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人神经生长因子基因真核细胞表达载体的构建与鉴定
被引量：
2
1
作者
王传恩
阮奕文
+2 位作者
姚志彬
谢瑶
郭辉玉
《中山医科大学学报》
CSCD
1999年第3期167-170,共4页
目的：构建携带人神经生长因子（ｈ Ｎ Ｇ Ｆ） 基因的真核细胞表达载体，为应用 Ｎ Ｇ Ｆ 进行老年性痴呆（ Ａ Ｄ） 等疾病基因治疗打基础。方法：应用基因重组技术将ｈ Ｎ Ｇ Ｆｃ Ｄ Ｎ Ａ 克隆到逆转录病毒载体ｐ Ｌ Ｘ Ｓ Ｎ 中...
目的：构建携带人神经生长因子（ｈ Ｎ Ｇ Ｆ） 基因的真核细胞表达载体，为应用 Ｎ Ｇ Ｆ 进行老年性痴呆（ Ａ Ｄ） 等疾病基因治疗打基础。方法：应用基因重组技术将ｈ Ｎ Ｇ Ｆｃ Ｄ Ｎ Ａ 克隆到逆转录病毒载体ｐ Ｌ Ｘ Ｓ Ｎ 中，用限制性内切酶酶切分析重组质粒ｐ Ｌ Ｎ Ｇ Ｆ Ｓ Ｎ 中ｈ Ｎ Ｇ Ｆ基因的插入方向，用 Ｐ Ｃ Ｒ、斑点杂交和 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交对重组质粒ｐ Ｌ Ｎ Ｇ Ｆ Ｓ Ｎ 作进一步鉴定。结果：ｈ Ｎ Ｇ Ｆｃ Ｄ Ｎ Ａ已正确地克隆到逆转录病毒载体ｐ Ｌ Ｘ Ｓ Ｎ 中，而构建成重组逆转录病毒载体ｐ Ｌ Ｎ Ｇ Ｆ Ｓ Ｎ。结论：真核细胞表达载体ｐ Ｌ Ｎ Ｇ Ｆ Ｓ Ｎ 的成功构建，为进一步开展 Ｎ Ｇ Ｆ基因治疗 Ａ Ｄ 等中枢神经系统疾病奠定了基础。
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关键词
神经生长因子
真核细胞
老年性痴呆
基因治疗
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职称材料
TargetUnmaskingFluid在强化神经生长因子受体免疫组织化学反应中的应用
2
作者
王子慧
《北京医科大学学报》
CSCD
1995年第5期359-360,I030,T001,共2页
首次将ＴａｒｇｅｔＵｎｍａｓｋｉｎｇＦｌｕｉｄ（ＴＵＦ）应用在人体组织的陈旧石蜡切片上强化显示神经生长因子受体（ＮＧＦＲ）的免疫组织化学反应。结果显示：石蜡切片经ＴＵＦ及微波预处理后，ＮＧＦＲ免疫反应的阳性细胞数及免...
首次将ＴａｒｇｅｔＵｎｍａｓｋｉｎｇＦｌｕｉｄ（ＴＵＦ）应用在人体组织的陈旧石蜡切片上强化显示神经生长因子受体（ＮＧＦＲ）的免疫组织化学反应。结果显示：石蜡切片经ＴＵＦ及微波预处理后，ＮＧＦＲ免疫反应的阳性细胞数及免疫反应强度均明显提高，背景十分清晰。ＴＵＦ对增强和改善某些陈旧性抗原的免疫组织化学反应有十分可观的应用前景。
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关键词
神经生长因子
受体
免疫组织化学
组织切片
试剂
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职称材料
神经生长因子对成纤维细胞游离细胞核的促转录作用
被引量：
1
3
作者
李建义
童坦君
《北京医科大学学报》
CSCD
1995年第4期246-248,共3页
据Ｇｒｅｎｆｅｌｌ法提取和纯化了小鼠正常成纤维细胞及其恶性转化细胞的细胞核。通过电镜观察和标志酶的测定，表明此法纯化的细胞核不存在胞膜和细胞浆成分的污染。然后我们用ＮＧＦ刺激纯化的细胞核，发现ＮＧＦ能提高细胞核的体外...
据Ｇｒｅｎｆｅｌｌ法提取和纯化了小鼠正常成纤维细胞及其恶性转化细胞的细胞核。通过电镜观察和标志酶的测定，表明此法纯化的细胞核不存在胞膜和细胞浆成分的污染。然后我们用ＮＧＦ刺激纯化的细胞核，发现ＮＧＦ能提高细胞核的体外转录活性。正常细胞比转化细胞更敏感，并且随ＮＧＦ的浓度的升高，作用更为明显。
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关键词
神经生长因子
成纤维细胞
细胞核
转录
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职称材料
题名
人神经生长因子基因真核细胞表达载体的构建与鉴定
被引量：
2
1
作者
王传恩
阮奕文
姚志彬
谢瑶
郭辉玉
机构
中山医科大学脑研究室
中山医科大学微生物学教研室
出处
《中山医科大学学报》
CSCD
1999年第3期167-170,共4页
基金
国家自然科学基金
广东省"五个一科教兴医工程"基金
"千百十人才工程"基金
文摘
目的：构建携带人神经生长因子（ｈ Ｎ Ｇ Ｆ） 基因的真核细胞表达载体，为应用 Ｎ Ｇ Ｆ 进行老年性痴呆（ Ａ Ｄ） 等疾病基因治疗打基础。方法：应用基因重组技术将ｈ Ｎ Ｇ Ｆｃ Ｄ Ｎ Ａ 克隆到逆转录病毒载体ｐ Ｌ Ｘ Ｓ Ｎ 中，用限制性内切酶酶切分析重组质粒ｐ Ｌ Ｎ Ｇ Ｆ Ｓ Ｎ 中ｈ Ｎ Ｇ Ｆ基因的插入方向，用 Ｐ Ｃ Ｒ、斑点杂交和 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交对重组质粒ｐ Ｌ Ｎ Ｇ Ｆ Ｓ Ｎ 作进一步鉴定。结果：ｈ Ｎ Ｇ Ｆｃ Ｄ Ｎ Ａ已正确地克隆到逆转录病毒载体ｐ Ｌ Ｘ Ｓ Ｎ 中，而构建成重组逆转录病毒载体ｐ Ｌ Ｎ Ｇ Ｆ Ｓ Ｎ。结论：真核细胞表达载体ｐ Ｌ Ｎ Ｇ Ｆ Ｓ Ｎ 的成功构建，为进一步开展 Ｎ Ｇ Ｆ基因治疗 Ａ Ｄ 等中枢神经系统疾病奠定了基础。
关键词
神经生长因子
真核细胞
老年性痴呆
基因治疗
Keywords
subject headings nerve growth factor/biothesis
genetic vectors
recombination ,genetic
gene therapy
dementi a ,senile/therapy
分类号
R749.160.5 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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职称材料
题名
TargetUnmaskingFluid在强化神经生长因子受体免疫组织化学反应中的应用
2
作者
王子慧
机构
北京医科大学病理学系
出处
《北京医科大学学报》
CSCD
1995年第5期359-360,I030,T001,共2页
文摘
首次将ＴａｒｇｅｔＵｎｍａｓｋｉｎｇＦｌｕｉｄ（ＴＵＦ）应用在人体组织的陈旧石蜡切片上强化显示神经生长因子受体（ＮＧＦＲ）的免疫组织化学反应。结果显示：石蜡切片经ＴＵＦ及微波预处理后，ＮＧＦＲ免疫反应的阳性细胞数及免疫反应强度均明显提高，背景十分清晰。ＴＵＦ对增强和改善某些陈旧性抗原的免疫组织化学反应有十分可观的应用前景。
关键词
神经生长因子
受体
免疫组织化学
组织切片
试剂
Keywords
headings
Target unmasking fluid
Immunohistochemisty
Receptors
nerve
growth
factor
Microtomy
分类号
R329-33 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R741.02 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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职称材料
题名
神经生长因子对成纤维细胞游离细胞核的促转录作用
被引量：
1
3
作者
李建义
童坦君
机构
北京医科大学生化与分子生物学系
出处
《北京医科大学学报》
CSCD
1995年第4期246-248,共3页
基金
国家自然科学基金
文摘
据Ｇｒｅｎｆｅｌｌ法提取和纯化了小鼠正常成纤维细胞及其恶性转化细胞的细胞核。通过电镜观察和标志酶的测定，表明此法纯化的细胞核不存在胞膜和细胞浆成分的污染。然后我们用ＮＧＦ刺激纯化的细胞核，发现ＮＧＦ能提高细胞核的体外转录活性。正常细胞比转化细胞更敏感，并且随ＮＧＦ的浓度的升高，作用更为明显。
关键词
神经生长因子
成纤维细胞
细胞核
转录
Keywords
headings
nerve
growth
factor/
pharmacol
Fibroblasts/genet
Transcription,genetic/drug eff
分类号
Q516 [生物学—生物化学]
Q593.2 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人神经生长因子基因真核细胞表达载体的构建与鉴定
王传恩
阮奕文
姚志彬
谢瑶
郭辉玉
《中山医科大学学报》
CSCD
1999
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
TargetUnmaskingFluid在强化神经生长因子受体免疫组织化学反应中的应用
王子慧
《北京医科大学学报》
CSCD
1995
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
神经生长因子对成纤维细胞游离细胞核的促转录作用
李建义
童坦君
《北京医科大学学报》
CSCD
1995
1
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职称材料
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