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基于CRISPR/Cas9基因编辑系统建立WIP 1基因g.37536832 C>A位点突变的ST细胞系: 1; 作者王楠杜伟伟 +7 位作者王婉洁王悦袁茂莎聂雨欣孙亚茹刘志国吴添文牟玉莲《中国畜牧兽医》北大核心 2025年第5期1966-1976,共11页; 【目的】利用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得野生型p53诱导磷酸酶1(wild-type p53-induced phosphatase 1,WIP1)基因与精子活力显著相关的位点g.37536832 C>A突变的猪睾丸(swine testis,ST)细胞系,为在细胞层面上进一步探讨WIP 1基因... 展开更多; 关键词 CRISPR/Cas9 WIP 1基因 st细胞系; 在线阅读下载PDF 职称材料

同工酶分析法鉴定ST细胞系的研究被引量：2: 2; 作者张敏陈小云 +3 位作者蒋桃珍王栋王磊王静文《中国兽药杂志》北大核心 2015年第12期6-9,共4页; 为鉴定ST细胞系的种属和纯净性,选用乳酸脱氢酶(LD)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)和核苷酸磷酸脱氢酶(NP)三种同工酶对ST细胞系进行了同工酶鉴定分析。结果显示:ST细胞系与猪睾丸原代细胞的三种同工酶谱带一致,不存在别的杂带,表明该ST... 展开更多; 关键词 st细胞系同工酶种属鉴定交叉污染; 在线阅读下载PDF 职称材料

ST细胞库的建立及其生物学特性鉴定被引量：3: 3; 作者平玲魏圆圆 +3 位作者王家敏沈武玲马忠仁乔自林《山西农业科学》 2013年第8期804-807,共4页; 从美国典型培养物保藏中心(ATCC)引进ST细胞系,扩大培养后液氮冻存建立了种子细胞库和工作细胞库;细胞复苏后对细胞的活力、形态、生长曲线、微生物污染、核型及荧光蛋白质粒转染表达等特性进行了研究。结果表明,ST细胞系呈成纤维型,生... 展开更多; 关键词 st细胞系细胞库生物学特性; 在线阅读下载PDF 职称材料

三种紫色作物花色苷对ST细胞单层生长的影响: 4; 作者王丹雷用东 +2 位作者马越张莉赵晓燕《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第23期104-107,共4页; 为揭示花色苷对猪睾丸细胞(ST)单层生长的影响,实验以黑加仑、黑豆皮、笃斯越桔三种作物花色苷为研究试材,处理ST细胞,光学显微镜观察不同花色苷处理后ST细胞生长情况,探索花色苷对细胞生长的最适浓度。结果表明:不同浓度的花色苷对ST... 展开更多; 关键词花色苷 st细胞系 MTT法; 在线阅读下载PDF 职称材料

ST悬浮细胞系的驯化与猪细小病毒的培养被引量：1: 5; 作者赵刚闫冰刘鑫莹《饲料博览》 2019年第10期28-30,共3页; 将贴壁的ST细胞驯化为可单细胞悬浮生长的细胞,并进行猪细小病毒大规模培养。采用逐步降低培养基中血清含量的方法获得可悬浮生长的ST-S细胞。结果表明,经悬浮驯化后的ST-S细胞呈现较好的单细胞悬浮生长状态,细胞呈圆球形,结团现象较少... 展开更多; 关键词 st悬浮细胞系猪细小病毒驯化培养; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪细小病毒HLJ-DN株分离鉴定被引量：1: 6; 作者刘秀芬姜艳平 +1 位作者唐丽杰李一经《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期74-78,共5页; 按照常规病毒分离方法,从黑龙江省某猪场怀孕母猪所产死胎的肝脏中分离到一株病毒。利用ST细胞进行培养,通过血细胞凝集试验、间接免疫荧光试验及电镜观察等对新分离毒株进行鉴定。结果表明,该病毒能在ST细胞上生长并引起明显拉网状细... 展开更多; 关键词猪细小病毒 st细胞分离鉴定 VP2基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

稳定表达T_7RNA聚合酶的猪睾丸细胞系的建立被引量：2: 7; 作者祁光宇刘萍 +7 位作者刘斌王凡武发菊杜平董金杰黄银君牟克斌刘学荣《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期26-31,共6页; 根据GenBank中登录的T7RNA聚合酶基因参考序列,设计合成了1对特异性引物扩增对T7RNA聚合酶基因进行扩增,将测序正确的T7RNA聚合酶基因和真核表达载体pIRES2-EGFP双酶切后进行连接构建pIRES2-EGFP-T7RNA RNA质粒。再将构建正确的pIRES2-E... 展开更多; 关键词 T7RNA聚合酶 EGFP和RED荧光基因猪睾丸细胞 st T7RNA细胞系; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪伪狂犬病病毒在不同细胞中增殖的研究被引量：15: 8; 作者彭丽英倪建平 +2 位作者张婉华何锡忠徐伟林《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期67-69,共3页; 研究了猪伪狂犬病病毒(PRV)在ST、PK-15、CEF、BHK-21细胞系上的增殖情况。结果表明:4种细胞对PRV均敏感,PRV在4种细胞上增殖产生的病毒毒价分别为10^(-8.87±0.04)TCID_(50)/mL、10^(-8.50±0.03)TCID_(50)/mL、10^(-7.68±... 展开更多; 关键词猪伪狂犬病病毒细胞病变病毒效价 st细胞系; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于CRISPR/Cas9基因编辑系统建立WIP 1基因g.37536832 C>A位点突变的ST细胞系: 1; 作者王楠杜伟伟王婉洁王悦袁茂莎聂雨欣孙亚茹刘志国吴添文牟玉莲; 机构中国农业科学院北京畜牧兽医研究所中国农业科学院农业基因组研究所新疆泰裕种猪有限公司佛山大学生命科学与工程学院; 出处《中国畜牧兽医》北大核心 2025年第5期1966-1976,共11页; 基金昌吉州丝绸之路经济带创新驱动发展试验区、乌昌石国家自主创新示范区科技发展计划项目(2023112311) 国家自然科学基金项目(32072690)。; 文摘【目的】利用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得野生型p53诱导磷酸酶1(wild-type p53-induced phosphatase 1,WIP1)基因与精子活力显著相关的位点g.37536832 C>A突变的猪睾丸(swine testis,ST)细胞系,为在细胞层面上进一步探讨WIP 1基因与公猪精液品质性状之间的关系奠定基础。【方法】利用CRISPOR在线网站在猪WIP 1基因g.37536832 C>A位点附近区域设计3条向导RNA(single guide RNA,sgRNA),并将其连接至pX458-GFP载体;通过T7E1酶切试验检测3条sgRNA活性,选择效率较高的sgRNA。构建Donor载体,并将其与sgRNA载体共同转染至ST细胞,采用流式细胞术将表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的阳性细胞进行富集和单克隆细胞筛选,并对筛选出的单克隆细胞进行基因型鉴定。【结果】质粒测序结果表明,成功将3条sgRNA连接至pX458-GFP载体上;T7E1酶切结果显示,转染pX458-GFP-sgRNA1和pX458-GFP-sgRNA2质粒组产生了切割,效率分别为24%和27%,而转染pX458-GFP-sgRNA3质粒组未检测到切割,因此选择pX458-GFP-sgRNA2质粒进行试验。成功构建Donor载体,并将pX458-GFP-sgRNA2和Donor载体共转染至ST细胞。基因型鉴定结果显示,获得的269株单克隆中有205株细胞发生了基因编辑,基因编辑效率为76%,其中9株为WIP 1基因g.37536832 C>A位点纯合突变的ST细胞,精确突变效率为3%。【结论】本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功获得了WIP 1基因g.37536832 C>A位点突变的ST细胞系,为深入研究WIP 1基因对公猪精液品质的影响提供了良好的细胞模型。; 关键词 CRISPR/Cas9 WIP 1基因 st细胞系; Keywords CRISPR/Cas9 WIP 1 gene st cell line; 分类号 S828.9 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名同工酶分析法鉴定ST细胞系的研究被引量：2: 2; 作者张敏陈小云蒋桃珍王栋王磊王静文; 机构中国兽医药品监察所; 出处《中国兽药杂志》北大核心 2015年第12期6-9,共4页; 文摘为鉴定ST细胞系的种属和纯净性,选用乳酸脱氢酶(LD)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)和核苷酸磷酸脱氢酶(NP)三种同工酶对ST细胞系进行了同工酶鉴定分析。结果显示:ST细胞系与猪睾丸原代细胞的三种同工酶谱带一致,不存在别的杂带,表明该ST细胞系与猪睾丸原代细胞同种,且不存在其他细胞的交叉污染。本研究可为其他动物源细胞的种属鉴定和交叉污染检测提供借鉴。; 关键词 st细胞系同工酶种属鉴定交叉污染; Keywords st cell line isoenzyme species identification cross contamination; 分类号 Q813.11 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名ST细胞库的建立及其生物学特性鉴定被引量：3: 3; 作者平玲魏圆圆王家敏沈武玲马忠仁乔自林; 机构西北民族大学生命科学与工程学院甘肃省动物细胞工程技术研究中心; 出处《山西农业科学》 2013年第8期804-807,共4页; 文摘从美国典型培养物保藏中心(ATCC)引进ST细胞系,扩大培养后液氮冻存建立了种子细胞库和工作细胞库;细胞复苏后对细胞的活力、形态、生长曲线、微生物污染、核型及荧光蛋白质粒转染表达等特性进行了研究。结果表明,ST细胞系呈成纤维型,生长状态良好;生长曲线呈S型;细菌、病毒、支原体检测均为阴性;染色体为19对;外源质粒在该细胞中能进行复制和表达。建立的细胞库,可为开展ST细胞及猪瘟疫苗的研究提供基础理论依据和细胞资源。; 关键词 st细胞系细胞库生物学特性; Keywords st cell line cell bank biological characteristics; 分类号 Q813.11 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名三种紫色作物花色苷对ST细胞单层生长的影响: 4; 作者王丹雷用东马越张莉赵晓燕; 机构北京市农林科学院蔬菜研究中心、农业部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室、农业部都市农业(北方)重点实验室石河子大学食品学院; 出处《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第23期104-107,共4页; 基金北京市自然科学基金(6111001) 现代农业产业技术体系建设专项资金(CARS-25); 文摘为揭示花色苷对猪睾丸细胞(ST)单层生长的影响,实验以黑加仑、黑豆皮、笃斯越桔三种作物花色苷为研究试材,处理ST细胞,光学显微镜观察不同花色苷处理后ST细胞生长情况,探索花色苷对细胞生长的最适浓度。结果表明:不同浓度的花色苷对ST细胞生长的影响不同,低浓度促进细胞生长,高浓度对细胞具有毒性。不同作物花色苷对ST细胞生长的影响也不同,笃斯越桔的最终安全浓度为100μg/mL,黑加仑、黑豆皮分别为30、40μg/mL。研究结果可进一步拓展花色苷功能性研究,为抑制病毒作用的细胞模型建立提供理论基础。; 关键词花色苷 st细胞系 MTT法; Keywords anthocyanin st cell line MTT-assay; 分类号 TS201.2 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名ST悬浮细胞系的驯化与猪细小病毒的培养被引量：1: 5; 作者赵刚闫冰刘鑫莹; 机构哈药集团生物疫苗有限公司; 出处《饲料博览》 2019年第10期28-30,共3页; 文摘将贴壁的ST细胞驯化为可单细胞悬浮生长的细胞,并进行猪细小病毒大规模培养。采用逐步降低培养基中血清含量的方法获得可悬浮生长的ST-S细胞。结果表明,经悬浮驯化后的ST-S细胞呈现较好的单细胞悬浮生长状态,细胞呈圆球形,结团现象较少,胞体大小基本一致,生长速度正常,最大细胞密度可以达到每毫升4.5×106个细胞。说明经驯化获得的可在无血清培养基中悬浮生长的ST细胞株,为大规模工业化生产ST细胞提供技术支持。; 关键词 st悬浮细胞系猪细小病毒驯化培养; Keywords st suspension cell line porcine parvovirus domestication culture; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪细小病毒HLJ-DN株分离鉴定被引量：1: 6; 作者刘秀芬姜艳平唐丽杰李一经; 机构东北农业大学动物医学学院湖北科技学院医药研究院; 出处《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期74-78,共5页; 基金黑龙江省高校创新团队项目(2011TD001); 文摘按照常规病毒分离方法,从黑龙江省某猪场怀孕母猪所产死胎的肝脏中分离到一株病毒。利用ST细胞进行培养,通过血细胞凝集试验、间接免疫荧光试验及电镜观察等对新分离毒株进行鉴定。结果表明,该病毒能在ST细胞上生长并引起明显拉网状细胞病变,按Reed-Muench法计算出TCID50为10-4.6·0.1 mL-1;通过电镜观察可见直径约为20 nm无囊膜的病毒粒子,该病毒能凝集0.5%的豚鼠红细胞,免疫荧光试验显示在细胞上出现明显荧光,能与特异性抗体发生反应。对VP2基因进行扩增及测序并与GenBank已发表PPV毒株序列进行比对分析,结果显示该毒株与WB-143株在同一个分支里,同源性高达到99.8%,说明分离的病毒为猪细小病毒,命名为HLJ-DN,该病毒的分离为研究当地猪细小病毒的流行、预防和治疗奠定。; 关键词猪细小病毒 st细胞分离鉴定 VP2基因; Keywords porcine parvovirus st cell line isolation and characterization VP2 gene; 分类号 S823 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名稳定表达T_7RNA聚合酶的猪睾丸细胞系的建立被引量：2: 7; 作者祁光宇刘萍刘斌王凡武发菊杜平董金杰黄银君牟克斌刘学荣; 机构中农威特生物科技股份有限公司中国农业科学院兰州兽医研究所; 出处《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期26-31,共6页; 基金甘肃省科技计划项目(1008FCCA006) 甘肃省科技计划项目(1104NKCA167); 文摘根据GenBank中登录的T7RNA聚合酶基因参考序列,设计合成了1对特异性引物扩增对T7RNA聚合酶基因进行扩增,将测序正确的T7RNA聚合酶基因和真核表达载体pIRES2-EGFP双酶切后进行连接构建pIRES2-EGFP-T7RNA RNA质粒。再将构建正确的pIRES2-EGFP-T7RNA质粒经用脂质体法转染猪睾丸细胞,通过G418筛选和单细胞克隆化,同时构建pET-32a-RED原核表达质粒载体,用其检测T7启动子控制下的红色荧光蛋白的表达。结果表明,建立的ST/T7RNA细胞系经20次传代仍然能稳定表达T7RNA聚合酶。结果显示,成功建立能稳定表达T7RNA聚合酶的猪睾丸细胞系,为猪瘟病毒反向遗传操作平台奠定了基础。; 关键词 T7RNA聚合酶 EGFP和RED荧光基因猪睾丸细胞 st T7RNA细胞系; Keywords T7 RNA polymerase EGFP and RED fluorescent gene swine testis cell st/T, RNA cell line; 分类号 Q503 [生物学—生物化学] S828 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪伪狂犬病病毒在不同细胞中增殖的研究被引量：15: 8; 作者彭丽英倪建平张婉华何锡忠徐伟林; 机构上海佳牧生物制品有限公司; 出处《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期67-69,共3页; 基金上海农科院院发项目[农科发2011(05)]资助; 文摘研究了猪伪狂犬病病毒(PRV)在ST、PK-15、CEF、BHK-21细胞系上的增殖情况。结果表明:4种细胞对PRV均敏感,PRV在4种细胞上增殖产生的病毒毒价分别为10^(-8.87±0.04)TCID_(50)/mL、10^(-8.50±0.03)TCID_(50)/mL、10^(-7.68±0.06)TCID_(50)/mL和10^(-7.87±0.05)TCID_(50)/mL。4种细胞都能产生明显的病变,但不同的细胞上出现病变不同,PK-15细胞(20±2)h出现细胞病变且病变为葡萄串状的细胞;ST细胞(22±2)h出现细胞病变且病变为细胞圆缩后成合胞体病灶;BHK-21细胞(25±1)h出现细胞病变且病变为细胞圆缩后成合胞体病灶,有拉网现象;CEF细胞(24±2)h出现细胞病变为葡萄串状的细胞。以上结果说明,ST细胞也适合用于PRV的增殖培养。; 关键词猪伪狂犬病病毒细胞病变病毒效价 st细胞系; Keywords Pseudorabies virus Cytopathy Virus titer st cell line; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	基于CRISPR/Cas9基因编辑系统建立WIP 1基因g.37536832 C>A位点突变的ST细胞系	王楠杜伟伟王婉洁王悦袁茂莎聂雨欣孙亚茹刘志国吴添文牟玉莲	《中国畜牧兽医》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
2	同工酶分析法鉴定ST细胞系的研究	张敏陈小云蒋桃珍王栋王磊王静文	《中国兽药杂志》北大核心	2015	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	ST细胞库的建立及其生物学特性鉴定	平玲魏圆圆王家敏沈武玲马忠仁乔自林	《山西农业科学》	2013	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	三种紫色作物花色苷对ST细胞单层生长的影响	王丹雷用东马越张莉赵晓燕	《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心	2013	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	ST悬浮细胞系的驯化与猪细小病毒的培养	赵刚闫冰刘鑫莹	《饲料博览》	2019	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	猪细小病毒HLJ-DN株分离鉴定	刘秀芬姜艳平唐丽杰李一经	《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	稳定表达T_7RNA聚合酶的猪睾丸细胞系的建立	祁光宇刘萍刘斌王凡武发菊杜平董金杰黄银君牟克斌刘学荣	《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	2	在线阅读下载PDF 职称材料
8	猪伪狂犬病病毒在不同细胞中增殖的研究	彭丽英倪建平张婉华何锡忠徐伟林	《上海农业学报》 CSCD 北大核心	2011	15	在线阅读下载PDF 职称材料