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p LA-PEDV-S1质粒拷贝数与发酵重组乳酸菌S1表达量之间的相关性研究
被引量:
2
1
作者
窦速林
刘卫贞
+3 位作者
侯喜林
张冰冰
王桂华
余丽芸
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2018年第5期27-33,共7页
探究质粒拷贝数以及目标蛋白S1表达量与发酵时间的关系,从而确定放大生产p LA-PEDV-S1/Lactobacillus casei的最佳发酵时间。通过发酵重组干酪乳杆菌,绘制重组干酪乳杆菌的生长曲线,确定其生长的最佳时期。将p LA-PEDV-S1/L. casei分别...
探究质粒拷贝数以及目标蛋白S1表达量与发酵时间的关系,从而确定放大生产p LA-PEDV-S1/Lactobacillus casei的最佳发酵时间。通过发酵重组干酪乳杆菌,绘制重组干酪乳杆菌的生长曲线,确定其生长的最佳时期。将p LA-PEDV-S1/L. casei分别接种至添加抗生素和不添加抗生素的MRS培养基中传代培养,进行稳定性实验。使用荧光定量PCR方法检测重组干酪乳杆菌中质粒的拷贝数,使用流式细胞术检测乳酸菌表达的目标蛋白。重组菌在7 h达到生长顶点,传至120代时外源质粒并无丢失情况出现。质粒拷贝数在9 h达到峰值29. 34,表达目标蛋白的重组菌在7 h达到峰值97. 98%。结果显示在细菌生长的对数生长期末期,质粒拷贝数最高且S1表达量最多;在平台期随着发酵时间的增加,质粒拷贝数逐渐降低,S1表达量也相应减少。发酵的最佳时间为7~10 h,质粒拷贝数与S1表达量之间存在着正相关性。
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关键词
重组干酪乳杆菌
荧光定
量
PCR
质粒拷贝数
s1蛋白的表达量
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职称材料
题名
p LA-PEDV-S1质粒拷贝数与发酵重组乳酸菌S1表达量之间的相关性研究
被引量:
2
1
作者
窦速林
刘卫贞
侯喜林
张冰冰
王桂华
余丽芸
机构
黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院
黑龙江八一农垦大学动物科技学院
出处
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2018年第5期27-33,共7页
基金
黑龙江省垦区科研课题(HNK135-04-06-04)
文摘
探究质粒拷贝数以及目标蛋白S1表达量与发酵时间的关系,从而确定放大生产p LA-PEDV-S1/Lactobacillus casei的最佳发酵时间。通过发酵重组干酪乳杆菌,绘制重组干酪乳杆菌的生长曲线,确定其生长的最佳时期。将p LA-PEDV-S1/L. casei分别接种至添加抗生素和不添加抗生素的MRS培养基中传代培养,进行稳定性实验。使用荧光定量PCR方法检测重组干酪乳杆菌中质粒的拷贝数,使用流式细胞术检测乳酸菌表达的目标蛋白。重组菌在7 h达到生长顶点,传至120代时外源质粒并无丢失情况出现。质粒拷贝数在9 h达到峰值29. 34,表达目标蛋白的重组菌在7 h达到峰值97. 98%。结果显示在细菌生长的对数生长期末期,质粒拷贝数最高且S1表达量最多;在平台期随着发酵时间的增加,质粒拷贝数逐渐降低,S1表达量也相应减少。发酵的最佳时间为7~10 h,质粒拷贝数与S1表达量之间存在着正相关性。
关键词
重组干酪乳杆菌
荧光定
量
PCR
质粒拷贝数
s1蛋白的表达量
Keywords
recombinant Lactobacillu
s
ca
s
ei
fluore
s
cent quantitative PCR
PCN
s
1
expre
s
s
ion
分类号
Q939.117 [生物学—微生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
p LA-PEDV-S1质粒拷贝数与发酵重组乳酸菌S1表达量之间的相关性研究
窦速林
刘卫贞
侯喜林
张冰冰
王桂华
余丽芸
《微生物学杂志》
CAS
CSCD
2018
2
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