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运用荧光分光光度仪观测结核杆菌耐链霉素耐药rpsL 43密码子发夹探针液相杂交信号
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作者 陈庆海 华兴 +4 位作者 张波 张雪 黄君富 匡红 府伟灵 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第24期2421-2424,共4页
目的设计针对结核杆菌耐链霉素(SM)rpsL43密码子的发夹型DNA探针,尝试运用荧光分光光度仪直接观测液相中发夹探针与rpsL43密码子扩增产物杂交后荧光信号,从而检出该位点突变。方法运用软件Beacon designer设计针对rpsL43密码子的发夹探... 目的设计针对结核杆菌耐链霉素(SM)rpsL43密码子的发夹型DNA探针,尝试运用荧光分光光度仪直接观测液相中发夹探针与rpsL43密码子扩增产物杂交后荧光信号,从而检出该位点突变。方法运用软件Beacon designer设计针对rpsL43密码子的发夹探针,应用荧光分光光度仪检测rpsL43密码子扩增片段与探针杂交后荧光信号,并比较扩增产物测序结果。结果通过荧光分光光度仪观测到结核杆菌标准株及SM耐药rpsL43密码子扩增产物杂交荧光信号存在显著差异;20株SM耐药组与10株H37RV标准株对照组荧光信号强度比较,SM耐药组rpsL43密码子突变检出率为70%,测序法突变检出率为65%,发夹探针杂交法假阳性株1例(504S)。结论应用荧光分光光度仪直接观测发夹探针液相杂交荧光信号具有简单、灵敏等优特点;rpsL43密码子点突变是重庆地区SM耐药的主要因素之一。 展开更多
关键词 发夹型DNA探针 smrpsl 43密码子 荧光分光光度仪 液相杂交
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IL-8/CXCR2轴促进兔内皮祖细胞迁移、增殖及VEGF的表达 被引量:4
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作者 毛梅 吕学军 +1 位作者 王艺 徐剑铖 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第24期2429-2431,共3页
目的观察不同浓度白介素-8(interleukin-8,IL-8)对体外培养兔外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)生物学功能的影响,探讨趋化因子IL-8/CXCR2轴对EPCs血管生成功能的作用。方法密度梯度离心法获取兔外周血单个核细胞(mo... 目的观察不同浓度白介素-8(interleukin-8,IL-8)对体外培养兔外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)生物学功能的影响,探讨趋化因子IL-8/CXCR2轴对EPCs血管生成功能的作用。方法密度梯度离心法获取兔外周血单个核细胞(mononuclear cells,MNCs),接种至纤维连接蛋白(fibronectin,FN)包被的培养板上,培养7~10d后收集贴壁细胞鉴定EPCs,并用不同浓度IL-8的培养基继续培养24h后采用MTT比色法、改良的Boyden小室实验,观察EPCs的迁移和增殖能力;采用RT-PCR、Western blot方法检测CXCR2、VEGF mRNA及蛋白表达水平。结果IL-8显著增加兔外周血EPCs的增殖和迁移能力(P<0.05),且随着IL-8浓度升高而增强。IL-8促进CXCR2膜受体和VEGF的表达,且随着IL-8浓度增加而增加。结论IL-8/CXCR2轴能显著促进EPCs的迁移、增殖及VEGF的表达。 展开更多
关键词 发夹型DNA探针 sm耐药rpsl43密码子 荧光分光光度仪 液相杂交
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