Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)及myeloid differentiation protein2(MD2)反义基因对内毒素(lipopolysaccharide,LPS)诱导的肺泡Ⅱ型细胞NF-κB活化的影响。方法培养的肺泡Ⅱ型细胞分为:正常细胞(对照)组、LPS组、LPS+... 目的观察Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)及myeloid differentiation protein2(MD2)反义基因对内毒素(lipopolysaccharide,LPS)诱导的肺泡Ⅱ型细胞NF-κB活化的影响。方法培养的肺泡Ⅱ型细胞分为:正常细胞(对照)组、LPS组、LPS+转染空载体组、LPS+转染TLR4反义基因组、LPS+转染MD2反义基因组、LPS+转染TLR4-MD2反义基因组(n=8)。Northern blot检测转染细胞的TLR4及MD2 mRNA表达,Western blot检测转染细胞TLR4及MD2蛋白表达,电泳迁移率改变法检测NF-κΒ的活性,ELISA测定细胞培养上清中TNF-α和IL-6含量。结果与对照组比较,LPS刺激后的细胞TLR4及MD2mRNA和蛋白表达、NF-κB活性、TNF-α和IL-6的生成均显著增加(P<0.01);而转染反义基因组细胞与其他LPS刺激组比较,TLR4及MD2mRNA和蛋白的表达、NF-κB活性及TNF-α和IL-6的含量均明显降低(P<0.01)。结论 TLR4及MD2反义基因能有效抑制LPS诱导的肺泡Ⅱ型细胞的活化。 展开更多

关键词 内毒素类 肺泡 上皮细胞 细胞 培养的 受体 细胞表面 信号转导 tOLL样受体4 MD2

在线阅读 下载PDF 职称材料

p38 MAPK对冲击波促进T淋巴细胞增殖和分泌IL-2的作用 被引量：2

11

作者 赵毅 于铁成 +3 位作者 金安 刘建国 郑学清 徐莘香 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期815-819,共5页

目的：研究有丝分裂原激活蛋白激酶p38（p38MAPK）对冲击波促进激活的T淋巴细胞增殖及分泌IL-2的作用。方法：预先用p38MAPK抑制剂（SB203580,20μmol·L^-1）分别与人外周血单个核细胞（PBMC）和Jurkat T细胞共同培养,同时设立不含... 目的：研究有丝分裂原激活蛋白激酶p38（p38MAPK）对冲击波促进激活的T淋巴细胞增殖及分泌IL-2的作用。方法：预先用p38MAPK抑制剂（SB203580,20μmol·L^-1）分别与人外周血单个核细胞（PBMC）和Jurkat T细胞共同培养,同时设立不含SB203580的阴性对照组,再用冲击波和PHA或抗-CD3/抗-CD28抗体的亚刺激量作用,检测T淋巴细胞增殖和分泌IL-2的变化。采用免疫印迹法,用抗-p38MAPK抗体及抗-磷酸化的p38MAPK（Thr180/Tyr182）抗体,测定冲击波作用后Jurkat T细胞上的p38MAPK的表达及磷酸化。结果：与未用冲击波作用组比较,被PHA激活的PBMC细胞,在能量密度为（0.180±0.015）mJ·mm^-2的冲击波作用100、150、200、250、300、330和360次时,细胞对3H-TdR掺入量明显增高（P〈0.01）。加入SB203580的PHA激活的PBMC细胞,在上述同样强度的冲击波作用时,细胞对3H-TdR掺入量低于没有加入SB203580对照组（P〈0.01）。与未受冲击波作用组比较,被CD3和CD28激活的Jurkat T细胞,在上述同样强度的冲击波作用时,细胞上清液中的IL-2活性明显增高（P〈0.01）。加入SB203580的CD3和CD28激活的Jurkat T细胞,在该强度的冲击波作用时,细胞上清液中的IL-2水平低于比未加入SB203580的对照组（P〈0.01）。50-250次的（0.180±0.015）mJ·mm^2的低能冲击波可使Jurkat T细胞的p38MAPK磷酸化,p38MAPK的磷酸化程度随着冲击波作用次数的增加而增加。结论：SB203580可抑制低能冲击波对激活的T淋巴细胞的增殖及分泌IL-2作用;低能冲击波通过激活T淋巴细胞内的p38MAPK,促进激活的T淋巴细胞增殖及分泌IL-2。 展开更多

关键词 t淋巴细胞 有丝分裂原激活蛋白激酶p38 冲击波

在线阅读 下载PDF 职称材料

BMP-2和TGFβ_(1)对培养兔关节软骨细胞代谢的影响 被引量：5

12

作者 杨物鹏 许建中 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第12期1139-1141,共3页

目的　探讨骨形态发生蛋白 2 (BMP 2 )和转化生长因子 β1(TGFβ1)对体外培养兔关节软骨细胞代谢的影响 ,从而了解其在关节软骨损伤修复中的作用。方法　利用荧光光度计 ,72 1 型分光光度计 ,35S Na2 SO4 同位素掺入法等测定兔原代及... 目的　探讨骨形态发生蛋白 2 (BMP 2 )和转化生长因子 β1(TGFβ1)对体外培养兔关节软骨细胞代谢的影响 ,从而了解其在关节软骨损伤修复中的作用。方法　利用荧光光度计 ,72 1 型分光光度计 ,35S Na2 SO4 同位素掺入法等测定兔原代及反分化关节软骨细胞羟脯氨酸和蛋白多糖 (PG )的变化。结果　BMP 2既能促进反分化关节软骨细胞DNA合成又能增加原代、反分化关节软骨细胞羟脯氨酸的含量和35S Na2 SO4 掺入 ,而TGFβ1显著增加原代软骨细胞羟脯氨酸的合成和35S Na2 SO4 掺入。结论　TGFβ1不能阻止关节软骨细胞反分化 ,而BMP 2能促进软骨细胞的增殖和维持其表型 。 展开更多

关键词 骨形态发生蛋白2 细胞分化 细胞反分化 同位素掺入 转化生长因子β_(1)

在线阅读 下载PDF 职称材料

骨形态发生蛋白2信号对肿瘤组织中调节性T细胞分化和浸润的作用 被引量：2

13

作者 黄菲 王海 +1 位作者 陈尧清 吴贵 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期897-904,共8页

目的明确骨形态发生蛋白2(BMP2)信号是否通过增强髓样抑制性细胞(MDSC)分泌转化生长因子β(TGF-β)诱导肿瘤组织调节性T淋巴细胞(Treg)的分化和浸润。方法通过实时荧光定量PCR检测BMP2信号诱导MDSC的TGF-βmRNA表达水平,应用酶联免疫吸... 目的明确骨形态发生蛋白2(BMP2)信号是否通过增强髓样抑制性细胞(MDSC)分泌转化生长因子β(TGF-β)诱导肿瘤组织调节性T淋巴细胞(Treg)的分化和浸润。方法通过实时荧光定量PCR检测BMP2信号诱导MDSC的TGF-βmRNA表达水平,应用酶联免疫吸附实验检测BMP2信号诱导MDSC分泌的TGF-β蛋白水平。应用流式细胞术检测BMP2信号诱导MDSC分泌的TGF-β对Treg分化的影响。将人源重组骨形态发生蛋白2(rhBMP2)材料埋植于荷瘤小鼠体内以检测生物体内BMP2通过诱导MDSC分泌TGF-β对Treg细胞活化的作用,应用酶联免疫吸附实验检测外周血和肿瘤组织中的TGF-β蛋白水平,应用免疫荧光检测Treg细胞在肿瘤组织中的浸润情况。结果BMP2在体外可以促进MDSC TGF-βmRNA和蛋白水平表达升高,BMP2信号诱导MDSC分泌的TGF-β可于体外诱导Treg细胞分化。rhBMP2的局部埋植可以促进小鼠外周血和肿瘤组织TGF-β蛋白水平的升高,且可促进Treg细胞浸润肿瘤组织。结论BMP2信号通过促进MDSC分泌TGF-β诱导Treg的分化,并诱导肿瘤组织Treg细胞的浸润。 展开更多

关键词 骨形态发生蛋白2 髓样抑制性细胞 调节性t淋巴细胞 肿瘤

在线阅读 下载PDF 职称材料

TLSF_(JM)对活化T细胞内IP3、Ca^(2+)水平和Fos蛋白表达的调节作用 被引量：2

14

作者 夏海滨 金伯泉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第4期199-201,共3页

本文应用ABC组化染色、Fura-2/AM标记细胞Ca^(2+)测定法以及阴离子交换树指层析柱分离磷酸肌醇等技术,研究了TLSF_(JM)对活化T细胞内IP3、Ca^(2+)水平以及Fos蛋白表达的调节作用。结果表明,TLSF_(JM)明显抑制PHA活化的PBMC Fos蛋白表达... 本文应用ABC组化染色、Fura-2/AM标记细胞Ca^(2+)测定法以及阴离子交换树指层析柱分离磷酸肌醇等技术,研究了TLSF_(JM)对活化T细胞内IP3、Ca^(2+)水平以及Fos蛋白表达的调节作用。结果表明,TLSF_(JM)明显抑制PHA活化的PBMC Fos蛋白表达,并对T细胞内IP3、Ca^(2+)水平也有很强的抑制作用。 展开更多

关键词 抑制因子 t细胞 三磷酸肌醇 钙离子

在线阅读 下载PDF 职称材料

LncRNA MALAT1通过miR-34c/SATB2轴对脂肪间充质干细胞成骨分化的促进作用 被引量：3

15

作者 郭玮玮 秦悦 +1 位作者 杨海波 米占虎 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期963-971,I0002,I0003,共11页

目的:探讨长非编码RNA肺癌转移相关转录本1(LncRNA MALAT1)通过微小RNA(miR)-34c/特异AT序列结合蛋白2(SATB2)轴对脂肪来源的间充质干细胞(ADSCs)成骨分化的影响,并阐明其作用机制。方法:人ADSCs转染Lenti-NC、Lenti-MALAT1、sh-NC、sh-... 目的:探讨长非编码RNA肺癌转移相关转录本1(LncRNA MALAT1)通过微小RNA(miR)-34c/特异AT序列结合蛋白2(SATB2)轴对脂肪来源的间充质干细胞(ADSCs)成骨分化的影响,并阐明其作用机制。方法:人ADSCs转染Lenti-NC、Lenti-MALAT1、sh-NC、sh-MALAT1、miR-NC和miR-34c,RT-PCR法检测ADSCs中LncRNA MALAT1、miR-34c和SATB2 mRNA表达水平;miRcode和TargetScan 7.1网站预测并通过荧光素酶报告基因实验验证miR-34c与LncRNA MALAT1、miR-34c与SATB2之间的靶向结合作用;Western blotting法检测ADSCs中成骨标志物Runt相关转录因子2(Runx2)、骨桥蛋白(OPN)和骨钙蛋白(OCN)表达水平;碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红S(ARS)染色检测ADSCs中ALP和ARS水平及钙盐沉积。结果:与第0天比较,ADSCs成骨诱导第3、7、14和21天后,细胞中LncRNA MALAT1、SATB2、Runx2、OPN和OCN蛋白表达水平明显升高(P<0.05),miR-34c表达水平明显降低(P<0.05)。与Lenti-NC组和sh-NC组比较,Lenti-MALAT1组ADSCs中LncRNA MALAT1表达水平,Runx2、OPN和OCN蛋白表达水平,ALP和ARS水平明显升高(P<0.01),sh-MALAT1组上述指标明显降低(P<0.01)。与miR-NC+Lenti-NC组比较,miR-34c+Lenti-NC组ADSCs中Runx2、OPN和OCN蛋白表达水平明显降低(P<0.01),ALP和ARS水平明显降低(P<0.01),miR-34c+Lenti-MALAT1组ADSCs中上述各项指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。与Lenti-NC+miR-NC组比较,Lenti-SATB2+miR-NC组ADSCs中Runx2、OPN和OCN蛋白表达水平及ALP和ARS水平明显升高(P<0.01),Lenti-SATB2+miR-34c组上述各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LncRNA MALAT1通过miRNA-34c/SATB2轴促进ADSCs的成骨分化。 展开更多

关键词 长链非编码RNA 肺癌转移相关转录本1 脂肪间充质干细胞 成骨分化 微小RNA-34c 特异At序列结合蛋白2

在线阅读 下载PDF 职称材料

体液免疫中IL-2/IL-2R整合CD4+T细胞信号形成Tfh 被引量：4

16

作者 张林 吉尚戎 《兰州大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期228-236,共9页

总结了参与Th细胞各种亚型分化的主要信号途径,并对IL-2/IL-2R信号影响Th亚型分化的分子机制进行了深入探讨.IL-2/IL-2R信号可能作为一种调节分子可以整合CD4+T细胞在免疫应答中的多种信号,从而将T细胞打造成一种更为成熟的形式,然后迁... 总结了参与Th细胞各种亚型分化的主要信号途径,并对IL-2/IL-2R信号影响Th亚型分化的分子机制进行了深入探讨.IL-2/IL-2R信号可能作为一种调节分子可以整合CD4+T细胞在免疫应答中的多种信号,从而将T细胞打造成一种更为成熟的形式,然后迁移至B淋巴滤泡和生发中心处辅助B细胞产生抗体和形成记忆B细胞.据此,推测这种成熟形式的Th就是Tfh,并提出了Tfh细胞产生及功能发挥的新模型,以正确认识Tfh在体液免疫中的关键作用. 展开更多

关键词 IL-2/IL-2R信号 tH细胞分化 滤泡辅助性t细胞 体液免疫

在线阅读 下载PDF 职称材料

重组优势T、B细胞表位的猪圆环病毒2型Cap蛋白的原核表达及免疫原性研究 被引量：1

17

作者 聂恺阳 吴云燕 +3 位作者 易琳 吴祖雄 陈金顶 赵明秋 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期945-950,共6页

为探究猪圆环病毒2型(PCV2)优势T、B细胞表位对Cap蛋白免疫原性的影响,本研究将前期研究筛选到的PCV2 Rep和Cap蛋白中的T、B细胞表位,分别构建pET-rB-Cap、pET-rT-Cap和pET-rT-B-Cap重组质粒,并转化到大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达后,... 为探究猪圆环病毒2型(PCV2)优势T、B细胞表位对Cap蛋白免疫原性的影响,本研究将前期研究筛选到的PCV2 Rep和Cap蛋白中的T、B细胞表位,分别构建pET-rB-Cap、pET-rT-Cap和pET-rT-B-Cap重组质粒,并转化到大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导表达后,采用SDS-PAGE和western blot检测3种重组蛋白:rB-Cap、rT-Cap和rT-B-Cap。结果显示,上述3种重组蛋白均高效表达且具有良好的反应原性。将70只4周龄~6周龄的BALB/c雌鼠随机分为7组,分别免疫不同的重组蛋白或者全病毒灭活疫苗,并对其产生的免疫原性进行检测。结果显示,各实验组小鼠的血清抗体水平均显著高于PBS组(p<0.01),其中rT-B-Cap组小鼠抗体水平显著高于PCV2全病毒灭活疫苗组和rCap组(p<0.01)。综上所述,PCV2 Cap蛋白同时串联T、B优势抗原表位时的免疫原性显著提高。本研究为PCV2多表位疫苗及基于Cap蛋白的亚单位疫苗的研究提供了新的途径。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型 CAP蛋白 t细胞表位 B细胞表位 免疫原性

在线阅读 下载PDF 职称材料

2型糖尿病对小鼠下颌骨骨再生及辅助性T细胞17、调节性T细胞相关因子表达的影响 被引量：2

18

作者 王亚楠 吴旋 +4 位作者 贾婷婷 冯瑶 刘世岳 徐欣 张东姣 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期642-650,共9页

目的观察2型糖尿病对小鼠下颌骨骨再生以及辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)相关因子表达的影响。方法将36只6周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常对照(NC)组和2型糖尿病(T2DM)组,小鼠下颌骨缺损建模当天(0 d)和术后7、14、28 d检... 目的观察2型糖尿病对小鼠下颌骨骨再生以及辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)相关因子表达的影响。方法将36只6周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常对照(NC)组和2型糖尿病(T2DM)组,小鼠下颌骨缺损建模当天(0 d)和术后7、14、28 d检测空腹血糖。于两组小鼠下颌骨缺损建模后7、14、28 d,通过苏木素-伊红(HE)染色观察下颌骨缺损愈合情况,通过免疫组织化学染色的方法观察下颌骨缺损内碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2(RUNX2)、叉头框蛋白P3(Foxp3)、维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)和蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型2(PTPN2)的表达情况。结果HE染色结果显示:T2DM组小鼠的下颌骨缺损范围内新生骨的数量明显少于NC组。免疫组织化学染色结果显示:成骨相关蛋白ALP和RUNX2的表达在T2DM组的骨缺损内明显降低;另外,2型糖尿病小鼠下颌骨缺损范围内的RORγt阳性细胞数量增加,Foxp3阳性细胞数量减少,PTPN2的表达明显降低。结论2型糖尿病可以显著地抑制小鼠下颌骨骨再生过程,PTPN2的下降以及Treg-Th17向偏移可能为其潜在的分子机制。 展开更多

关键词 2型糖尿病 骨再生 辅助性t细胞17 调节性t细胞 蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型2

在线阅读 下载PDF 职称材料

类风湿性关节炎患者关节滑液CD4^(+)T细胞分化抑制因子2(Id2)表达升高 被引量：2

19

作者 孙浩洋 高键 +4 位作者 张佩艳 王雁 畅洋 缪金林 朱平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期333-337,共5页

目的检测类风湿性关节炎(RA)患者外周血及关节滑液CD4^(+)T细胞亚群的比例及其分化抑制因子2(Id2)的表达,探讨Id2对CD4^(+)T细胞亚群比例的影响。方法收集RA患者51例(含滑液18例)和健康对照者31例,采用流式细胞术测定RA患者外周血、关... 目的检测类风湿性关节炎(RA)患者外周血及关节滑液CD4^(+)T细胞亚群的比例及其分化抑制因子2(Id2)的表达,探讨Id2对CD4^(+)T细胞亚群比例的影响。方法收集RA患者51例(含滑液18例)和健康对照者31例,采用流式细胞术测定RA患者外周血、关节滑液和健康对照者外周血中CD4^(+)T细胞、1型辅助T(Th1)细胞和Th17细胞的比例及其核内Id2的表达水平。结果与健康对照组相比,RA患者外周血中CD4^(+)T细胞、Th1细胞及Th17细胞比例及Id2表达水平无明显变化,滑液CD4^(+)T细胞、Th1细胞比例及CD4^(+)T细胞Id2表达水平明显增加,也高于RA患者外周血。CD4^(+)T细胞Id2表达率与血沉(ESR)、C反应蛋白(CRP)及28关节疾病活动度评分(DAS28)无明显相关性,但与γ干扰素(IFN-γ)表达呈正相关。结论RA患者关节滑液中CD4^(+)T细胞富集,其Id2表达促进Th1细胞分化。 展开更多

关键词 类风湿性关节炎(RA) 分化抑制因子2(Id2) CD4^(+)t细胞 滑液(SF)

在线阅读 下载PDF 职称材料

MAL2在乳腺癌中的差异表达及预后分析 被引量：1

20

作者 何东宁 周浩东 +3 位作者 刘畅 谭琦 谷泽慧 王亚帝 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期128-137,共10页

目的:通过数据挖掘分析T细胞分化蛋白2(MAL2)在乳腺癌(BC)中的表达及意义.方法:通过Oncomine、基因表达谱交互分析(GEPIA)及人类蛋白质表达图谱(HPA)数据库分析MAL2在正常乳腺组织和BC组织中的表达情况;应用GEPIA分析MAL2表达与BC预后... 目的:通过数据挖掘分析T细胞分化蛋白2(MAL2)在乳腺癌(BC)中的表达及意义.方法:通过Oncomine、基因表达谱交互分析(GEPIA)及人类蛋白质表达图谱(HPA)数据库分析MAL2在正常乳腺组织和BC组织中的表达情况;应用GEPIA分析MAL2表达与BC预后的相关性;应用STRING分析MAL2表达与上下游蛋白的相互作用.结果:MAL2在BC组织中的表达显著高于正常乳腺组织(P<0.05).在三阴性乳腺癌(TNBC)中,基底样1型的MAL2表达为高于间充质干细胞型、骨髓干细胞型及未特指型(P<0.05),HER-2过表达型的MAL2表达高于间充质干细胞型(P<0.05).癌症组学(TCGA)数据分析结果显示,MAL2高表达BC患者的总体生存率明显低于MAL2低表达患者(P<0.05),但无病生存率无统计学差异(P>0.05);MAL2与TPD52、TPD52L2、YIF1A、IGR、FRMD4B、SH3YL1、OCLN等22个蛋白相互作用(PPI=0.001746),并参与补体和凝血级联、细胞间紧密连接、白细胞经内皮细胞迁移等生物学过程.结论:MAL2在BC组织中表达高于正常乳腺组织,其高表达可能与BC患者的不良预后有关. 展开更多

关键词 t细胞分化蛋白2(mal2) 乳腺癌 预后

在线阅读 下载PDF 职称材料