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单纯疱疹病毒2型全长糖蛋白D抗原的原核表达及抗原性分析
被引量：
1
1
作者
周翠
曹春来
+1 位作者
樊建勇
杨慧兰
《实用医学杂志》
CAS
2008年第10期1668-1670,共3页
目的:构建单纯疱疹病毒2型(HSV-2)全长糖蛋白D(gD)基因原核表达质粒,研究其编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达,并鉴定重组蛋白的gD抗原性。方法:提取病毒DNA,PCR扩增出gD基因,克隆于原核表达载体pGEX-4T-1,并转化大肠杆菌BL21。PCR、双酶...
目的:构建单纯疱疹病毒2型(HSV-2)全长糖蛋白D(gD)基因原核表达质粒,研究其编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达,并鉴定重组蛋白的gD抗原性。方法:提取病毒DNA,PCR扩增出gD基因,克隆于原核表达载体pGEX-4T-1,并转化大肠杆菌BL21。PCR、双酶切及测序证实插入的gD基因序列正确后,IPTG诱导表达融合蛋白GST-gD,并进行免疫学鉴定。结果:获得了gDDNA。测序鉴定表明,该序列与Gen Bank中的序列一致,gD基因已正确插入到pGEX-4T-1中。重组融合蛋白表达载体pGEX-4T-gD经IPTG诱导后能在大肠杆菌中高效表达,Western Blotting证实,该蛋白具有天然gD抗原性。结论:成功构建了融合蛋白表达载体pGEX-4T-gD,在大肠杆菌中获得了有效表达,并证实融合蛋白具有gD免疫原性。为进一步研究gD蛋白的免疫学特性,制备gD亚单位疫苗和单克隆抗体奠定了基础。
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关键词
单纯疱疹病毒属
糖蛋白
d
重组融合蛋白
抗原性
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题名
单纯疱疹病毒2型全长糖蛋白D抗原的原核表达及抗原性分析
被引量：
1
1
作者
周翠
曹春来
樊建勇
杨慧兰
机构
华南理工大学生物科学与工程学院
广州军区广州总医院皮肤科
出处
《实用医学杂志》
CAS
2008年第10期1668-1670,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(编号:30371290)
文摘
目的:构建单纯疱疹病毒2型(HSV-2)全长糖蛋白D(gD)基因原核表达质粒,研究其编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达,并鉴定重组蛋白的gD抗原性。方法:提取病毒DNA,PCR扩增出gD基因,克隆于原核表达载体pGEX-4T-1,并转化大肠杆菌BL21。PCR、双酶切及测序证实插入的gD基因序列正确后,IPTG诱导表达融合蛋白GST-gD,并进行免疫学鉴定。结果:获得了gDDNA。测序鉴定表明,该序列与Gen Bank中的序列一致,gD基因已正确插入到pGEX-4T-1中。重组融合蛋白表达载体pGEX-4T-gD经IPTG诱导后能在大肠杆菌中高效表达,Western Blotting证实,该蛋白具有天然gD抗原性。结论:成功构建了融合蛋白表达载体pGEX-4T-gD,在大肠杆菌中获得了有效表达,并证实融合蛋白具有gD免疫原性。为进一步研究gD蛋白的免疫学特性,制备gD亚单位疫苗和单克隆抗体奠定了基础。
关键词
单纯疱疹病毒属
糖蛋白
d
重组融合蛋白
抗原性
Keywords
simplexvirus glycoprotein d recombinant fusion protein antigenicity
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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作者
出处
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被引量
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1
单纯疱疹病毒2型全长糖蛋白D抗原的原核表达及抗原性分析
周翠
曹春来
樊建勇
杨慧兰
《实用医学杂志》
CAS
2008
1
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