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猪瘟石门系强毒株SYBR Green-Ⅰ染料法实时荧光定量PCR方法的建立被引量：4: 1; 作者王伟邹月红 +6 位作者李雪松陈欣郎越坤田华斌符芳李曦李集临《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第3期104-107,共4页; 为了能快速、准确地诊断猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)石门系强毒,根据登录在GenBank上23株Shimen毒株的全基因组序列,利用DNASIS软件进行序列分析,设计1对特异的荧光定量引物。建立猪瘟石门系强毒株SYBR Green-Ⅰ染料法... 展开更多; 关键词猪瘟病毒 Shimen毒株 sybrgreen-ⅰ染料法实时荧光定量pcr; 在线阅读下载PDF 职称材料

Q热贝纳柯克斯体SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立: 2; 作者贾广乐王晓楠 +1 位作者廖娟红林祥梅《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第7期18-21,共4页; 根据Q热贝纳柯克斯体(Coxiella burnetii)插入序列IS1111序列设计引物,建立快速检测Q热的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。以梯度稀释的含有目的扩增片段的重组质粒作为标准品,进行定量PCR反应。结果显示,该方法能检测出102个拷贝数... 展开更多; 关键词 Q热贝纳柯克斯体荧光定量pcr SYBR Greenⅰ染料法; 在线阅读下载PDF 职称材料

SYBR Green实时荧光定量PCR检测大豆转基因成分被引量：18: 3; 作者王小花李建祥 +3 位作者王国卿李新莉邵景东傅春玲《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第8期171-176,共6页; 采用SYBR Green实时荧光定量PCR技术,建立了食品中大豆转基因成分的定量检测方法。通过设计特异引物,扩增内源参照基因lectin和转基因靶基因CP4EPSPS,建立两种基因的拷贝数-CT标准曲线,根据标准曲线方程计算样品中的转基因含量,并且通... 展开更多; 关键词实时定量pcr SYBR Green ⅰ荧光染料转基因大豆; 在线阅读下载PDF 职称材料

实时荧光定量PCR技术在转基因检测中的应用被引量：30: 4; 作者敖金霞高学军 +1 位作者仇有文郭士成《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期141-144,共4页; 实时荧光定量PCR技术是一种新型的核酸定性、定量检测、分析技术。随着转基因产品大规模商业化,转基因生物的环境安全和食用安全性问题引起了全球范围内广泛的争论和关注。实时监测、定量准确、灵敏度高、反应速度快、重复性好及PCR反... 展开更多; 关键词实时荧光定量pcr TaqMan探针法 SYBR Green I染料法转基因检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

兰州大尾羊H-FABP基因荧光定量PCR检测方法的研究被引量：4: 5; 作者徐红伟臧荣鑫 +4 位作者杨具田卢建雄蔡勇石来文马伟龙《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第6期84-88,共5页; 通过对兰州大尾羊尾部、大网膜、肝脏、肾周脂肪组织中的总RNA提取,反转录获得总cDNA样品,结合PCR技术,建立了SYBR荧光定量PCR法检测兰州大尾羊心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因mRNA在不同组织中相对表达量的试验方法,并进行批内、批... 展开更多; 关键词兰州大尾羊脂肪酸结合蛋白 SYBR Greenⅰ法实时荧光定量pcr; 在线阅读下载PDF 职称材料

SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测大鼠外伤性视神经损伤后P53、bax和caspase 3基因表达被引量：4: 6; 作者吕瀛娟赵秀兰 +2 位作者杨洁于金国颜华《眼科研究》 CSCD 北大核心 2009年第11期973-977,共5页; 目的应用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR法检测外伤性视神经损伤后P53、bax和caspase 3基因mRNA表达的变化。方法应用液压颅脑损伤仪建立大鼠外伤性视神经损伤动物模型,伤后1、3、5、7、9、14、28d处死,以Trizol法提取新鲜视网膜组织的总RNA,... 展开更多; 关键词 SYBR Green ⅰ法实时荧光定量pcr T/A克隆法外伤性视神经损伤 P53 BAX CASPASE 3; 在线阅读下载PDF 职称材料

大鼠bFGF基因荧光定量PCR检测方法的建立被引量：4: 7; 作者舒剑波张瑞 +1 位作者董茵郭刚《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2008年第1期1-4,共4页; 目的建立用荧光定量PCR方法检测大鼠bFGF基因mRNA水平。方法以Trizol一步法提取新鲜骨组织总RNA，以Oligo（dt）18为引物逆转录产生cDNA并进行扩增，以T-A克隆法将纯化的目的片断与PGEM—T Easy载体连接成重组质粒并转化E．coli DH5α... 展开更多; 关键词碱性成纤维生长因子 SYBR Green ⅰ法实时荧光定量pcr T-A克隆标准曲线; 在线阅读下载PDF 职称材料

3种qPCR检测柑桔黄龙病的灵敏度研究被引量：4: 8; 作者赵培娅卢占军 +4 位作者黄爱军高玉霞丁鹏刘映雪 Umbreen Shahzad 《中国南方果树》北大核心 2016年第2期33-37,共5页; 把柑桔黄龙病(Citrus Huanglongbing,HLB)阳性核酸样品进行梯度稀释后,分别采用HLBp、CQULAP两组TaqMan水解探针法和以rpl基因为目的片段的SYBR Green染料法进行HLB实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qPCR)检测,结果发现,HLB... 展开更多; 关键词柑桔黄龙病 TaqMan水解探针 SYBR Green染料法实时荧光定量pcr 灵敏度; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪瘟石门系强毒株SYBR Green-Ⅰ染料法实时荧光定量PCR方法的建立被引量：4: 1; 作者王伟邹月红李雪松陈欣郎越坤田华斌符芳李曦李集临; 机构哈尔滨师范大学生命科学与技术学院黑龙江大学中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第3期104-107,共4页; 基金黑龙江省科技攻关重点项目(GB05B501-1); 文摘为了能快速、准确地诊断猪瘟病毒(classical swine fever virus,CSFV)石门系强毒,根据登录在GenBank上23株Shimen毒株的全基因组序列,利用DNASIS软件进行序列分析,设计1对特异的荧光定量引物。建立猪瘟石门系强毒株SYBR Green-Ⅰ染料法实时荧光定量PCR快速检测方法。试验结果表明,本方法最低可检测到的Shimen病毒cDNA含量为100拷贝/μL,敏感度至少是普通PCR的100倍;猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、牛流行腹泻病毒Ⅰ型(BVDV-1)和猪瘟病毒C株均无特异性扩增,证明本方法具有很强的特异性;通过批内和批间重复试验,其变异系数<0.7%,结果显示本方法具有很好的重复性。本研究建立了猪瘟石门系强毒株SYBR Green-Ⅰ染料法实时荧光定量PCR快速检测方法,为猪瘟的预防与控制提供了有效的技术手段,并为猪瘟强毒试剂盒的研发奠定了基础。; 关键词猪瘟病毒 Shimen毒株 sybrgreen-ⅰ染料法实时荧光定量pcr; Keywords CSFV Shimen-strain SYBR Green-ⅰ real-time pcr; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Q热贝纳柯克斯体SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立: 2; 作者贾广乐王晓楠廖娟红林祥梅; 机构中国检验检疫科学研究院; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第7期18-21,共4页; 基金动物Q热检疫技术及标准研究(201110247); 文摘根据Q热贝纳柯克斯体(Coxiella burnetii)插入序列IS1111序列设计引物,建立快速检测Q热的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。以梯度稀释的含有目的扩增片段的重组质粒作为标准品,进行定量PCR反应。结果显示,该方法能检测出102个拷贝数的阳性质粒。标准曲线相关系数为0.991,扩增效率为98%。对结核分支杆菌、衣原体、布鲁氏杆菌及牛血液的核酸样品的特异性检测结果均为阴性。结果表明本研究建立的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR法灵敏度高且特异性好,可用于临床检测。; 关键词 Q热贝纳柯克斯体荧光定量pcr SYBR Greenⅰ染料法; Keywords Q fever Coxiella burnetii Real-time quantitative pcr SYBR Green I dye method; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名SYBR Green实时荧光定量PCR检测大豆转基因成分被引量：18: 3; 作者王小花李建祥王国卿李新莉邵景东傅春玲; 机构苏州大学放射医学与公共卫生学院苏州大学基础医学与生物科学学院张家港出入境检验检疫局; 出处《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第8期171-176,共6页; 基金江苏省高校自然科学基金项目(06KJD330159); 文摘采用SYBR Green实时荧光定量PCR技术,建立了食品中大豆转基因成分的定量检测方法。通过设计特异引物,扩增内源参照基因lectin和转基因靶基因CP4EPSPS,建立两种基因的拷贝数-CT标准曲线,根据标准曲线方程计算样品中的转基因含量,并且通过熔解曲线分析扩增反应特异性。结果表明,lectin和CP4EPSPS基因标准曲线线性关系好,R2值分别为0.9984和0.9953,方法的回收率为95%～110%,检测限为0.01%。本检测方法具有快速、灵敏、准确、特异、高通量等优点,可以作为食品中大豆转基因成分的定量检测方法。; 关键词实时定量pcr SYBR Green ⅰ荧光染料转基因大豆; Keywords real-time quantitative pcr fluorescence dye SYBR Green ⅰ transgenic soybean; 分类号 Q503 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名实时荧光定量PCR技术在转基因检测中的应用被引量：30: 4; 作者敖金霞高学军仇有文郭士成; 机构东北农业大学生命科学与生物技术研究中心东北农业大学生命科学学院; 出处《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期141-144,共4页; 基金东北农业大学创新团队项目(CXT004-3-2); 文摘实时荧光定量PCR技术是一种新型的核酸定性、定量检测、分析技术。随着转基因产品大规模商业化,转基因生物的环境安全和食用安全性问题引起了全球范围内广泛的争论和关注。实时监测、定量准确、灵敏度高、反应速度快、重复性好及PCR反应后不需电泳检测等优点,使RQ-PCR逐步成为转基因检测的重要工具。; 关键词实时荧光定量pcr TaqMan探针法 SYBR Green I染料法转基因检测; Keywords real-time quantitative pcr TaqMan probe method SYBR Green I method Genetically Modified Organisms; 分类号 TS207.3 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名兰州大尾羊H-FABP基因荧光定量PCR检测方法的研究被引量：4: 5; 作者徐红伟臧荣鑫杨具田卢建雄蔡勇石来文马伟龙; 机构西北民族大学生命科学与工程学院西北民族大学实验中心; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第6期84-88,共5页; 基金甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目(GNSW-2009-13) 西北民族大学研究生科研创新项目(ycx09061); 文摘通过对兰州大尾羊尾部、大网膜、肝脏、肾周脂肪组织中的总RNA提取,反转录获得总cDNA样品,结合PCR技术,建立了SYBR荧光定量PCR法检测兰州大尾羊心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因mRNA在不同组织中相对表达量的试验方法,并进行批内、批间重复性检验。结果表明,H-FABP和18S基因标准曲线回归方程分别为CtH-FABP=-3.24375x+38.34230和Ct18S=-3.33137x+33.4573,相关系数(r2)分别为0.9964和0.9992,扩增效率分别为103%和99%;批内、批间重复性测定的变异系数分别为小于1.8%和10%;说明该方法灵敏度高、特异性强、准确可靠、重复性好,是实时荧光定量PCR检测兰州大尾羊心脏型脂肪酸结合蛋白基因mRNA表达量的有效方法。; 关键词兰州大尾羊脂肪酸结合蛋白 SYBR Greenⅰ法实时荧光定量pcr; Keywords Lanzhou fat-tailed sheep fatty acid-binding proteins SYBR Green I method real time pcr; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测大鼠外伤性视神经损伤后P53、bax和caspase 3基因表达被引量：4: 6; 作者吕瀛娟赵秀兰杨洁于金国颜华; 机构天津医科大学总医院眼科天津医科大学眼科中心天津医科大学病理教研室天津医科大学免疫教研室; 出处《眼科研究》 CSCD 北大核心 2009年第11期973-977,共5页; 基金天津医科大学科研基金资助(2006ky19); 文摘目的应用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR法检测外伤性视神经损伤后P53、bax和caspase 3基因mRNA表达的变化。方法应用液压颅脑损伤仪建立大鼠外伤性视神经损伤动物模型,伤后1、3、5、7、9、14、28d处死,以Trizol法提取新鲜视网膜组织的总RNA,以Oligo(dt)18为引物逆转录合成cDNA并进行扩增,以T/A克隆法将纯化的目的片断与T/A克隆载体(pTZ57R/T)连接成重组质粒并转化入E.coli DH5α。采用碱裂解法提取重组质粒,经蓝白斑筛选、酶切、测序鉴定后,根据标准品建立标准曲线,由软件自动计算出待测样本中靶基因mRNA的含量,并以靶基因和内参GAPDH mRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标。结果由pTZ57R/T与目的基因所构建的标准曲线的线性关系良好、灵敏度高、特异性强、准确可靠。P53和bax均在视神经损伤后3d mRNA表达明显增加,5d时达到高峰,7d后开始下降;伤后5d caspase 3 mRNA表达明显增加,9d时达到高峰,14d后开始下降。三者表达水平与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论促凋亡基因P53、bax和caspase3在视神经损伤后视网膜神经节细胞(RGCs)的凋亡发生中起到重要作用。; 关键词 SYBR Green ⅰ法实时荧光定量pcr T/A克隆法外伤性视神经损伤 P53 BAX CASPASE 3; Keywords SYBR green I method fluorescence quantitative polymerase chain reaction T/A clone method traumatic optic nerve injury P53 bax caspase 3; 分类号 R779.1 [医药卫生—眼科]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名大鼠bFGF基因荧光定量PCR检测方法的建立被引量：4: 7; 作者舒剑波张瑞董茵郭刚; 机构天津医科大学代谢病医院内分泌研究所卫生部与天津市激素与发育重点实验室; 出处《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2008年第1期1-4,共4页; 文摘目的建立用荧光定量PCR方法检测大鼠bFGF基因mRNA水平。方法以Trizol一步法提取新鲜骨组织总RNA，以Oligo（dt）18为引物逆转录产生cDNA并进行扩增，以T-A克隆法将纯化的目的片断与PGEM—T Easy载体连接成重组质粒并转化E．coli DH5α。采用碱裂解法提取重组质粒，经蓝白筛选、酶切、测序鉴定后，根据标准品建立标准曲线，由软件自动计算出待测样本中靶基因mRNA准确含量，并以靶基因和内参GAPDH mRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标。结果由PGEM-T Easy—bFGF所构建的标准曲线线性关系良好（反应体系中含1×10^2～1×10^7拷贝大鼠bFGF基因分子时，扩增反应α值与拷贝数的对数成线性关系）、灵敏度高、特异性强、准确可靠。批内和批间重复性测定的变异系数分别为1．03％～4、59％以及2．24％～6．46％。结论成功建立了用实时荧光定量PCR检测大鼠bFGF基因表达量的方法。; 关键词碱性成纤维生长因子 SYBR Green ⅰ法实时荧光定量pcr T-A克隆标准曲线; Keywords Basic fibroblast growth factor SYBR Green I method： Fluorescence quantitative polymerase chain reaction T-A clone method Standard curve; 分类号 R31 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名3种qPCR检测柑桔黄龙病的灵敏度研究被引量：4: 8; 作者赵培娅卢占军黄爱军高玉霞丁鹏刘映雪 Umbreen Shahzad; 机构赣南师范大学生命与环境科学学院国家脐橙工程技术研究中心南京师范大学生命科学学院 College of Agriculture; 出处《中国南方果树》北大核心 2016年第2期33-37,共5页; 基金国家自然科学基金(31560602) 江西省科技计划重大项目(20152ACF60003) +5 种基金江西省自然科学基金(20131542040011); 文摘把柑桔黄龙病(Citrus Huanglongbing,HLB)阳性核酸样品进行梯度稀释后,分别采用HLBp、CQULAP两组TaqMan水解探针法和以rpl基因为目的片段的SYBR Green染料法进行HLB实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qPCR)检测,结果发现,HLBp探针法可以从稀释105倍的阳性叶片核酸样品(病菌拷贝数约为60个)中检测到病原菌,高于CQULAP探针法和SYBR Green染料法。将3种qPCR检测体系用于赣州安远县、寻乌县和赣县送检的60份田间样品检测,结果发现,HLBp探针法的阳性率为86.7%,CQULAP探针的阳性率为60.0%,SYBR Green染料法的阳性率为68.3%。; 关键词柑桔黄龙病 TaqMan水解探针 SYBR Green染料法实时荧光定量pcr 灵敏度; Keywords citrus Huanglongbing TaqMan probes SYBR Green method Quantitative Real-time pcr sensitivity; 分类号 S436.66 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	猪瘟石门系强毒株SYBR Green-Ⅰ染料法实时荧光定量PCR方法的建立	王伟邹月红李雪松陈欣郎越坤田华斌符芳李曦李集临	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2011	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	Q热贝纳柯克斯体SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立	贾广乐王晓楠廖娟红林祥梅	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	SYBR Green实时荧光定量PCR检测大豆转基因成分	王小花李建祥王国卿李新莉邵景东傅春玲	《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2009	18	在线阅读下载PDF 职称材料
4	实时荧光定量PCR技术在转基因检测中的应用	敖金霞高学军仇有文郭士成	《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	30	在线阅读下载PDF 职称材料
5	兰州大尾羊H-FABP基因荧光定量PCR检测方法的研究	徐红伟臧荣鑫杨具田卢建雄蔡勇石来文马伟龙	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2010	4	在线阅读下载PDF 职称材料
6	SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测大鼠外伤性视神经损伤后P53、bax和caspase 3基因表达	吕瀛娟赵秀兰杨洁于金国颜华	《眼科研究》 CSCD 北大核心	2009	4	在线阅读下载PDF 职称材料
7	大鼠bFGF基因荧光定量PCR检测方法的建立	舒剑波张瑞董茵郭刚	《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD	2008	4	在线阅读下载PDF 职称材料
8	3种qPCR检测柑桔黄龙病的灵敏度研究	赵培娅卢占军黄爱军高玉霞丁鹏刘映雪 Umbreen Shahzad	《中国南方果树》北大核心	2016	4	在线阅读下载PDF 职称材料