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利用细菌人工染色体构建人SIRPα转基因兔模型
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作者 杨素杰 陶源 +6 位作者 耿阳 赵多维 李传沛 尹智 赵祥杰 刘忠华 宋军 《东北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2024年第8期171-180,共10页
异种细胞和组织移植是免疫缺陷动物主要研究方向之一,为增强免疫缺陷动物对人源细胞与组织的亲和性,降低免疫排斥反应,常通过转入人SIRPα(Signal regulatory proteinα)基因使其免疫细胞表达人源SIRPA蛋白。hSIRPA蛋白可识别并结合人... 异种细胞和组织移植是免疫缺陷动物主要研究方向之一,为增强免疫缺陷动物对人源细胞与组织的亲和性,降低免疫排斥反应,常通过转入人SIRPα(Signal regulatory proteinα)基因使其免疫细胞表达人源SIRPA蛋白。hSIRPA蛋白可识别并结合人源移植细胞上的CD47分子,形成“不要吃我”信号,抑制吞噬细胞吞噬,显著降低受体动物对外来细胞和组织的免疫排斥反应,提高其在动物体内的移植效果。研究通过显微操作技术将含有hSIRPα基因的BAC质粒注射到兔受精卵原核中,经胚胎移植成功获得h SIRPα转基因兔。通过PCR、real-time PCR、流式细胞术等方法检测转基因兔基因型与表型。结果表明:通过检测F0和F1两代hSIRPα转基因兔基因型,hSIRPα基因被完整地转入兔体内。在转基因各组织中hSIRPα基因表达水平存在差异,在回肠、胃、脾脏中,hSIRPα基因表达水平显著高于野生型兔;外周血流式细胞技术检测结果可知,hSIRPα在转基因兔的表达水平高于野生型,不影响兔免疫细胞及组分正常发育。综上,试验成功获得hSIRPα转基因兔,为获得类似于NSG、NOG小鼠的免疫缺陷兔模型奠定基础。 展开更多
关键词 细菌人工染色体(BAC) 转基因兔模型 h sirpα基因 sirpα-cd47抑制性信号
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