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自噬基因Beclin1对上皮性卵巢癌细胞SKOV3生长的抑制作用 被引量:14
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作者 段振玲 彭芝兰 王赞宏 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期672-676,680,共6页
目的观察自噬基因Beclin1在人卵巢癌细胞株SKOV3中过表达对肿瘤细胞在体内、体外生长活性的影响。方法脂质体法将重组质粒pcDNA3.1/Beclin1转染人卵巢癌细胞株SKOV3,MTT法分析外源性Beclin1过表达对SKOV3增殖的影响,流式细胞仪检测转染... 目的观察自噬基因Beclin1在人卵巢癌细胞株SKOV3中过表达对肿瘤细胞在体内、体外生长活性的影响。方法脂质体法将重组质粒pcDNA3.1/Beclin1转染人卵巢癌细胞株SKOV3,MTT法分析外源性Beclin1过表达对SKOV3增殖的影响,流式细胞仪检测转染后肿瘤细胞的凋亡及自噬情况。将重组质粒pcDNA3.1/Beclin1转染SKOV3细胞后,接种到裸鼠皮下,观察体内致瘤活性及生长情况;免疫组化检测瘤组织Beclin1蛋白的表达。结果Beclin1在SKOV3中的过表达后抑制肿瘤细胞在体外的生长,抑制率为58.68%;pcDNA3.1/Beclin1转染后SKOV3的凋亡率为(21.26±3.89)%,高于空质粒pcDNA3.1转染组和未转染组,差异有显著性(P<0.05);流式细胞仪检测pcDNA3.1/Beclin1转染后SKOV3细胞MDC平均荧光强度高于pcDNA3.1转染组和未转染组。重组质粒pcDNA3.1/Beclin1使SKOV3细胞在裸鼠体内成瘤时间延长,瘤体体积及质量明显小于空质粒组和空白对照组,抑瘤率为50.27%。结论自噬基因Beclin1在人卵巢癌细胞SKOV3中过表达可抑制SKOV3在体内、体外的增殖,针对自噬基因Beclin1的卵巢癌基因治疗可能具有可行性。 展开更多
关键词 BECLIN1 凋亡 自噬 卵巢 skov3细胞
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纳秒级陡脉冲对人卵巢癌细胞SKOV_3生长抑制及诱导凋亡作用 被引量:3
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作者 吴晓娟 姚珍薇 +2 位作者 唐均英 姚陈果 孙才新 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第17期1670-1672,共3页
目的探讨纳秒级陡脉冲对人卵巢癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用。方法采用人卵巢癌细胞SKOV3,应用MTT比色法,倒置显微镜,荧光显微镜及Annexin-FITC技术等方法进行检测和观察。结果中(8.5kV/cm)、高(10kV/cm)场强处理组对SKOV3细胞活性... 目的探讨纳秒级陡脉冲对人卵巢癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用。方法采用人卵巢癌细胞SKOV3,应用MTT比色法,倒置显微镜,荧光显微镜及Annexin-FITC技术等方法进行检测和观察。结果中(8.5kV/cm)、高(10kV/cm)场强处理组对SKOV3细胞活性具有明显抑制作用,呈剂量依赖性,在处理后2~4h内呈时间依赖性;倒置显微镜和荧光显微镜下观察到典型的凋亡细胞形态;流式细胞仪示,中、高场强处理组早期凋亡率分别为(22.21±2.71)%、(57.30±6.51)%,与对照组(3.04±0.44)%比较均有显著性差异。结论一定范围内的纳秒级陡脉冲能明显抑制SKOV3细胞增殖,亦诱导SKOV3细胞凋亡。 展开更多
关键词 陡脉冲 卵巢肿瘤 skov3细胞 生长抑制 凋亡
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Rac1蛋白在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞株SKOV3增殖及迁移的作用 被引量:3
3
作者 彭慧娟 张瑜 +3 位作者 高一萌 罗淑娟 刘斌 令狐华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第13期1402-1405,共4页
目的研究Rac1蛋白在人卵巢浆液性腺癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞株SKOV3恶性增殖和迁移的影响。方法 Western blot检测人卵巢浆液性腺癌组织、卵巢良性浆液性囊腺瘤组织及卵巢正常组织中Rac1蛋白的表达水平;构建Rac1表达缺失的细胞株... 目的研究Rac1蛋白在人卵巢浆液性腺癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞株SKOV3恶性增殖和迁移的影响。方法 Western blot检测人卵巢浆液性腺癌组织、卵巢良性浆液性囊腺瘤组织及卵巢正常组织中Rac1蛋白的表达水平;构建Rac1表达缺失的细胞株SKOV3-Rac1i;分别用细胞划痕实验、MTT及平板克隆实验检测SKOV3-Rac1i细胞迁移能力、细胞增殖及克隆形成能力。结果卵巢浆液性腺癌组织中Rac1蛋白表达水平显著高于卵巢良性浆液性囊腺瘤组织[(0.89±0.17)vs(0.69±0.24),P<0.05]和卵巢正常组织[(0.89±0.17)vs(0.72±0.12),P<0.05];与亲代细胞相比,SKOV3-Rac1i细胞表现出迁移能力减弱(P<0.05)和增殖能力明显受限(P<0.05)。结论 Rac1在人卵巢浆液性腺癌组织中呈高表达,其可能是通过影响细胞迁移能力及细胞的增殖而促进卵巢癌细胞的恶性生物行为。 展开更多
关键词 卵巢浆液性腺癌 skov3 RNAi RAC1
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缺氧诱导因子-1α过表达可使卵巢癌细胞株SKOV3的E-钙黏蛋白下调 被引量:1
4
作者 高蜀君 丰有吉 +1 位作者 孙红 殷莲华 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期441-444,共4页
目的探讨缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor1α,HIF-1α)和E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)在人卵巢浆液性肿瘤细胞SKOV3缺氧不同时间的表达及其相互作用关系。方法在细胞缺氧培养不同时间段,分别采用Western blotting和RT-PCR... 目的探讨缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor1α,HIF-1α)和E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)在人卵巢浆液性肿瘤细胞SKOV3缺氧不同时间的表达及其相互作用关系。方法在细胞缺氧培养不同时间段,分别采用Western blotting和RT-PCR技术检测HIF-1α和E-cad的蛋白和RNA表达变化;同时用HIF-1α抑制剂雷帕霉素作用于细胞,检测上述各指标的变化。结果随着缺氧时间的延长,HIF-1α蛋白表达逐渐上升,缺氧16h达到高峰,24h仍处于较高水平(P<0.05),而HIF-1α的mRNA表达变化无明显改变(P>0.05);E-cad缺氧8h表达明显下降(P<0.05),缺氧24h表达仅为对照组的6.37%(P<0.05);雷帕霉素可以从蛋白水平抑制HIF-1α表达,防止E-cad在缺氧环境中的降低。结论HIF-1α过表达可通过下调E-cad从而降低SKOV3细胞的黏附能力,由此可能启动肿瘤细胞从原发灶脱落继而转移的第一步。 展开更多
关键词 卵巢癌细胞skov3 缺氧 缺氧诱导因子-1Α E-钙黏蛋白
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内皮祖细胞对卵巢癌细胞SKOV3生物学功能的影响 被引量:1
5
作者 罗艳梅 梁志清 +1 位作者 陈振波 阎萍 《实用妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期191-195,共5页
目的:通过在卵巢癌细胞SKOV3中使用血管内皮生长因子(VEGF)抗体贝伐单抗,了解脐血内皮祖细胞(EPCs)对卵巢癌细胞SKOV3增殖、迁移、黏附和凋亡能力的影响。方法:在成功建立EPCs和卵巢癌细胞SKOV3体外培育模型后,将实验分为SKOV3单独培养... 目的:通过在卵巢癌细胞SKOV3中使用血管内皮生长因子(VEGF)抗体贝伐单抗,了解脐血内皮祖细胞(EPCs)对卵巢癌细胞SKOV3增殖、迁移、黏附和凋亡能力的影响。方法:在成功建立EPCs和卵巢癌细胞SKOV3体外培育模型后,将实验分为SKOV3单独培养组(SKOV3组),SKOV3+EPCs共培养组(SKOV3+EPCs组),SKOV3+100μg/ml的贝伐单抗共培养组(SKOV3+贝伐单抗组)和SKOV3+EPCs+100μg/ml的贝伐单抗共培养组(SKOV3+EPCs+贝伐单抗组),并比较4组SKOV3的增殖、凋亡、迁移和黏附能力的变化。结果:①SKOV3+EPCs组SKOV3的增殖能力、穿膜细胞数和OD值高于SKOV3组(P<0.05,P<0.01);②SKOV3+贝伐单抗组SKOV3的增殖能力、穿膜细胞数、凋亡率低于SKOV3组(P<0.05,P<0.01):③SK—OV3+EPCs+贝伐单抗组SKOV3的增殖活性、穿膜细胞数、凋亡率低于SKOV3+EPCs组(P<0.05,P<0.01),而OD值显著高于SKOV3+EPCs组(P<0.01)。结论:共培养条件下EPCs能促进SKOV3生物学功能,贝伐单抗则相反,EPCs能协同贝伐单抗抑制SKOV3的生物学功能。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 卵巢癌细胞skov3 贝伐单抗 体外
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人Bub1基因shRNA真核表达质粒的构建及其对人卵巢癌细胞SKOV3紫杉醇敏感性的影响 被引量:2
6
作者 周婷 王世宣 +2 位作者 翁丹卉 卢运萍 马丁 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期171-174,188,共5页
目的构建人Bub1 shRNA真核表达质粒,鉴定该质粒对人卵巢癌SKOV3细胞中Bub1基因的抑制作用,并探讨其对SKOV3细胞紫杉醇敏感性的影响。方法构建pEGFP-Bub1-shRNA质粒,将其经脂质体Lipo 2000TM转染SKOV3细胞后,通过RT-PCR及Western blot检... 目的构建人Bub1 shRNA真核表达质粒,鉴定该质粒对人卵巢癌SKOV3细胞中Bub1基因的抑制作用,并探讨其对SKOV3细胞紫杉醇敏感性的影响。方法构建pEGFP-Bub1-shRNA质粒,将其经脂质体Lipo 2000TM转染SKOV3细胞后,通过RT-PCR及Western blot检测干扰效率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,MTT法比较转染前后SK-OV3细胞的紫杉醇敏感性。结果成功构建了pEGFP-Bub1-shRNA质粒;RT-PCR和Western blot检测结果提示,转染后Bub1的mRNA和蛋白表达均显著降低;MTT和FACS提示,与对照组细胞相比,转染后SKOV3细胞生长抑制率及凋亡率明显降低(P<0.05)。结论pEGFP-Bub1-shRNA质粒能有效抑制Bub1 mRNA及蛋白的表达,并降低SK-OV3细胞紫杉醇敏感性,该质粒的成功构建为进一步研究Bub1基因的生物学功能提供了工具。 展开更多
关键词 Bub1基因 紫杉醇 耐药 卵巢 skov3细胞
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穿心莲内酯对卵巢癌细胞株SKOV-3侵袭与凋亡的影响 被引量:5
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作者 苏芳静 张斌 田林燕 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1328-1331,共4页
目的:观察穿心莲内酯对卵巢癌细胞株SKOV-3侵袭与凋亡的影响并探讨初步的作用机制。方法:CCK-8法检测不同浓度(0、5、10、20和40μmol/L)的穿心莲内酯对SKOV-3细胞作用不同时间(12、24、36和48h)后,SKOV-3细胞存活率的变化;Transwell法... 目的:观察穿心莲内酯对卵巢癌细胞株SKOV-3侵袭与凋亡的影响并探讨初步的作用机制。方法:CCK-8法检测不同浓度(0、5、10、20和40μmol/L)的穿心莲内酯对SKOV-3细胞作用不同时间(12、24、36和48h)后,SKOV-3细胞存活率的变化;Transwell法与TUNEL法分别检测SKOV-3细胞侵袭能力与凋亡能力的变化;Western blot法检测p-PI3K、p-Akt与p-mTOR蛋白水平的变化。结果:CCK-8法检测结果显示,随着浓度增加与培养时间延长,穿心莲内酯对SKOV-3细胞存活率的抑制程度增强;采用20μmol/L穿心莲内酯培养SKOV-3细胞36h后,SKOV-3细胞的侵袭数明显降低,凋亡数明显增加(P<0.05),p-PI3K、p-Akt与p-mTOR的蛋白水平明显降低(P<0.05)。结论:穿心莲内酯能够抑制卵巢癌细胞SKOV-3的活力与侵袭能力,增强凋亡能力,这可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。 展开更多
关键词 穿心莲内酯 卵巢癌细胞 PI3K/Akt/mTOR信号通路
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不同磁感应强度的微秒脉冲磁场对卵巢癌细胞SKOV3的影响 被引量:1
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作者 米彦 芮少琴 +3 位作者 储贻道 张晏源 唐均英 龙映妃 《高电压技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第8期2494-2500,共7页
雷电μs脉冲电磁场的危害越来越严重,却鲜有人研究此μs脉冲电磁场对人的影响。为研究μs脉冲磁场的生物电磁效应机制以及对人体健康的影响,使用人卵巢癌细胞株SKOV3作为实验对象,采用实验室自制的μs脉冲磁场发生器产生不同磁感应强度... 雷电μs脉冲电磁场的危害越来越严重,却鲜有人研究此μs脉冲电磁场对人的影响。为研究μs脉冲磁场的生物电磁效应机制以及对人体健康的影响,使用人卵巢癌细胞株SKOV3作为实验对象,采用实验室自制的μs脉冲磁场发生器产生不同磁感应强度的μs脉冲磁场(磁感应强度为1~200 m T,上升时间为800 ns,脉冲宽度为8.4μs,频率为8 Hz)处理细胞3 d时间,每天间隔12 h时间处理1次,每次处理时间为1 h。处理结束后24 h时间分别使用噻唑蓝(MTT)和流式细胞术(flow cytometry method,FCM)来检测细胞的增殖抑制率和凋亡率。结果显示:增殖抑制率与脉冲磁场的磁感应强度不呈现趋势变化关系,且增殖抑制率均低于5%,μs脉冲磁场对SKOV3细胞的增殖抑制率不具有统计学意义(概率P〉0.05);肿瘤细胞的凋亡率与脉冲磁场的磁感应强度也不呈现趋势变化关系,且凋亡率均低于12%,脉冲磁场对SKOV3细胞的凋亡也不具有统计学意义(概率P〉0.05)。研究结果揭示:不同磁感应强度(1~200 m T)的μs脉冲磁场对卵巢癌细胞SKOV3无显著影响。 展开更多
关键词 μs脉冲磁场 磁感应强度 卵巢癌细胞skov3 MTT 流式细胞 生物电磁效应
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过表达KLF9增加GPX4和活性氧(ROS)水平抑制悬浮培养的SKOV3人卵巢癌细胞凋亡 被引量:2
9
作者 彭映然 刘娟 +2 位作者 田小飞 张瑞 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期337-343,共7页
目的探究Kruppel样因子9/谷胱甘肽过氧化物酶4(KLF9/GPX4)信号轴对悬浮培养的卵巢癌细胞凋亡的调控功能和机制。方法通过慢病毒感染在SKOV3细胞过表达和敲低KLF9表达水平,通过实时定量PCR和Western blot法进行验证。采用双荧光素酶报告... 目的探究Kruppel样因子9/谷胱甘肽过氧化物酶4(KLF9/GPX4)信号轴对悬浮培养的卵巢癌细胞凋亡的调控功能和机制。方法通过慢病毒感染在SKOV3细胞过表达和敲低KLF9表达水平,通过实时定量PCR和Western blot法进行验证。采用双荧光素酶报告基因实验验证KLF9对GPX4的转录调控作用,采用流式细胞术检测SKOV3细胞活性氧(ROS)含量及细胞凋亡比率。结果KLF9对GPX4的启动子区域有转录抑制作用。过表达KLF9的SKOV3细胞GPX4表达量增加,ROS水平上升。在悬浮培养条件下,SKOV3细胞ROS水平增加,过表达KLF9抑制SKOV3细胞凋亡,敲低KLF9则促进SKOV3细胞凋亡,与此同时正常的贴壁培养并没有观察到这一现象。结论过表达KLF9增加卵巢癌细胞GPX4和ROS水平,抑制悬浮培养的卵巢癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 Kruppel样因子9(KLF9) 谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4) 活性氧(ROS) 细胞凋亡 skov3卵巢癌细胞
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circSKA3/miR-3163/ADAM9基因轴调控卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭及免疫因子表达的机制研究 被引量:2
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作者 张健 葛卫伟 +2 位作者 顾栋桦 郭凯 陆夏良 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期2304-2309,共6页
目的:探讨circSKA3/miR-3163/去整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)基因轴调控卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭及免疫因子表达的机制。方法:qRT-PCR检测卵巢癌组织、癌旁组织circSKA3、miR-3163表达;Western blot检测组织ADAM9蛋白水平。选用SK... 目的:探讨circSKA3/miR-3163/去整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)基因轴调控卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭及免疫因子表达的机制。方法:qRT-PCR检测卵巢癌组织、癌旁组织circSKA3、miR-3163表达;Western blot检测组织ADAM9蛋白水平。选用SKOV3细胞进行体外实验,分为sh-NC组、sh-circSKA3组、miR-NC组、miR-3163组、sh-circSKA3+antimiR-3163组、sh-circSKA3+pcDNA-ADAM9组。qRT-PCR检测SKOV3细胞circSKA3、miR-3163表达;CCK-8、划痕实验、Transwell检测细胞增殖活性、迁移及侵袭能力;ELISA检测细胞上清中TNF-α、IL-6、IL-10表达;双荧光素酶报告实验验证circSKA3与miR-3163、miR-3163与ADAM9的靶向关系;Western blot检测SKOV3细胞ADAM9、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9蛋白水平。结果:与癌旁组织比较,卵巢癌组织circSKA3、ADAM9表达升高,miR-3163表达降低(P<0.05);与sh-NC组/miR-NC组比较,sh-circSKA3组/miR-3163组细胞增殖活性、划痕愈合率降低,侵袭细胞数减少,MMP-2、MMP-9蛋白及TNF-α、IL-6表达降低,IL-10表达升高(P<0.05);circSKA3可靶向调控miR-3163表达,miR-3163可靶向结合ADAM9(P<0.05);与sh-circSKA3组比较,sh-circSKA3+anti-miR-3163组、sh-circSKA3+pcDNA-ADAM9组细胞增殖活性、划痕愈合率升高,侵袭细胞数增多,MMP-2、MMP-9蛋白及TNF-α、IL-6表达升高,IL-10表达降低(P<0.05)。结论:沉默circSKA3表达可通过上调miR-3163表达而降低ADAM9表达,抑制卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭,调控免疫因子表达。 展开更多
关键词 卵巢skov3细胞 circSKA3 miR-3163 去整合素-金属蛋白酶9
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VEGF、MMP-9在卵巢癌组织中的表达及贝伐单抗联合顺铂对卵巢癌细胞SKOV3的作用 被引量:17
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作者 刘端 李红雨 +3 位作者 臧星卉 鱼志琪 孙玮 李玉光 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2018年第4期516-520,共5页
目的:探讨卵巢癌组织中VEGF、MMP-9蛋白的表达及贝伐单抗联合顺铂对卵巢癌细胞SKOV3的作用机制。方法:收集41例上皮性卵巢恶性肿瘤组织、30例卵巢良性肿瘤组织、30例正常卵巢组织,采用免疫组化法检测卵巢组织中VEGF、MMP-9蛋白的表达情... 目的:探讨卵巢癌组织中VEGF、MMP-9蛋白的表达及贝伐单抗联合顺铂对卵巢癌细胞SKOV3的作用机制。方法:收集41例上皮性卵巢恶性肿瘤组织、30例卵巢良性肿瘤组织、30例正常卵巢组织,采用免疫组化法检测卵巢组织中VEGF、MMP-9蛋白的表达情况。MTT实验检测2.5、5.0、10.0、20.0、40.0 mg/L的贝伐单抗对卵巢癌细胞SKOV3的体外增殖抑制作用;流式细胞仪检测5 mg/L贝伐单抗、3 mg/L顺铂单独及联合使用对卵巢癌细胞凋亡的影响;Western blot法检测5 mg/L贝伐单抗、3 mg/L顺铂单独及联合使用对VEGF下游信号通路中关键蛋白AKT、Bad和MMP-9表达的影响。结果:卵巢癌、卵巢良性肿瘤、正常卵巢组织中VEGF蛋白阳性表达率分别为75.6%、40.0%、6.7%;MMP-9蛋白阳性表达率分别为70.7%、20.0%、3.3%,卵巢癌组与卵巢良性肿瘤组和对照组相比均升高(P均<0.001)。贝伐单抗在体外可浓度依赖性地抑制卵巢癌细胞SKOV3的增殖,其IC50为(8.89±0.27)mg/L。贝伐单抗、顺铂可联合诱导卵巢癌细胞SKOV3凋亡(P<0.001);贝伐单抗联合顺铂处理组与单独药物处理组相比,可减弱磷酸化AKT和MMP-9蛋白的表达,增强促凋亡蛋白Bad的表达。结论:VEGF、MMP-9在卵巢癌组织中呈共同高表达状态;贝伐单抗联合顺铂通过对VEGF下游信号通路的调控以及MMP-9蛋白的影响,发挥协同抗肿瘤效应。 展开更多
关键词 卵巢 血管内皮生长因子 基质金属蛋白酶-9 贝伐单抗 顺铂 skov3细胞
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miR-122-5p靶向ADAM10调控Notch信号通路对人卵巢癌细胞SKOV-3的上皮-间质转化的抑制作用 被引量:11
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作者 李根林 刘杰 +2 位作者 谢晶 余芙蓉 胡意 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第1期54-59,共6页
目的研究miR-122-5p对人卵巢癌细胞SKOV-3上皮-间质转化(EMT)的影响,阐明其可能机制。方法常规体外培养人卵巢癌细胞SKOV-3,将miR-122-5p模拟物(miR-122-5p mimic)及其阴性对照(mimic NC)转染至SKOV-3细胞,分为空白对照组(Blank组)、mim... 目的研究miR-122-5p对人卵巢癌细胞SKOV-3上皮-间质转化(EMT)的影响,阐明其可能机制。方法常规体外培养人卵巢癌细胞SKOV-3,将miR-122-5p模拟物(miR-122-5p mimic)及其阴性对照(mimic NC)转染至SKOV-3细胞,分为空白对照组(Blank组)、mimic NC组和miR-122-5p mimic组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞miR-122-5p和ADAM10 mRNA的表达水平;Western blot检测各组细胞ADAM10蛋白的表达水平;生物信息学预测miR-122-5p与ADAM10靶向匹配,采用双荧光素酶报告系统验证两者在SKOV-3细胞中的靶向关系。再将miR-122-5p mimic和ADAM10过表达质粒(pcDNA-ADAM10)分别或同时转染至SKOV-3细胞中,分为空白对照组(Blank组)、miR-122-5p mimic组、ADAM10过表达组(pc-ADAM10组)和miR-122-5p mimic+pc-ADAM10组,采用Transwell检测SKOV-3细胞的迁移和侵袭能力;Western blot检测细胞Notch信号通路相关蛋白Notch1、HES1和HEY1,EMT相关蛋白Snail、E-cadherin和N-cadherin的表达水平。结果 miR-122-5p mimic组SKOV-3细胞中miR-122-5p的表达水平较mimic NC组的升高(P<0.01),表明miR-122-5p mimic稳定转染至SKOV-3细胞。miR-122-5p mimic组SKOV-3细胞中ADAM10 mRNA和蛋白的表达水平较mimic NC组的降低(P<0.01),双荧光素酶报告系统证实ADAM10是miR-122-5p靶基因。与Blank组比较,miR-122-5p mimic组SKOV-3细胞发生迁移和侵袭的数量降低(t=6.004,P<0.05;t=7.289,P<0.01),而pc-ADAM10组的升高(t=13.181,P<0.001;t=11.504,P<0.01);miR-122-5p mimic组细胞的Notch、HES1、HEY1、Snail和N-cadherin蛋白表达水平下降(P<0.05,P<0.01),而pc-ADAM10组的上升(P<0.01);miR-122-5p mimic组细胞的E-cadheirn蛋白表达水平上升(P<0.01),而pc-ADAM10组的下降(P<0.01)。与pc-ADAM10组比较,miR-122-5p mimic+pc-ADAM10能减弱pc-ADAM10的促EMT作用,且下调Notch信号通路活性。结论 miR-122-5p通过阻断Notch信号通路抑制人卵巢癌细胞SKOV-3的EMT,其机制可能与miR-122-5p靶向抑制ADAM10的表达有关。 展开更多
关键词 卵巢癌细胞skov-3 上皮-间质转化 NOTCH信号通路 去整合素金属蛋白酶10
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克唑替尼对人卵巢癌细胞系SKOV3细胞增殖的影响 被引量:3
13
作者 邓梅君 刘俊 李贵玲 《医药导报》 CAS 2017年第7期727-730,共4页
目的探索人卵巢浆液性腺癌细胞系SKOV3中间变性淋巴瘤激酶(ALK)的表达及其对克唑替尼的反应。方法采用蛋白免疫印迹法(Western blotting)及免疫细胞化学法检测ALK蛋白在人卵巢癌细胞系SKOV3中的表达;细胞增殖实验检测ALK抑制药克唑替尼... 目的探索人卵巢浆液性腺癌细胞系SKOV3中间变性淋巴瘤激酶(ALK)的表达及其对克唑替尼的反应。方法采用蛋白免疫印迹法(Western blotting)及免疫细胞化学法检测ALK蛋白在人卵巢癌细胞系SKOV3中的表达;细胞增殖实验检测ALK抑制药克唑替尼对SKOV3细胞增殖的影响。结果 Western blotting结果显示,SKOV3细胞中有ALK蛋白表达;免疫细胞化学结果显示,ALK在SKOV3细胞质中有表达。细胞增殖实验显示,克唑替尼≤10~6nmol·L^(-1)时SKOV3细胞活力与对照组比值均接近1,达到10~7nmol·L^(-1)时SKOV3细胞活力值接近64%。结论人卵巢癌细胞系SKOV3细胞中有ALK蛋白表达,但其对克唑替尼治疗不敏感。 展开更多
关键词 克唑替尼 卵巢 skov3细胞 间变性淋巴瘤激酶
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小檗碱对人卵巢癌细胞SKOV3增殖及凋亡机制的研究 被引量:10
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作者 王婉 张帆 +1 位作者 袁慧 杨文静 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1498-1501,1508,共5页
目的:探讨小檗碱对人卵巢癌细胞(SKOV3)增殖及凋亡的影响。方法:MTT法检测细胞增殖;流式细胞仪Annexin V/PI双染色法和透射电子显微镜检测细胞凋亡情况;甲基化特异性PCR分析h MLH1基因启动子区Cp G岛的甲基化状态;实时荧光定量RT-PCR检... 目的:探讨小檗碱对人卵巢癌细胞(SKOV3)增殖及凋亡的影响。方法:MTT法检测细胞增殖;流式细胞仪Annexin V/PI双染色法和透射电子显微镜检测细胞凋亡情况;甲基化特异性PCR分析h MLH1基因启动子区Cp G岛的甲基化状态;实时荧光定量RT-PCR检测Bcl-2、Bax、Survivin和h MLH1 mRNA基因的表达。结果:小檗碱对卵巢癌SKOV3细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05),呈剂量和时间依赖性。当与顺铂联用时,小檗碱对卵巢癌细胞有协同抗癌作用。小檗碱可明显诱导SKOV3细胞凋亡,并下调Bcl-2、Survivin基因及上调Bax基因的表达。此外,小檗碱能恢复h MLH1启动子的甲基化状态及增强h MLH1 mRNA的表达。结论:小檗碱可抑制卵巢癌细胞增殖及诱导细胞凋亡,小檗碱可协同增强抗癌药物顺铂的抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 小檗碱 甲基化 错配修复基因 卵巢skov3细胞
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肝/肾/骨型碱性磷酸酶基因ALPL抑制卵巢癌细胞系SKOV3增殖的研究 被引量:1
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作者 程李娟 詹诗杰 +1 位作者 刘斌 令狐华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期58-63,共6页
目的研究肝/肾/骨型碱性磷酸酶基因(alkaline phosphatase,liver/bone/kidney,ALPL)在卵巢癌细胞株中的表达及其对卵巢癌细胞SKOV3增殖的影响。方法通过qRT-PCR检测ALPL在不同卵巢癌细胞株(HEY、SKOV3、8910、ES-2、OVCAR3、3AO、A2780)... 目的研究肝/肾/骨型碱性磷酸酶基因(alkaline phosphatase,liver/bone/kidney,ALPL)在卵巢癌细胞株中的表达及其对卵巢癌细胞SKOV3增殖的影响。方法通过qRT-PCR检测ALPL在不同卵巢癌细胞株(HEY、SKOV3、8910、ES-2、OVCAR3、3AO、A2780)mRNA中的表达,并与正常卵巢组织进行比较。在低表达ALPL的卵巢癌细胞株SKOV3中外源性过表达ALPL,通过MTT法、平板克隆实验检测细胞的增殖,流式细胞仪检测细胞周期。通过建立裸鼠皮下种植瘤模型,观察过表达ALPL的SKOV3细胞在体内的成瘤能力。结果 ALPL在卵巢癌细胞中的mRNA表达低于正常卵巢组织(P<0.01),外源性过表达ALPL可抑制SKOV3细胞的增殖和克隆形成率(P<0.01),阻滞细胞G1期向S的转化,并抑制肿瘤细胞的成瘤能力(P<0.05)。结论 ALPL表达的恢复可以明显抑制卵巢癌细胞SKOV3的增殖及成瘤能力。 展开更多
关键词 肝/肾/骨型碱性磷酸酶基因 卵巢 skov3 细胞增殖
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原花青素对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响 被引量:12
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作者 池余刚 钟玲 +1 位作者 伍霞 王勇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第23期2203-2206,共4页
目的探讨葡萄籽提取物原花青素对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响和机制。方法体外培养的SKOV3细胞与25、50、100、200、400μg/ml的葡萄籽提取物原花青素共孵育,分别在24、48、72h时观察细胞形态学变化,MTT检测细胞增殖抑制率,流式细... 目的探讨葡萄籽提取物原花青素对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响和机制。方法体外培养的SKOV3细胞与25、50、100、200、400μg/ml的葡萄籽提取物原花青素共孵育,分别在24、48、72h时观察细胞形态学变化,MTT检测细胞增殖抑制率,流式细胞和TUNEL分析细胞凋亡,RT-PCR检测survivin在mRNA的表达情况,Western blot检测SKOV3细胞survivin在蛋白水平的表达。结果不同浓度(25、50、100、200、400μg/ml)原花青素对SKOV3细胞作用48h的细胞增殖抑制率分别为48.67%、53.85%、67.03%、73.78%、77.39%。流式细胞和TUNEL检测经25μg/ml原花青素处理24、48h后SKOV3细胞凋亡率分别为31.98%、45.78%。葡萄籽原花青素还可以明显降低survivin的mRNA和蛋白水平的表达。这些作用均随原花青素浓度和作用时间的延长而增强。结论原花青素可能通过降低survivin的表达,在体外抑制SKOV3细胞增殖,并促进其凋亡。 展开更多
关键词 卵巢 原花青素 细胞增殖 细胞凋亡 SURVIVIN skov3细胞
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桧木醇通过mTOR通路抑制自噬诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡 被引量:8
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作者 瞿小玲 曾仪 +1 位作者 姚利 蔡政(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第14期1717-1721,共5页
目的:探究桧木醇(Hinokitiol)对卵巢癌SKOV3细胞自噬的作用及机制。方法:将SKOV3细胞分为SKOV3组、Hinokitiol(5μmol/L)组、Hinokitiol(10μmol/L)组和Hinokitiol(20μmol/L)组,分别用0、5、10、20μmol/L的桧木醇处理各组细胞,CCK8检... 目的:探究桧木醇(Hinokitiol)对卵巢癌SKOV3细胞自噬的作用及机制。方法:将SKOV3细胞分为SKOV3组、Hinokitiol(5μmol/L)组、Hinokitiol(10μmol/L)组和Hinokitiol(20μmol/L)组,分别用0、5、10、20μmol/L的桧木醇处理各组细胞,CCK8检测培养不同时间细胞的增殖倍数,克隆实验检测细胞增殖,流式检测细胞凋亡,免疫印迹检测自噬相关蛋白Beclin1、P62、LC3及通路蛋白雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和UNC-51样激酶1(Ulk1)的表达,免疫荧光检测LC3的表达。结果:桧木醇处理细胞4d后,与SKOV3组比较,Hinokitiol(5、10、20μmol/L)组细胞增殖倍数均显著降低,克隆形成细胞数均明显减少,细胞凋亡率明显升高;同时,Hinokitiol(5、10、20μmol/L)组细胞Beclin1表达水平和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值明显低于SKOV3组,P62表达水平与SKOV3组比较明显升高,细胞质LC3阳性表达也明显减少;此外,Hinokitiol(5、10、20μmol/L)还能显著升高SKOV3细胞mTOR的表达水平,并抑制Ulk1表达。结论:桧木醇可通过抑制自噬诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡,作用机制与激活mTOR信号通路有关。 展开更多
关键词 桧木醇 卵巢 skov3细胞 自噬 mTOR通路
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CIK细胞联合顺铂对卵巢癌耐药细胞SKOV3/CDDP的杀伤作用 被引量:10
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作者 张辉 赵群 +4 位作者 左连富 焦琨 程建新 贾金华 康山 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第4期381-384,共4页
目的:探讨细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞联合顺铂对卵巢癌顺铂耐药细胞SKOV3/CD-DP小鼠腹腔移植模型的体内外杀伤作用。方法:取正常人的外周血单个核细胞(PBMC),加入IFN-γ、IL-2、CD3McAb和IL-1,体外诱导成CIK... 目的:探讨细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞联合顺铂对卵巢癌顺铂耐药细胞SKOV3/CD-DP小鼠腹腔移植模型的体内外杀伤作用。方法:取正常人的外周血单个核细胞(PBMC),加入IFN-γ、IL-2、CD3McAb和IL-1,体外诱导成CIK细胞。用MTT法测定CIK细胞、顺铂及两者联合对人卵巢癌细胞株SKOV3/CDDP细胞的杀伤活性。在SCID小鼠腹腔内接种卵巢癌SKOV3/CDDP细胞,观察CIK细胞对荷瘤鼠的体内抑瘤作用,并用RIA法检测各组血清中CA125的含量。结果:顺铂对SKOV3/CDDP细胞的IC50为315.5μg/ml,较其对SKOV3细胞的IC50(85μg/ml)增加了4倍;CIK细胞对SKOV3与SKOV3/CDDP细胞的杀伤活性均在48h最高,且随效靶比的增高而增强,其对SKOV3/CDDP细胞的杀伤活性明显高于SKOV3(P<0.05)。仅25μg/ml的顺铂即可使效靶比为12.5∶1组中的联合杀伤率比单纯顺铂组增加5.8倍,比单纯加CIK(相同效靶比)细胞杀伤率增加2.3倍,且随效靶细胞比值和顺铂浓度的升高呈依赖性增加。与对照组相比,CIK组与CIK+顺铂组均能显著抑制癌性结节的生长,抑瘤率达100%,且3组SCID鼠血中CA125值有显著性差异(P<0.05)。结论:正常人CIK细胞联合顺铂对清除晚期卵巢癌表达耐药蛋白的腹腔种植转移病灶可能会有较好的效果,并有希望成为前景良好的综合治疗方案。 展开更多
关键词 卵巢 多药耐药 细胞因子诱导的杀伤细胞 顺铂 卵巢癌耐药细胞skov3/CDDP
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杨梅素对人卵巢癌SKOV3细胞的凋亡诱导作用 被引量:6
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作者 于洋 刘亚萌 +6 位作者 吴少花 谢奇 衣丹 徐海月 胡耀狄 陈君 徐冶 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期902-906,I0001,I0002,共7页
目的:观察杨梅素对人卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制及凋亡诱导作用,并探讨其可能机制。方法:体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,按杨梅素给药浓度将细胞分为对照组和低、中、高浓度杨梅素组,杨梅素给药浓度分别为0、20、40和60mg·L-1。MTT法... 目的:观察杨梅素对人卵巢癌SKOV3细胞的生长抑制及凋亡诱导作用,并探讨其可能机制。方法:体外培养人卵巢癌SKOV3细胞,按杨梅素给药浓度将细胞分为对照组和低、中、高浓度杨梅素组,杨梅素给药浓度分别为0、20、40和60mg·L-1。MTT法检测各组SKOV3细胞存活率;激光共聚焦显微镜观察各组SKOV3细胞核形态变化并计算异常细胞核比率;免疫荧光法检测各组SKOV3细胞中凋亡相关蛋白-活化半胱氨酸蛋白酶3(active Caspase-3)的表达;Western blotting法检测各组SKOV3细胞中DNA损伤相关蛋白γ-H2AX的表达水平。结果:与对照组比较,低、中和高浓度杨梅素组SKOV3细胞存活率明显下降(t=-12.35,t=-11.42,t=-10.21,P<0.05);激光共聚焦显微镜下各浓度杨梅素组细胞出现核皱缩等凋亡形态学改变,且细胞中异常细胞核比率高于对照组(t=6.87,t=9.35,t=7.22,P<0.05),高浓度杨梅素组异常细胞核比率高于低、中浓度杨梅素组(t=9.55,t=7.25,P<0.05);随着杨梅素给药浓度的增加,SKOV3细胞中active Caspase-3的表达水平有升高趋势,各浓度杨梅素组SKOV3细胞中γ-H2AX的表达水平高于对照组(t=5.41,t=3.21,t=6.58,P<0.05)。结论:杨梅素可抑制人卵巢癌SKOV3细胞增殖并诱导其凋亡,DNA双链断裂可能是其促凋亡的机制之一。 展开更多
关键词 杨梅素 卵巢肿瘤 skov3细胞 细胞凋亡 DNA双链断裂
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抑制miRNA-301a表达对卵巢癌中SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭的影响 被引量:12
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作者 曾小芳 熊艳杰 +4 位作者 乌日娜 傅彩虹 张春香 冉淑玲 赵俊暕 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期92-94,共3页
目的探讨抑制miRNA-301a表达对卵巢癌中SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法转染miRNA-301a抑制剂抑制SKOV3细胞中miRNA-301a表达,采用CCK8法、划痕实验和Transwell实验分别检测SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭;应用Western blot检测p-PI3... 目的探讨抑制miRNA-301a表达对卵巢癌中SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法转染miRNA-301a抑制剂抑制SKOV3细胞中miRNA-301a表达,采用CCK8法、划痕实验和Transwell实验分别检测SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭;应用Western blot检测p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白水平。结果增殖实验、划痕实验、Transwell实验显示,抑制miRNA-301a表达能显著抑制SKOV3细胞的增殖、迁移及侵袭(P<0.05),减少p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白水平(P<0.05)。结论抑制miRNA-301a表达能有效抑制SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭,其可能通过影响PI3K/AKT/mTOR信号通路的激活发挥作用。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 miRNA-301a skov3细胞 PI3K/AKT/mTOR信号通路
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