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髓系特异性Spi1基因敲除小鼠的构建和基因鉴定被引量：1: 1; 作者吴旭铭王卉卉 +5 位作者朱向玲周园园王安琪张慧茹刘崇涂佳杰《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第3期413-417,共5页; 目的构建髓系特异性Spi1基因敲除小鼠并分析其基因型,为疾病病理机制及药物靶点研究提供动物模型基础。方法根据CRISPR/Cas9技术原理和Cre/LoxP系统,设计并构建sgRNA和Donor载体,以第2号外显子(Exon 2)所在的转录本为敲除区域,在Exon 2... 展开更多; 关键词髓系特异性 spi1 基因敲除 CRISPR/Cas9 Cre/LoxP PCR Western blot; 在线阅读下载PDF 职称材料

T细胞条件性敲除Spi1基因小鼠的繁育及鉴定被引量：1: 2; 作者王卉卉朱向玲 +5 位作者吴旭铭张慧茹周园园王安琪刘崇涂佳杰《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第4期595-599,共5页; 目的繁育T细胞条件性敲除Spi1基因的小鼠并对其进行鉴定,为进一步探索Spi1编码蛋白PU.1的作用提供研究基础。方法将Lck-Cre小鼠与Spi1^(flox/flox)小鼠进行杂交繁育,通过聚合酶链式反应(PCR)和琼脂糖凝胶电泳鉴定小鼠基因型,筛选出基因... 展开更多; 关键词 spi1 CRE/LOXP系统 CRISPR/Cas9技术 T细胞 PU.1 条件性敲除; 在线阅读下载PDF 职称材料

家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因表达及其与茧层率的相关性研究被引量：1: 3; 作者甘丽萍刘仁华 +3 位作者龙菲菲张进司马杨虎徐世清《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2014年第2期129-134,共6页; 为研究家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpins)基因Spi1、Spi2与家蚕雌雄丝物质合成差异的关系,应用RT-PCR、实时定量PCR以及Western blot等方法,比较了6个家蚕品种幼虫丝腺中丝氨酸蛋白酶抑制剂基因mRNA和蛋白水平的表达情况,并测定茧层率。... 展开更多; 关键词家蚕 spi1基因 Spi2基因 spi1蛋白茧层率; 在线阅读下载PDF 职称材料

人转录因子PU.1基因重组腺病毒载体的构建及鉴定被引量：3: 4; 作者刘晨阳颜文杰 +3 位作者王敏孙文逵苏欣施毅《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第5期465-469,共5页; 目的 PU.1是调控肺泡巨噬细胞天然免疫功能的重要转录因子之一。文中旨在构建并鉴定表达人转录因子PU.1基因的重组腺病毒载体。方法将PU.1基因SPI1和真核表达载体p IRES-EGFP进行双酶切、连接酶连接,PCR扩增目的片段SPI1-IRES-EGFP,与... 展开更多; 关键词 PU.1 spi1 重组腺病毒烟曲霉天然免疫; 在线阅读下载PDF 职称材料

转录因子PU.1在炎症性疾病中的研究进展: 5; 作者袁怡婷田艾《重庆医科大学学报》北大核心 2025年第10期1392-1398,共7页; 炎症性疾病是由免疫系统异常激活引起的一类疾病,包括自身免疫性疾病、慢性炎症性肠病、代谢性炎症疾病和牙周炎等。转录因子富含嘌呤盒1(purine rich box-1,PU.1)通过调控免疫细胞的发育、分化及炎症信号通路,在炎症性疾病的发生发展... 展开更多; 关键词富含嘌呤盒1 脾脏病灶病毒前病毒整合原癌基因-1 炎症性疾病免疫调控治疗靶点; 在线阅读下载PDF 职称材料

spy1的DNA改组提高普那霉素的产量被引量：7: 6; 作者金庆超沈娜 +1 位作者杨郁金志华《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期178-182,191,共6页; 目的研究普那霉素产生菌株选育的分子育种方法,提高普那霉素的产量。方法对来自6种始旋链霉菌基因组重排菌株的spy1调控基因,进行DNA改组研究,然后筛选阳性接合子进行发酵,HPLC法测定普那霉素两组分的产量变化。结果建立了普那霉素生物... 展开更多; 关键词始旋链霉菌普那霉素生物合成 DNA改组 spy1基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

亚抑菌浓度山奈酚对鼠伤寒沙门氏菌侵袭鸡肠道上皮细胞的抑制作用研究被引量：6: 7; 作者李连涛马畅 +6 位作者赵茜苏鑫尧张自杰李焓笑宋国宾王洁吴帅成《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期534-539,共6页; 为研究亚抑菌浓度山奈酚对鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)侵袭鸡肠道上皮细胞的作用,本研究首先通过二倍稀释法确定山奈酚的最小抑菌浓度(MIC)及其亚抑菌浓度,然后利用亚抑菌浓度山奈酚处理S.typhimurium后检测其SPI-1毒力基因表达水平... 展开更多; 关键词山奈酚鼠伤寒沙门氏菌鸡肠道上皮细胞 SPI.1毒力基因侵袭; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名髓系特异性Spi1基因敲除小鼠的构建和基因鉴定被引量：1: 1; 作者吴旭铭王卉卉朱向玲周园园王安琪张慧茹刘崇涂佳杰; 机构安徽医科大学临床药理研究所; 出处《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第3期413-417,共5页; 基金安徽省高校杰出青年科研项目(编号:2022AH020052)。; 文摘目的构建髓系特异性Spi1基因敲除小鼠并分析其基因型,为疾病病理机制及药物靶点研究提供动物模型基础。方法根据CRISPR/Cas9技术原理和Cre/LoxP系统,设计并构建sgRNA和Donor载体,以第2号外显子(Exon 2)所在的转录本为敲除区域,在Exon 2两侧各放置同向Loxp元件;将Cas9蛋白、sgRNA和Donor载体混合显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中,移植受精卵到假孕的C57BL/6J母鼠的子宫中,19~20 d后获得F0代。将阳性F0代小鼠与C57BL/6J小鼠交配,得到稳定的F1代Spi1^(flox/+)小鼠。F1代Spi1^(flox/+)小鼠雌雄自交得到Spi1^(flox/flox)小鼠。Spi1^(flox/flox)与Lyz2-Cre^(+)小鼠交配得到Spi1^(flox/+)/Lyz2-Cre^(+)小鼠,再将其与Spi1^(flox/flox)交配,得到的Spi1^(flox/flox)/Lyz2-Cre^(+)小鼠为髓系特异性Spi1基因敲除(KO)小鼠;Spi1^(flox/flox)/Lyz2-Cre^(-)小鼠作为野生型(WT)小鼠。提取WT和KO小鼠DNA,PCR扩增后琼脂糖凝胶电泳鉴定基因型;Western blot检测WT和KO小鼠免疫细胞中脾病灶形成病毒前病毒整合癌基因-1/富含嘌呤盒1(PU.1)表达。结果PCR鉴定结果显示,采用flox引物鉴定时仅扩增出220 bp条带的小鼠,即基因型为Spi1^(flox/flox)纯合子,采用Lyz2-Cre引物鉴定时扩增出700 bp的小鼠,基因型为Lyz2-Cre^(+);Western blot结果显示,与WT组比较,KO组小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDMs)和腹腔原位巨噬细胞(PM)中的PU.1不表达(P<0.01);T细胞中KO小鼠PU.1表达水平与WT小鼠差异无统计学意义;PCR和Western blot结果均表明髓系特异性Spi1 KO小鼠构建成功。结论成功构建和鉴定髓系特异性Spi1 KO小鼠,为进一步揭示PU.1在免疫调节中的潜在机制研究提供动物模型基础。; 关键词髓系特异性 spi1 基因敲除 CRISPR/Cas9 Cre/LoxP PCR Western blot; Keywords myeloid-specific spi1 gene knockout CRISPR/Cas9 Cre/Lox PCR Western blot; 分类号 Q291 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名T细胞条件性敲除Spi1基因小鼠的繁育及鉴定被引量：1: 2; 作者王卉卉朱向玲吴旭铭张慧茹周园园王安琪刘崇涂佳杰; 机构安徽医科大学临床药理研究所; 出处《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第4期595-599,共5页; 基金安徽省高校杰出青年科研项目(编号:2022AH020052)。; 文摘目的繁育T细胞条件性敲除Spi1基因的小鼠并对其进行鉴定,为进一步探索Spi1编码蛋白PU.1的作用提供研究基础。方法将Lck-Cre小鼠与Spi1^(flox/flox)小鼠进行杂交繁育,通过聚合酶链式反应(PCR)和琼脂糖凝胶电泳鉴定小鼠基因型,筛选出基因型为Lck-Cre×Spi1^(flox/flox)的小鼠即为T细胞条件性敲除Spi1基因的纯合子小鼠。使用磁珠分选脾脏T淋巴细胞,并应用Western blot、实时荧光定量PCR(qPCR)及流式细胞术检测PU.1在T细胞中的敲除效率。结果Lck-Cre×Spi1^(flox/flox)小鼠基因稳定遗传。与Spi1^(flox/flox)小鼠相比,Lck-Cre×Spi1^(flox/flox)小鼠脾脏T细胞中的PU.1表达水平显著降低。结论该研究应用Cre/LoxP系统和CRISPR/Cas9技术成功构建了T细胞条件性敲除Spi1基因小鼠,为后续研究PU.1在T细胞相关疾病中的具体作用提供了可靠的动物模型。; 关键词 spi1 CRE/LOXP系统 CRISPR/Cas9技术 T细胞 PU.1 条件性敲除; Keywords spi1 Cre/LoxP system CRISPR/Cas9 technology T cells PU.1 conditional knockout; 分类号 R-332 [医药卫生]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因表达及其与茧层率的相关性研究被引量：1: 3; 作者甘丽萍刘仁华龙菲菲张进司马杨虎徐世清; 机构重庆三峡学院生命科学与工程学院苏州大学现代丝绸国家工程实验室; 出处《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2014年第2期129-134,共6页; 基金重庆市教委项目(KJ131113) 重庆市科委项目(cstc2013jcyjA1202) +1 种基金重庆三峡学院项目(12ZD11 12ZZ31); 文摘为研究家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serpins)基因Spi1、Spi2与家蚕雌雄丝物质合成差异的关系,应用RT-PCR、实时定量PCR以及Western blot等方法,比较了6个家蚕品种幼虫丝腺中丝氨酸蛋白酶抑制剂基因mRNA和蛋白水平的表达情况,并测定茧层率。结果显示,Spi1基因在家蚕幼虫5龄中后期开始表达,其中在中部丝腺(MSG)和后部丝腺(PSG)中的表达量都比较高,Spi1基因在雄蚕的丝腺及中肠中持续表达时间均比雌蚕长,Spi2在MSG以及头部和体壁有表达;Western blot检测显示,SPI1蛋白在雄性中从4龄眠期就有表达,而雌性只在5龄末期有表达;Spi1基因在雄性丝腺中表达和蛋白质翻译的持续时间均比雌性长;品种之间,菁松雌雄茧层率均较高,与分子水平上其幼虫丝腺中Spi1基因表达量较高、SPI1蛋白的表达显著高于其他品种相一致。表明家蚕丝物质合成效率与Spi基因在mRNA和蛋白水平上的表达量有关。; 关键词家蚕 spi1基因 Spi2基因 spi1蛋白茧层率; Keywords Bombyx mori Spil gene Spi2 gene spi1 ratio of cocoon shell; 分类号 S881.21 [农业科学—特种经济动物饲养]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人转录因子PU.1基因重组腺病毒载体的构建及鉴定被引量：3: 4; 作者刘晨阳颜文杰王敏孙文逵苏欣施毅; 机构南方医科大学金陵医院(南京军区南京总医院)呼吸与危重症医学科上海市第一人民医院呼吸内科; 出处《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第5期465-469,共5页; 基金国家自然科学基金(81270064,81200063); 文摘目的 PU.1是调控肺泡巨噬细胞天然免疫功能的重要转录因子之一。文中旨在构建并鉴定表达人转录因子PU.1基因的重组腺病毒载体。方法将PU.1基因SPI1和真核表达载体p IRES-EGFP进行双酶切、连接酶连接,PCR扩增目的片段SPI1-IRES-EGFP,与中间质粒p DONR221和腺病毒骨架质粒p Ad/CMV/V5-DEST进行重组,线性化后转染人胚肾293(HEK293)细胞,获得重组腺病毒p AD-SPI1-IRES-EGFP,经过大量扩增后获得高浓度的重组腺病毒。TCID 50法测定重组腺病毒滴度,通过荧光显微镜和实时荧光定量PCR(Real-time q PCR)鉴定PU.1基因在HEK293细胞中的表达。结果菌落PCR、酶切电泳及测序结果均表明重组腺病毒携带有正确的PU.1基因,TCID 50法计算腺病毒滴度为8×1011IU/m L,荧光显微镜下可见明显的绿色荧光,Real-time q PCR转染重组腺病毒组PU.1 mRNA表达量是转染空病毒组的2189.93倍。结论成功构建并获得了高浓度的人转录因子PU.1基因重组腺病毒,为后续研究高表达PU.1在宿主抗烟曲霉感染中的天然免疫作用奠定了基础。; 关键词 PU.1 spi1 重组腺病毒烟曲霉天然免疫; Keywords PU.1 spi1 Recombinant adenovirus Aspergillus fumigatus Innate immunity; 分类号 R373 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名转录因子PU.1在炎症性疾病中的研究进展: 5; 作者袁怡婷田艾; 机构贵州医科大学口腔医学院贵州医科大学附属口腔医院修复种植科; 出处《重庆医科大学学报》北大核心 2025年第10期1392-1398,共7页; 基金国家自然科学基金资助项目(编号:82260193) 贵州省科学技术厅基金资助项目(编号:黔科台基础ZK[2024]一般251) 贵州省卫生健康委科学技术基金资助项目(编号:gzwkj2024-193)。; 文摘炎症性疾病是由免疫系统异常激活引起的一类疾病,包括自身免疫性疾病、慢性炎症性肠病、代谢性炎症疾病和牙周炎等。转录因子富含嘌呤盒1(purine rich box-1,PU.1)通过调控免疫细胞的发育、分化及炎症信号通路,在炎症性疾病的发生发展过程中发挥重要作用。近年来,研究逐渐揭示PU.1在炎症反应中的核心作用,并突出了其作为潜在治疗靶点的临床应用价值。本文系统综述PU.1的生物学特征与调控机制,探讨其在炎症反应及常见炎症性疾病中的作用,并分析其临床应用策略,以期为未来研究及临床应用提供参考。; 关键词富含嘌呤盒1 脾脏病灶病毒前病毒整合原癌基因-1 炎症性疾病免疫调控治疗靶点; Keywords purine rich box-1 spi1 gene inflammatory diseases immune regulation therapeutic target; 分类号 R392 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名spy1的DNA改组提高普那霉素的产量被引量：7: 6; 作者金庆超沈娜杨郁金志华; 机构生物与化学工程学院浙江大学宁波理工学院; 出处《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期178-182,191,共6页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.21376217 20976161) 宁波自然科学基金资助项目(No.2014A610209); 文摘目的研究普那霉素产生菌株选育的分子育种方法,提高普那霉素的产量。方法对来自6种始旋链霉菌基因组重排菌株的spy1调控基因,进行DNA改组研究,然后筛选阳性接合子进行发酵,HPLC法测定普那霉素两组分的产量变化。结果建立了普那霉素生物合成调控基因spy1的改组基因库,筛选出71个spy1改组接合子。接合子的普那霉素I产量都有了不同程度的提高,最高产量为出发菌株7.5倍,达60mg/L;普那霉素II产量则没有显著变化。结论利用DNA改组技术进行调控基因的分子进化可以有效提高抗生素的产量,为普那霉素分子育种研究中的首次尝试。; 关键词始旋链霉菌普那霉素生物合成 DNA改组 spy1基因; Keywords Streptomyces pristinaespiralis Pristinamycin biosynthesis DNA shuffling spyl; 分类号 R978.1 [医药卫生—药品]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名亚抑菌浓度山奈酚对鼠伤寒沙门氏菌侵袭鸡肠道上皮细胞的抑制作用研究被引量：6: 7; 作者李连涛马畅赵茜苏鑫尧张自杰李焓笑宋国宾王洁吴帅成; 机构临沂大学农林科学学院临沂市兰山区动物疫病预防控制中心; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期534-539,共6页; 基金国家自然科学基金(31372740) 山东省自然科学基金(ZR2016CP15) 临沂大学大学生创新创业训练计划(201610452178); 文摘为研究亚抑菌浓度山奈酚对鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)侵袭鸡肠道上皮细胞的作用,本研究首先通过二倍稀释法确定山奈酚的最小抑菌浓度(MIC)及其亚抑菌浓度,然后利用亚抑菌浓度山奈酚处理S.typhimurium后检测其SPI-1毒力基因表达水平及其对鸡肠道上皮细胞的侵袭变化规律和对雏鸡的致病性。结果显示,山奈酚对S.typhimurium CVCC542和SL1344株的MIC均>200μg/m L。亚抑菌浓度山奈酚能显著抑制S.typhimurium SPI-1毒力基因sip A、sop B、sop E2、hil A、hil C和hil D的基因表达,并显著降低S.typhimurium对鸡肠道上皮细胞侵袭数目,抑制S.typhimurium诱导鸡肠道上皮细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性升高和F-actin骨架重排,并延长雏鸡存活时间。上述结果表明,亚抑菌浓度山奈酚能够抑制S.typhimurium侵袭鸡肠道上皮细胞,并降低其对雏鸡的致病性,为山奈酚应用于防治S.typhimurium感染提供了实验依据。; 关键词山奈酚鼠伤寒沙门氏菌鸡肠道上皮细胞 SPI.1毒力基因侵袭; Keywords Kaempferol S.typhimuritun chicken intestinal epithelium cells SPI-1 virulence genes invasion; 分类号 S852.61 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	髓系特异性Spi1基因敲除小鼠的构建和基因鉴定	吴旭铭王卉卉朱向玲周园园王安琪张慧茹刘崇涂佳杰	《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心	2024	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	T细胞条件性敲除Spi1基因小鼠的繁育及鉴定	王卉卉朱向玲吴旭铭张慧茹周园园王安琪刘崇涂佳杰	《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心	2024	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂基因表达及其与茧层率的相关性研究	甘丽萍刘仁华龙菲菲张进司马杨虎徐世清	《河南农业科学》 CSCD 北大核心	2014	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	人转录因子PU.1基因重组腺病毒载体的构建及鉴定	刘晨阳颜文杰王敏孙文逵苏欣施毅	《医学研究生学报》 CAS 北大核心	2016	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	转录因子PU.1在炎症性疾病中的研究进展	袁怡婷田艾	《重庆医科大学学报》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	spy1的DNA改组提高普那霉素的产量	金庆超沈娜杨郁金志华	《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心	2015	7	在线阅读下载PDF 职称材料
7	亚抑菌浓度山奈酚对鼠伤寒沙门氏菌侵袭鸡肠道上皮细胞的抑制作用研究	李连涛马畅赵茜苏鑫尧张自杰李焓笑宋国宾王洁吴帅成	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2017	6	在线阅读下载PDF 职称材料