荔枝核黄酮类化合物对SARS-CoV 3CL蛋白酶抑制作用的研究 被引量：18

1

作者 龚受基 苏小建 +4 位作者 虞海平 李佳 覃永俊 徐庆 罗伟生 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期699-700,共2页

关键词 荔枝核黄酮类化合物 sars-cov 3CL蛋白酶 抑制 作用

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SARS-CoVS蛋白功能性受体ACE2在人角膜、结膜中的表达 被引量：19

2

作者 柳林 孙琰 +3 位作者 潘欣 沈炜 刘志勇 刘银平 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2004年第6期561-564,共4页

目的检测人角膜、结膜中血管紧张素转化酶2(ACE 2)的表达,由此来初步推断重症急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒由眼部入侵的可能.方法取成人眼球破裂伤摘除的眼角膜和结膜组织及4～6个月中期引产胎儿的眼角膜、结膜、心、肺组织,分别采用RT... 目的检测人角膜、结膜中血管紧张素转化酶2(ACE 2)的表达,由此来初步推断重症急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒由眼部入侵的可能.方法取成人眼球破裂伤摘除的眼角膜和结膜组织及4～6个月中期引产胎儿的眼角膜、结膜、心、肺组织,分别采用RT-PCR和免疫组化方法检测组织中ACE 2的表达.取成人尸体解剖的心、肺组织作为对照.结果在上述各种组织中均检测到了ACE.2的表达.结论眼角膜、结膜是人体暴露于SARS冠状病毒的一个重要部位,研究结果从mRNA和蛋白质水平证实了眼部组织存在SARS冠状病毒S蛋白的功能性受体ACE 2,由此初步推断SARS-CoV存在由眼部入侵的可能,为临床进一步研究SARS的防护和致病机制提供了线索. 展开更多

关键词 sars-cov S蛋白 功能性受体 血管紧张素转化酶 角膜 结膜

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SARS-CoVS蛋白功能性受体ACE2在人、兔角膜、结膜中的表达 被引量：27

3

作者 孙琰 潘欣 +1 位作者 柳林 倪灿荣 《眼科新进展》 CAS 2004年第5期332-336,共5页

目的　SARS冠状病毒 (SARS CoV)的S蛋白介导了病毒与宿主细胞的结合 ,最近已鉴定出SARS CoVS蛋白的功能性受体是血管紧张素转化酶 2 (angiotensin convertingenzyme 2 ,ACE2 )。本研究检测了ACE2在人、兔眼结膜、角膜中的表达 ,由此来... 目的　SARS冠状病毒 (SARS CoV)的S蛋白介导了病毒与宿主细胞的结合 ,最近已鉴定出SARS CoVS蛋白的功能性受体是血管紧张素转化酶 2 (angiotensin convertingenzyme 2 ,ACE2 )。本研究检测了ACE2在人、兔眼结膜、角膜中的表达 ,由此来初步推断SARS CoV由眼部入侵的可能。方法　分别采取 :(1)成人眼球破裂伤摘除的眼角膜和结膜组织 ;(2 ) 4～ 6月中期引产胎儿的眼角膜、结膜、心、肺组织 ;(3)兔眼角膜、结膜、心、肺组织 ;(4 )培养的人结膜成纤维细胞和兔角膜上皮细胞。分别采用RT PCR和免疫组化方法检测各组织、细胞中ACE2的表达。取尸体解剖的成人心、肺组织作为对照。结果　RT PCR法在上述各种组织和细胞中均检测到ACE2的扩增条带 ,其中胎儿、成人和兔的角膜、结膜扩增条带较心、肺稍弱 ,兔各组织的扩增条带亮度与对应的人体组织的扩增条带亮度相近。ACE2免疫组化反应产物主要位于胞浆和胞膜 ,呈棕黄色或棕褐色。角膜和结膜的上皮细胞及角膜内皮细胞呈明显的阳性表达 ,角膜和结膜的成纤维细胞呈弱阳性表达 ,培养的人结膜成纤维细胞和兔角膜上皮细胞亦可见阳性表达。兔组织中的ACE2表达强度及组织定位与人相近。结论　本研究从mRNA和蛋白质水平证实了眼组织存在SARS冠状病毒S蛋白的功能性受体ACE2 ,由? 展开更多

关键词 sars-cov S蛋白 功能性受体 血管紧张素转化酶2 角膜 结膜

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SARS-CoV N蛋白和MAP19的相互作用 被引量：6

4

作者 刘俊丽 曹诚 马清钧 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期777-779,共3页

目的:研究SARS-CoV N蛋白与MAP19之间的相互作用。方法:利用免疫共沉淀试验验证SARS-CoV N蛋白与MAP19的相互作用,并利用Western blot检测SARS-CoV N蛋白对MAP19表达量的影响。结果:SARS-CoV N蛋白与MAP19能够在细胞内相互作用,且SARS-C... 目的:研究SARS-CoV N蛋白与MAP19之间的相互作用。方法:利用免疫共沉淀试验验证SARS-CoV N蛋白与MAP19的相互作用,并利用Western blot检测SARS-CoV N蛋白对MAP19表达量的影响。结果:SARS-CoV N蛋白与MAP19能够在细胞内相互作用,且SARS-CoV N能够显著提高MAP19的表达量。结论:SARS-CoV N蛋白与MAP19能够在细胞内形成复合物,将为进一步研究SARS-CoV N蛋白与MAP19相互作用的生物学功能提供实验基础。 展开更多

关键词 sars-cov N MAP19 相互作用

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儿童支气管哮喘合并SARS-CoV-2感染的防控与诊疗方案 被引量：3

5

作者 王颖硕 周云连 +3 位作者 张园园 唐兰芳 陈志敏 洪建国 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期233-235,共3页

2019年12月份以来,新型冠状病毒(2019-nCoV)感染在我国湖北及其他地区流行.2020年2月11日,世界卫生组织(WHO)正式将 SARS-CoV-2感染引起的疾病命名为COVID-19(corona virus disease-19).同日,国际病毒分类委员会正式将此病毒命名为严重... 2019年12月份以来,新型冠状病毒(2019-nCoV)感染在我国湖北及其他地区流行.2020年2月11日,世界卫生组织(WHO)正式将 SARS-CoV-2感染引起的疾病命名为COVID-19(corona virus disease-19).同日,国际病毒分类委员会正式将此病毒命名为严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2).SARS-CoV-2对人群普遍易感,包括儿童.目前全国报道儿童感染人数已达数百例,最小者仅生后36小时[1]. 展开更多

关键词 诊疗方案 sars-cov 疾病命名 严重急性呼吸综合征冠状病毒

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果子狸SARS-CoV实验性感染的病理学研究 被引量：2

6

作者 肖一红 孟庆文 +6 位作者 尹训南 关云涛 刘永刚 李昌文 王牟平 孔宪刚 吴东来 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期477-480,484,共5页

目的为了明确实验性感染SARS-CoV的果子狸各器官的病理变化,进一步确定SARS-CoV与果子狸的关系,评价其作为SARS动物模型的可行性。方法在人源SARS-CoV分离株BJ01(有29个核苷酸的缺失序列)和GD01(无29个核苷酸的缺失序列)实验性感染果子... 目的为了明确实验性感染SARS-CoV的果子狸各器官的病理变化,进一步确定SARS-CoV与果子狸的关系,评价其作为SARS动物模型的可行性。方法在人源SARS-CoV分离株BJ01(有29个核苷酸的缺失序列)和GD01(无29个核苷酸的缺失序列)实验性感染果子狸的基础上,对其经福尔马林固定的肺、脾、淋巴结、肝、小肠、肾、气管、大脑、胰腺、性腺、胃、心组织进行病理组织学观察,同时用原位杂交技术(ISH)对SARS-CoV在组织器官中的分布进行检测。结果攻毒后不同时期,肺、脾、淋巴结、肝、小肠、肾和大脑有不同程度的病理变化,主要病变是肺脏为急性间质性肺炎:肺炎性水肿、肺泡腔浆液渗出以及肺泡壁充血、出血并因淋巴细胞、巨噬细胞增生、浆液渗出而显著增厚,肺内小血管增生、扩张。淋巴结、脾脏结构破坏,淋巴滤泡消失,脾小体萎缩,淋巴细胞明显减少,结缔组织增生。肝细胞脂肪变性,并见有多个淋巴细胞浸润灶。ISH结果显示,在肺、小肠、大脑中检测到SARS-CoV基因,其它器官中未检到,与SARS患者的检测结果基本相符。结论果子狸实验性感染SARS-CoV可导致与人类相似的病理学变化和病原分布,表明果子狸可以作为评价SARS-CoV疫苗及治疗药物的动物模型。 展开更多

关键词 sars-cov 果子狸 冠状病毒感染 原位杂交

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抗SARS-CoV重组纤突蛋白单克隆抗体的制备和鉴定 被引量：1

7

作者 秦宇 李梅 +4 位作者 刘中华 石立莹 毛乃颖 许文波 李晓眠 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期611-612,共2页

关键词 sars-cov 重组纤突蛋白 单克降抗体

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恒河猴感染SARS-CoV的病毒学、血清学检测 被引量：1

8

作者 魏强 王健伟 +12 位作者 张扬清 鲍琳琳 涂新明 蒋虹 高红 丛喆 朱华 邓巍 佟巍 张兵林 黄澜 刘亚莉 秦川 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2005年第3期144-146,共3页

目的对感染SARS-CoV的8只恒河猴进行病毒学、血清学指标检测.方法SARS-CoV经鼻腔接种8只恒河猴,在感染的第1天开始到5、7、10、15、20、30和60天分别安乐处死时,不同时间取咽拭子、血液和脏器,进行病毒分离,RT-PCR检测和抗体测定.结果RT... 目的对感染SARS-CoV的8只恒河猴进行病毒学、血清学指标检测.方法SARS-CoV经鼻腔接种8只恒河猴,在感染的第1天开始到5、7、10、15、20、30和60天分别安乐处死时,不同时间取咽拭子、血液和脏器,进行病毒分离,RT-PCR检测和抗体测定.结果RT-PCR证实感染病毒检出时间为5～16 d,8只猴中的5只分离到了病毒,感染15 d后可检测到抗体.结论感染SARS-CoV的恒河猴不仅出现与SARS患者类似的临床和病理学改变,也在一定时期内排毒,出现特异免疫反应,这些指标均可作为药物筛选、疫苗评价等方面的重要参数. 展开更多

关键词 sars-cov 恒河猴 血清学 病毒学

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SARS-CoV S1蛋白在甲醇营养型酵母中表达及鉴定 被引量：1

9

作者 何仰东 姜曼 +1 位作者 倪兵 吴玉章 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第18期1837-1840,共4页

目的获得保持生物学活性、易于纯化、高产量的严重急性呼吸道综合征冠状病毒(severe acute resp iratorysyndrom coronavirus,SARS-CoV)S1蛋白,以便进一步研究S1蛋白及其抗体的功能。方法将SARS-CoV S1基因重组入酵母表达载体pMETαA,... 目的获得保持生物学活性、易于纯化、高产量的严重急性呼吸道综合征冠状病毒(severe acute resp iratorysyndrom coronavirus,SARS-CoV)S1蛋白,以便进一步研究S1蛋白及其抗体的功能。方法将SARS-CoV S1基因重组入酵母表达载体pMETαA,经过酶切和测序鉴定后,通过电穿孔法将重组质粒S1-pMETαA转化入宿主酵母菌株PMAD11,使其在甲醇的诱导下表达目的蛋白。最后用覆盖分析法对重组转化子初步分析,SDS-PAGE和W esntern b lotting法鉴定目的蛋白的表达和特异性。结果酶切鉴定和测序结果证实了S1基因成功地克隆到pMETαA载体中;覆盖分析、SDS-PAGE和免疫印迹法证实S1基因得到正确的表达。结论利用酵母表达系统,成功地克隆和表达了SARS-CoV S1蛋白,为进一步纯化该蛋白和研究其功能奠定了基础。 展开更多

关键词 sars-cov S1蛋白 真核表达系统 甲醇营养型酵母

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SARS-CoV中和抗体保护恒河猴等感染SARS-CoV研究 被引量：1

10

作者 秦川 魏强 +9 位作者 高红 涂新明 蒋虹 邓巍 鲍琳琳 朱华 佟巍 李国生 黄澜 刘亚莉 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2005年第S1期35-36,共2页

[目的]阐明SARS病毒感染后能否再次感染,疫苗产生的抗体中长期保护效果,被动免疫是否真正安全有效等,为防治SARS提供实验依据。[方法]实验分4组,分别为一组(SARS恒河猴恢复组):用感染SARS-CoV发病12月后的4只恒河猴,均有中和抗体产生。... [目的]阐明SARS病毒感染后能否再次感染,疫苗产生的抗体中长期保护效果,被动免疫是否真正安全有效等,为防治SARS提供实验依据。[方法]实验分4组,分别为一组(SARS恒河猴恢复组):用感染SARS-CoV发病12月后的4只恒河猴,均有中和抗体产生。二组(SARS食蟹猴恢复组):用感染SARS-CoV发病12月后的3只食蟹猴,均有中和抗体产生。三组(SARS血清输入恒河猴组):3只恒河猴,病毒接种时中和抗体阴性。病毒接种两天后输入抗体阳性血清(恒河猴血清,感染获得,效价为:1:128),用量10ml/只,分别经肌肉和静脉输入,各5ml。四组(恒河猴SARS-CoV感染组):2只恒河猴,病毒接种时中和抗体阴性。SARSCo-V经鼻腔接种,在感染的第1天开始到7天安乐死时,不同时间取咽拭子、血液和脏器,进行病毒分离,RT-PCR检测和中和抗体测定。[结果]一组(SARS恒河猴恢复组):接种SARS-CoV后未见发热等异常临床表现。血清生化无ALT、LDH、CK、总蛋白和血清白蛋白异常。3只猴在接种病毒后的咽拭子中,RT-PCR分别未检出、第1天检出、第1-3天中检出病毒。第2、5、7天咽拭子中、7天安乐死时血、肺、肝、脾和淋巴结等组织中病毒分离均为阴性。2只猴肺组织病理学检查见轻度肺炎。二组(SARS食蟹猴恢复组):接种3只未见任何不良临床表现,血清生化5项正常。3只猴在接种病毒后的咽拭子标本中,RT-PCR分别未检出SARS病毒、在第1-2天检出、在第1-3天中检出病毒。第2、5、7天咽拭子中、7天安乐死时血、肺、肝、脾和淋巴结等组织中病毒分离均为阴性。3只猴肺组织病理学检查见轻度肺炎等。三组(SARS血清输入恒河猴组):3只恒河猴在病毒接种的第2-5天时有一过性的体温升高,3940℃。血清生化5项正常。3只猴在接种病毒后的咽拭子标本中,RT-PCR分别在第1-3、第1-4天和第1-2天检出SARS病毒。2只猴第7天咽拭子中病毒分离阳性。另外1只在第2、5、7天咽拭子中、7天安乐死时血、肺、肝、脾和淋巴结等组织中病毒分离均为阴性。3只猴肺组织病理学检查见轻度肺炎等。四组(SARS恒河猴SARS-CoV感染组):2只猴病毒接种后,第2-4天时有一过性的体温升高,3940℃。2只进行接种病毒后1-7天安乐死时,RT-PCR在恒河猴的咽拭子标本中连续检出SARS病毒。在第2、5天咽拭子中、7天安乐死时肺组织中病毒分离阳性。2只猴肺等组织病理学检查发现肺组织表面局部有轻度发灰实变现象,可见到间质性肺炎病变,内皮细胞受损,出血和水肿。大多数肺泡没有完整的内衬细胞残留,肺泡间隔变宽并被以吞噬细胞为主的单核炎症细胞浸润,同SARS肺炎改变。实验表明,前期感染产生中和抗体的恒河猴、食蟹猴再次感染病毒,和模型对照猴比较,动物肺组织等只出现轻微或无病理变化,RT-PCR检出时间大大缩短,病毒培养未能分离出病毒,所有这些指标,均证实中和抗体有明显的保护作用,是有效的。被动免疫从结果来看,有一定的作用,但保护作用弱。 展开更多

关键词 sars-cov 动物模型 中和抗体 保护实验

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SARS-CoV的来源及其种间传播的分子进化基础 被引量：2

11

作者 孙金福 涂长春 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期625-627,共3页

关键词 sars-cov 分子进化 种间传播 SARS冠状病毒 新型冠状病毒 人类健康 SARS病原 亨德拉病毒

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SARS-CoV抗原化学发光免疫分析法的应用 被引量：4

12

作者 甄亚平 刘红 +3 位作者 齐娜 单若明 王巧巧 吴晓东 《首都医科大学学报》 CAS 2005年第3期293-295,共3页

目的建立一种可用于严重急性呼吸综合征(SARS)早期诊断的简便、快速、灵敏的实验室检测方法.方法采用化学发光免疫分析方法(chemiluminescence immunosaasy,CLIA)测定12种不同病毒培养上清和人血中SARS冠状病毒核衣壳蛋白 (nucleocapsid... 目的建立一种可用于严重急性呼吸综合征(SARS)早期诊断的简便、快速、灵敏的实验室检测方法.方法采用化学发光免疫分析方法(chemiluminescence immunosaasy,CLIA)测定12种不同病毒培养上清和人血中SARS冠状病毒核衣壳蛋白 (nucleocapsid protein)抗原(SARS-CoV-N).结果 7种不同SARS毒株测定均为阳性,12种非SARS毒株测定均为阴性,最低可检出核酸定量为6.3×101 PFU/mL的SARS-CoV培养上清;测定63例临床确诊SARS的阳性血清样本,发病6～10 d的样本检出率最高,可达100%;测定1 066例正常人样本,99.35%为阴性.结论 SARS-CoV的CLIA的灵敏度和特异性较高,并且简便、快速,在SARS的早期诊断中展示了良好的应用前景. 展开更多

关键词 化学发光免疫分析法 严重急性呼吸综合征(SARS) V抗原 SARS冠状病毒 sars-cov 实验室检测方法 免疫分析方法 早期诊断 培养上清 核衣壳蛋白 SAILS 核酸定量 血清样本 CLIA 测定 检出率 正常人 特异性 灵敏度 阳性 毒株

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SARS恢复猴和灭活疫苗免疫实验猴再次感染SARS-CoV研究 被引量：1

13

作者 魏强 高虹 +8 位作者 蒋虹 涂新明 邓巍 丛喆 朱华 佟巍 李国生 张连峰 秦川 《中国比较医学杂志》 CAS 2006年第11期641-644,F0002,共5页

目的研究SARS-CoV实验感染恢复猴，以及灭活疫苗免疫猴对SARS—CoV再次感染的疾病状况。方法动物分四组，分别为SARS感染恢复动物组，灭活疫苗免疫不同时间2组和SARS模型对照组。动物分别接种病毒，1～7d进行病毒检测和血清学检测，7d... 目的研究SARS-CoV实验感染恢复猴，以及灭活疫苗免疫猴对SARS—CoV再次感染的疾病状况。方法动物分四组，分别为SARS感染恢复动物组，灭活疫苗免疫不同时间2组和SARS模型对照组。动物分别接种病毒，1～7d进行病毒检测和血清学检测，7d后安乐处死动物，进行病理检测。结果实验感染SARS-CoV猴和灭活疫苗免疫猴均产生了中和抗体，猴体内SARS-CoV复制得到一定程度的抑制，病理变化也比SARS-CoV模型组轻。结论SARS-CoV感染恢复猴对SARS-CoV再次感染有一定抵抗作用；灭活疫苗免疫是预防实验猴感染SARS—CoV的有效方法。 展开更多

关键词 sars-cov 灭活疫苗 恒河猴 食蟹猴 中和抗体 保护实验

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SARS-CoV病毒抗体对恒河猴SARS-CoV的感染保护作用 被引量：1

14

作者 秦川 魏强 +7 位作者 高虹 蒋虹 涂新民 邓巍 丛喆 李国生 张连峰 Yasuhiro Yashikawa 《中国比较医学杂志》 CAS 2005年第6期323-326,共4页

目的研究了实验感染产生中和抗体以及输入SARS-CoV中和抗体对SARS-CoV感染恒河猴的保护作用。方法动物分3组,分别为SARS感染恢复动物组,输入抗SARS阳性血清动物组和SARS模型对照组,分别接种病毒,1-7 d进行病毒检测和血清学检测,7 d后安... 目的研究了实验感染产生中和抗体以及输入SARS-CoV中和抗体对SARS-CoV感染恒河猴的保护作用。方法动物分3组,分别为SARS感染恢复动物组,输入抗SARS阳性血清动物组和SARS模型对照组,分别接种病毒,1-7 d进行病毒检测和血清学检测,7 d后安乐处死动物,进行病理检测。结果实验感染产生中和抗体,输入SARS-CoV中和抗体的恒河猴体内SARS-CoV复制得到一定程度的抑制,病理变化也比模型组轻。结论SARS-CoV中和抗体(包括被动免疫)是一种有潜力的SARS治疗方法。 展开更多

关键词 sars-cov 恒河猴 中和抗体 保护实验

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SARS-CoV的发现及其基因组研究进展 被引量：1

15

作者 胡族琼 赵卫 龙北国 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第1期83-84,88,共3页

关键词 sars-cov SARS—CoV 单链RNA病毒 冠状病毒科 冠状病毒属 基因组研究 形态学 发现 基因组结构 微生物

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含多抗原表位的嵌合SARS-CoV基因疫苗的构建和免疫原性研究 被引量：1

16

作者 汪晓华 童德妍 +1 位作者 徐焕宾 熊思东 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期130-133,共4页

目的　研制基于表位的SARS- CoV基因疫苗 ,为传统灭活或减毒疫苗提供有益的配伍选择。方法　通过网络数据库结合生物软件分析的方法 ,确定可能在SARS- CoV感染过程中起重要作用并具较好抗原性参数的结构区域作为候选抗原表位 ,以密码子... 目的　研制基于表位的SARS- CoV基因疫苗 ,为传统灭活或减毒疫苗提供有益的配伍选择。方法　通过网络数据库结合生物软件分析的方法 ,确定可能在SARS- CoV感染过程中起重要作用并具较好抗原性参数的结构区域作为候选抗原表位 ,以密码子优化的方法提高表位串联蛋白的真核表达效率 ,构建了含多抗原表位的嵌合SARS- CoV基因疫苗。结果　多表位串联基因接入真核表达载体后 ,可在真核细胞内高效表达。多表位嵌合SARS -CoV基因疫苗免疫小鼠后 ,可诱导融合蛋白特异的体液免疫反应。结论　该基于多抗原表位的嵌合SARS- CoV基因疫苗可以诱导抗体应答 ,为该疫苗的深入研究奠定了基础。 展开更多

关键词 sars-cov 多抗原表位 基因疫苗 免疫原性研究 嵌合 真核表达载体 体液免疫反应 网络数据库 配伍选择 减毒疫苗 软件分析 感染过程 表达效率 高效表达 免疫小鼠 融合蛋白 抗体应答 结构区 抗原性 密码子 细胞内 串联

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SARS-CoV抗体检测在发热鉴别诊断中的可靠性探讨 被引量：2

17

作者 刘勇 王仲 +7 位作者 邓亚军 倪安平 马驰 文洁 张素梅 刘丹 袁秀方 何维 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期539-541,共3页

目的探讨是否可以通过检测SARS-CoVIgM、IgG抗体来协助早期鉴别诊断发热患者。方法利用SARS-CoVELISA试剂盒检测正常人群、普通发热患者、临床SARS疑似患者和临床SARS确诊患者新鲜血浆标本中的IgM和IgG抗体。结果正常人群中SARS-CoV抗... 目的探讨是否可以通过检测SARS-CoVIgM、IgG抗体来协助早期鉴别诊断发热患者。方法利用SARS-CoVELISA试剂盒检测正常人群、普通发热患者、临床SARS疑似患者和临床SARS确诊患者新鲜血浆标本中的IgM和IgG抗体。结果正常人群中SARS-CoV抗体阳性率为0%(0/25);疑似患者中SARS-CoV抗体阳性率为40%(4/10);确诊患者中SARS-CoV抗体阳性率为95%(60/63)。结论利用SARS-CoVELISA检测中晚期SARS患者血浆中的相应抗体较可靠,但在普通发热患者中会出现较高的假阳性率。 展开更多

关键词 sars-cov抗体 ELISA鉴别诊断

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SARS-COV结构蛋白N的核酸PCR扩增 被引量：1

18

作者 袁宁 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第7期2873-2874,2882,共3页

[目的]探讨SARS-COV结构蛋白的PCR扩增条件。[方法]采用正交试验对SARS全基因组进行PCR反应筛选目标片段,确定退火温度、模板浓度、聚合酶量、引物浓度P、CR延长时间对于PCR反应的影响。[结果]结果表明,在退火温度55~60°C、模板浓... [目的]探讨SARS-COV结构蛋白的PCR扩增条件。[方法]采用正交试验对SARS全基因组进行PCR反应筛选目标片段,确定退火温度、模板浓度、聚合酶量、引物浓度P、CR延长时间对于PCR反应的影响。[结果]结果表明,在退火温度55~60°C、模板浓度5 mg/ml加入1μl、DNA聚合酶加入0.25μl、引物浓度25 pmol/LP、CR反应时间为60 s时,DNA回收量最高,为4.37μg。[结论]该研究为SARS冠状病毒核酸的转录和复制提供科学依据。 展开更多

关键词 sars-cov结构 核酸 PCR扩增

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重组SARS-CoV核衣壳蛋白的表达纯化及其单克隆抗体的制备鉴定

19

作者 张娟 余晓林 +4 位作者 陈维贤 陶鹏 唐霓 黄爱龙 郑建 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期741-745,共5页

目的目的表达纯化SARS冠状病毒(SARS-CoV)的核衣壳蛋白(nucleocapsid N蛋白),并制备出高安全性、高特异性的针对该蛋白的单克隆抗体(McAb),为SARS的早期快速诊断提供有力的抗体工具。方法在不接触病原体的前提下,采用全基因合成方式分别... 目的目的表达纯化SARS冠状病毒(SARS-CoV)的核衣壳蛋白(nucleocapsid N蛋白),并制备出高安全性、高特异性的针对该蛋白的单克隆抗体(McAb),为SARS的早期快速诊断提供有力的抗体工具。方法在不接触病原体的前提下,采用全基因合成方式分别将SARS-CoV N蛋白编码基因第1-549位碱基(N端)和第496-1269位碱基(C端)直接合成至原核表达载体pET32a(+),表达、纯化重组蛋白(分别记为N1蛋白、N2蛋白),并以纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,制备特异性针对N蛋白的单克隆抗体,以间接ELISA法对所需的杂交瘤细胞株进行配对筛选,分析其亚类,以Western blot和间接免疫荧光法鉴定单克隆抗体特异性。结果成功表达并纯化SARS-CoV N1、N2蛋白,筛选出7株抗SARS-CoV N1蛋白及2株抗SARS-CoVN2蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株,IgG亚类鉴定6株为IgG1,2株为IgG2b,1株为IgG3,Western blot及间接免疫荧光证实所获的单克隆抗体可与SARS-CoV N蛋白发生特异性反应。结论重组SARS-CoV N蛋白成功表达及纯化,并由此获得了SARS-CoV特异性单克隆抗体,为SARS预防检测和发病机制研究奠定基础。 展开更多

关键词 sars-cov 核衣壳蛋白 表达 单克隆抗体

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新西兰兔对SARS-CoV实验灭活疫苗的体液免疫应答

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作者 张传海 郭中敏 +5 位作者 郑焕英 陆家海 王一飞 赵勇 杜雄伟 张美英 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期420-421,共2页

目的:评价SARS-CoV广东F69分离株实验灭活疫苗的免疫效果。方法:病毒悬液经0·4%甲醛灭活后作为抗原,对新西兰兔进行免疫接种;采用ELISA法和微量细胞中和试验,检测血清特异性IgG抗体和中和抗体的消长规律。结果:初次免疫后第3天,即... 目的:评价SARS-CoV广东F69分离株实验灭活疫苗的免疫效果。方法:病毒悬液经0·4%甲醛灭活后作为抗原,对新西兰兔进行免疫接种;采用ELISA法和微量细胞中和试验,检测血清特异性IgG抗体和中和抗体的消长规律。结果:初次免疫后第3天,即能检测到抗SARS-CoV特异性抗体,第7天检测到中和抗体。二次免疫后,特异性IgG抗体和中和抗体效价于第6周左右分别达到1∶81920和1∶20480的峰值水平。继续加强免疫,特异性抗体水平无明显变化。F69分离株与Z2-Y3广东分离株之间能够完全交叉中和。结论:F69毒株实验灭活疫苗具有很强的免疫原性。F69与Z2-Y3毒株之间尽管存在基因序列差异,但能够完全交叉免疫保护。 展开更多

关键词 sars-cov 灭活疫苗 免疫原性 中和抗体

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