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小鼠天然可溶性VEGF受体基因sflt-1的克隆及鉴定被引量：1: 1; 作者糜军陈诗书《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期335-339,共5页; 可溶性血管内皮细胞生长因子受体 (sFlt 1 )与膜表面受体Flt 1竞争结合血管内皮细胞生长因子 (VEGF) ,并且与膜表面受体Flt 1及KDR形成异源二聚体 .完全阻断VEGF的生物学活性 ,除与sFlt 1的结合部位结构域有关外 ,还与整个蛋白质分子的... 展开更多; 关键词内皮细胞生长因子受体真核表达原核表达 SFLT-1 可溶性受体小鼠克隆鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠真核表达质粒pcDNA3.1(+)-FGFR1的构建及表达被引量：1: 2; 作者郭峻莉翁志宏郑少江《海南医学院学报》 CAS 2010年第10期1245-1247,1252,共4页; 目的:通过基因重组技术构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-FGFR1,并检测其在CHO细胞中的表达。方法:通过PCR扩增FGFR1的全段基因cDNA,应用基因工程技术将扩增的基因片段插入pcDNA3.1(+)真核表达质粒,经限制内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,... 展开更多; 关键词碱性成纤维细胞生长因子1型受体(FGFR1) 真核表达质粒基因工程; 在线阅读下载PDF 职称材料

GST-人可溶性成纤维细胞生长因子受体1融合蛋白在酵母细胞中的表达及活性测定: 3; 作者孙陆果马克威于永利《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期233-235,共3页; 目的：表达重组人可溶性成纤维细胞生长因子受体１（ｓｏｌｕｂｌｅ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　１，ｓＦＧＦＲ１），研究其对成纤维细胞生长因子（ＦＧＦ）生物学活性的拮抗作用。方法：... 展开更多; 关键词可溶性成纤维细胞生长因子受体-1 酵母表达系统表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

可溶性VEGF受体Flt-1的基因克隆及其活性产物在原核中的表达被引量：5: 4; 作者安平董志伟寿成超《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第1期62-66,共5页; 可溶性血管内皮细胞生长因子受体 ( Flt- 1 )具有受体拮抗剂作用 ,可竞争结合血管内皮细胞生长因子 ,( VEGF)并与其膜表面受体 Flt- 1及 KDR形成异源二聚体 ,最终阻断 VEGF的生物学活性 .利用 RT- PCR技术从人脐静脉内皮细胞扩增出 Flt... 展开更多; 关键词 FLT-1 原核表达结合活性 VEGF受体阻断剂; 在线阅读下载PDF 职称材料

VEGF受体KDR克隆及其对内皮细胞增殖和血管新生的影响被引量：3: 5; 作者周彩存谈立松 +3 位作者唐亮张颉粟波康健《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2001年第3期173-177,共5页; 目的 :克隆VEGF受体KDR基因膜外 5 7区 ,探讨其生物学活性。方法 :提取脐静脉血管内皮细胞总RNA ,克隆KDR基因膜外部分 5 7区 ,并使之在QIA表达系统进行表达 ;镍柱亲和层析纯化、复性、生物学活性鉴定。结果 :该系统能表达KDR基因片... 展开更多; 关键词血管内皮细胞生长因子可溶性受体 KDR 原核表达 Pichia酵母血管新生内皮细胞增殖肿瘤; 在线阅读下载PDF 职称材料

鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体胞外段原核表达载体的构建及表达鉴定被引量：2: 6; 作者郑少江黄凤迎 +2 位作者郑少萍王伟吴人亮《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期433-435,439,共4页; 目的构建重组原核表达载体以获得鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR-1)胞外段活性蛋白,为进一步研制FGFR-1蛋白质肿瘤疫苗打下基础。方法利用RT-PCR技术,从鸡胚肝中扩增出鸡的FGFR-1胞外段基因的cD-NA,用内切酶消化后插入原核表达质粒p... 展开更多; 关键词成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体肿瘤血管生成原核表达基因重组; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠天然可溶性VEGF受体基因sflt-1的克隆及鉴定被引量：1: 1; 作者糜军陈诗书; 机构上海第二医科大学生物化学与分子生物学实验室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期335-339,共5页; 基金国家自然科学基金资助 (No .3 9870 77)&&; 文摘可溶性血管内皮细胞生长因子受体 (sFlt 1 )与膜表面受体Flt 1竞争结合血管内皮细胞生长因子 (VEGF) ,并且与膜表面受体Flt 1及KDR形成异源二聚体 .完全阻断VEGF的生物学活性 ,除与sFlt 1的结合部位结构域有关外 ,还与整个蛋白质分子的高效分泌表达有关 .而蛋白质分子的高效分泌表达与蛋白质在细胞内高尔基体及内质网的加工密切相关 ,基因工程重组可溶性受体由于一些尚未明了的原因 ,往往不能高效表达 ,从而大大影响了其应用价值 .利用RT PCR技术从胚胎小鼠中扩增出天然可溶性VEGF受体基因sflt 1 ,克隆于pcDNA3载体中 ,在COS 7细胞中短暂表达 ;并克隆至pET42b载体中 ,经IPTG诱导后 ,可大量稳定表达与His Tag形成的融合蛋白 ,经HisNi柱纯化 ,可特异性结合VEGF .可溶性受体sFlt 1在肿瘤组织的高效表达可有效阻断新生血管的形成 ,从而为肿瘤的治疗探索一种方法 .; 关键词内皮细胞生长因子受体真核表达原核表达 SFLT-1 可溶性受体小鼠克隆鉴定; Keywords vascular endothelial growth factor,eukaryotic expression,prokaryotic expression,soluble receptor, sflt\|1; 分类号 R394.8 [医药卫生—医学遗传学] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠真核表达质粒pcDNA3.1(+)-FGFR1的构建及表达被引量：1: 2; 作者郭峻莉翁志宏郑少江; 机构海南医学院海南省热带病重点实验室华中科技大学同济医学院附属协和医院传染科; 出处《海南医学院学报》 CAS 2010年第10期1245-1247,1252,共4页; 基金国家自然科学基金(30660055 81060184) +3 种基金海南省自然科学基金(30864 310043)~~; 文摘目的:通过基因重组技术构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-FGFR1,并检测其在CHO细胞中的表达。方法:通过PCR扩增FGFR1的全段基因cDNA,应用基因工程技术将扩增的基因片段插入pcDNA3.1(+)真核表达质粒,经限制内切酶酶切分析及测序鉴定正确后,用脂质体包裹转染CHO细胞,Western blot检测FGFR1目的蛋白的表达。结果:经酶切和测序鉴定证实本实验构建的重组表达质粒正确,该质粒在体外转染CHO细胞后可表达FGFR1目的蛋白。结论:成功构建的pcDNA3.1(+)-FGFR1重组质粒能在体外表达FGFR1目的蛋白。; 关键词碱性成纤维细胞生长因子1型受体(FGFR1) 真核表达质粒基因工程; Keywords fibroblast growth factor receptor-1（FGFR1） Eukaryotic expression plasmid Genetic engineering; 分类号 Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名GST-人可溶性成纤维细胞生长因子受体1融合蛋白在酵母细胞中的表达及活性测定: 3; 作者孙陆果马克威于永利; 机构吉林大学基础医学院免疫学教研室吉林大学第一临床医院; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期233-235,共3页; 基金香港求是基金会资助(1995-1998年); 文摘目的：表达重组人可溶性成纤维细胞生长因子受体１（ｓｏｌｕｂｌｅ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　１，ｓＦＧＦＲ１），研究其对成纤维细胞生长因子（ＦＧＦ）生物学活性的拮抗作用。方法：采用逆转录－ＰＣＲ（ＰＴ－ＰＣＲ）技术自人肺成纤维细胞获得ｓＦＧＦＲ１　ｃＤＮＡ，测序确证后，将其克隆人酵母细胞表达载体ｐＹＥＸ４Ｔ－１；重组质粒转化入酵母细胞（ＤＹ１５０）中进行诱导表达，表达产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ鉴定。利用ＮＩＨ３Ｔ３细胞增殖抑制实验检测重组人ｓＦＧＦＲ１的生物学活性。结果：经ＣｕＳＯ４诱导，酵母细胞表达出重组谷胱苷肽转移酶（ＧＳＴ）－ｓＦＧＦＲ１融合蛋白，此蛋白在凝胶上表现为１条约６０ｋＤ的阳性区带，在Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ实验中可被ＧＳＴ特异性抗体识别。重组ＧＳＴ－ｓＦＧＦＲ１融合蛋白的粗提物在体外能够桔抗ＦＧＦ介导的促ＮＩＨ３Ｔ３细胞增殖的活性。结论：重组ＧＳＴ－ｓＦＧＦＲ１融合蛋白在酵母表达系统中得到有效表达，并具有很好的生物活性。; 关键词可溶性成纤维细胞生长因子受体-1 酵母表达系统表达; Keywords soluble fibroblast growth factor receptor 1 yeast expression expression; 分类号 R392－33 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名可溶性VEGF受体Flt-1的基因克隆及其活性产物在原核中的表达被引量：5: 4; 作者安平董志伟寿成超; 机构北京医科大学临床肿瘤学院中国医学科学院肿瘤研究所; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第1期62-66,共5页; 基金国家杰出青年科学基金!资助 ( 3 95 2 5 0 2 1); 文摘可溶性血管内皮细胞生长因子受体 ( Flt- 1 )具有受体拮抗剂作用 ,可竞争结合血管内皮细胞生长因子 ,( VEGF)并与其膜表面受体 Flt- 1及 KDR形成异源二聚体 ,最终阻断 VEGF的生物学活性 .利用 RT- PCR技术从人脐静脉内皮细胞扩增出 Flt- 1胞外～区 c DNA片段 ,通过基因重组将该片段克隆于谷胱甘肽转移酶 ( GST)融合蛋白表达载体 PGEX2 -T中 ,连接产物转化大肠杆菌XL1 - blue,经 IPTG诱导可获大量稳定表达的 Flt- 1 - GST融合蛋白 .该表达产物经变性复性处理后 ,可特异性结合 12 5 - VEGF.大量具有活性的可溶性 Flt- 1的获得有助于新的抗肿瘤血管形成方法的探索 .; 关键词 FLT-1 原核表达结合活性 VEGF受体阻断剂; Keywords Vascular endothelial cell growth factor soluble receptor Flt 1 Procaryotic expression Binding activity; 分类号 R730.5 [医药卫生—肿瘤] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名VEGF受体KDR克隆及其对内皮细胞增殖和血管新生的影响被引量：3: 5; 作者周彩存谈立松唐亮张颉粟波康健; 机构上海市肺科医院肿瘤科中国医科大学呼吸病研究所; 出处《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2001年第3期173-177,共5页; 基金上海市卫生局课题资金资助 ( 992 4); 文摘目的 :克隆VEGF受体KDR基因膜外 5 7区 ,探讨其生物学活性。方法 :提取脐静脉血管内皮细胞总RNA ,克隆KDR基因膜外部分 5 7区 ,并使之在QIA表达系统进行表达 ;镍柱亲和层析纯化、复性、生物学活性鉴定。结果 :该系统能表达KDR基因片段 ,表达量约占菌体蛋白总量的 5 %左右。经复性 ,可溶性蛋白具有与VEGF特异结合功能 ,并能抑制VEGF促使脐静脉内皮细胞增殖和鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的作用。结论 :KDR基因片段能在QIA表达系统中得到表达 ,复性后表达蛋白具有与VEGF结合的生物学功能。; 关键词血管内皮细胞生长因子可溶性受体 KDR 原核表达 Pichia酵母血管新生内皮细胞增殖肿瘤; Keywords vascular endothelial growth factor soluble receptor KDR procaryotic expression pichia yeast angiogenesis; 分类号 R73－36 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体胞外段原核表达载体的构建及表达鉴定被引量：2: 6; 作者郑少江黄凤迎郑少萍王伟吴人亮; 机构华中科技大学同济医学院基础医学院病理学系海南省热带病重点实验室海南医学院生理学教研室; 出处《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期433-435,439,共4页; 基金海南省自然科学基金资助项目(No.30321); 文摘目的构建重组原核表达载体以获得鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体(FGFR-1)胞外段活性蛋白,为进一步研制FGFR-1蛋白质肿瘤疫苗打下基础。方法利用RT-PCR技术,从鸡胚肝中扩增出鸡的FGFR-1胞外段基因的cD-NA,用内切酶消化后插入原核表达质粒pQE30中。经过琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定后,体外转化大肠埃希菌,用RT-PCR和免疫印迹方法鉴定是否能够正确表达,同时利用Ni-NTA琼脂柱层析法纯化复性重组蛋白。结果琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定证实PCR扩增的cDNA及构建的重组原核表达质粒pQE30-FGFR-1正确,并在大肠埃希菌中正确表达。经纯化后,进行SDS-PAGE电泳显示得到1条分子量约40 ku的蛋白质条带。结论成功构建鸡FGFR-1胞外段原核表达载体并获得重组活性蛋白。; 关键词成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体肿瘤血管生成原核表达基因重组; Keywords fibroblast growth factor receptor-1 tumor angiogenesis prokaryotic expression recombination; 分类号 Q782 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	小鼠天然可溶性VEGF受体基因sflt-1的克隆及鉴定	糜军陈诗书	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2001	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	小鼠真核表达质粒pcDNA3.1(+)-FGFR1的构建及表达	郭峻莉翁志宏郑少江	《海南医学院学报》 CAS	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	GST-人可溶性成纤维细胞生长因子受体1融合蛋白在酵母细胞中的表达及活性测定	孙陆果马克威于永利	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2002	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	可溶性VEGF受体Flt-1的基因克隆及其活性产物在原核中的表达	安平董志伟寿成超	《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD	2000	5	在线阅读下载PDF 职称材料
5	VEGF受体KDR克隆及其对内皮细胞增殖和血管新生的影响	周彩存谈立松唐亮张颉粟波康健	《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD	2001	3	在线阅读下载PDF 职称材料
6	鸡成纤维细胞生长因子Ⅰ型受体胞外段原核表达载体的构建及表达鉴定	郑少江黄凤迎郑少萍王伟吴人亮	《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2006	2	在线阅读下载PDF 职称材料