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靶向抑制人SREBP-1基因对高糖刺激下人肾小管上皮细胞脂滴形成的影响
被引量：
10
1
作者
郝军
石宏
+2 位作者
赵松
任韫卓
段惠军
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期371-377,共7页
目的构建人SREBP-1基因的shRNA载体并转染人肾小管上皮细胞(HKC)明确是否沉默SREBP-1基因的表达可减轻高糖环境引起的细胞内脂滴形成。方法设计两对针对人SREBP-1基因的干扰靶序列及短链寡核苷酸和线性化的pGenesil-1质粒进行连接,筛选...
目的构建人SREBP-1基因的shRNA载体并转染人肾小管上皮细胞(HKC)明确是否沉默SREBP-1基因的表达可减轻高糖环境引起的细胞内脂滴形成。方法设计两对针对人SREBP-1基因的干扰靶序列及短链寡核苷酸和线性化的pGenesil-1质粒进行连接,筛选鉴定并最终命名为pGenesil-1-SREBP1-1和pGenesil-1-SREBP1-2。体外培养人肾小管上皮细胞并随机分组,采用阳离子脂质体法转染细胞后给予高糖刺激48h,在倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达,半定量RT-PCR和Westernblot分析目标基因表达丰度的变化,并采用油红O染色检测细胞内脂滴。结果经酶切及测序鉴定证明构建的重组载体pGenesil-1-SREBP1-1、pGenesil-1-SREBP1-2序列正确;转染HKC细胞后均可表达绿色荧光;RT-PCR和Westernblot显示pGenesil-1-SREBP1-1、pGenesil-1-SREBP1-2能够有效抑制高糖环境下HKC细胞SREBP-1的表达,与阴性质粒对照组相比,差异有统计学意义。进一步研究发现在HKC细胞内,SREBP-1基因表达沉默明显抑制了脂肪酸合成酶(FAS)的转录,细胞内脂滴明显减少。结论有效沉默高糖刺激下HKC细胞SREBP-1的基因表达可通过抑制FAS转录而减少细胞内脂滴形成。
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关键词
固醇调节元件结合蛋白-
1
人肾小管上皮细胞
RNA干扰
短发夹状干扰RNA
脂滴形成
脂肪酸合成酶
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题名
靶向抑制人SREBP-1基因对高糖刺激下人肾小管上皮细胞脂滴形成的影响
被引量：
10
1
作者
郝军
石宏
赵松
任韫卓
段惠军
机构
河北医科大学病理学教研室
河北医科大学附属口腔医院
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第3期371-377,共7页
基金
河北省科技厅资助项目(No07276170)
文摘
目的构建人SREBP-1基因的shRNA载体并转染人肾小管上皮细胞(HKC)明确是否沉默SREBP-1基因的表达可减轻高糖环境引起的细胞内脂滴形成。方法设计两对针对人SREBP-1基因的干扰靶序列及短链寡核苷酸和线性化的pGenesil-1质粒进行连接,筛选鉴定并最终命名为pGenesil-1-SREBP1-1和pGenesil-1-SREBP1-2。体外培养人肾小管上皮细胞并随机分组,采用阳离子脂质体法转染细胞后给予高糖刺激48h,在倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达,半定量RT-PCR和Westernblot分析目标基因表达丰度的变化,并采用油红O染色检测细胞内脂滴。结果经酶切及测序鉴定证明构建的重组载体pGenesil-1-SREBP1-1、pGenesil-1-SREBP1-2序列正确;转染HKC细胞后均可表达绿色荧光;RT-PCR和Westernblot显示pGenesil-1-SREBP1-1、pGenesil-1-SREBP1-2能够有效抑制高糖环境下HKC细胞SREBP-1的表达,与阴性质粒对照组相比,差异有统计学意义。进一步研究发现在HKC细胞内,SREBP-1基因表达沉默明显抑制了脂肪酸合成酶(FAS)的转录,细胞内脂滴明显减少。结论有效沉默高糖刺激下HKC细胞SREBP-1的基因表达可通过抑制FAS转录而减少细胞内脂滴形成。
关键词
固醇调节元件结合蛋白-
1
人肾小管上皮细胞
RNA干扰
短发夹状干扰RNA
脂滴形成
脂肪酸合成酶
Keywords
srebp-1 （ sterol ing protein-1 ）
HKC （ human regulation element bindrenal proximal tubular epithelial cell line ）
RNAi （ RNA interference ）
shRNA （small hairpin RNA ）
lipid droplets formation
FAS （ fatty acid synthase）
分类号
R322.61 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
靶向抑制人SREBP-1基因对高糖刺激下人肾小管上皮细胞脂滴形成的影响
郝军
石宏
赵松
任韫卓
段惠军
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
10
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