限制性内切酶SmaⅠ和HincⅡ存在切割序列多态性 被引量：1

1

作者 卢一凡 邓继先 +1 位作者 肖成祖 马清钧 《生物技术通报》 CAS CSCD 1997年第2期18-21,共4页

ＰＣＲ扩增产物基因组Ｇ—ＣＳＦ基因被克隆至ｐＵＣ１９，在对其进行序列分析时发现，Ｓｍａ　Ⅰ和ＨｉｎｃⅡ共同使用对回收片段进行亚克隆时，有一段序列缺失，序列分析表明这可能是由于Ｓｍａ　Ⅰ和Ｈｉｎｃ Ⅱ同时使用造成的。Ｓ... ＰＣＲ扩增产物基因组Ｇ—ＣＳＦ基因被克隆至ｐＵＣ１９，在对其进行序列分析时发现，Ｓｍａ　Ⅰ和ＨｉｎｃⅡ共同使用对回收片段进行亚克隆时，有一段序列缺失，序列分析表明这可能是由于Ｓｍａ　Ⅰ和Ｈｉｎｃ Ⅱ同时使用造成的。Ｓｍａ　Ⅰ和Ｈｉｎｃ　Ⅱ可能存在切割序列多态性。 展开更多

关键词 限制性内切酶 Smaⅰ HincⅡ 切割序列多态性 共切割 PCR

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限制性内切酶NcoⅠ的高效重组表达、硒代与结晶条件初步筛选 被引量：2

2

作者 程艺 马超 +5 位作者 陈晓雨 邵钰晨 王潇 杨雪丽 苏蓉 李婷婷 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期81-88,共8页

来源于珊瑚诺卡氏菌Nocardia corallina的限制性内切酶NcoⅠ是基因工程中常用的工具酶之一。然而目前NcoⅠ蛋白质三维结构尚未被解析,对其基因改造缺乏理论指导。为了解析NcoⅠ的三维结构,采用大肠杆菌表达系统,高效重组表达和纯化,获... 来源于珊瑚诺卡氏菌Nocardia corallina的限制性内切酶NcoⅠ是基因工程中常用的工具酶之一。然而目前NcoⅠ蛋白质三维结构尚未被解析,对其基因改造缺乏理论指导。为了解析NcoⅠ的三维结构,采用大肠杆菌表达系统,高效重组表达和纯化,获得了纯度>95%的NcoⅠ野生型和Se-NcoⅠ硒代蛋白。质谱分析表明,重组Se-NcoⅠ蛋白中所有硫原子成功被硒原子取代。酶切实验表明,硒代蛋白与野生型具有相似的限制酶活性。采用坐滴法筛选重组NcoⅠ蛋白结晶条件,已在3种条件下获得针状晶体,1种条件下获得颗粒状晶体。X射线衍射初步分析晶体分辨率在0.8 nm左右,为下一步解析NcoⅠ三维结构提供了基础。 展开更多

关键词 限制性内切酶 Ncoⅰ 表达纯化 硒代 结晶

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重组限制性内切酶Pst Ⅰ发酵条件优化

3

作者 张建 张新亚 +3 位作者 李婷婷 罗志丹 许恒皓 卢辰 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期100-105,共6页

由于限制性内切酶在重组表达时具有切割宿主DNA的细胞毒性,生产难度大,其供应一直被国外企业垄断。实验室前期通过广谱甲基化保护,初步实现了部分限制性内切酶的国产化,但工艺仍停留在低密度摇瓶培养水平,产量无法满足市场需求。研究以... 由于限制性内切酶在重组表达时具有切割宿主DNA的细胞毒性,生产难度大,其供应一直被国外企业垄断。实验室前期通过广谱甲基化保护,初步实现了部分限制性内切酶的国产化,但工艺仍停留在低密度摇瓶培养水平,产量无法满足市场需求。研究以限制性内切酶Pst Ⅰ为对象,通过单因素试验筛选了诱导温度、诱导时间、诱导剂浓度、补充碳源、pH值与诱导时机等多个发酵条件。结果表明,在37℃下,开始发酵后6 h,添加终浓度1.4 mmol/L IPTG进行诱导发酵8 h,以甘油为补充碳源,控制发酵体系pH为8.0时Pst Ⅰ的表达量最高,Pst Ⅰ蛋白产量为0.0129 g/L,为未优化的2.15倍,同时酶产率为1.926×10^(6)U/L,为未优化的3.74倍。 展开更多

关键词 限制性内切酶 Pstⅰ 重组表达

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BsaH Ⅰ对猪激素敏感脂肪酶基因外显子Ⅰ的PCR-RFLP分析 被引量：2

4

作者 陈利荣 贾艳梅 韩俊文 《生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期19-21,共3页

以华北野猪、东北野猪和山西黑猪、长白猪、大白猪、马身猪共计287头猪作为研究对象,对其HSL基因外显子Ⅰ区域进行了PCR-RFLP多态性研究,发现不同品种猪间存在多态性。瘦肉型大白猪、长白猪全部表现为GG基因型;山西黑猪表现为AA、AG和G... 以华北野猪、东北野猪和山西黑猪、长白猪、大白猪、马身猪共计287头猪作为研究对象,对其HSL基因外显子Ⅰ区域进行了PCR-RFLP多态性研究,发现不同品种猪间存在多态性。瘦肉型大白猪、长白猪全部表现为GG基因型;山西黑猪表现为AA、AG和GG三种基因型;脂肪型地方猪种马身猪为单一的AA基因型;华北杂种野猪、东北纯种野猪及杂种野猪表现为AG和GG两种基因型。等位基因A、G及三种基因型的频率在不同猪种中不同。该研究首次对华北及东北野猪HSL基因进行了多态性研究,丰富了国内外对野猪的分子生物学研究,为野猪遗传资源的合理开发利用提供了依据。 展开更多

关键词 野猪 激素敏感脂肪酶基因 限制性内切酶BsaH ⅰ 多态性

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禽腺病毒-Ⅰ群PCR-RFLP分型方法的建立 被引量：1

5

作者 江之瑶 王守春 +2 位作者 栾庆东 尹燕博 王建琳 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第11期22-24,27,共4页

为快速确定临床禽腺病毒-Ⅰ群(FAdVs)的血清型,本研究根据FAdVs的Hexon基因设计引物,对12个血清型FAdVs标准毒株进行PCR扩增,并根据扩增目的片段进行酶切位点分析和相应酶切反应研究,建立聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP... 为快速确定临床禽腺病毒-Ⅰ群(FAdVs)的血清型,本研究根据FAdVs的Hexon基因设计引物,对12个血清型FAdVs标准毒株进行PCR扩增,并根据扩增目的片段进行酶切位点分析和相应酶切反应研究,建立聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法。结果显示,利用该引物可同时扩增12个血清型FAdVs标准毒株,扩增片段大小为894 bp;扩增片段酶切位点分析显示,Eco130Ⅰ、Pf123Ⅱ、MluⅠ、PsyⅠ和BgⅡ为主要酶切位点,这5种酶切反应结果显示12个血清型FAdVs标准毒株可以得到不同的酶切图谱,且能区分12种血清型FAdVs;应用该酶切方法对本实验室保存的2株已知血清型的分离株进行分析,其结果与已确定的血清型一致。表明本试验建立的PCR-RFLP方法简便、特异性和区分度好,可用于12个血清型FAdVs的分型。 展开更多

关键词 禽腺病毒-ⅰ群 PCR-RFLP 限制性内切酶 分型 HEXON

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应用PCR-RFLP技术检测短喙矮小综合征鹅细小病毒 被引量：2

6

作者 王劭 肖世峰 +7 位作者 林甦 程晓霞 俞博 江丹丹 林锋强 朱小丽 陈仕龙 陈少莺 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1026-1030,共5页

为准确诊断鸭短喙矮小综合征(SBDS)以及鉴别鹅细小病毒感染鸭群中新发短喙矮小综合征鹅细小病毒(SBDS-GPV),本研究通过对GenBank登录的水禽细小病毒基因组核苷酸序列的比对分析,根据该病毒5'非编码区基因序列特征设计一对特异性引物... 为准确诊断鸭短喙矮小综合征(SBDS)以及鉴别鹅细小病毒感染鸭群中新发短喙矮小综合征鹅细小病毒(SBDS-GPV),本研究通过对GenBank登录的水禽细小病毒基因组核苷酸序列的比对分析,根据该病毒5'非编码区基因序列特征设计一对特异性引物,建立了SBDS-GPV聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测方法。特异性试验和敏感性试验显示,水禽细小病毒特异性引物可以扩增得到约200 bp的目的片段,SBDS-GPV PCR产物能够被SspⅠ酶切为140 bp和60 bp两个片段,番鸭细小病毒与德兹西氏病小鹅瘟病毒则不能被酶切,检出SBDS-GPV DNA的最低浓度为2.28×10~7拷贝/μL。利用该方法对14份疑似SBDS临床样品检测,阳性样本采用SPF鸭胚进行病毒分离,结果显示SBDS-GPV PCR-RFLP检测的阳性样本经病毒分离均为SBDS-GPV。上述研究表明,该SBDS-GPV PCR-RFLP检测方法特异性强、敏感性高,为SBDS的防控提供了有效手段。 展开更多

关键词 短喙矮小综合征 鹅细小病毒 聚合酶链式反应-限制性片段多态性 sspⅰ限制性内切酶

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正体与斜体使用规则

7

《蚕学通讯》 2024年第2期67-67,共1页

物种的学名属名、种名(包括亚种、变种)用拉丁文斜体,首字母大写,其余小写;属以上用拉丁文正体,首字母大写。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编码正体平排,例如:Bam HⅠ、Eco RⅠ、MspⅠ、Sau 3AⅠ等。

关键词 限制性内切酶 Mspⅰ 斜体 拉丁文 正体

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区别鹅细小病毒和番鸭细小病毒的PCR-RFLP方法的建立 被引量：6

8

作者 万春和 潘异哲 +4 位作者 陈红梅 施少华 傅光华 程龙飞 黄瑜 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第9期56-59,共4页

根据GenBank登录的鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MDPV)非结构蛋白(NS)基因特征,本研究设计1对特异性引物对GPV和MDPV基因组DNA进行PCR扩增,目的片段大小均为810bp,并对PCR产物进行切胶回收。用EcoRⅠ酶对GPV和MDPV特异性胶回收产物进... 根据GenBank登录的鹅细小病毒(GPV)和番鸭细小病毒(MDPV)非结构蛋白(NS)基因特征,本研究设计1对特异性引物对GPV和MDPV基因组DNA进行PCR扩增,目的片段大小均为810bp,并对PCR产物进行切胶回收。用EcoRⅠ酶对GPV和MDPV特异性胶回收产物进行酶切鉴定,结果显示MDPV经EcoRⅠ酶切后琼脂糖凝胶电泳检测片段为2段,大小为530和280bp;而GPV经EcoRⅠ酶切后琼脂糖凝胶电泳检测片段大小不变。本研究建立了一种快速区别GPV和MDPV感染的检测方法,可对番鸭感染水禽细小病毒的情况进行快速鉴别诊断。 展开更多

关键词 鹅细小病毒 番鸭细小病毒 EcoRⅰ限制性内切酶 聚合酶链式反应—限制性片段长度多态性

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三种CRISPR/Cas9基因敲除变异检测方法的比较分析 被引量：6

9

作者 唐国盘 黄安群 +3 位作者 孙志鹏 匡友谊 王胜杰 王大伟 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2019年第2期20-26,共7页

比较三种常用的CRISPR/Cas9基因敲除检测变异方法,从准确性、耗时、成本和应用限制等方面进行评估。采用T7核酸内切酶I、限制性内切酶和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法分别对利用CRISPR/Cas9方法敲除的fibinb和ngs基因的50尾斑马鱼(Danio r... 比较三种常用的CRISPR/Cas9基因敲除检测变异方法,从准确性、耗时、成本和应用限制等方面进行评估。采用T7核酸内切酶I、限制性内切酶和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法分别对利用CRISPR/Cas9方法敲除的fibinb和ngs基因的50尾斑马鱼(Danio rerio)突变纯合个体和突变杂合个体进行检测,用野生型个体作对照;同时用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对CRISPR/Cas9方法敲除的ogn和ddb1基因的突变杂合个体进行了检测。结果表明:三种方法均能够区分突变杂合个体,其中T7核酸内切酶I检测法耗时最短,但该方法不能用于鉴定突变纯合个体;限制性内切酶检测法能够用于鉴定纯合个体,但需要有特异性的识别位点;非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法能够区分纯合和杂合个体,对序列无依赖性,能够检测出序列中存在的所有变异。成本上,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法最经济;限制性内切酶的价格存在较大的差异,因此检测成本依赖于酶的价格。三种检测方法各有优缺点,在应用实践中可根据试验需要选择合适的方法。 展开更多

关键词 CRISPR/Cas9 T7核酸内切酶ⅰ 限制性内切酶 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 检测

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本刊外文书写正斜体的要求

10

《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期807-807,共1页

生物学中的属名、种名（包括亚种、变种）用拉丁文斜体,属的首字母大写,余用小写,如：Helicobacter pylori,Escherichiacoli。属以上的名称用拉丁文正体。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编号用正体,如：EcoRⅠ,HindⅢ,XbaⅠ,... 生物学中的属名、种名（包括亚种、变种）用拉丁文斜体,属的首字母大写,余用小写,如：Helicobacter pylori,Escherichiacoli。属以上的名称用拉丁文正体。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编号用正体,如：EcoRⅠ,HindⅢ,XbaⅠ,Sau3AⅠ。耐热DNA聚合酶用斜体表示,首字母大写,如：Taq、Pfu、TthDNA聚合酶。 展开更多

关键词 耐热DNA聚合酶 书写 外文 限制性内切酶 EcoRⅰ HindⅢ Xbaⅰ 生物学

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读者·作者·编者

11

《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期595-595,共1页

本刊外文书写正斜体的要求生物学中的属名、种名（包括亚种、变种）用拉丁文斜体,属的首字母大写,余用小写,如：Helicobacter pylori,Escherichiacoli。属以上的名称用拉丁文正体。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编号用正体... 本刊外文书写正斜体的要求生物学中的属名、种名（包括亚种、变种）用拉丁文斜体,属的首字母大写,余用小写,如：Helicobacter pylori,Escherichiacoli。属以上的名称用拉丁文正体。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编号用正体,如：EcoRⅠ,HindⅢ,XbaⅠ,Sau3AⅠ。 展开更多

关键词 编者 作者 读者 限制性内切酶 EcoRⅰ HindⅢ Xbaⅰ 生物学

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本刊外文书写正斜体的要求

12

《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期896-896,共1页

生物学中的属名、种名（包括亚种、变种）用拉丁文斜体,属的首字母大写,余用小写,如：Helicobacter pylori,Escherichiacoli。属以上的名称用拉丁文正体。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编号用正体,如：EcoRⅠ,HindⅢ,XbaⅠ,... 生物学中的属名、种名（包括亚种、变种）用拉丁文斜体,属的首字母大写,余用小写,如：Helicobacter pylori,Escherichiacoli。属以上的名称用拉丁文正体。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编号用正体,如：EcoRⅠ,HindⅢ,XbaⅠ,Sau3AⅠ。 展开更多

关键词 书写 外文 限制性内切酶 EcoRⅰ HindⅢ Xbaⅰ 生物学 拉丁文

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本刊外文书写正斜体的要求

13

《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1306-1306,共1页

生物学中的属名、种名（包括亚种、变种）用拉丁文斜体,属的首字母大写,余用小写,如：Helicobacter pylori,Escherichia coli。属以上的名称用拉丁文正体。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编号用正体,如：EcoRⅠ,HindⅢ,XbaⅠ... 生物学中的属名、种名（包括亚种、变种）用拉丁文斜体,属的首字母大写,余用小写,如：Helicobacter pylori,Escherichia coli。属以上的名称用拉丁文正体。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编号用正体,如：EcoRⅠ,HindⅢ,XbaⅠ,Sau3AⅠ。 展开更多

关键词 书写 外文 限制性内切酶 EcoRⅰ HindⅢ Xbaⅰ 生物学 拉丁文

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本刊外文书写正斜体的要求

14

《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1073-1073,共1页

生物学中的属名、种名（包括亚种、变种）用拉丁文斜体,属的首字母大写,余用小写,如：Helicobacter pylori,Escherichia coli。属以上的名称用拉丁文正体。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编号用正体,如：EcoRⅠ,HindⅢ,XbaⅠ... 生物学中的属名、种名（包括亚种、变种）用拉丁文斜体,属的首字母大写,余用小写,如：Helicobacter pylori,Escherichia coli。属以上的名称用拉丁文正体。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编号用正体,如：EcoRⅠ,HindⅢ,XbaⅠ,Sau3AⅠ。 展开更多

关键词 书写 外文 限制性内切酶 EcoRⅰ HindⅢ Xbaⅰ 生物学 拉丁文

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正体与斜体的使用规则

15

《广西蚕业》 2022年第4期45-45,共1页

物种的学名属名、种名(包括亚种、变种)用拉丁文斜体,首字母大写,其余小写;属以上用拉丁文正体,首字母大写。限制性内切酶前3个用斜体,后面的字母和编码正体平排,例如:BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ、Msp Ⅰ、Sau3A Ⅰ等。氨基酸和碱基的缩写氨基酸... 物种的学名属名、种名(包括亚种、变种)用拉丁文斜体,首字母大写,其余小写;属以上用拉丁文正体,首字母大写。限制性内切酶前3个用斜体,后面的字母和编码正体平排,例如:BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ、Msp Ⅰ、Sau3A Ⅰ等。氨基酸和碱基的缩写氨基酸缩写用3个字母表示时,仅第一个字母大写,其余小写,正体。碱基缩写为大写正体。 展开更多

关键词 限制性内切酶 拉丁文 BamHⅰ 氨基酸 斜体 正体 小写

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正体与斜体使用规则

16

《蚕学通讯》 2023年第3期38-38,共1页

物种的学名属名、种名(包括亚种、变种)用拉丁文斜体,首字母大写,其余小写;属以上用拉丁文正体,首字母大写。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编码正体平排,例如:Bam HⅠ、Eco RⅠ、MspⅠ、Sau 3AⅠ等。

关键词 限制性内切酶 Mspⅰ 斜体 拉丁文 正体

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正体与斜体使用规则

17

《蚕学通讯》 2023年第4期34-34,共1页

物种的学名属名、种名(包括亚种、变种)用拉丁文斜体,首字母大写,其余小写;属以上用拉丁文正体,首字母大写。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编码正体平排,例如:BamHⅠ、EcoRⅠ、MspⅠ、Sau3AⅠ等。

关键词 限制性内切酶 拉丁文 BamHⅰ 斜体 正体

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正体与斜体使用规则

18

《中国蚕业》 2020年第4期18-18,共1页

物种的学名属名、种名(包括亚种、变种)用拉丁文斜体,首字母大写,其余小写;属以上用拉丁文正体,首字母大写。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编码正体平排,例如:Bam HⅠ、Eco RⅠ、MspⅠ、Sau 3AⅠ等。氨基酸和碱基的缩写氨... 物种的学名属名、种名(包括亚种、变种)用拉丁文斜体,首字母大写,其余小写;属以上用拉丁文正体,首字母大写。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编码正体平排,例如:Bam HⅠ、Eco RⅠ、MspⅠ、Sau 3AⅠ等。氨基酸和碱基的缩写氨基酸缩写用3个字母表示时,仅第一个字母大写,其余小写,正体。碱基缩写为大写正体。 展开更多

关键词 限制性内切酶 Mspⅰ 氨基酸 斜体 拉丁文 正体 小写 碱基

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正体与斜体使用规则

19

《蚕学通讯》 2022年第2期49-49,共1页

物种的学名属名、种名(包括亚种、变种)用拉丁文斜体,首字母大写,其余小写;属以上用拉丁文正体,首字母大写。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编码正体平排,例如:Bam HⅠ、Eco RⅠ、MspⅠ、Sau 3AⅠ等。氨基酸和碱基的缩写氨... 物种的学名属名、种名(包括亚种、变种)用拉丁文斜体,首字母大写,其余小写;属以上用拉丁文正体,首字母大写。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编码正体平排,例如:Bam HⅠ、Eco RⅠ、MspⅠ、Sau 3AⅠ等。氨基酸和碱基的缩写氨基酸缩写用3个字母表示时,仅第一个字母大写,其余小写,正体。碱基缩写为大写正体。 展开更多

关键词 限制性内切酶 Mspⅰ 氨基酸 斜体 拉丁文 正体 小写 碱基

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正体与斜体使用规则

20

《中国蚕业》 2020年第1期69-69,共1页

物种的学名属名、种名(包括亚种、变种)用拉丁文斜体,首字母大写,其余小写;属以上用拉丁文正体,首字母大写。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编码正体平排,例如:Bam HⅠ、Eco RⅠ、MspⅠ、Sau 3AⅠ等。氨基酸和碱基的缩写氨... 物种的学名属名、种名(包括亚种、变种)用拉丁文斜体,首字母大写,其余小写;属以上用拉丁文正体,首字母大写。限制性内切酶前3个字母用斜体,后面的字母和编码正体平排,例如:Bam HⅠ、Eco RⅠ、MspⅠ、Sau 3AⅠ等。氨基酸和碱基的缩写氨基酸缩写用3个字母表示时,仅第一个字母大写,其余小写,正体。碱基缩写为大写正体。 展开更多

关键词 限制性内切酶 Mspⅰ 氨基酸 斜体 拉丁文 正体 小写 碱基

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