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TNF-α对人根尖乳头干细胞增殖及分化能力的影响 被引量:5
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作者 刘彩奇 陈柯 +1 位作者 黄义彬 熊华翠 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2014年第5期392-395,共4页
目的:研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)对人根尖乳头干细胞增殖及分化能力的影响。方法:采用组织块法获得人根尖乳头干细胞,免疫荧光法鉴定干细胞表面标志物;经TNF-α刺激后检测对干细胞增殖、克隆形成率及分化能力的影响。结果:免疫荧光显... 目的:研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)对人根尖乳头干细胞增殖及分化能力的影响。方法:采用组织块法获得人根尖乳头干细胞,免疫荧光法鉴定干细胞表面标志物;经TNF-α刺激后检测对干细胞增殖、克隆形成率及分化能力的影响。结果:免疫荧光显示人波形丝蛋白、STRO-1阳性,角蛋白阴性;10μg/L TNF-α在4天时促进根尖乳头干细胞的增殖,提高克隆形成率;抑制碱性磷酸酶活性及矿化结节形成。结论:炎性因子TNF-α对人根尖乳头干细胞的生物学特性具有一定的影响。 展开更多
关键词 人根尖乳头干细胞 tnf-Α 增殖 分化
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犬根尖牙乳头干细胞的分离培养和生物学特性 被引量:4
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作者 杨杰 赵玉鸣 +2 位作者 王文君 贾维茜 葛立宏 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期921-926,共6页
目的:分离培养比格犬(Beagle犬)根尖牙乳头干细胞并研究其生物学特性。方法:拔除Beagle犬上颌年轻恒前牙,切取根尖牙乳头,采用酶消化法分离培养Beagle犬根尖牙乳头细胞,进行成纤维细胞克隆形成实验、生长曲线测定、多向分化能力研究及... 目的:分离培养比格犬(Beagle犬)根尖牙乳头干细胞并研究其生物学特性。方法:拔除Beagle犬上颌年轻恒前牙,切取根尖牙乳头,采用酶消化法分离培养Beagle犬根尖牙乳头细胞,进行成纤维细胞克隆形成实验、生长曲线测定、多向分化能力研究及间充质干细胞相关表面标记物STRO-1、CD146和CK的表达分析,并将其移植至免疫缺陷鼠皮下观察矿化组织的形成。结果:Beagle犬根尖牙乳头组织中存在一群具有高度增殖能力的细胞,在相同培养条件下,其克隆形成率明显高于人根尖牙乳头干细胞,差异具有统计学意义(P<0.001);所获得Beagle犬根尖牙乳头干细胞具有成骨、成脂和成软骨等多向分化能力;在体外经成骨诱导后可形成矿化结节,成脂诱导后可形成脂滴,成软骨诱导后免疫组织化学染色Ⅱ型胶原阳性表达;同时该群细胞STRO-1和CD146阳性表达,而CK阴性表达;与羟基磷灰石混合移植于免疫缺陷鼠皮下可形成矿化组织和牙髓-牙本质复合体样结构。结论:Beagle犬根尖牙乳头中存在具有高增殖能力和多向分化能力的根尖牙乳头干细胞。 展开更多
关键词 根尖牙乳头干细胞 细胞增殖 多向分化
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miR-146a-5p对人牙髓干细胞成牙本质分化的影响 被引量:3
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作者 邱在玲 林诗晗 +3 位作者 曾建钗 柯志红 肖婷婷 吕红兵 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期830-833,共4页
目的:探讨miR-146a-5p对人牙髓干细胞成牙本质分化的调控作用。方法:前期通过二代测序技术检测人牙髓干细胞和根尖牙乳头干细胞中miRNAs的差异表达,用qRT-PCR验证前期筛选出的7个miRNAs的表达水平。通过重组慢病毒转染人牙髓干细胞,特... 目的:探讨miR-146a-5p对人牙髓干细胞成牙本质分化的调控作用。方法:前期通过二代测序技术检测人牙髓干细胞和根尖牙乳头干细胞中miRNAs的差异表达,用qRT-PCR验证前期筛选出的7个miRNAs的表达水平。通过重组慢病毒转染人牙髓干细胞,特异性上调miR-146a-5p后进行成牙本质诱导,用茜素红染色,碱性磷酸酶活性检测和qRT-PCR的方法检测成牙本质分化能力的改变。结果:miR-146a-5p在人牙髓干细胞中的表达显著高于根尖牙乳头干细胞。过表达miR-146a-5p后矿化结节、ALP活性和成牙本质分化标志基因表达增加。结论:miR-146a-5p促进人牙髓干细胞向成牙本质分化。 展开更多
关键词 牙髓干细胞(DPSCs) 根尖牙乳头干细胞(scaps) MIRNAS 成牙本质分化
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白细胞介素34(IL-34)促进大鼠根尖牙乳头干细胞增殖并向成牙成骨分化 被引量:3
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作者 朱晨晨 朱永娜 +6 位作者 姜丽娜 王旋宇 刘青 郑银竹 薛魁 武庆华 张晓东 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期199-204,共6页
目的探究白细胞介素34(IL-34)对大鼠根尖牙乳头干细胞(SCAP)成牙、成骨分化的影响。方法采用酶消化法分离培养大鼠SCAP,实时荧光定量PCR检测IL-34在大鼠SCAP中的表达。采用噻唑蓝(MTT)法分析不同浓度IL-34对大鼠SCAP增殖活性的影响。茜... 目的探究白细胞介素34(IL-34)对大鼠根尖牙乳头干细胞(SCAP)成牙、成骨分化的影响。方法采用酶消化法分离培养大鼠SCAP,实时荧光定量PCR检测IL-34在大鼠SCAP中的表达。采用噻唑蓝(MTT)法分析不同浓度IL-34对大鼠SCAP增殖活性的影响。茜素红染色观察矿化情况,划痕实验检测增殖能力,实时荧光定量PCR检测成骨相关基因碱性磷酸酶(ALP)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、Runt相关转录因子2(RUNX2)、成骨细胞特异性转录因子(OSX)的表达。应用Western blot法检测ALP、DSPP、RUNX2、OSX蛋白的表达。结果IL-34促进大鼠SCAP增殖的最大剂量为100 ng/mL,茜素红染色显示IL-34能够促进SCAP的矿化。100 ng/mL IL-34处理显著提高成骨相关基因ALP、DSPP、RUNX2、OSX的表达。结论IL-34能够促进大鼠SCAP的增殖并向成牙/成骨分化。 展开更多
关键词 白细胞介素34(IL-34) 根尖牙乳头干细胞 成骨分化 大鼠
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机械牵张应力对人根尖牙乳头干细胞增殖分化的影响 被引量:4
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作者 杜希希 李波 袁小平 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第10期1041-1047,共7页
目的根尖牙乳头干细胞(SCAP)被看作是根尖周组织再生的种子细胞并被用于以干细胞为基础的根尖周组织再生工程中。文章探讨不同力值的机械牵张应力对人SCAP增殖、分化潜能的影响。方法利用组织块酶消化法及有限稀释法分离、培养人SCAP并... 目的根尖牙乳头干细胞(SCAP)被看作是根尖周组织再生的种子细胞并被用于以干细胞为基础的根尖周组织再生工程中。文章探讨不同力值的机械牵张应力对人SCAP增殖、分化潜能的影响。方法利用组织块酶消化法及有限稀释法分离、培养人SCAP并加以鉴定。根据对细胞加载机械牵张应力大小不同将实验分为150、200、250 g组,另设空白对照组(未做加力处理)。利用MTT法检测不同大小静态机械牵张应力刺激对SCAP增殖活性的影响。利用Western blot检测机械牵张应力作用下SCAP成骨/成牙分化相关蛋白(ALP、OSX、DSP)表达的变化以及不同大小静态机械牵张应力作用下SCAP内质网应激分子伴侣GRP78的表达情况。结果 SCAP细胞经过3周的成骨诱导后进行茜素红染色,镜下可见块状矿化结节的出现,SCAP细胞经过2周的成脂诱导后进行油红O染色,镜下可见红染的脂滴出现。SCAP细胞表面抗原表型通过流式细胞仪检测分析显示:SCAP对CD31(2.46%,内皮细胞标记物)和CD45(0.07%,造血干细胞标记物)呈阴性表达,对CD90(99.89%,间质细胞标记)和STRO-1(15.21%,干细胞标记)呈阳性表达。与150 g组比较,200 g加力组的加载机械牵张应力第2天,SCAP增殖能力明显下降(P<0.05);250 g加力组的加载机械牵张应力的第2、3、4、5天,SCAP增殖能力显著下降(P<0.05)。与200 g组比较,250 g加力组的加载机械牵张应力的第2、3、4、5天,SCAP增殖能力显著下降(P<0.05)。Western blot检测结果显示:加载牵张应力的第5天,与对照组相比,150 g组、200 g组、250 g组成骨分化相关蛋白ALP和OSX和DSP表达均显著升高(P<0.05)。与150 g组相比,200g组ALP、OSX表达差异无统计学意义(P>0.05),DSP表达显著升高(P<0.05);250 g组ALP、OSX、DSP表达均显著降低(P<0.05)。与200 g组相比,250 g组ALP、OSX、DSP表达均显著降低(P<0.05)。Western blot检测显示:加载牵张应力的第5天,与对照组GRP78表达(0.279±0.085)相比,150、200、250 g组GRP78表达(1.085±0.128、1.289±0.076、0.810±0.067)均显著升高(P<0.05)。结论机械牵张应力对人根尖牙乳头干细胞的增殖和成骨/成牙本质分化具有调控作用。内质网应激参与了机械牵张应力作用下的SCAP成骨/成牙分化过程,并促进了SCAP成骨/成牙分化。 展开更多
关键词 机械牵张应力 根尖牙乳头干细胞 增殖 分化 内质网应激
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炎症微环境下可溶性环氧化物酶抑制剂对人根尖牙乳头干细胞增殖及分化的影响
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作者 党海霞 王福 +2 位作者 陈岚 王渝林 周志强 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期164-168,共5页
目的:探讨在炎症微环境下,可溶性环氧化物酶抑制剂(TPPU)对人根尖牙乳头干细胞(hSCAPs)增殖和分化的影响。方法:采用流式细胞仪以及成骨诱导后茜素红染色鉴定hSCAPs;1 mg/mL脂多糖(LPS)处理hSCAPs模拟炎症微环境,然后用10μmol/L TPPU... 目的:探讨在炎症微环境下,可溶性环氧化物酶抑制剂(TPPU)对人根尖牙乳头干细胞(hSCAPs)增殖和分化的影响。方法:采用流式细胞仪以及成骨诱导后茜素红染色鉴定hSCAPs;1 mg/mL脂多糖(LPS)处理hSCAPs模拟炎症微环境,然后用10μmol/L TPPU作用于hSCAPs,分别在第1、3、5、7天,通过CCK-8法观察TPPU对hSCAPs增殖能力的影响;在第24小时,实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测炎症相关因子表达。在成骨诱导后的第7、12天,通过qRT-PCR检测成骨分化相关基因的表达;第8天通过碱性磷酸酶染色来分析碱性磷酸酶活性,第21天用茜素红染色观察矿化结节形成。结果:流式细胞仪结果与茜素红染色鉴定实验细胞为hSCAPs。用1 mg/mL LPS处理hSCAPs后,在第1、3、5、7天时,TPPU+LPS组、LPS组和vehicle组细胞增殖无差异(P>0.05)。在用LPS处理hSCAPs 24 h后,相对于vehicle组,LPS组白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)表达显著上调(P<0.05),LPS+TPPU组IL-1β、IL-6的表达明显低于LPS组(P<0.05)。成骨诱导液培养hSCAPs一定时间后,检测发现相对于LPS组,LPS+TPPU组碱性磷酸酶(ALP)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨钙素(OCN)、Runt相关转录因子2(RUNX2)的表达显著上调(P<0.05)。且TPPU处理组较LPS组碱性磷酸酶染色和茜素红染色均加深。结论:在体外炎症微环境下,TPPU可以抑制hSCAPs炎性因子的表达。其次,在炎症微环境下TPPU对hSCAPs的增殖可能并没有明显的促进作用,但TPPU可在一定程度上促进hSCAPs的成牙/成骨分化。 展开更多
关键词 可溶性环氧化物酶抑制剂 人根尖牙乳头干细胞 脂多糖 增殖 分化
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