目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)促进单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达诱导巨噬细胞浸润加重急性缺血性卒中(AIS)的机制。方法:采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注小鼠模型。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑缺血严重程度,HE染色...目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)促进单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达诱导巨噬细胞浸润加重急性缺血性卒中(AIS)的机制。方法:采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注小鼠模型。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑缺血严重程度,HE染色法检测缺血脑组织神经细胞损伤状况和炎症细胞浸润程度;高效液相色谱法检测急性期小鼠脑组织Hcy表达;免疫组织化学染色、Western blot、real time RT-PCR法检测小鼠脑组织MCP-1表达。Transwell小室检测巨噬细胞迁移程度,TUNEL法检测Hcy对内皮细胞影响;利用MCP-1中和抗体观察对巨噬细胞迁移的影响。结果:与假手术组比较,模型组小鼠右侧大脑半球梗死明显,缺血脑组织损伤严重,神经细胞死亡并伴有大量炎症细胞浸润;Hcy水平显著升高,MCP-1蛋白和mRNA表达均明显增加。Hcy刺激小鼠脑血管内皮细胞后可诱导NF-κB(p65)入核,促进巨噬细胞迁移,促进内皮细胞凋亡,给予NF-κB(p65)抑制剂后MCP-1生成减少;MCP-1中和抗体明显抑制巨噬细胞迁移。结论:Hcy、MCP-1与脑缺血再灌注炎性反应相关,且Hcy可能通过NF-κB通路促进MCP-1表达,发挥诱导巨噬细胞浸润作用,加重脑缺血损伤。展开更多
目的·探究白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)在预测口腔颌面间隙感染(oral and maxillofacial space infection,OMSI)严重程度的作用,并探索影响IL-1β释放的关键机制、关键细胞亚群及OMSI患者免疫细胞间通信网络。方法·选...目的·探究白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)在预测口腔颌面间隙感染(oral and maxillofacial space infection,OMSI)严重程度的作用,并探索影响IL-1β释放的关键机制、关键细胞亚群及OMSI患者免疫细胞间通信网络。方法·选取2023年1月至2023年11月就诊于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔外科的OMSI患者共62例,包括中度感染20例、重度感染21例和极重度感染21例,采用Logistic回归分析影响极重度感染的危险因素,绘制受试者操作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)评估上述指标预测极重度感染的能力。分别选取2例中度、重度和极重度患者的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),结合2名健康对照(GSE224198)进行单细胞RNA测序(single-cell RNA sequencing,scRNA-seq)分析,明确促炎关键细胞亚群及关键基因随着感染程度加重的变化趋势,通过CellChat分析细胞间通信。通过实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)及Westernblotting验证PBMC中炎性小体激活水平。结果·与中度和重度感染患者相比,极重度感染患者降钙素原(procalcitonin,PCT)(P<0.05)和IL-1β(P<0.05)水平显著升高。Logistic回归显示IL-1β是极重度感染的独立危险因素(OR=1.814,95%CI 1.256~2.621,P=0.002)。联合IL-1β和PCT预测极重度感染的ROC曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.943。scRNA-seq显示,感染加重过程中单核细胞NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor family pyrin domain-containing 3,NLRP3)基因、IL1B基因表达持续上调,中间型单核细胞是表达IL1B基因的主要细胞亚群。IL-1Β-IL-1R信号通信、趋化因子配体(C-C motif chemokine ligand,CCL)和细胞间黏附分子(intercellular adhesion molecule,ICAM)信号通信在单核细胞中显著增强;T细胞与单核细胞间巨噬细胞迁移抑制因子(macrophage migration inhibitory factor,MIF)信号通信亦显著增强。随着感染的加重,外周血NLRP3和IL1B的mRNA水平逐渐升高,NLRP3、caspase-1 p20、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)、IL-1β蛋白表达水平持续升高。结论·联合入院IL-1β和PCT水平可有效预测OMSI极重度感染。感染患者PBMC中NLRP3炎性小体激活。IL-1β的升高与中间型单核细胞密切相关,同时单核细胞介导的IL-1Β-IL-1R、CCL、ICAM信号通信及T细胞介导的MIF信号通信共同促进炎症反应。展开更多
目的观察养阴益肺汤治疗气阴两虚型2型糖尿病(T2DM)伴血清角蛋白19片段(Cyfra21-1)升高患者的临床疗效。方法选择符合纳入标准的气阴两虚型T2DM伴血清Cyfra21-1升高患者60例,随机分为观察组与对照组各30例。对照组予盐酸二甲双胍缓释片...目的观察养阴益肺汤治疗气阴两虚型2型糖尿病(T2DM)伴血清角蛋白19片段(Cyfra21-1)升高患者的临床疗效。方法选择符合纳入标准的气阴两虚型T2DM伴血清Cyfra21-1升高患者60例,随机分为观察组与对照组各30例。对照组予盐酸二甲双胍缓释片及达格列净片口服降糖治疗,观察组在对照组治疗基础上再服中药养阴益肺汤,2组疗程均为12周。治疗前后分别观察2组患者的中医证候积分、空腹血糖(FBG)及餐后2 h血糖(2 h PG)、糖化血红蛋白(HbAlc)、血清Cyfra21-1及Cyfra21-1特异性T细胞反应、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬酸氨基转移酶(AST)、尿素(UR)、肌酐(CREA)等变化情况。结果治疗后,2组患者FBG、2 h PG、HbAlc、中医证候积分明显下降(P<0.05,P<0.01),观察组优于对照组(P<0.05,P<0.01);观察组TG、TC显著降低(P<0.01)、血清Cyfra21-1明显降低(P<0.01)、PBMCs中Cyfra21-1特异性T细胞明显增加(P<0.01),优于对照组(P<0.01);2组患者肝肾功能均无明显变化。结论养阴益肺汤联合基础降糖方案能显著改善气阴两虚型T2DM伴血清Cyfra21-1升高患者血糖及脂质代谢,增强Cyfra21-1特异性T细胞功能,提高机体免疫力,安全性高。展开更多
文摘目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)促进单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达诱导巨噬细胞浸润加重急性缺血性卒中(AIS)的机制。方法:采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注小鼠模型。采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测脑缺血严重程度,HE染色法检测缺血脑组织神经细胞损伤状况和炎症细胞浸润程度;高效液相色谱法检测急性期小鼠脑组织Hcy表达;免疫组织化学染色、Western blot、real time RT-PCR法检测小鼠脑组织MCP-1表达。Transwell小室检测巨噬细胞迁移程度,TUNEL法检测Hcy对内皮细胞影响;利用MCP-1中和抗体观察对巨噬细胞迁移的影响。结果:与假手术组比较,模型组小鼠右侧大脑半球梗死明显,缺血脑组织损伤严重,神经细胞死亡并伴有大量炎症细胞浸润;Hcy水平显著升高,MCP-1蛋白和mRNA表达均明显增加。Hcy刺激小鼠脑血管内皮细胞后可诱导NF-κB(p65)入核,促进巨噬细胞迁移,促进内皮细胞凋亡,给予NF-κB(p65)抑制剂后MCP-1生成减少;MCP-1中和抗体明显抑制巨噬细胞迁移。结论:Hcy、MCP-1与脑缺血再灌注炎性反应相关,且Hcy可能通过NF-κB通路促进MCP-1表达,发挥诱导巨噬细胞浸润作用,加重脑缺血损伤。
文摘目的观察养阴益肺汤治疗气阴两虚型2型糖尿病(T2DM)伴血清角蛋白19片段(Cyfra21-1)升高患者的临床疗效。方法选择符合纳入标准的气阴两虚型T2DM伴血清Cyfra21-1升高患者60例,随机分为观察组与对照组各30例。对照组予盐酸二甲双胍缓释片及达格列净片口服降糖治疗,观察组在对照组治疗基础上再服中药养阴益肺汤,2组疗程均为12周。治疗前后分别观察2组患者的中医证候积分、空腹血糖(FBG)及餐后2 h血糖(2 h PG)、糖化血红蛋白(HbAlc)、血清Cyfra21-1及Cyfra21-1特异性T细胞反应、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬酸氨基转移酶(AST)、尿素(UR)、肌酐(CREA)等变化情况。结果治疗后,2组患者FBG、2 h PG、HbAlc、中医证候积分明显下降(P<0.05,P<0.01),观察组优于对照组(P<0.05,P<0.01);观察组TG、TC显著降低(P<0.01)、血清Cyfra21-1明显降低(P<0.01)、PBMCs中Cyfra21-1特异性T细胞明显增加(P<0.01),优于对照组(P<0.01);2组患者肝肾功能均无明显变化。结论养阴益肺汤联合基础降糖方案能显著改善气阴两虚型T2DM伴血清Cyfra21-1升高患者血糖及脂质代谢,增强Cyfra21-1特异性T细胞功能,提高机体免疫力,安全性高。
