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miR-122-5p靶向ADAM10调控Notch信号通路对人卵巢癌细胞SKOV-3的上皮-间质转化的抑制作用 被引量:11
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作者 李根林 刘杰 +2 位作者 谢晶 余芙蓉 胡意 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第1期54-59,共6页
目的研究miR-122-5p对人卵巢癌细胞SKOV-3上皮-间质转化(EMT)的影响,阐明其可能机制。方法常规体外培养人卵巢癌细胞SKOV-3,将miR-122-5p模拟物(miR-122-5p mimic)及其阴性对照(mimic NC)转染至SKOV-3细胞,分为空白对照组(Blank组)、mim... 目的研究miR-122-5p对人卵巢癌细胞SKOV-3上皮-间质转化(EMT)的影响,阐明其可能机制。方法常规体外培养人卵巢癌细胞SKOV-3,将miR-122-5p模拟物(miR-122-5p mimic)及其阴性对照(mimic NC)转染至SKOV-3细胞,分为空白对照组(Blank组)、mimic NC组和miR-122-5p mimic组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞miR-122-5p和ADAM10 mRNA的表达水平;Western blot检测各组细胞ADAM10蛋白的表达水平;生物信息学预测miR-122-5p与ADAM10靶向匹配,采用双荧光素酶报告系统验证两者在SKOV-3细胞中的靶向关系。再将miR-122-5p mimic和ADAM10过表达质粒(pcDNA-ADAM10)分别或同时转染至SKOV-3细胞中,分为空白对照组(Blank组)、miR-122-5p mimic组、ADAM10过表达组(pc-ADAM10组)和miR-122-5p mimic+pc-ADAM10组,采用Transwell检测SKOV-3细胞的迁移和侵袭能力;Western blot检测细胞Notch信号通路相关蛋白Notch1、HES1和HEY1,EMT相关蛋白Snail、E-cadherin和N-cadherin的表达水平。结果 miR-122-5p mimic组SKOV-3细胞中miR-122-5p的表达水平较mimic NC组的升高(P<0.01),表明miR-122-5p mimic稳定转染至SKOV-3细胞。miR-122-5p mimic组SKOV-3细胞中ADAM10 mRNA和蛋白的表达水平较mimic NC组的降低(P<0.01),双荧光素酶报告系统证实ADAM10是miR-122-5p靶基因。与Blank组比较,miR-122-5p mimic组SKOV-3细胞发生迁移和侵袭的数量降低(t=6.004,P<0.05;t=7.289,P<0.01),而pc-ADAM10组的升高(t=13.181,P<0.001;t=11.504,P<0.01);miR-122-5p mimic组细胞的Notch、HES1、HEY1、Snail和N-cadherin蛋白表达水平下降(P<0.05,P<0.01),而pc-ADAM10组的上升(P<0.01);miR-122-5p mimic组细胞的E-cadheirn蛋白表达水平上升(P<0.01),而pc-ADAM10组的下降(P<0.01)。与pc-ADAM10组比较,miR-122-5p mimic+pc-ADAM10能减弱pc-ADAM10的促EMT作用,且下调Notch信号通路活性。结论 miR-122-5p通过阻断Notch信号通路抑制人卵巢癌细胞SKOV-3的EMT,其机制可能与miR-122-5p靶向抑制ADAM10的表达有关。 展开更多
关键词 人卵巢癌细胞skov-3 上皮-间质转化 NOTCH信号通路 去整合素金属蛋白酶10
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表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂厄洛替尼联合山奈酚诱导卵巢癌细胞凋亡的协同机制 被引量:10
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作者 张宝月 张俊农 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期31-35,共5页
目的:探讨厄洛替尼和山奈酚对表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR-TPK)的抑制作用,并阐明二者对卵巢癌细胞生长的协同抑制作用机制。方法:培养人卵巢癌SKOV-3细胞,将细胞分为空白组、山奈酚组和厄洛替尼组,将不同浓度山奈酚与厄洛替尼加入... 目的:探讨厄洛替尼和山奈酚对表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR-TPK)的抑制作用,并阐明二者对卵巢癌细胞生长的协同抑制作用机制。方法:培养人卵巢癌SKOV-3细胞,将细胞分为空白组、山奈酚组和厄洛替尼组,将不同浓度山奈酚与厄洛替尼加入到EGFR-TPK和人卵巢癌SKOV-3细胞中,ELISA法检测EGFR-TPK的活性,采用Transwell小室法检测各组SKOV-3细胞侵袭转移能力,采用酶标仪检测各组SKOV-3细胞凋亡蛋白caspase-3活性,MTT法检测各组SKOV-3细胞的生长抑制率及山奈酚联合厄洛替尼对SKOV-3细胞的生长抑制作用。结果:山奈酚和厄洛替尼对EGFR-TPK的半数抑制浓度(IC50)分别为(2.33±0.32)g·L-1和(1.75±0.18)g·L-1,二者比较差异无统计学意义(P>0.05)。与空白组比较,山奈酚和厄洛替尼组穿膜细胞数减少(P<0.05或P<0.01),SKOV-3细胞中凋亡蛋白caspase-3活性明显增加(P<0.05或P<0.01)。随着山奈酚和厄洛替尼浓度增加,SKOV-3细胞生长抑制率不断增加,与空白组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:山奈酚联合厄洛替尼对人卵巢癌SKOV-3细胞具有协同抑制作用,并对SKOV-3细胞转移起到抑制作用。 展开更多
关键词 山奈酚 厄洛替尼 表皮生长因子受体酪氨酸激酶 skov-3人卵巢癌细胞株 抑制作用 细胞凋亡 caspase-3
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大七气汤单用及联合顺铂对SKOV-3细胞移植瘤Survivin与Caspase-3表达的影响
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作者 杨洋博君 李舒 +1 位作者 王爽 陈蓉 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期29-34,共6页
目的探讨大七气汤加减方(姜黄、三棱、莪术、半枝莲等)单用及联合顺铂对SKOV-3细胞移植瘤Survivin与Caspase-3表达的影响。方法将SKOV-3细胞移植瘤造模成功的40只荷瘤鼠随机分为模型对照组、大七气汤低、高剂量组、顺铂组、顺铂联合大... 目的探讨大七气汤加减方(姜黄、三棱、莪术、半枝莲等)单用及联合顺铂对SKOV-3细胞移植瘤Survivin与Caspase-3表达的影响。方法将SKOV-3细胞移植瘤造模成功的40只荷瘤鼠随机分为模型对照组、大七气汤低、高剂量组、顺铂组、顺铂联合大七气汤组,每组8只,给药21 d后处死所有荷瘤鼠,称瘤重,测瘤体积,以逆转录-聚合酶链反应法和蛋白质印迹法检测瘤组织Survivin、Caspase-3 m RNA及蛋白的表达。结果各用药组瘤重和瘤体积均小于模型对照组(P<0.01);逆转录-聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测结果显示中药组Survivin m RNA及蛋白表达明显低于模型对照组(P<0.01),且大七气汤低剂量组与DDP顺铂组比较差异有统计学意义(P<0.05),且DDP联合大七气汤组表达最低;用药组Caspase-3 m RNA和蛋白表达明显高于模型对照组(P<0.01),且大七气汤低剂量组与顺铂组比较差异有统计学意义(P<0.05),且顺铂联合大七气汤组表达最高。结论大七气汤加减方能够下调Survivin和上调Caspase-3的表达来达到抑制肿瘤细胞生长和促进肿瘤细胞凋亡,且大七气汤联合顺铂对SKOV-3细胞移植瘤治疗具有增效作用。 展开更多
关键词 大七气汤 顺铂 人卵巢癌细胞skov-3 SURVIVIN Caspase-3
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过渡金属铜修饰的仲钨酸盐抑制人卵巢癌细胞增殖的研究 被引量:2
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作者 张静 曲小姝 +1 位作者 刘树萍 杨艳艳 《东北师大学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期92-96,共5页
研究了过渡金属铜修饰的仲钨酸盐化合物[Na_2(H_2O)_(10)][Cu_4(H_2O)_(12)(H_2W_(12)O_(42))]·15H_2O(CuW_(12))的体外抗肿瘤活性.取人卵巢癌细胞SKOV-3加入不同浓度CuW_(12)处理,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法分析细胞增殖,计... 研究了过渡金属铜修饰的仲钨酸盐化合物[Na_2(H_2O)_(10)][Cu_4(H_2O)_(12)(H_2W_(12)O_(42))]·15H_2O(CuW_(12))的体外抗肿瘤活性.取人卵巢癌细胞SKOV-3加入不同浓度CuW_(12)处理,应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法分析细胞增殖,计算了半数抑制浓度(IC_(50));采用光学显微镜观察SKOV-3细胞的凋亡形态变化;分析了细胞周期和细胞凋亡,计算了各期细胞比例及细胞凋亡率.结果表明:CuW_(12)对SKOV-3细胞增殖抑制的IC_(50)值为45.2μmol/L,且呈剂量依赖性;与经典的仲钨酸盐Na_(10)(H_2W_(12)O_(42))·26H_2O(NaW_(12))相比,过渡金属铜修饰的仲钨酸盐抗肿瘤活性更强;光学显微镜下观察到CuW_(12)处理组细胞数目明显减少,出现变圆、缩小、老化等形态变化;不同浓度CuW_(12)处理12h后早期凋亡细胞所占的百分比显著增加且呈剂量依赖性. 展开更多
关键词 仲钨酸盐 人卵巢癌细胞skov-3 抗肿瘤
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DACT1对Ⅰ型卵巢癌恶性侵袭行为的影响 被引量:2
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作者 李若男 刘斌 令狐华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第19期2158-2163,共6页
目的探讨β-环连蛋白抑制基因1(dapper antagonist of catenin-1,DACT1)对Ⅰ型上皮性卵巢癌迁移侵袭能力的影响及可能机制。方法免疫组织化学检测Ⅰ型人卵巢癌临床组织中DACT1的表达;采用人黏液性卵巢癌细胞株3AO构建外源性转染DACT1的... 目的探讨β-环连蛋白抑制基因1(dapper antagonist of catenin-1,DACT1)对Ⅰ型上皮性卵巢癌迁移侵袭能力的影响及可能机制。方法免疫组织化学检测Ⅰ型人卵巢癌临床组织中DACT1的表达;采用人黏液性卵巢癌细胞株3AO构建外源性转染DACT1的稳转株,通过划痕实验、Transwell迁移及基质胶侵袭实验检测细胞运动能力;免疫荧光观察DACT1对细胞骨架重塑的影响。结果Ⅰ型卵巢癌组织中DACT1表达低于正常卵巢组织(P<0.01)。外源性转染DACT1后3AO细胞株迁移侵袭能力降低(P<0.01),且腹腔内成瘤能力有所下降,细胞骨架中特化膜结构减少。结论 DACT1对Ⅰ型卵巢癌浸润转移具有抑制效应,其在Ⅰ型卵巢癌组织中的低表达可能与其疾病发生相关。 展开更多
关键词 Ⅰ型卵巢 β-环连蛋白抑制基因1 卵巢癌细胞3AO 迁移侵袭
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