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反转录病毒载体介导的EGFP基因在SK-N-SH神经母细胞瘤细胞中的表达
被引量：
7
1
作者
刘朝晖
杨宇
+3 位作者
庄鹏辉
许杰华
马延兵
胡海涛
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期10-13,共4页
目的构建携带报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的反转录病毒载体,并且探讨病毒载体对SK-N-SH神经母细胞瘤细胞株的感染效率。方法使用基因重组技术构建携带EGFP基因的反转录病毒载体(RV/EGFP)。将稀释的RV病毒液感染NIH3T3细胞,计数NIH...
目的构建携带报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的反转录病毒载体,并且探讨病毒载体对SK-N-SH神经母细胞瘤细胞株的感染效率。方法使用基因重组技术构建携带EGFP基因的反转录病毒载体(RV/EGFP)。将稀释的RV病毒液感染NIH3T3细胞,计数NIH3T3荧光表达细胞的数量来确定病毒的浓度;使用RV载体感染SK-N-SH细胞,通过流式细胞学荧光检测明确RV在SK-N-SH细胞的感染效率。结果成功构建了基因转移载体RV/EGFP,确定重组病毒的浓度为8.3×106病毒颗粒/mL。在SK-N-SH细胞RV/EGFP稳定转染并有效表达。在SK-N-SH细胞EGFP的荧光表达显示RV的转移并且表达的效率达到30%以上。结论SK-N-SH细胞能被RV病毒载体有效感染,在转基因细胞株外源基因的表达长期稳定并且显示RV病毒载体具有良好的基因转移效率。
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关键词
sk—n—sh神经母细胞瘤细胞
增强型绿色荧光蛋白
反转录病毒载体
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职称材料
半胱氨酰白三烯受体1拮抗剂普鲁司特调节SK-N-SH细胞分化
被引量：
5
2
作者
彭芳
方三华
+3 位作者
郑晓亮
张纬萍
卢韵碧
魏尔清
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
2007年第2期123-129,共7页
目的:观察半胱氨酰白三烯受体激动剂LTD4以及受体1(CysLT1)拮抗剂普鲁司特对人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH细胞分化的影响。方法:以维A酸为阳性对照,观察LTD4、普鲁司特、LTD4+普鲁司特诱导SK-N-SH细胞形态学变化;用免疫印迹法观察SK-N-S...
目的:观察半胱氨酰白三烯受体激动剂LTD4以及受体1(CysLT1)拮抗剂普鲁司特对人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH细胞分化的影响。方法:以维A酸为阳性对照,观察LTD4、普鲁司特、LTD4+普鲁司特诱导SK-N-SH细胞形态学变化;用免疫印迹法观察SK-N-SH细胞CysLT1和CysLT2受体的表达;用免疫荧光法观察神经元分化标记物微管相关蛋白(MAP-2)的表达。结果:免疫印迹显示,SK-N-SH表达CysLT1受体和CysLT2受体,CysLT2受体表达较多。形态学结果显示,维A酸、普鲁司特、LTD4+普鲁司特诱导SK-N-SH细胞发生形态学改变,表现为胞体变小,有明显的突起生长;而LTD4无明显作用。免疫荧光结果显示,在对照组和普鲁司特组MAP-2主要分布于胞体;在维甲酸组MAP-2除了分布于胞体外,还分布于突起。普鲁司特增加MAP-2阳性细胞数。结论:CysLT1受体拮抗剂普鲁司特参与SK-N-SH细胞分化的调节。
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关键词
白三烯类/治疗应用
受体
白三烯
神经
母细胞
瘤
/病理学
半胱氨酰白三烯受体
白三烯D4
普鲁司特
sk—
n
—sh
细胞
细胞
分化
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职称材料
题名
反转录病毒载体介导的EGFP基因在SK-N-SH神经母细胞瘤细胞中的表达
被引量：
7
1
作者
刘朝晖
杨宇
庄鹏辉
许杰华
马延兵
胡海涛
机构
西安交通大学医学院人体解剖与组织胚胎学系
吉林大学第一医院神经内科
西安交通大学医学院第一附属医院胸外科
出处
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期10-13,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30300395No.30400515)
教育部博士点基金项目(No.20030698011)
文摘
目的构建携带报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的反转录病毒载体,并且探讨病毒载体对SK-N-SH神经母细胞瘤细胞株的感染效率。方法使用基因重组技术构建携带EGFP基因的反转录病毒载体(RV/EGFP)。将稀释的RV病毒液感染NIH3T3细胞,计数NIH3T3荧光表达细胞的数量来确定病毒的浓度;使用RV载体感染SK-N-SH细胞,通过流式细胞学荧光检测明确RV在SK-N-SH细胞的感染效率。结果成功构建了基因转移载体RV/EGFP,确定重组病毒的浓度为8.3×106病毒颗粒/mL。在SK-N-SH细胞RV/EGFP稳定转染并有效表达。在SK-N-SH细胞EGFP的荧光表达显示RV的转移并且表达的效率达到30%以上。结论SK-N-SH细胞能被RV病毒载体有效感染,在转基因细胞株外源基因的表达长期稳定并且显示RV病毒载体具有良好的基因转移效率。
关键词
sk—n—sh神经母细胞瘤细胞
增强型绿色荧光蛋白
反转录病毒载体
Keywords
sk
-
n
-
sh
n
euroblastoma cell
e
n
ha
n
ced gree
n
fluoresce
n
t protei
n
retroviral vector
分类号
R592 [医药卫生—老年医学]
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职称材料
题名
半胱氨酰白三烯受体1拮抗剂普鲁司特调节SK-N-SH细胞分化
被引量：
5
2
作者
彭芳
方三华
郑晓亮
张纬萍
卢韵碧
魏尔清
机构
浙江大学医学院药理学教研室
出处
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
2007年第2期123-129,共7页
基金
国家自然科学基金(30672449)资助项目
文摘
目的:观察半胱氨酰白三烯受体激动剂LTD4以及受体1(CysLT1)拮抗剂普鲁司特对人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH细胞分化的影响。方法:以维A酸为阳性对照,观察LTD4、普鲁司特、LTD4+普鲁司特诱导SK-N-SH细胞形态学变化;用免疫印迹法观察SK-N-SH细胞CysLT1和CysLT2受体的表达;用免疫荧光法观察神经元分化标记物微管相关蛋白(MAP-2)的表达。结果:免疫印迹显示,SK-N-SH表达CysLT1受体和CysLT2受体,CysLT2受体表达较多。形态学结果显示,维A酸、普鲁司特、LTD4+普鲁司特诱导SK-N-SH细胞发生形态学改变,表现为胞体变小,有明显的突起生长;而LTD4无明显作用。免疫荧光结果显示,在对照组和普鲁司特组MAP-2主要分布于胞体;在维甲酸组MAP-2除了分布于胞体外,还分布于突起。普鲁司特增加MAP-2阳性细胞数。结论:CysLT1受体拮抗剂普鲁司特参与SK-N-SH细胞分化的调节。
关键词
白三烯类/治疗应用
受体
白三烯
神经
母细胞
瘤
/病理学
半胱氨酰白三烯受体
白三烯D4
普鲁司特
sk—
n
—sh
细胞
细胞
分化
Keywords
Leukotrie
n
es/ther use
Receptors,leukotrie
n
e
n
euroblastoma/pathol
Cystei
n
yl leukotrie
n
e receptor
Leukotrie
n
e D4
Pra
n
lukast,
sk
-
n
-
sh
cell
Cell differe
n
tiatio
n
分类号
R96 [医药卫生—药理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
反转录病毒载体介导的EGFP基因在SK-N-SH神经母细胞瘤细胞中的表达
刘朝晖
杨宇
庄鹏辉
许杰华
马延兵
胡海涛
《西安交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007
7
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
半胱氨酰白三烯受体1拮抗剂普鲁司特调节SK-N-SH细胞分化
彭芳
方三华
郑晓亮
张纬萍
卢韵碧
魏尔清
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
2007
5
在线阅读
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职称材料
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0
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