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人脑源性神经营养因子基因(hBDNF)在转基因家蚕丝腺中的特异表达 被引量:10
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作者 段建平 徐汉福 +3 位作者 马三垣 邓党军 王峰 夏庆友 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期248-252,共5页
家蚕丝腺具有强大合成与分泌蛋白质的能力,利用其作为生物反应器生产高附加值外源蛋白有着广阔的市场前景。以人血白细胞基因组DNA为模板,扩增并克隆了人脑源性神经营养因子基因(hBDNF)核苷酸序列。序列分析表明,克隆的hBDNF核苷酸序列... 家蚕丝腺具有强大合成与分泌蛋白质的能力,利用其作为生物反应器生产高附加值外源蛋白有着广阔的市场前景。以人血白细胞基因组DNA为模板,扩增并克隆了人脑源性神经营养因子基因(hBDNF)核苷酸序列。序列分析表明,克隆的hBDNF核苷酸序列与已发表序列(GenBank登录号:NM_170735)的同源性为100%。随后采用家蚕丝胶基因(Ser1)启动子,以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为筛选标记,将hBDNF构建到piggyBac转座表达载体并注射入家蚕早期胚胎,在G1代筛选获得了54头转基因阳性个体。经分子检测证实,hBDNF已整合到家蚕基因组并在丝腺有较高水平的特异表达。 展开更多
关键词 人脑源性神经营养因子 丝腺生物反应器 家蚕 表达
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转基因家蚕丝腺生物反应器体系的建立和应用 被引量:3
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作者 王峰 马三垣 +1 位作者 赵萍 夏庆友 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期757-763,共7页
数千年来,家蚕的主要经济价值在于生产蚕丝,以此形成的蚕丝产业为人类经济发展和社会进步做出了卓越贡献。随着现代生物技术的快速发展,特别是在家蚕基因组计划以及家蚕功能基因组研究平台建立的促进下,家蚕丝腺高效合成与分泌丝蛋白的... 数千年来,家蚕的主要经济价值在于生产蚕丝,以此形成的蚕丝产业为人类经济发展和社会进步做出了卓越贡献。随着现代生物技术的快速发展,特别是在家蚕基因组计划以及家蚕功能基因组研究平台建立的促进下,家蚕丝腺高效合成与分泌丝蛋白的这一奇特现象逐渐被了解和重视,以家蚕丝腺作为生物反应器大规模、低成本生产高附加值有用蛋白质的应用潜力也逐步得以彰显,并有可能成为促进传统蚕丝产业改造及拓宽产业领域的重要方向之一。本文综合分析了过去10年国内外在家蚕丝腺生物反应器领域的发展线索及取得的研究成果,并就该领域的现存问题与发展趋势进行了初步分析和讨论。 展开更多
关键词 家蚕 丝腺 表达系统 生物反应器
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家蚕生物反应器的研究进展及开发前景 被引量:4
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作者 王昌河 蒋平 +1 位作者 曹林 郭聪 《四川动物》 CSCD 2004年第4期368-373,共6页
目前 ,家蚕生物反应器的研究和开发主要是以BmNPV为载体 ,在家蚕体液中表达多种有用蛋白 ,其表达量比其它生化微生物高出许多倍 ;但是家蚕绢丝腺细胞表达外源蛋白比家蚕BmNPV表达系统有着更大的优越性。
关键词 家蚕丝 绢丝腺 开发前景 蚕体 外源基因 生物反应器 生化 表达系统 外源蛋白 腺细胞
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酵母和人剪接因子Prp5在家蚕中部丝腺的表达
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作者 李文萃 黄俊逸 +1 位作者 徐永镇 孙霞 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期530-536,共7页
剪接因子Prp5是一种三磷酸腺苷(ATP)水解酶/RNA解旋酶,在内含子的识别和预剪接体的组装过程中具有重要的调控作用。分别克隆了酵母(Saccharomyces cerevisiae)与人(Homo sapiens)Prp5蛋白的核心编码序列Sc Prp5-M和h Prp5-M,然后... 剪接因子Prp5是一种三磷酸腺苷(ATP)水解酶/RNA解旋酶,在内含子的识别和预剪接体的组装过程中具有重要的调控作用。分别克隆了酵母(Saccharomyces cerevisiae)与人(Homo sapiens)Prp5蛋白的核心编码序列Sc Prp5-M和h Prp5-M,然后在序列上游分别添加8×His标签序列,再与转基因质粒p Bac-Seri1-IE1ds Red(含seri1基因启动子和信号肽序列)进行重组,得到p Bac-Sc Prp5-M和p Bac-h Prp5-M转基因质粒。利用家蚕转基因技术将转基因质粒分别注射到蚕卵中,通过串联红色荧光标记筛选阳性转基因家蚕,在基因组水平检测到有Sc Prp5-M和h Prp5-M插入的家蚕个体,进一步的RNA和蛋白质检测也证明2种外源蛋白在家蚕中部丝腺中特异性表达,并且在5龄第4天和第5天的表达量较高。此外,在家蚕中部丝腺表达的2种重组蛋白均能随丝蛋白分泌到体外存在于茧层中,经裂解和纯化后,每1 g鲜茧茧层可分别获得6.25μg重组Sc Prp5-M蛋白和12.5μg重组h Prp5-M蛋白。利用家蚕丝腺生物反应器表达外源Prp5蛋白,为进一步研究Prp5蛋白的功能奠定了一定的实验基础。 展开更多
关键词 丝腺生物反应器 中部丝腺 转基因家蚕 外源蛋白 剪接因子 Prp5
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