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西方蜜蜂Smo蛋白多克隆抗体的制备及免疫定位
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作者 宋畅 张宇 +1 位作者 郭丽娜 郭媛 《华北农学报》 北大核心 2025年第3期234-238,共5页
Hedgehog(Hh)信号通路在多种生物的生长和发育过程中发挥重要作用,Smoothened(Smo)蛋白作为Hh信号通路的关键受体,是Hh信号转导的核心调控因子。为探究Smo蛋白在蜜蜂体内的功能及其调控机制,并深入解析蜜蜂嗅觉信号转导的分子机制,利用... Hedgehog(Hh)信号通路在多种生物的生长和发育过程中发挥重要作用,Smoothened(Smo)蛋白作为Hh信号通路的关键受体,是Hh信号转导的核心调控因子。为探究Smo蛋白在蜜蜂体内的功能及其调控机制,并深入解析蜜蜂嗅觉信号转导的分子机制,利用大肠杆菌BL21表达系统表达并纯化了Smo蛋白,并以纯化的Smo蛋白为抗原免疫新西兰白兔,制备了高活性和高特异性的Smo蛋白多克隆抗体。进一步采用免疫荧光技术检测了Smo蛋白在西方蜜蜂触角中的表达定位。结果显示,经大肠杆菌诱导表达后,重组Smo蛋白在83.72 ku处富集出明显目标条带,与预测的分子质量大小一致,表明诱导表达成功;SDS-PAGE分析结果显示,经富集纯化后,获得了高浓度的重组Smo蛋白洗脱液,表明Smo蛋白的纯化效果良好。ELISA检测结果显示,制备的Smo蛋白抗体效价达到1∶364500,表现出较高的免疫活性。免疫荧光结果显示,Smo蛋白在西方蜜蜂触角中广泛表达,尤其在毛形感器中高表达。研究成功制备了高纯度、高效价且特异性强的Smo蛋白多克隆抗体,并明确了Smo蛋白在西方蜜蜂触角中的表达定位。 展开更多
关键词 西方蜜蜂 smoothened(smo)蛋白 多克隆抗体 免疫荧光 毛形感器
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Sonic hedgehog信号通路Smo蛋白及其下游转录因子Gli1蛋白在胃癌组织中的表达及其意义 被引量:14
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作者 戎祯祥 方驰华 +1 位作者 朱达坚 刘胜军 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1728-1731,共4页
目的探讨Sonichedgehog信号通路Smo蛋白及其下游转录因子Gli1蛋白在胃癌组织中的表达及其意义。方法收集85例胃癌组织及25例正常胃粘膜组织构建成组织芯片,应用免疫组化S-P法检测胃癌组织中Smo蛋白及Gli1蛋白的表达,并以正常胃粘膜组织... 目的探讨Sonichedgehog信号通路Smo蛋白及其下游转录因子Gli1蛋白在胃癌组织中的表达及其意义。方法收集85例胃癌组织及25例正常胃粘膜组织构建成组织芯片,应用免疫组化S-P法检测胃癌组织中Smo蛋白及Gli1蛋白的表达,并以正常胃粘膜组织作对照,分析两者的相关性。结果Smo和Gli1蛋白均在正常胃粘膜中不表达或弱表达;在胃乳头状腺癌、管状腺癌、低分化腺癌中,两者的表达强度和阳性表达率显著高于正常胃粘膜(P<0.05,并随着胃腺癌分化程度下降而上升;相关分析显示Smo和Gli1蛋白在胃癌组织中的表达呈正相关,相关系数为0.989,P<0.001。结论胃癌发生过程中的Sonichedgehog信号通路异常激活可能通过Smo蛋白高表达上调下游转录因子Gli1蛋白的表达参与部分胃腺癌的发生。 展开更多
关键词 胃肿瘤 组织芯片 免疫组化 Sonic HEDGEHOG信号通路 smo蛋白 GLI1蛋白
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G蛋白偶联受体在血管发育中的作用 被引量:3
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作者 李方方 李文庆 荆清 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期459-467,共9页
血管发育包括血管发生和血管生成两个阶段。近年研究表明,G蛋白偶联受体广泛参与调控成血管细胞的分化、迁移和接合,尖端细胞和柄细胞命运决定,内皮细胞的增殖、迁移和管腔形成等多个过程。文章以血管发育中的这些关键事件为主线,总结了... 血管发育包括血管发生和血管生成两个阶段。近年研究表明,G蛋白偶联受体广泛参与调控成血管细胞的分化、迁移和接合,尖端细胞和柄细胞命运决定,内皮细胞的增殖、迁移和管腔形成等多个过程。文章以血管发育中的这些关键事件为主线,总结了G蛋白偶联受体家族成员特别是视紫红质类和卷曲类受体在调节血管发育方面的最新研究进展。文章着重介绍了斑马鱼作为模式生物在血管发育生物学研究中的独特优势,并展望了利用斑马鱼深入开展G蛋白偶联受体相关研究的广阔前景。 展开更多
关键词 G蛋白偶联受体 血管发生 血管生成 视紫红质样受体 FRIZZLED smoothened 斑马鱼
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调控Smo活性对成年大鼠神经干细胞增殖和迁移的影响 被引量:4
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作者 仇欣霞 陈荷 +1 位作者 冯德龙 董为人 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1588-1592,共5页
目的探讨Shh信号通路中G蛋白偶联受体Smoothened(Smo)对成年大鼠神经干细胞(ANSCs)增殖、迁移的影响并阐明其作用机制。方法培养ANSCs,分别添加Smo的激动剂Purmorphamine及其抑制剂Cyclopamine,细胞增殖-毒性实验(CCK8)检测其对ANSCs增... 目的探讨Shh信号通路中G蛋白偶联受体Smoothened(Smo)对成年大鼠神经干细胞(ANSCs)增殖、迁移的影响并阐明其作用机制。方法培养ANSCs,分别添加Smo的激动剂Purmorphamine及其抑制剂Cyclopamine,细胞增殖-毒性实验(CCK8)检测其对ANSCs增殖的影响;细胞划痕实验检测其对ANSCs迁移能力的影响;实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测Sonic Hedgehog(Shh)信号通路的细胞表面Patched蛋白(Ptch1)、G蛋白偶联受体Smo、转录因子(Gli1)以及神经导向因子(Slit1)和脑源性神经营养因子(BDNF)表达量的变化。结果Smo激动剂PM对ANSCs的增殖有明显促进作用,48 h后PM组ANSCs的吸光度明显升高(P<0.01);PM可以促进ANSCs的迁移,48 h后的PM组ANSCs划痕面积显著减小(P<0.01);Smo抑制剂CPM对ANSCs的增殖和迁移均有显著的抑制作用;RT-PCR实验显示PM组细胞中的Ptch1、Smo、Gli1及Slit1、BDNF表达水平均明显增加(P<0.05)。结论调控Smo的活性可以促进或抑制成年神经干细胞的增殖和迁移,其作用机制可能与调节BDNF和Slit1的表达有关。 展开更多
关键词 Purmorphamine CYCLOPAMINE G蛋白偶联受体smoothened 成年神经干细胞
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治疗急性髓系白血病新药——格拉吉布(glasdegib)
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作者 陈本川 《医药导报》 CAS 北大核心 2019年第8期1100-1106,I0001,共8页
格拉吉布(glasdegib)由美国辉瑞制药有限公司首先研制,是靶向Smoothened(SMO)蛋白质受体Hedgehog信号通道的抑制药,与小剂量阿糖胞苷化疗药联用,用于治疗急性髓系白血病(AML)。Glasdegib于2017年6月28日被美国食品药品监督管理局(FDA)... 格拉吉布(glasdegib)由美国辉瑞制药有限公司首先研制,是靶向Smoothened(SMO)蛋白质受体Hedgehog信号通道的抑制药,与小剂量阿糖胞苷化疗药联用,用于治疗急性髓系白血病(AML)。Glasdegib于2017年6月28日被美国食品药品监督管理局(FDA)指定为治疗AML罕用药(Orphan),欧盟于2017年10月16日也授予英国辉瑞欧洲公司治疗AML罕用药的认定。辉瑞制药公司于2018年6月27日向美国FDA提出Glasdegib新药上市申请,美国FDA接受了该公司的口服glasdegib与小剂量阿糖胞苷联用治疗未经治疗的成人AML的新药申请,给予突破性治疗组合用药的认定及享受优先审评的待遇,并决定该处方药从2018年12月为使用者费用法案(PDUFA)的目标日期。FDA于2018年11月2日批准上市,制剂的商品名为Daurismo。该文对glasdegib的非临床和临床药理毒理学、临床研究、不良反应、适应证、剂量与用法、用药注意事项及知识产权状态和国内外研究进展等进行介绍。 展开更多
关键词 格拉吉布 Glasdegib smoothened蛋白 hedgehog信号通道抑制药 髓系白血病 急性
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