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TGF-β_1对甲状腺相关性眼病眼外肌成纤维细胞Smads基因表达的影响 被引量:1
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作者 陆燕 丁颖 +3 位作者 候培莉 孟虎 施宇华 黄振平 《国际眼科杂志》 CAS 2013年第10期1956-1959,共4页
目的:测定转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对甲状腺相关性眼病(thyroid-associated ophthalmopathy,TAO)患者纤维化眼外肌来源的成纤维细胞(orbital fibroblasts,OF)细胞Smad3,Smad4,Smad7基因表达的影响。方... 目的:测定转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对甲状腺相关性眼病(thyroid-associated ophthalmopathy,TAO)患者纤维化眼外肌来源的成纤维细胞(orbital fibroblasts,OF)细胞Smad3,Smad4,Smad7基因表达的影响。方法:采用实时荧光定量逆转录聚合酶连反应(real-time quantitative RT-PCR)观察5μg/L TGF-β1刺激OF在不同时间点(0h;15,30min;1,2,4h)表达Smad3 mRNA,Smad4 mRNA,Smad7 mRNA的变化。结果:5μg/L TGF-β1刺激OF 15min后,Smad3 mRNA的表达量已显著增加,为对照组的10.71倍,于1h达顶峰,为对照组的25.07倍(P<0.01),持续近2h,然后呈下降趋势,4h基本恢复正常;5μg/L TGF-β1刺激OF 15min后,Smad4 mRNA的表达量开始增加,为对照组的1.54倍,于1h达顶峰,为对照组的15.99倍(P<0.01),然后呈下降趋势,4h基本恢复正常;5μg/L TGF-β1刺激OF30min后,Smad7 mRNA的表达量明显开始增加,为对照组的3.21倍,持续至4h为对照组的14.66倍(P<0.01)。结论:TGF-β1可活化眼眶成纤维细胞Smads信号通路。在一定的时间范围内,诱导OF表达Smad3 mRNA和Smad4 mRNA呈先增加后下降的趋势,而Smad7 mRNA表达则呈现持续增加的趋势,说明TGF-β1/Smads这一纤维化相关的经典信号转导通路可能在TAO眼外肌纤维化机制中发挥了重要的作用。 展开更多
关键词 甲状腺相关性眼病 眼外肌纤维化 TGF-Β1 smads基因 成纤维细胞
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阿勒泰羊羔羊MSTN/Smad信号通路基因在不同组织的表达研究 被引量:1
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作者 吐来力江.哈木太 安外尔.热合曼 +2 位作者 马晓燕 依明.苏来曼 决肯.阿尼瓦什 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1728-1736,共9页
【目的】研究MSTN/Smad信号通路基因在阿勒泰羊2日龄羔羊不同组织中的表达程度的差异。掌握阿勒泰羊2日龄羔羊MSTN/Smad信号通路基因表达规律。【方法】采用荧光定量PCR技术(QRT-PCR)分析阿勒泰羊2日龄羔羊MSTN/Smad信号通路基因在不同... 【目的】研究MSTN/Smad信号通路基因在阿勒泰羊2日龄羔羊不同组织中的表达程度的差异。掌握阿勒泰羊2日龄羔羊MSTN/Smad信号通路基因表达规律。【方法】采用荧光定量PCR技术(QRT-PCR)分析阿勒泰羊2日龄羔羊MSTN/Smad信号通路基因在不同组织中的表达量。【结果】背最长肌MSTN mRNA表量显著高于股三头肌、股二头肌、半腱肌和半膜肌(P<0.05),各组织Smad2 mRNA表达量无显著差异(P>0.05)。Smad3 mRNA在股二头肌、半腱肌、背最长肌和脾中的表达量显著高于肺中的表达量(P<0.05)。Smad4 mRNA在心脏中的表达显著高于肺脏中的表达量(P<0.05)。TGFBR1 mRNA在心脏中的相对表达量为最高。TGFBR2 mRNA在心脏、脾脏、肾脏、肝脏中的表达量显著高于股二头肌肉中的表达量(P<0.05)。【结论】对阿勒泰羊2日龄羔羊MSTN/Smad信号通路基因在不同组织中的表达进行了初步的研究,这对今后阿勒泰羊MSTN基因表达规律及调控的研究具有重要意义。 展开更多
关键词 阿勒泰羊 MSTN基因 smads基因 TGFB受体基因 基因表达
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腺病毒载体介导Smad3基因在秦川牛前体脂肪细胞中的过表达和沉默 被引量:4
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作者 张乐 宁越 +2 位作者 李佩韦 王洪宝 昝林森 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1840-1850,共11页
旨在通过在秦川牛前体脂肪细胞中过表达和沉默Smad3基因,探讨其在秦川牛前体脂肪细胞分化过程中的生物学功能,从而为阐明TGF-β信号通路在牛脂肪组织生长发育过程中发挥的作用提供理论依据。本试验采用Ad5腺病毒改建的AdMaxTM重组腺病... 旨在通过在秦川牛前体脂肪细胞中过表达和沉默Smad3基因,探讨其在秦川牛前体脂肪细胞分化过程中的生物学功能,从而为阐明TGF-β信号通路在牛脂肪组织生长发育过程中发挥的作用提供理论依据。本试验采用Ad5腺病毒改建的AdMaxTM重组腺病毒包装系统成功重组获得了过表达腺病毒pDC316-EGFP-bSMAD3和干扰腺病毒pDC316-EGFP-ShRNA-bSMAD3-1405。感染牛前体脂肪细胞后,利用实时荧光定量检测Smad3基因及脂肪形成相关基因mRNA的表达。结果表明,将获得的具有较高滴度的过表达腺病毒pDC316-EGFP-bSMAD3感染秦川牛前体脂肪细胞3、6、9d后,分别较对照组Smad3基因表达量显著上调了1 031、1 286、633倍(P<0.001)。与对照组相比,高滴度干扰腺病毒pDC316-EGFP-ShRNA-bSMAD3-1405感染牛前体脂肪细胞3、6、9d后,Smad3基因的表达量分别下调了70%、55%、57%(P<0.01)。油红O染色和实时荧光定量结果均证明,Smad3基因抑制了前体脂肪细胞脂质积累并促使标志基因PPARγ、FABP4、C/EBPα和C/EBPβ的表达显著下调。综上所述,腺病毒载体介导体外表达载体可以成功的实现Smad3基因在秦川牛前体脂肪细胞中的过表达和沉默,并对秦川牛前体脂肪细胞的成脂分化具有一定的调控作用。 展开更多
关键词 秦川牛 smad3基因 前体脂肪细胞 腺病毒载体
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绵羊SMAD 4基因克隆、生物信息学分析及组织表达研究 被引量:1
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作者 王丹 张新玉 +5 位作者 付佳棋 贾琪 张双双 崔成都 张立春 孙福亮 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期4783-4792,共10页
【目的】克隆绵羊SMAD同源物4(SMAD4)基因并探究其在绵羊中的生物学功能,为研究SMAD 4基因在毛囊生长发育过程中的调控作用提供依据。【方法】以小尾寒羊皮肤组织cDNA为模板,PCR扩增SMAD 4基因CDS区并克隆测序,对其进行生物信息学分析;... 【目的】克隆绵羊SMAD同源物4(SMAD4)基因并探究其在绵羊中的生物学功能,为研究SMAD 4基因在毛囊生长发育过程中的调控作用提供依据。【方法】以小尾寒羊皮肤组织cDNA为模板,PCR扩增SMAD 4基因CDS区并克隆测序,对其进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR检测SMAD 4基因在小尾寒羊和新吉细毛羊心脏、肝脏、脾脏、肾脏、皮肤和肌肉中的表达量。【结果】试验成功克隆小尾寒羊SMAD 4基因CDS区,长1662 bp,编码553个氨基酸。系统进化树分析显示,绵羊SMAD 4基因核苷酸序列与山羊和牦牛的亲缘关系最近,与鸡的亲缘关系最远。生物信息学分析发现,SMAD4蛋白为不含信号肽的非跨膜蛋白,存在磷酸化和糖基化位点,属于亲水性蛋白,主要存在于细胞核中;SMAD4蛋白二级结构以无规则卷曲为主,与三级结构预测结果一致;蛋白互作分析显示,SMAD4蛋白与SMAD2、SMAD1、TGFBR1、TGFBR2、SMAD3等蛋白存在相互作用。实时荧光定量PCR结果显示,SMAD 4基因在绵羊中广泛表达;与新吉细毛羊相比,小尾寒羊心脏、脾脏和皮肤中SMAD 4基因表达量均显著上升(P<0.05),而肺脏和肌肉中SMAD 4基因表达量均显著下降(P<0.05)。【结论】试验成功克隆绵羊SMAD 4基因CDS区,该基因在绵羊各组织中均有表达,且在小尾寒羊和新吉细毛羊心脏、脾脏、皮肤、肺脏和肌肉中存在显著差异。试验结果为进一步探究绵羊SMAD 4基因调控毛囊发育提供理论依据。 展开更多
关键词 绵羊 smad 4基因 克隆 生物信息学 表达
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SMAD3基因在畜牧生产中的应用研究进展 被引量:1
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作者 谭斌 杨胜林 +4 位作者 杨汝才 王旭平 周美迪 周璇 杨世皓 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第1期185-193,共9页
SMAD3基因是SMADS基因家族成员之一,其编码的SMAD3蛋白是转化生长因子-β(TGF-β)超家族特异的细胞内信号转导分子,SMAD3基因通过TGF-β超家族参与疾病、免疫调节、生长发育、创伤愈合、软骨与骨骼的发育及维持等重要的生理过程,同时还... SMAD3基因是SMADS基因家族成员之一,其编码的SMAD3蛋白是转化生长因子-β(TGF-β)超家族特异的细胞内信号转导分子,SMAD3基因通过TGF-β超家族参与疾病、免疫调节、生长发育、创伤愈合、软骨与骨骼的发育及维持等重要的生理过程,同时还参与调节生殖细胞的增殖、分化、成熟、黏附、闭锁、凋亡和甾体激素的产生等,因此,了解SMAD3基因的结构与功能对动物生长发育、繁殖等研究具有重要意义。文章简述了SMAD3基因结构、功能、作用机理,分析了其在畜牧生产方面相关的应用研究进展发现,目前SMAD3基因在畜牧生产上的应用研究主要集中在参与调控脊椎动物(猪、牛、羊、鸡等)生长、发育、细胞免疫与凋亡、激素分泌及繁殖功能方面;SMAD3基因在调控动物机体疾病发生、生长发育、脂肪沉积及繁殖性能方面仍是国内外研究的热点,而该基因对畜禽疾病发生、生长和繁殖性能的精确分子调控机制仍有待进一步研究。 展开更多
关键词 smad3基因 转化生长因子-β(TGF-β) 作用机理 畜牧生产
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Smad3基因敲除小鼠肾Smad2和p-Smad2表达的变化
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作者 吴婧 徐健 董静霞 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期26-28,共3页
目的:观察Smad3基因敲除小鼠肾Smad2和p-Smad2表达的变化,探讨Smad3基因敲除小鼠肾是否有Smad2和p-Smad2代偿性增加。方法:4只Smad3基因敲除小鼠,10只野生型小鼠,应用免疫组织化学显色技术,检测Smad2和矿Smad2蛋白的定位和表达情... 目的:观察Smad3基因敲除小鼠肾Smad2和p-Smad2表达的变化,探讨Smad3基因敲除小鼠肾是否有Smad2和p-Smad2代偿性增加。方法:4只Smad3基因敲除小鼠,10只野生型小鼠,应用免疫组织化学显色技术,检测Smad2和矿Smad2蛋白的定位和表达情况,并用Modc病理图像分析系统对图像进行半定量分析。结果:野生型小鼠肾Smad2蛋白在肾远端小管和肾集合管细胞胞质中有广泛弱表达,p-Smad2蛋白在肾远端小管和肾集合管细胞胞质、胞核中也有弱表达,而Smad3基因敲除小鼠的Smad2和p-Smad2的表达比野生型小鼠有显著升高。结论:Smad3基因敲除能引起小鼠肾Smad2和p-Smad2表达的代偿性增加。 展开更多
关键词 smad2 p-smad2 smad3基因敲除 小鼠
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SMAD1基因对黔北麻羊卵巢颗粒细胞的影响及组织表达分析 被引量:8
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作者 敖叶 陈祥 +5 位作者 周志楠 张艳 洪磊 韦仕南 吴雨 唐文 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1607-1618,共12页
旨在验证SMAD1基因在转录组测序中单羔组对多羔组上调的结果,并探究SMAD1基因对黔北麻羊产羔性状的影响。本试验选取健康、体重45 kg、4岁左右的单、多羔黔北麻羊母羊为研究对象,采用qRT-PCR法检测SMAD1基因在单、多羔组黔北麻羊母羊子... 旨在验证SMAD1基因在转录组测序中单羔组对多羔组上调的结果,并探究SMAD1基因对黔北麻羊产羔性状的影响。本试验选取健康、体重45 kg、4岁左右的单、多羔黔北麻羊母羊为研究对象,采用qRT-PCR法检测SMAD1基因在单、多羔组黔北麻羊母羊子宫、输卵管、垂体、下丘脑及卵巢组织的表达水平,PCR扩增黔北麻羊SMAD1基因CDS区,构建pEGFP-N3-SAMD1重组质粒,利用脂质体转染法转染pEGFP-N3-SAMD1重组质粒进入卵巢颗粒细胞,分为超表达SMAD1试验组和pEGFP-N3空载体对照组,通过检测培养基中雌二醇和孕酮的浓度,利用CCK-8法和Annexin V-FITC法检测超表达SMAD1基因对卵巢颗粒细胞增殖、凋亡的影响,qRT-PCR检测超表达SMAD1基因对SAMD1、GnRHR、FSHR、BMP4、TIMP3基因mRNA表达的影响,来探究SMAD1基因对卵巢颗粒细胞的影响。结果表明,SMAD1基因在黔北麻羊各组织中均有表达。组间比较可知,卵巢和下丘脑组织单羔组极显著高表达于多羔组(P<0.01),输卵管组织中单羔组显著高表达于多羔组(P<0.05),其他组织未达到差异显著性(P>0.05)。本研究成功克隆了SMAD1基因CDS序列,未发现突变位点,并将pEGFP-N3-SAMD1重组质粒转染进入卵巢颗粒细胞,转染试验组培养基中E2含量在12、48 h显著高于对照组(P<0.05),P4含量在12 h显著高于对照组(P<0.05);超表达SMAD1基因对细胞增殖在24 h达到显著促进作用(P<0.05),48、72 h达到极显著促进作用(P<0.01),并且发现超表达SMAD1基因对卵巢颗粒细胞的凋亡具有抑制作用,与SMAD1基因对卵巢颗粒细胞增殖具有促进的结果是相符的。SMAD1基因超表达后繁殖相关基因GnRHR、FSHR、BMP4、TIMP3 mRNA的表达极显著降低(P<0.01)。综上表明,SMAD1基因超表达可提高E2、P4的生成,有助于黔北麻羊发情及妊娠的维持,促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,也极显著抑制繁殖相关基因mRNA的表达,而这些繁殖相关基因都能够调控卵泡数、卵泡的发育与形成以及排卵。因此,SMAD1基因能够抑制这些基因的表达,致使黔北麻羊单羔组受胎率低,进而降低产羔数,这为产羔性状相关基因的研究提供了理论基础,初步认为SMAD1基因可作为探究影响山羊产羔性状的候选基因。 展开更多
关键词 黔北麻羊 smad1基因 卵巢颗粒细胞 差异表达 产羔性状
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鸡Smad4基因克隆、生物信息学及组织表达分析 被引量:4
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作者 黄正洋 王钱保 +5 位作者 李春苗 黄华云 梁忠 穆春宇 黎寿丰 赵振华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第10期3522-3532,共11页
试验旨在克隆鸡Smad4基因,并对其进行生物信息学和组织表达分析。以苏禽3号优质黄羽肉鸡为试验对象,使用RACE技术扩增并克隆了鸡Smad4基因全长序列,对其进行生物信息学分析,构建系统进化树,并利用实时荧光定量PCR检测了Smad4基因在鸡各... 试验旨在克隆鸡Smad4基因,并对其进行生物信息学和组织表达分析。以苏禽3号优质黄羽肉鸡为试验对象,使用RACE技术扩增并克隆了鸡Smad4基因全长序列,对其进行生物信息学分析,构建系统进化树,并利用实时荧光定量PCR检测了Smad4基因在鸡各组织中的表达情况。结果显示,鸡Smad4基因全长序列包含17 bp的5′UTR、1842 bp的开放阅读框和466 bp的3′UTR,有11个外显子和10个内含子,mRNA序列全长2325 bp,可编码613个氨基酸。系统进化树显示,鸡Smad4与其他鸟类聚为一类。生物信息学分析显示,Smad4蛋白分子质量为65.43 ku,理论等电点为10.04,为亲水蛋白;含有2个保守结构域:MH1和MH2;二级结构由α-螺旋(18.11%)、延伸链(17.29%)和无规则卷曲(64.60%)组成。组织表达分析表明,Smad4基因在鸡的心脏、肝脏、空肠、卵巢中均有较高表达,而在胸肌中不表达。本试验成功获得了鸡Smad4基因全长序列,并初步研究了其组织表达规律,为进一步研究Smad4基因在鸡繁殖活动中的分子机制提供了理论依据。 展开更多
关键词 smad4基因 克隆 表达分析
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水牛Smad4基因的克隆及其真核表达载体的构建 被引量:3
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作者 鄢胜飞 张秀芳 +5 位作者 黄玥萌 郑海英 杨春艳 覃广胜 黄加祥 尚江华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第8期2369-2377,共9页
为了阐明Smad4基因在水牛卵巢颗粒细胞增殖及胚胎发育中的分子机制,试验采用RT-PCR扩增并克隆水牛Smad4基因,对其核苷酸序列和蛋白质序列进行生物信息学分析,构建Smad4基因的真核表达载体,通过脂质体转染法转染体外培养的牛卵巢颗粒细... 为了阐明Smad4基因在水牛卵巢颗粒细胞增殖及胚胎发育中的分子机制,试验采用RT-PCR扩增并克隆水牛Smad4基因,对其核苷酸序列和蛋白质序列进行生物信息学分析,构建Smad4基因的真核表达载体,通过脂质体转染法转染体外培养的牛卵巢颗粒细胞。结果表明,试验克隆得到水牛Smad4基因编码序列,编码区全长为1 662bp,编码553个氨基酸。通过BLAST对水牛Smad4基因的核苷酸序列进行同源性比对,结果显示,水牛Smad4基因与牛的同源性为99%,与绵羊、猪、马、人的同源性分别为98%、96%、96%和95%。系统进化树分析表明,Smad4基因在不同物种的进化过程中具有高度的保守性。试验成功构建了水牛Smad4基因的真核表达载体pEGFP-N1-Smad4,并在水牛卵巢颗粒细胞中表达出较强的绿色荧光蛋白Smad4-EGFP融合蛋白。本研究成功克隆了水牛Smad4基因,并成功构建了Smad4基因的真核表达载体,为进一步研究Smad4基因在水牛胚胎发育过程中的分子机制奠定基础。 展开更多
关键词 水牛 smad4基因 克隆 真核表达载体
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中间球海胆smad2/3基因克隆、组织表达及其脂多糖刺激响应 被引量:6
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作者 柳林 张宝警 +5 位作者 李莹莹 姜惠婷 刘丽 刘印 常亚青 湛垚垚 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期345-354,共10页
为明确中间球海胆Strongylocentrotus intermedius smad2/3基因(命名为Si-smad2/3)信息,初步研究了该基因的序列特征、组织表达模式及脂多糖对其表达的影响,采用RACE技术克隆获得了成体中间球海胆Si-smad2/3基因的全长cDNA序列。结果表... 为明确中间球海胆Strongylocentrotus intermedius smad2/3基因(命名为Si-smad2/3)信息,初步研究了该基因的序列特征、组织表达模式及脂多糖对其表达的影响,采用RACE技术克隆获得了成体中间球海胆Si-smad2/3基因的全长cDNA序列。结果表明:Si-smad2/3基因的cDNA全长为2146 bp,共编码446个氨基酸;生物信息学分析发现,Si-smad2/3基因所编码的蛋白相对分子质量为50 300,等电点为6.93,属于亲水性非跨膜蛋白;通过与9种已公布物种的smad2/3蛋白氨基酸序列进行多重序列比对和系统进化分析发现,中间球海胆Si-smad2/3蛋白的氨基酸序列与其他真核生物smad2/3蛋白序列具有较高的相似性,与紫球海胆Strongylocentrotus purpuratus smad2/3蛋白的一致性高达96%,符合中间球海胆的分类和进化地位;实时定量PCR(qRT-PCR)检测结果显示,Si-smad2/3基因在中间球海胆不同组织中均有表达,其相对表达量从高到低为体腔细胞>管足>性腺>围口膜>肠>齿间肌;利用脂多糖(LPS,0.1 mg/mL)对中间球海胆进行免疫刺激发现,与对照组相比,LPS刺激后Si-smad2/3基因在中间球海胆体腔细胞、管足和围口膜中均呈先升高后降低的表达趋势,其中,Si-smad2/3基因在中间球海胆体腔细胞中的相对表达量在LPS刺激9 h时达到峰值,管足中表达量在LPS刺激6 h时达到峰值,而围口膜中的表达量在LPS刺激72 h时达到峰值。研究表明,Si-smad2/3可能参与中间球海胆的免疫应答过程且免疫响应具有组织特异性。 展开更多
关键词 中间球海胆 smad2/3基因 克隆 表达模式 生物功能
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猪miR-23a靶向调控Smad3基因表达的研究 被引量:1
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作者 邱梅玉 翟腾蛟 +3 位作者 黄涛 李涛 孙敬礼 孙晓梅 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第1期200-205,共6页
为了确定miR-23a是否靶向调控Smad3基因,试验利用NotⅠ和XhoⅠ酶构建包含Smad3-3′-UTR的野生型(psiCHECKTM-2-W-Smad3-3′-UTR)和突变型双荧光酶报告载体(psiCHECKTM-2-M-Smad3-3′-UTR),并在PK-15细胞中转染miR-23amimics、miR-23ainh... 为了确定miR-23a是否靶向调控Smad3基因,试验利用NotⅠ和XhoⅠ酶构建包含Smad3-3′-UTR的野生型(psiCHECKTM-2-W-Smad3-3′-UTR)和突变型双荧光酶报告载体(psiCHECKTM-2-M-Smad3-3′-UTR),并在PK-15细胞中转染miR-23amimics、miR-23ainhibitor及其阴性对照,采用双荧光酶检测试剂盒检测荧光素酶活性,用实时荧光定量PCR和Western blotting法分别检测Smad3基因的mRNA和蛋白表达水平。结果表明,将含Smad3-3′-UTR的野生型和突变型双荧光酶报告载体与miR-23amimic共转染PK-15细胞,野生型报告质粒表达的荧光素酶活性显著低于其阴性对照组(P<0.05);转染miR-23amimics能显著下调Smad3基因mRNA及其蛋白表达水平(P<0.05);而转染miR-23ainhibitor组与miR-23ainhibitor阴性对照组相比,Smad3基因蛋白表达差异不显著(P>0.05)。综合上述结果可知,猪miR-23a可靶向作用于Smad3基因。 展开更多
关键词 miR-23a smad3基因 表达调控
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BMP4和SMAD4基因在公绵羊繁殖相关组织的表达 被引量:2
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作者 采复拉.大木拉 田志龙 +1 位作者 段新华 储明星 《中国草食动物科学》 CAS 2019年第2期5-8,共4页
试验旨在探索骨形态发生蛋白4(Bone morphogenetic protein 4,BMP4)和SMAD家族蛋白4(SMAD family member 4,SMAD4)基因在公绵羊繁殖中的作用,以便深入研究公绵羊繁殖机制。采用荧光定量PCR技术检测BMP4和SMAD4基因在高繁殖力的小尾寒羊... 试验旨在探索骨形态发生蛋白4(Bone morphogenetic protein 4,BMP4)和SMAD家族蛋白4(SMAD family member 4,SMAD4)基因在公绵羊繁殖中的作用,以便深入研究公绵羊繁殖机制。采用荧光定量PCR技术检测BMP4和SMAD4基因在高繁殖力的小尾寒羊公羊(n=3)和低繁殖力苏尼特公羊(n=3)大脑、小脑、下丘脑、垂体、输精管、肾上腺、睾丸和附睾8种组织中的表达。结果表明:BMP4和SMAD4基因在小尾寒羊公羊和苏尼特羊公羊各种组织中均有表达。其中BMP4基因在睾丸中高表达,在输精管、肾上腺中中等表达,在其他组织中均呈痕量表达;SMAD4基因在睾丸、下丘脑、小脑、大脑中高表达,在其他组织中中等表达。BMP4基因在低繁殖力苏尼特羊公羊睾丸中表达量显著高于高繁殖力小尾寒羊公羊(P<0.05);SMAD4基因在低繁殖力苏尼特公羊8种组织中表达量均显著高于高繁殖力小尾寒羊公羊(P<0.05)。说明BMP4和SMAD4基因在公绵羊繁殖中起到一定程度的负调控作用,这为公羊高繁殖性状选育提供了参考依据。 展开更多
关键词 BMP4基因 smad4基因 公绵羊 组织表达
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吐鲁番黑羊MSTN/Smad信号通路基因表达的发育性变化 被引量:2
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作者 安外尔.热合曼 吐来力江.哈木太 +2 位作者 马晓燕 依明.苏来曼 决肯.阿尼瓦什 《中国草食动物科学》 CAS 2014年第3期12-14,共3页
为探讨MSTN/Smad信号通路基因对吐鲁番黑羊肌肉生长发育的影响,采用实时定量PCR法,分别对1~6月龄吐鲁番黑羊的腿肌和尾脂MSTN/Smad信号通路基因进行检测.结果表明:MSTN/Smad信号通路基因在腿肌和尾脂组织中均有表达,MSTN/Smad信号通... 为探讨MSTN/Smad信号通路基因对吐鲁番黑羊肌肉生长发育的影响,采用实时定量PCR法,分别对1~6月龄吐鲁番黑羊的腿肌和尾脂MSTN/Smad信号通路基因进行检测.结果表明:MSTN/Smad信号通路基因在腿肌和尾脂组织中均有表达,MSTN/Smad信号通路基因在吐鲁番黑羊不同生长阶段的腿肌和尾脂中的表达没有出现随月龄的增加而一直增加或下降的趋势. 展开更多
关键词 吐鲁番黑羊 MSTN smad信号通路基因 基因表达 实时荧光定量PCR
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TGF-β及其伙伴分子Smad4在胃癌组织中的表达 被引量:5
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作者 李乐平 靖昌庆 +2 位作者 刘洪俊 石玉龙 许晓群 《中国现代普通外科进展》 CAS 2007年第3期194-198,共5页
目的:探讨TGF-β及其伙伴分子Smad4在胃癌组织中的表达。方法:利用逆转录(RT)-PCR技术测定胃癌组织TGF-β mRNA和Smad4 mRNA水平,并分析两者与胃癌患者各项临床病理指标间的关系。结果:Smad4 mRNA在胃癌组织中的阳性表达率明显下降。TGF... 目的:探讨TGF-β及其伙伴分子Smad4在胃癌组织中的表达。方法:利用逆转录(RT)-PCR技术测定胃癌组织TGF-β mRNA和Smad4 mRNA水平,并分析两者与胃癌患者各项临床病理指标间的关系。结果:Smad4 mRNA在胃癌组织中的阳性表达率明显下降。TGF-β和Smad4均与胃癌组织的分化程度、肿瘤大小、浸润深度、淋巴转移和TNM分期有关。Smad4 mRNA在胃癌组织分化程度高、肿瘤<5cm、浸润深度浅、无淋巴转移、TNM分期较早的患者中阳性表达率高。TGF-β mRNA在胃癌组织中的阳性表达率明显升高。TGF-β mRNA在胃癌组织分化程度高、肿瘤<5cm、浸润深度浅、无淋巴转移、TNM分期较早的患者中阳性表达率低。胃癌组织中TGF-β和Smad4表达间呈负相关。结论:TGF-β和Smad4共同调节胃癌的发生、发展及其生物学行为。 展开更多
关键词 胃肿瘤 逆转录-聚合酶链反应 转化生长因子 β smad4基因
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TGF-β及其伙伴分子Smad4在大肠癌组织中的表达 被引量:1
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作者 李乐平 石强 +2 位作者 靖昌庆 林黎明 石玉龙 《山东医药》 CAS 北大核心 2007年第6期1-3,共3页
目的探讨转化生长因子-β(TGF-β)及其伙伴分子Smad4基因在大肠癌组织中的表达。方法利用RT-PCR技术测定大肠癌组织TGF-β mRNA和Smad4 mRNA水平,并分析二者与大肠癌患者临床病理的关系。结果Smad4 mRNA在大肠癌组织中的阳性表达率明显... 目的探讨转化生长因子-β(TGF-β)及其伙伴分子Smad4基因在大肠癌组织中的表达。方法利用RT-PCR技术测定大肠癌组织TGF-β mRNA和Smad4 mRNA水平,并分析二者与大肠癌患者临床病理的关系。结果Smad4 mRNA在大肠癌组织中的阳性表达率明显下降。Smad4与大肠癌组织的分化程度、肿瘤大小、浸润深度、淋巴转移和TNM分期有关。TGF-β与大肠癌组织的浸润深度、淋巴转移和TNM分期有关。Smad4 mRNA在大肠癌组织分化程度高、肿瘤<5cm、浸润浅、无淋巴转移、TNM分期较早患者的阳性表达率高。TGF-β mRNA在大肠癌组织中的阳性表达率明显升高。TGF-β mRNA在浸润浅、无淋巴转移、TNM分期较早的大肠癌患者中阳性表达率低。大肠癌组织中TGF-β与Smad4表达呈负相关。结论TGF-β和Smad4共同作用于大肠癌的发生、发展的各生物学行为。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 直肠肿瘤 逆转录-聚合酶链反应 转化生长因子-Β smad4基因
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抗纤灵对慢性肾功能衰竭模型Smad2-KO小鼠心脏CoⅠ、CoⅢ、AngⅡ、TNF-α、IL-6的影响 被引量:5
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作者 夏嘉 王颖 +3 位作者 刘铭洁 高雅婵 陈文浩 何立群 《西部中医药》 2021年第2期13-17,共5页
目的:观察抗纤灵对慢性肾功能衰竭(chronic renal failure,CRF)模型Smad2-KO小鼠心脏Ⅰ型胶原(collagen I,CoI)、Ⅲ型胶原(collagenⅢ,CoⅢ)、血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、... 目的:观察抗纤灵对慢性肾功能衰竭(chronic renal failure,CRF)模型Smad2-KO小鼠心脏Ⅰ型胶原(collagen I,CoI)、Ⅲ型胶原(collagenⅢ,CoⅢ)、血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)水平的影响,探讨抗纤灵治疗CRF的作用机制。方法:将18只假手术Smad2-KO小鼠随机分为假手术组(蒸馏水0.5 mL,灌胃)、抗纤灵假手术组(抗纤灵复方20 g/kg,0.5 mL灌胃)、缬沙坦假手术组(缬沙坦20 mg/kg,0.5 mL灌胃),每组6只。将24只CRF模型Smad2-KO小鼠随机分为模型组(蒸馏水0.5 mL,灌胃)、抗纤灵模型组(抗纤灵复方20 g/kg,0.5 mL灌胃)、缬沙坦模型组(缬沙坦20 mg/kg,0.5 mL灌胃),每组8只。灌胃8周后取材,Elisa法检测心脏AngⅡ的水平,Western blot法测心脏CoI、CoⅢ、TNF-α、IL-6的相对表达。结果:与假手术组比较,模型组的AngⅡ、CoⅠ、CoⅢ、TNF-α、IL-6均显著增高(P<0.01),缬沙坦假手术组的AngⅡ下降(P<0.05)。与模型组比较,抗纤灵模型组的AngⅡ有改善(P<0.05),CoI、CoⅢ、TNF-α、IL-6有显著改善(P<0.01)。缬沙坦模型组的CoI、CoⅢ、AngⅡ、TNF-α、IL-6均明显改善(P<0.01)。抗纤灵模型组与缬沙坦模型组组间比较,缬沙坦在改善AngⅡ方面优于抗纤灵组(P<0.05),其余指标两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:抗纤灵可改善CRF模型Smad2-KO小鼠心脏病变的作用机制可能与降低炎症因子的表达、调节RAS和减少心脏胶原的过度沉积有关。 展开更多
关键词 抗纤灵 smad2基因敲除 慢性肾衰 心脏 动物实验
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NR2F2基因调控猪PK15细胞增殖和凋亡的研究
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作者 张万锋 赵天枝 +7 位作者 李娇 尤紫薇 杨阳 蔡春波 高鹏飞 曹果清 郭晓红 李步高 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3242-3251,共10页
旨在探究NR2F2基因对猪PK15细胞增殖和凋亡的影响。本研究在猪PK15细胞中过表达NR2F2基因,通过qRT-PCR、Western blot、CCK-8、EdU、流式细胞术、划痕试验等方法检测了过表达NR2F2基因对细胞增殖的影响;采用CO-IP技术验证NR2F2与Smad4... 旨在探究NR2F2基因对猪PK15细胞增殖和凋亡的影响。本研究在猪PK15细胞中过表达NR2F2基因,通过qRT-PCR、Western blot、CCK-8、EdU、流式细胞术、划痕试验等方法检测了过表达NR2F2基因对细胞增殖的影响;采用CO-IP技术验证NR2F2与Smad4蛋白结合能力;用qRT-PCR方法检测了NR2F2基因对Smad 4基因表达以及下游基因Cyclin B、CDK1、CDK4、Cyclin D 1表达的影响;挽救试验过表达NR2F2基因且干扰Smad 4基因检测下游基因及增殖基因Ki67、PCNA的表达。结果发现,过表达NR2F2基因极显著上调了Ki 67基因的表达(P<0.01),显著上调了PCNA的表达(P<0.05),促进了细胞周期的进程,抑制了细胞凋亡,促进了细胞的增殖。CO-IP结果证明了NR2F2与Smad4蛋白物理性结合,且发现过表达NR2F2基因后,Smad 4基因表达显著上升(P<0.01),Smad 4基因调控的下游基因Cyclin B、CDK1、CDK4、Cyclin D 1表达显著升高(P<0.01);干扰NR2F2基因后,Smad 4基因表达显著下降(P<0.01),Smad 4基因调控的下游基因表达显著降低(P<0.01)。挽救试验发现,过表达NR2F2基因后,干扰Smad 4基因的表达,能显著降低Cyclin D1、Cyclin B、CDK 1以及Ki67、PCNA的表达(P<0.01,P<0.05)。本研究结果表明,过表达NR2F2基因后促进了细胞的增殖,抑制凋亡,且NR2F2蛋白能与Smad4蛋白结合并影响Smad 4基因的表达,进而影响下游基因的表达。 展开更多
关键词 NR2F2基因 smad 4基因 细胞增殖 PK15细胞
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新疆哈萨克族胃癌患者胃癌组织Smad4蛋白表达及意义
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作者 刘玺 陈卫刚 +2 位作者 刘晓燕 康雪 郑勇 《山东医药》 CAS 2013年第9期35-36,共2页
目的检测胃癌抑癌基因Smad4蛋白在哈萨克族胃癌患者发病中的作用。方法胃镜下留取哈萨克族胃癌及正常哈萨克族胃黏膜组织各30份,均经病理证实为胃癌组织。采用Western blot技术检测胃癌组织、正常胃黏膜组织中的Smad4蛋白表达。结果胃... 目的检测胃癌抑癌基因Smad4蛋白在哈萨克族胃癌患者发病中的作用。方法胃镜下留取哈萨克族胃癌及正常哈萨克族胃黏膜组织各30份,均经病理证实为胃癌组织。采用Western blot技术检测胃癌组织、正常胃黏膜组织中的Smad4蛋白表达。结果胃癌组织中Smad4蛋白表达明显低于正常胃黏膜组织(P<0.05)。结论新疆地区哈萨克族胃癌的发生可能与Smad4蛋白低表达有关。 展开更多
关键词 哈萨克族 胃癌 smad4基因
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抑制BMP/Smad信号通路对水牛卵巢颗粒细胞生长和类固醇激素合成的影响
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作者 徐媛媛 郑海英 +8 位作者 杨春艳 邓廷贤 黄晨茜 冯超 陆杏蓉 段安琴 莫霞 马小娅 尚江华 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期2354-2362,共9页
【目的】探究BMP/Smad信号通路对水牛卵巢颗粒细胞生长和类固醇激素合成的影响。【方法】利用脂质体转染的方法将合成的Smad 4基因的3对siRNAs(Smad4-siRNA1、Smad4-siRNA2和Smad4-siRNA3)和NC-siRNA(对照组)分别转染水牛颗粒细胞,通过... 【目的】探究BMP/Smad信号通路对水牛卵巢颗粒细胞生长和类固醇激素合成的影响。【方法】利用脂质体转染的方法将合成的Smad 4基因的3对siRNAs(Smad4-siRNA1、Smad4-siRNA2和Smad4-siRNA3)和NC-siRNA(对照组)分别转染水牛颗粒细胞,通过实时荧光定量PCR检测Smad 4基因的表达水平,比较不同siRNA的干扰效率。然后利用筛选的干扰效率最高的siRNA,转染水牛卵巢颗粒细胞,通过CCK-8法检测对照组和干扰组细胞的增殖情况,实时荧光定量PCR检测上述两组细胞凋亡相关基因Bax和Bcl2,细胞周期相关调控基因CyclinD2和CDK4,以及类固醇激素合成相关基因Cyp19A1和Cyp11A1的表达水平,并通过ELISA检测雌二醇(E 2)和孕酮(P 4)的含量。【结果】基因干扰试验结果表明,3对siRNAs对Smad4基因的表达均具有极显著的干扰作用(P<0.01),其中Smad4-siRNA1的干扰效率最高,达到了64%。CCK-8检测结果显示,与对照组相比,干扰组细胞的增殖效率显著降低(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,干扰组Bcl2、CyclinD2、CDK4和Cyp19A1基因的表达量均显著或极显著下调(P<0.05;P<0.01),而Cyp11A1基因的表达极显著上调(P<0.01),Bax基因的表达未受影响。ELISA检测结果表明,与对照组相比,干扰组雌二醇分泌量减少10.2%,孕酮的分泌量增加24.7%,差异均显著(P<0.05)。【结论】通过RNAi介导的Smad 4基因沉默对内源性BMP/Smad信号通路的中断不仅能够显著抑制水牛颗粒细胞的生长,而且能够诱导水牛颗粒细胞的凋亡,还会改变类固醇激素生成。BMP/Smad信号通路在调控水牛颗粒细胞生长和类固醇生成过程中具有重要的作用。 展开更多
关键词 水牛 BMP/smad信号通路 smad 4基因 颗粒细胞 RNA干扰 类固醇生成
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