目的观察甲基化抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对肺癌SPC-A1细胞增殖、细胞划痕和凋亡的影响,探讨抑癌基因分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzled related protein 1,SFRP1)和O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转...目的观察甲基化抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-Aza-CdR)对肺癌SPC-A1细胞增殖、细胞划痕和凋亡的影响,探讨抑癌基因分泌型卷曲相关蛋白1(secreted frizzled related protein 1,SFRP1)和O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA-methyltransferase,MGMT)基因启动子区DNA甲基化mRNA和蛋白在其中的表达和意义。方法CCK-8法检测不同浓度的5-Aza-CdR对人肺癌SPC-A1细胞增殖影响,划痕实验测定5-Aza-CdR对SPC-A1细胞迁移能力的影响,Hoechst 33258染色检测(0、3、10、30μmol·L^(-1))5-Aza-CdR处理肺癌SPC-A1细胞24h后细胞凋亡情况,RT-PCR、Western blot法检测SPC-A1细胞中SFRP1和MGMT的mRNA、蛋白表达。结果5-Aza-CdR可以浓度梯度的抑制肺癌SPC-A1细胞增殖,IC 50为21.2μmol·L^(-1);5-Aza-CdR(3、10、30μmol·L^(-1))作用48 h后,肺癌SPC-A1细胞划痕愈合分别为对照组的(92.4±2.6)%、(83.6±4.2)%、(76.7±4.5)%;5-Aza-CdR处理肺癌SPC-A1细胞后,出现典型的细胞凋亡形态学改变;不同浓度5-Aza-CdR(3、10、30μmol·L^(-1))处理SPC-A1细胞24 h后,SFRP1、MGMT mRNA和蛋白表达增加(P<0.05)。结论5-Aza-CdR可抑制肺癌SPC-A1细胞增殖,抑制肺癌细胞划痕修复和促进凋亡,可能与升高MGMT和SFRPl的甲基化表达有关。展开更多
目的探讨妊娠糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)患者血清胎盘蛋白-13(placental protein 13,PP-13)、分泌型卷曲相关蛋白5(secreted frizzled-related protein 5,SFRP5)水平及其与妊娠结局的关系。方法选取2018年1月至2019年1...目的探讨妊娠糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)患者血清胎盘蛋白-13(placental protein 13,PP-13)、分泌型卷曲相关蛋白5(secreted frizzled-related protein 5,SFRP5)水平及其与妊娠结局的关系。方法选取2018年1月至2019年12月中国人民解放军总医院第六医学中心接诊的GDM患者187例纳入研究组,选取同期正常产检的健康孕妇152例纳入对照组。比较两组孕妇血清PP-13、SFRP5水平及妊娠结局。根据妊娠结局将研究组孕妇分为妊娠结局不良组和妊娠结局良好组,分析PP-13、SFRP5对GDM孕妇妊娠结局的影响及其预测价值。结果研究组孕妇血清PP-13、SFRP5水平均显著低于对照组(均P<0.05),胎膜早破、产后出血、羊水异常、胎盘异常发生率均显著高于对照组(均P<0.05)。研究组54例(28.88%)孕妇妊娠结局不良。Logistic回归分析显示,稳态模型评估的胰岛素抵抗(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)指数、空腹血糖均是GDM孕妇不良妊娠结局的独立危险因素(均P<0.05),PP-13、SFRP5均是独立保护因素(均P<0.05)。受试者操作特征曲线显示,PP-13、SFRP5、空腹血糖、HOMA-IR指数预测GDM孕妇不良妊娠结局的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.791、0.822、0.824、0.644;4项联合的AUC为0.958,灵敏度为88.9%,特异度为88.0%。结论GDM孕妇血清PP-13、SFRP5水平呈低表达,可能参与GDM的发生,且影响妊娠结局;空腹血糖、HOMA-IR指数、PP-13、SFRP5联合检测有助于预测GDM孕妇不良妊娠结局。展开更多
目的:研究分泌型卷曲相关蛋白5(secreted frizzled related protein 5,SFRP5)对P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)介导的白血病多药耐药性的作用。方法:采用转基因方法构建过表达SFRP5的KG1a/SFRP5细胞,real-time PCR检测MDR1 mRNA表达,Wes...目的:研究分泌型卷曲相关蛋白5(secreted frizzled related protein 5,SFRP5)对P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)介导的白血病多药耐药性的作用。方法:采用转基因方法构建过表达SFRP5的KG1a/SFRP5细胞,real-time PCR检测MDR1 mRNA表达,Western blot检测细胞P-gp表达。免疫荧光显微镜观察细胞膜表面P-gp表达。流式细胞仪检测细胞内药物浓度。MTT方法检测细胞耐药性。结果:与KG1a细胞及表达绿色荧光蛋白的KG1a/eGFP细胞相比,KG1a/SFRP5细胞中MDR1 mRNA水平显著下降(P<0.01),总P-gp表达水平亦被下调,细胞膜表面P-gp荧光强度减弱,细胞内的罗丹明浓度显著升高(P<0.01),对ADR的IC50显著降低(P<0.01),细胞耐药性下降。结论:SFRP5蛋白表达可以下调MDR1转录及P-gp表达,增加细胞内药物浓度,逆转白血病多药耐药。展开更多
目的通过real-time PCR技术检测大鼠肌肉挫伤后组织中分泌型卷曲相关蛋白5(secreted frizzledrelated protein 5,SFRP5)m RNA的表达变化情况,分析其与挫伤时间及损伤类型的关系。方法 90只SD大鼠,随机分为肌肉挫伤后4、8、12、16、20、2...目的通过real-time PCR技术检测大鼠肌肉挫伤后组织中分泌型卷曲相关蛋白5(secreted frizzledrelated protein 5,SFRP5)m RNA的表达变化情况,分析其与挫伤时间及损伤类型的关系。方法 90只SD大鼠,随机分为肌肉挫伤后4、8、12、16、20、24、28、32、36、40、44、48 h组,切创后4、8 h组和对照组。于相应时间点取损伤处肌肉组织样本。提取组织中总RNA,反转录后用于SFRP5 m RNA表达量的检测。结果SFRP5 m RNA的表达量在损伤后很快明显下降,在20 h时降至最低,然后逐渐上升,但挫伤后48 h内其表达量均低于对照组;切创组SFRP5 m RNA的表达量均明显降低,在伤后4 h,切创组低于挫伤组,而在8 h时两组的表达差异无统计学意义。结论 SFRP5 m RNA在大鼠肌肉挫伤后一段时间内呈现规律性表达,可望作为推断骨骼肌损伤时间的指标之一。展开更多
分泌型卷曲相关蛋白4(secreted frizzled-related protein 4,SFRP4)是Wnt信号通路可溶解的调控子.通过高通量测序(Solexa)技术、实时定量PCR(RT-qPCR)技术对瘦肉型和脂肪型猪不同生长阶段脂肪组织、脂肪细胞中SFRP4表达规律进行研究;用...分泌型卷曲相关蛋白4(secreted frizzled-related protein 4,SFRP4)是Wnt信号通路可溶解的调控子.通过高通量测序(Solexa)技术、实时定量PCR(RT-qPCR)技术对瘦肉型和脂肪型猪不同生长阶段脂肪组织、脂肪细胞中SFRP4表达规律进行研究;用JNK信号通路特异性抑制剂SP600125处理猪原代前体脂肪细胞,研究抑制JNK信号通路对猪前体脂肪分化以及SFRP4 mRNA和蛋白表达的影响.结果显示,SFRP4在脂肪型猪脂肪组织表达量显著高于瘦肉型猪(P<0.01);不同组织检测结果发现,SFRP4广泛表达于各个组织,并高表达于脂肪组织;前体脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化过程中SFRP4表达量逐渐升高;SP600125促进前体脂肪细胞分化,引起PPARγ、FABP4、ATGL、Perilipin的显著升高(P<0.01),而SFRP4表达被显著抑制.本研究为调控脂肪细胞分化关键基因的筛选提供新的理论参考.展开更多
文摘目的探讨妊娠糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)患者血清胎盘蛋白-13(placental protein 13,PP-13)、分泌型卷曲相关蛋白5(secreted frizzled-related protein 5,SFRP5)水平及其与妊娠结局的关系。方法选取2018年1月至2019年12月中国人民解放军总医院第六医学中心接诊的GDM患者187例纳入研究组,选取同期正常产检的健康孕妇152例纳入对照组。比较两组孕妇血清PP-13、SFRP5水平及妊娠结局。根据妊娠结局将研究组孕妇分为妊娠结局不良组和妊娠结局良好组,分析PP-13、SFRP5对GDM孕妇妊娠结局的影响及其预测价值。结果研究组孕妇血清PP-13、SFRP5水平均显著低于对照组(均P<0.05),胎膜早破、产后出血、羊水异常、胎盘异常发生率均显著高于对照组(均P<0.05)。研究组54例(28.88%)孕妇妊娠结局不良。Logistic回归分析显示,稳态模型评估的胰岛素抵抗(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)指数、空腹血糖均是GDM孕妇不良妊娠结局的独立危险因素(均P<0.05),PP-13、SFRP5均是独立保护因素(均P<0.05)。受试者操作特征曲线显示,PP-13、SFRP5、空腹血糖、HOMA-IR指数预测GDM孕妇不良妊娠结局的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.791、0.822、0.824、0.644;4项联合的AUC为0.958,灵敏度为88.9%,特异度为88.0%。结论GDM孕妇血清PP-13、SFRP5水平呈低表达,可能参与GDM的发生,且影响妊娠结局;空腹血糖、HOMA-IR指数、PP-13、SFRP5联合检测有助于预测GDM孕妇不良妊娠结局。
文摘目的:研究分泌型卷曲相关蛋白5(secreted frizzled related protein 5,SFRP5)对P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)介导的白血病多药耐药性的作用。方法:采用转基因方法构建过表达SFRP5的KG1a/SFRP5细胞,real-time PCR检测MDR1 mRNA表达,Western blot检测细胞P-gp表达。免疫荧光显微镜观察细胞膜表面P-gp表达。流式细胞仪检测细胞内药物浓度。MTT方法检测细胞耐药性。结果:与KG1a细胞及表达绿色荧光蛋白的KG1a/eGFP细胞相比,KG1a/SFRP5细胞中MDR1 mRNA水平显著下降(P<0.01),总P-gp表达水平亦被下调,细胞膜表面P-gp荧光强度减弱,细胞内的罗丹明浓度显著升高(P<0.01),对ADR的IC50显著降低(P<0.01),细胞耐药性下降。结论:SFRP5蛋白表达可以下调MDR1转录及P-gp表达,增加细胞内药物浓度,逆转白血病多药耐药。
文摘目的通过real-time PCR技术检测大鼠肌肉挫伤后组织中分泌型卷曲相关蛋白5(secreted frizzledrelated protein 5,SFRP5)m RNA的表达变化情况,分析其与挫伤时间及损伤类型的关系。方法 90只SD大鼠,随机分为肌肉挫伤后4、8、12、16、20、24、28、32、36、40、44、48 h组,切创后4、8 h组和对照组。于相应时间点取损伤处肌肉组织样本。提取组织中总RNA,反转录后用于SFRP5 m RNA表达量的检测。结果SFRP5 m RNA的表达量在损伤后很快明显下降,在20 h时降至最低,然后逐渐上升,但挫伤后48 h内其表达量均低于对照组;切创组SFRP5 m RNA的表达量均明显降低,在伤后4 h,切创组低于挫伤组,而在8 h时两组的表达差异无统计学意义。结论 SFRP5 m RNA在大鼠肌肉挫伤后一段时间内呈现规律性表达,可望作为推断骨骼肌损伤时间的指标之一。
文摘分泌型卷曲相关蛋白4(secreted frizzled-related protein 4,SFRP4)是Wnt信号通路可溶解的调控子.通过高通量测序(Solexa)技术、实时定量PCR(RT-qPCR)技术对瘦肉型和脂肪型猪不同生长阶段脂肪组织、脂肪细胞中SFRP4表达规律进行研究;用JNK信号通路特异性抑制剂SP600125处理猪原代前体脂肪细胞,研究抑制JNK信号通路对猪前体脂肪分化以及SFRP4 mRNA和蛋白表达的影响.结果显示,SFRP4在脂肪型猪脂肪组织表达量显著高于瘦肉型猪(P<0.01);不同组织检测结果发现,SFRP4广泛表达于各个组织,并高表达于脂肪组织;前体脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化过程中SFRP4表达量逐渐升高;SP600125促进前体脂肪细胞分化,引起PPARγ、FABP4、ATGL、Perilipin的显著升高(P<0.01),而SFRP4表达被显著抑制.本研究为调控脂肪细胞分化关键基因的筛选提供新的理论参考.
