集胞藻Synechocystis sp. PCC 6803 slr1501的克隆及原核表达分析 被引量：1

1

作者 张燕 岳寿松 +3 位作者 陈高 游银伟 钟怀荣 于金慧 《山东农业科学》 2019年第7期1-4,16,共5页

组蛋白乙酰基转移酶上调表达与抗逆性有一定相关性。集胞藻Synechocystis sp.PCC 6803 Slr1501是一个未知蛋白,预测其属于组蛋白乙酰基转移酶GNAT家族N-乙酰基转移酶。为了进一步明确slr1501基因功能,本研究从集胞藻6803中克隆slr1501基... 组蛋白乙酰基转移酶上调表达与抗逆性有一定相关性。集胞藻Synechocystis sp.PCC 6803 Slr1501是一个未知蛋白,预测其属于组蛋白乙酰基转移酶GNAT家族N-乙酰基转移酶。为了进一步明确slr1501基因功能,本研究从集胞藻6803中克隆slr1501基因,成功构建了pET-28a(+)-slr1501原核表达载体,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行分析。经1 mmol/L IPTG诱导2 h后Slr1501蛋白成功表达,表达量随诱导时间的延长而增加,且主要以包涵体形式表达。Western blot检测结果显示Slr1501重组蛋白特异性表达。本试验结果为进一步研究该基因的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 集胞藻6803 乙酰基转移酶 slr1501 原核表达 基因功能

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Synechocystis sp.strain PCC 6803定量PCR模板制备方法的改进 被引量：2

2

作者 阳桂丹 张巨源 陈雯莉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期44-51,共8页

以Synechocystis sp.strain PCC 6803为实验菌株,设计改良制备定量PCR模板的方法;同时,对Synechocystis sp.strain PCC 6803总RNA的Trizol抽提法进行优化。结果显示,利用改良方法抽提得到的RNA结构更完整;同时,利用改良方法制备的模板... 以Synechocystis sp.strain PCC 6803为实验菌株,设计改良制备定量PCR模板的方法;同时,对Synechocystis sp.strain PCC 6803总RNA的Trizol抽提法进行优化。结果显示,利用改良方法抽提得到的RNA结构更完整;同时,利用改良方法制备的模板可以用于后续定量PCR实验;其中,只有高表达量基因适用于半定量PCR,低表达量基因则需要实时荧光定量PCR检测。 展开更多

关键词 定量PCR Synechocystissp.strain pcc6803 RNA抽提 qPCR模板制备

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集胞藻Synechocystis sp. PCC 6803脂质组的分析 被引量：2

3

作者 郭晓烨 李艳华 韩丹翔 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期376-386,共11页

以集胞藻Synechocystis sp.PCC 6803为研究对象,研究建立了基于超高效液相色谱耦合串联质谱技术脂质组学分析方法。鸟枪法脂质组学通过电喷雾离子化有效分离油脂粗提物中所含单个脂质分子,在三重四极杆扫描碎片离子,能够利用特征片段离... 以集胞藻Synechocystis sp.PCC 6803为研究对象,研究建立了基于超高效液相色谱耦合串联质谱技术脂质组学分析方法。鸟枪法脂质组学通过电喷雾离子化有效分离油脂粗提物中所含单个脂质分子,在三重四极杆扫描碎片离子,能够利用特征片段离子鉴定光合甘油酯的种类和酰基组成,具有高效、灵敏度高和质量准确度高等优点。对不同光强下生长的Synechocystis sp.PCC 6803细胞的各脂质组分进行了全定量分析,发现单半乳糖甘油二酯(Monogalactosyldiacylglycerol,MGDG)和磷脂酰甘油(Phosphatidyl glycerol,PG)在高光处理的第2小时即显著积累,增长量分别为34.64%和68.49%,其中以含有从头合成、高度饱和的脂肪酸的种类增长最为快速和显著,而后高不饱和度的脂肪酸组成的种类逐渐积累。双半乳糖甘油二脂(Digalactosyldiacylglycerol,DGDG)在各时间点都持续增长,12h后增长量达26.95%,硫代异鼠李糖甘油二酯(Sulfoquinovosyl diacylglycerol,SQDG)的含量则呈现出不断下降的趋势。研究所建立的脂质组学分析方法对进一步研究Synechocystis sp.PCC 6803的脂质代谢及生理功能提供了有力的分析工具。 展开更多

关键词 脂质组 集胞藻Synechocystis sp.pcc 6803 高光适应 甘油酯

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集胞藻PCC 6803高产精氨酸藻株的紫外诱变选育 被引量：1

4

作者 戢水玲 高宏 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期635-640,共6页

精氨酸在医药和食品工业上具有广泛用途。集胞藻PCC 6803是单细胞蓝藻,能利用工业废气(主要成分是氮氧化物NOx)与水反应生成的硝酸盐和亚硝酸盐合成氨基酸等化合物,因而选育高产精氨酸藻株,不仅能提高精氨酸产量,而且能去除工业废气中的... 精氨酸在医药和食品工业上具有广泛用途。集胞藻PCC 6803是单细胞蓝藻,能利用工业废气(主要成分是氮氧化物NOx)与水反应生成的硝酸盐和亚硝酸盐合成氨基酸等化合物,因而选育高产精氨酸藻株,不仅能提高精氨酸产量,而且能去除工业废气中的NOx,具有潜在的应用前景。研究在集胞藻PCC 6803中利用紫外诱变,筛选抗0.8 g/L D-精氨酸和抗0.2 g/L 6-氮尿嘧啶的突变株,选育到了一株精氨酸产量显著提高的突变株#13807-111-55,它每OD730值细胞的胞外精氨酸产量相比出发株提高了62.3倍,达到(0.76±0.1)mg/(L·OD730),总精氨酸产量相比出发株提高了6.0倍,达到(0.82±0.08)mg/(L·OD730)。该突变株每OD730值细胞的胞外精氨酸产量明显高于胞内,表明该突变藻株是精氨酸分泌型,因而具有潜在的应用前景。 展开更多

关键词 紫外诱变 精氨酸 集胞藻pcc 6803

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氯霉素对集胞蓝细菌PCC 6803细胞中羧酶体数目及其相关蛋白丰度的影响

5

作者 李松柏 支瑶 +2 位作者 李盼 汪方奎 陈雯莉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期7-11,共5页

羧酶体是由致密的外壳蛋白包裹着核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/氧化酶和碳酸苷酶形成的细胞内蛋白质小体,是蓝细菌二氧化碳固定的场所。为解析羧酶体在不同培养条件下的功能,本研究构建了原核表达载体pET28a-CcmK2,并在大肠杆菌BL21(DE3)中... 羧酶体是由致密的外壳蛋白包裹着核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/氧化酶和碳酸苷酶形成的细胞内蛋白质小体,是蓝细菌二氧化碳固定的场所。为解析羧酶体在不同培养条件下的功能,本研究构建了原核表达载体pET28a-CcmK2,并在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达带有组氨酸标签的CcmK2重组蛋白,制备了其多克隆抗体,探讨了不同质量浓度氯霉素对细胞内羧酶体数目和羧酶体相关蛋白丰度的影响。首先,确定了不同质量浓度的氯霉素对集胞蓝细菌PCC 6803生长的影响,发现5.0μg/mL氯霉素能够完全抑制菌株的生长,但是可以维持菌株存活。随后,探讨了集胞蓝细菌在葡萄糖异养和光合自养转换过程中,氯霉素对细胞内羧酶体数目及羧酶体相关蛋白的影响。结果显示:氯霉素的加入抑制了细胞内羧酶体数目对环境碳源的响应;同时,Western blot检测发现5.0μg/mL氯霉素能够抑制细胞内新的羧酶体外壳蛋白CcmK2的合成。这些结果表明,氯霉素可能通过抑制羧酶体外壳蛋白的合成来干扰细胞内羧酶体的形成,细胞内羧酶体对环境碳源的响应存在复杂的调控机制。 展开更多

关键词 集胞蓝细菌pcc 6803 羧酶体 氯霉素 二氧化碳浓缩机制

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集胞蓝细菌PCC 6803中CcmK2蛋白多克隆抗体的制备与检测

6

作者 李盼 支瑶 +1 位作者 汪方奎 陈雯莉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期12-16,共5页

CcmK2蛋白是集胞蓝细菌PCC 6803羧酶体外壳蛋白的主要组分,在羧酶体的组装与功能行使方面扮演重要角色。为解析其功能,本研究构建了原核表达载体pET28a-CcmK2,并在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达带有6个组氨酸标签的CcmK2重组蛋白。通过... CcmK2蛋白是集胞蓝细菌PCC 6803羧酶体外壳蛋白的主要组分,在羧酶体的组装与功能行使方面扮演重要角色。为解析其功能,本研究构建了原核表达载体pET28a-CcmK2,并在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达带有6个组氨酸标签的CcmK2重组蛋白。通过金属亲和层析技术,将CcmK2重组蛋白纯化后免疫家兔,制备抗CcmK2多克隆抗体。基于Dot blot分析的结果显示:该多克隆抗体能够有效检测蓝细菌CcmK2蛋白;进一步的抗体特异性分析显示,CcmK2多克隆抗体与其他羧酶体外壳蛋白存在微弱的抗原抗体反应;最后,通过Western blot分析证实该多克隆抗体能够特异而灵敏地检测集胞蓝细菌PCC 6803中CcmK2的丰度。 展开更多

关键词 集胞蓝细菌pcc 6803 羧酶体 WESTERN BLOT 二氧化碳浓缩机制

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封闭式光生物反应器集胞藻6803光自养和混合营养培养比较 被引量：3

7

作者 王永红 李元广 +3 位作者 施定基 沈国敏 茹炳根 张嗣良 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期247-250,共4页

采用封闭式光生物反应器进行了蓝藻基因工程常用宿主系统集胞藻 Synechocystis sp.PCC 680 3的混合营养培养 ,并与光自养培养进行了比较。在两种培养方式下 ,集胞藻 680 3的饱和光强基本相同 ,都为 50 0 0 lx。当入射光强为 50 0 0 lx... 采用封闭式光生物反应器进行了蓝藻基因工程常用宿主系统集胞藻 Synechocystis sp.PCC 680 3的混合营养培养 ,并与光自养培养进行了比较。在两种培养方式下 ,集胞藻 680 3的饱和光强基本相同 ,都为 50 0 0 lx。当入射光强为 50 0 0 lx、初始葡萄糖浓度为 1 .74g/L时 ,混合营养生长在葡萄糖消耗完 ( 69.5h)时的藻细胞密度为 1 .36g/L、叶绿素浓度为 2 0 .0 8mg/L、能量得率为1 6.7% ,分别为同期光自养生长的 3.8倍、2 .3倍和 2 .6倍。这表明封闭式光生物反应器混合营养培养方式在促进集胞藻 680 展开更多

关键词 集胞藻6803 混合营养培养 光生物反应器 葡萄糖 蓝藻 基因工程 光自养培养

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气升式反应器培养集胞藻6803过程中光能利用特性研究 被引量：4

8

作者 张志斌 颜日明 +1 位作者 曾庆桂 朱笃 《海洋通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期54-61,共8页

在气升式光生物反应器中,对集胞藻6803分批培养条件下的光衰减、平均光强、光的分布以及藻细胞生长对光能的利用特性进行分析。结果表明:Lambert-Beer定律可较好描述细胞浓度及光程对光衰减的影响;随着藻细胞密度的增加,光生物反应器内... 在气升式光生物反应器中,对集胞藻6803分批培养条件下的光衰减、平均光强、光的分布以及藻细胞生长对光能的利用特性进行分析。结果表明:Lambert-Beer定律可较好描述细胞浓度及光程对光衰减的影响;随着藻细胞密度的增加,光生物反应器内平均光强不断减小,藻细胞的比光能吸收速率和比生长速率也不断降低,反应器中"暗区"体积在培养6d后超过总体积的80%;利用Pirt细胞生长生物能量模型描述比生长速率和比光能吸收速率的关系,在入射光强为58.73KJ/(m2·h),求得基于光能的细胞得率YG和维持系数m分别为9.98×10-3g/kJ和0.445kJ/(g·h)。 展开更多

关键词 集胞藻6803 光衰减 光分布 平均光强 光能利用

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集胞藻6803对Pb^(2+)胁迫的生理生化响应

9

作者 邓祥元 樊玲波 +2 位作者 高坤 罗翔 丁婉婉 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期39-43,共5页

为探索藻类对Pb2+胁迫的生理生化响应,首次以集胞藻6803(Synechocystis sp.PCC 6803)为材料,以细胞密度、叶绿素a、可溶性糖、MDA含量及SOD活性为指标,研究Pb2+胁迫下集胞藻的生理生化响应。结果表明,高浓度Pb(NO3)2(>100 mg·L... 为探索藻类对Pb2+胁迫的生理生化响应,首次以集胞藻6803(Synechocystis sp.PCC 6803)为材料,以细胞密度、叶绿素a、可溶性糖、MDA含量及SOD活性为指标,研究Pb2+胁迫下集胞藻的生理生化响应。结果表明,高浓度Pb(NO3)2(>100 mg·L-1)严重抑制集胞藻的生长及叶绿素a的合成,但低浓度Pb(NO3)2(<50 mg·L-1)对其没有明显影响(P>0.05)。而Pb(NO3)2对集胞藻中糖类物质含量的影响不同,尽管50 mg·L-1的Pb(NO3)2对集胞藻生长的抑制作用不明显,但可显著抑制集胞藻中糖类物质的合成(P<0.05)。此外,随着Pb(NO3)2浓度的升高,细胞中MDA含量和SOD活力显著增加,表明细胞中活性氧自由基过量积累,将破坏集胞藻的细胞膜结构与功能,使细胞遭受严重损伤。 展开更多

关键词 集胞藻6803 Pb(NO3)2 叶绿素A 超氧化物歧化酶 丙二醛

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绿色荧光蛋白标记S2P在集胞藻6803中的表达

10

作者 陈谷 闻盼盼 +1 位作者 秦春燕 王玉玲 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第12期122-127,共6页

为研究集胞藻6803中两个S2P同源蛋白酶Slr0643和Sll0862的功能,分别在两个蛋白酶的羧基端添加增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标签,构建了两株转基因集胞藻psbA2::0643GFP-Cmr/△0643-Kmr和psbA2::0862GFP-Cmr/△0862-Kmr.通过逆转录聚合酶链... 为研究集胞藻6803中两个S2P同源蛋白酶Slr0643和Sll0862的功能,分别在两个蛋白酶的羧基端添加增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标签,构建了两株转基因集胞藻psbA2::0643GFP-Cmr/△0643-Kmr和psbA2::0862GFP-Cmr/△0862-Kmr.通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测到egfp基因的转录表达,通过激光共聚焦显微镜检测到转基因集胞藻细胞发出的绿色荧光蛋白荧光,表明带EGFP标签的S2P融合蛋白在psbA2启动子调控下正确表达. 展开更多

关键词 增强型绿色荧光蛋白 S2P同源蛋白酶 集胞藻6803 融合蛋白

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集胞藻胞外多糖的流变学性质和乳化活性 被引量：3

11

作者 许浩 李朋富 +3 位作者 陈丽 高云 陶芳芳 刘志礼 《南京大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期320-325,共6页

集胞藻在培养过程中向培养基中分泌大量胞外多糖，流变学研究表明这种胞外多糖呈现假塑性行为，粘度值接近黄原胶，当剪切速率存0．15s^-1时，两者粘度相等．集胞藻胞外多糖在0．1mol／L氯化钠溶液中以及存30-70℃温度范围内粘度值具有... 集胞藻在培养过程中向培养基中分泌大量胞外多糖，流变学研究表明这种胞外多糖呈现假塑性行为，粘度值接近黄原胶，当剪切速率存0．15s^-1时，两者粘度相等．集胞藻胞外多糖在0．1mol／L氯化钠溶液中以及存30-70℃温度范围内粘度值具有一定的稳定性．集胞藻胞外多糖的粘弹谱类似于黄原胶，具有弱凝胶的特征．这种多糖具有良好稳定的乳化活性，对植物油、正十六烷、石蜡、二甲苯和2-甲基萘＋正十六烷（1：1）都有乳化作用，而且在静置一个月后，乳液依然稳定．集胞藻胞外多糖可以作为增稠剂、稳定剂以及乳化剂在食品、化妆品工业等领域得到广泛应用。 展开更多

关键词 集胞藻胞外多糖 流变学性质 粘度 乳化活性

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启动子对蓝藻合成乙醇能力影响的研究

12

作者 高政绪 刘中庆 +5 位作者 刘宏 刘秀丽 王德权 张英华 高倩倩 杜传印 《可再生能源》 CAS 北大核心 2014年第11期1759-1765,共7页

从集胞藻PCC6803中克隆了Prbp1,Prnpb和PnrtA3个启动子,用于控制蓝藻中乙醇合成相关酶的表达,分别构建了3个基因工程藻株Syn-ZG72,Syn-ZG73和Syn-ZG74。在相同培养条件下,与之前构建的携带Prbc启动子的Syn-ZG25相比,Syn-ZG73乙醇产量与... 从集胞藻PCC6803中克隆了Prbp1,Prnpb和PnrtA3个启动子,用于控制蓝藻中乙醇合成相关酶的表达,分别构建了3个基因工程藻株Syn-ZG72,Syn-ZG73和Syn-ZG74。在相同培养条件下,与之前构建的携带Prbc启动子的Syn-ZG25相比,Syn-ZG73乙醇产量与之相当,明显高于Syn-ZG72和Syn-ZG74,表明Prnpb的表达效果强于Prbp1和PnrtA。Prbp1不能控制乙醇的诱导合成,PnrtA可以控制乙醇的诱导合成,但是启动子强度弱,乙醇产量低。 展开更多

关键词 蓝藻 集胞藻pcc6803 启动子 乙醇

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