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兰州熊蜂(Bombus lantschouensis)SMPD基因原核表达诱导条件的优化
被引量：
1
1
作者
韩蕾
董捷
+2 位作者
黄家兴
和绍禹
吴杰
《中国蜂业》
2017年第1期21-23,共3页
兰州熊蜂(Bombus lantschouensis)是我国优良熊蜂蜂种,已成功实现人工饲养并应用于设施作物授粉。鞘磷脂磷酸二酯酶(SMPD)是一种水解酶,参与鞘磷脂代谢过程并起关键作用。本研究从诱导温度、IPTG浓度及诱导时间三个因素对SMPD基因的原...
兰州熊蜂(Bombus lantschouensis)是我国优良熊蜂蜂种,已成功实现人工饲养并应用于设施作物授粉。鞘磷脂磷酸二酯酶(SMPD)是一种水解酶,参与鞘磷脂代谢过程并起关键作用。本研究从诱导温度、IPTG浓度及诱导时间三个因素对SMPD基因的原核表达进行优化,以期获得最佳原核表达条件。结果表明:诱导温度与诱导时间是影响SMPD蛋白表达量的主要因素,而诱导剂IPTG浓度影响较小。当温度为10℃,IPTG终浓度为0.1 mM,诱导时间为32 h时,目的蛋白表达量高,特异性好,能够满足该蛋白后续纯化实验要求。本研究结果为进一步开展SMPD蛋白功能研究奠定重要基础。
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关键词
兰州熊蜂
原核表达
smpd基因
诱导条件
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职称材料
尼曼-匹克病SMPD1基因突变分析
被引量：
4
2
作者
李振彪
罗强
+3 位作者
史丹丹
张继要
董伟
王怀立
《临床儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第12期1101-1106,共6页
目的探讨中国人尼曼-匹克病(NPD)家系发病的分子遗传学基础及SMPD1基因检测在中国人NPD家系基因诊断中的意义。方法收集3个无关的NPD家系的临床资料和血液标本,同时选取20例健康儿童的血液标本。从外周血提取基因组DNA,经聚合酶链反应(P...
目的探讨中国人尼曼-匹克病(NPD)家系发病的分子遗传学基础及SMPD1基因检测在中国人NPD家系基因诊断中的意义。方法收集3个无关的NPD家系的临床资料和血液标本,同时选取20例健康儿童的血液标本。从外周血提取基因组DNA,经聚合酶链反应(PCR)依次扩增3个家系中所有成员SMPD1基因的6个编码外显子及其侧翼内含子序列,扩增产物纯化后直接进行正反向测序,并与Genebank进行比对;将发现突变所在外显子的扩增产物通过TA克隆技术进一步证实突变的实际意义。结果家系1先证者为T107C的纯合突变,其父母均为T107C的杂合突变;家系2和家系3的所有成员均发现在SMPD1基因外显子1上有连续6个碱基缺失,即在编码序列第108碱基至第113碱基GCTGGC的缺失(c.108-113del GCTGGC),且均为纯合突变。进一步应用TA克隆技术检测,家系2和家系3的所有成员随机挑选的单克隆测序结果均存在该突变c.108-113del GCTGGC。对20个正常对照的PCR扩增产物进行直接正反向测序,均未见以上突变。结论 SMPD1基因第1外显子上T107C的纯合突变为家系1先证者发病的分子遗传学基础,其父母是表型正常的基因突变携带者。家系2和家系3所有成员均发现在SMPD1基因第1外显子上存在c.108-113del GCTGGC的纯合突变,考虑为人类基因多态性。
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关键词
尼曼-匹克病
分子遗传学
基因
突变
smpd
1
基因
酸性神经鞘磷脂酶
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职称材料
题名
兰州熊蜂(Bombus lantschouensis)SMPD基因原核表达诱导条件的优化
被引量：
1
1
作者
韩蕾
董捷
黄家兴
和绍禹
吴杰
机构
云南农业大学东方蜜蜂研究所
中国农业科学院蜜蜂研究所
出处
《中国蜂业》
2017年第1期21-23,共3页
文摘
兰州熊蜂(Bombus lantschouensis)是我国优良熊蜂蜂种,已成功实现人工饲养并应用于设施作物授粉。鞘磷脂磷酸二酯酶(SMPD)是一种水解酶,参与鞘磷脂代谢过程并起关键作用。本研究从诱导温度、IPTG浓度及诱导时间三个因素对SMPD基因的原核表达进行优化,以期获得最佳原核表达条件。结果表明:诱导温度与诱导时间是影响SMPD蛋白表达量的主要因素,而诱导剂IPTG浓度影响较小。当温度为10℃,IPTG终浓度为0.1 mM,诱导时间为32 h时,目的蛋白表达量高,特异性好,能够满足该蛋白后续纯化实验要求。本研究结果为进一步开展SMPD蛋白功能研究奠定重要基础。
关键词
兰州熊蜂
原核表达
smpd基因
诱导条件
Keywords
Bombus lantschouensis
prokaryotic expression
smpd
gene
inducing conditions
分类号
S891 [农业科学—特种经济动物饲养]
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职称材料
题名
尼曼-匹克病SMPD1基因突变分析
被引量：
4
2
作者
李振彪
罗强
史丹丹
张继要
董伟
王怀立
机构
郑州大学第一附属医院儿科
出处
《临床儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第12期1101-1106,共6页
文摘
目的探讨中国人尼曼-匹克病(NPD)家系发病的分子遗传学基础及SMPD1基因检测在中国人NPD家系基因诊断中的意义。方法收集3个无关的NPD家系的临床资料和血液标本,同时选取20例健康儿童的血液标本。从外周血提取基因组DNA,经聚合酶链反应(PCR)依次扩增3个家系中所有成员SMPD1基因的6个编码外显子及其侧翼内含子序列,扩增产物纯化后直接进行正反向测序,并与Genebank进行比对;将发现突变所在外显子的扩增产物通过TA克隆技术进一步证实突变的实际意义。结果家系1先证者为T107C的纯合突变,其父母均为T107C的杂合突变;家系2和家系3的所有成员均发现在SMPD1基因外显子1上有连续6个碱基缺失,即在编码序列第108碱基至第113碱基GCTGGC的缺失(c.108-113del GCTGGC),且均为纯合突变。进一步应用TA克隆技术检测,家系2和家系3的所有成员随机挑选的单克隆测序结果均存在该突变c.108-113del GCTGGC。对20个正常对照的PCR扩增产物进行直接正反向测序,均未见以上突变。结论 SMPD1基因第1外显子上T107C的纯合突变为家系1先证者发病的分子遗传学基础,其父母是表型正常的基因突变携带者。家系2和家系3所有成员均发现在SMPD1基因第1外显子上存在c.108-113del GCTGGC的纯合突变,考虑为人类基因多态性。
关键词
尼曼-匹克病
分子遗传学
基因
突变
smpd
1
基因
酸性神经鞘磷脂酶
Keywords
Niemann-Pick disease
molecular genetics
gene mutation
smpd
1 gene
acid sphingomyelinase
分类号
R725.9 [医药卫生—儿科]
R346 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
兰州熊蜂(Bombus lantschouensis)SMPD基因原核表达诱导条件的优化
韩蕾
董捷
黄家兴
和绍禹
吴杰
《中国蜂业》
2017
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
尼曼-匹克病SMPD1基因突变分析
李振彪
罗强
史丹丹
张继要
董伟
王怀立
《临床儿科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
4
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