期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到9篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
不结球白菜S位点受体激酶基因片段的克隆与表达分析 被引量：1
1
作者 张爱芬 王立 +2 位作者 侯喜林 刘同坤 李英 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期25-30,共6页
以不结球白菜自交不亲和系03的基因组DNA和柱头cDNA为模板,利用引物SRKF/SRKR扩增获得长度为964 bp和646 bp的SRK基因片段。序列比较分析表明,克隆的基因片段属于SRK基因的激酶域,该序列包含4个外显子和3个内含子,编码215个氨基酸,与芜... 以不结球白菜自交不亲和系03的基因组DNA和柱头cDNA为模板,利用引物SRKF/SRKR扩增获得长度为964 bp和646 bp的SRK基因片段。序列比较分析表明,克隆的基因片段属于SRK基因的激酶域,该序列包含4个外显子和3个内含子,编码215个氨基酸,与芜菁、甘蓝、芥蓝等SRK基因有90%以上的相似性。荧光定量PCR分析结果表明:自交不亲和系03和自交亲和系105不同组织中SRK基因的表达水平存在显著的差异,SRK基因主要在自交不亲和系的柱头中高度表达,自交亲和系中该基因的表达主要分布于叶片、花蕾和柱头组织中。 展开更多
关键词 不结球白菜 s位点受体激酶基因 荧光定量PCR 基因表达分析
在线阅读 下载PDF
珍稀植物华木莲SRK基因的克隆与亚细胞定位
2
作者 邱珊姗 邓凌帆 +4 位作者 刘苗苗 张建强 王颜波 刘齐元 王建革 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1339-1347,共9页
【目的】利用杂种优势是植物育种的重要目的,但对于自交不亲和物种来说,因为亲本杂合,很难充分利用最大杂种优势。自交不亲和是开花植物避免近交的重要繁育机制,自交不亲和与自交亲和相互转换在自交不亲和物种中非常普遍,这种转换可为... 【目的】利用杂种优势是植物育种的重要目的,但对于自交不亲和物种来说,因为亲本杂合,很难充分利用最大杂种优势。自交不亲和是开花植物避免近交的重要繁育机制,自交不亲和与自交亲和相互转换在自交不亲和物种中非常普遍,这种转换可为自交不亲和物种育种开辟新的途径。华木莲(Sinomanglietia glauca)为木兰科珍稀物种,有重要科学价值和良好应用前景,但适应能力差,自我更新能力弱。华木莲呈现迟发性自交不亲和特征,自交不亲和机理尚不清楚。从华木莲转录组中鉴定出了与孢子体自交不亲和反应关键基因S位点受体激酶(S-locus receptor kinase,SRK)基因高度同源基因SgSRK,这是唯一一类与已知自交不亲和基因高度同源的迟发性自交不亲和基因,因此了解该基因的作用成为研究华木莲自交不亲和机理的出发点。克隆基因、分析其编码蛋白理化性质及亚细胞定位是进行基因功能分析的前提,因此了解SgSRK基因克隆与亚细胞定位可为揭示该基因在华木莲自交不亲和中的作用提供参考。【方法】以自花授粉后3 h华木莲心皮为材料,根据转录组扩增出了SgSRK基因,对其编码蛋白分析了理化性质,鉴定了结构域,推断了疏水性、信号肽、跨膜结构,并对其亚细胞定位进行了预测。为探讨SgSRK基因与已知的不同物种SRK基因演化关系,基于蛋白序列利用最大似然法构建了系统发育树。将目的基因和GFP基因构建了重组表达载体并转化农杆菌,然后将含有目的基因重组表达载体的农杆菌直接注射烟草叶片,3 d后利用荧光显微镜观察叶片注射部位基因瞬时表达情况,确定其编码蛋白的亚细胞定位。【结果】SgSRK基因共计2463 bp(GenBank登录号:MW139903),编码蛋白含有820个氨基酸,编码蛋白具有4个结构域:B;ectin、S;ocus;lycop、PAN-2、Pkinase Tyr结构域,有跨膜结构,存在信号肽,因此编码蛋白质可分为膜外域、跨膜域、胞内磷酸激酶域。共聚焦荧光显微镜观察表明,该基因蛋白产物定位在细胞质中和细胞膜上,细胞膜上表达更多。【结论】SgSRK基因具有植物SRK基因典型特征。 展开更多
关键词 华木莲 自交不亲和 s位点受体激酶 分子克隆 亚细胞定位 生物信息学
在线阅读 下载PDF
利用酵母双杂交法检测甘蓝SCR与SRK之间的相互作用 被引量：6
3
作者 罗兵 薛丽琰 +7 位作者 朱利泉 张贺翠 彭一波 陈松 杨红 杨昆 李成琼 王小佳 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期579-586,共8页
为深入研究甘蓝S位点受体激酶(SRK)和S位点富含半胱氨酸蛋白(SCR)间相互识别的分子机理,以具有典型自交不亲和性的甘蓝D3为材料,利用巢式PCR分别扩增SRK胞外域(eSRK)和SCR,通过酵母双杂交检测二者之间的相互作用,并利用同源重组技术将e... 为深入研究甘蓝S位点受体激酶(SRK)和S位点富含半胱氨酸蛋白(SCR)间相互识别的分子机理,以具有典型自交不亲和性的甘蓝D3为材料,利用巢式PCR分别扩增SRK胞外域(eSRK)和SCR,通过酵母双杂交检测二者之间的相互作用,并利用同源重组技术将eSRK与GAL4报告基因DNA活化域融合(pGADT7eSRK)以及SCR与GAL4报告基因DNA结合域融合(pGBKT7SCR)。两种重组质粒分别转化酵母Y187和Y2HGold后未出现自激活现象。融合的二倍体酵母(pGADT7eSRK×pGBKT7SCR)能在选择性固体培养基(SD/–Ade/–His/–Leu/–Trp/X-a-Gal/AbA)上生长,并且菌落呈蓝色。结果表明,eSRK与SCR蛋白能够相互结合,为深入研究二者作用位点成功建立了一个技术平台。 展开更多
关键词 甘蓝 s位点受体激酶(srk) s位点富含半胱氨酸蛋白(sCR) 酵母双杂交
在线阅读 下载PDF
甘蓝自交不亲和信号传导中SRK底物ARC1蛋白编码序列的克隆与分析 被引量：8
4
作者 刘东 朱利泉 王小佳 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期427-431,共5页
以甘蓝自交不亲和系 2 0 0 10 197的植株为材料 ,提取幼苗中的gDNA及花蕾期的柱头、子房、花瓣、叶片、根的mRNA ,并对mRNA进行反转录合成cDNA ,然后以gDNA与cDNA为模板扩增ARC1蛋白编码序列。结果表明只在gDNA与花期柱头mRNA的反转录c... 以甘蓝自交不亲和系 2 0 0 10 197的植株为材料 ,提取幼苗中的gDNA及花蕾期的柱头、子房、花瓣、叶片、根的mRNA ,并对mRNA进行反转录合成cDNA ,然后以gDNA与cDNA为模板扩增ARC1蛋白编码序列。结果表明只在gDNA与花期柱头mRNA的反转录cDNA中扩增出产物 ,而在其他组织中无任何产物。这可能说明甘蓝ARC1蛋白编码序列是在柱头特异性表达的。在甘蓝中克隆的ARC1Boler基因与GenBank中公布的油菜的ARC1基因序列的同源性为 94 %。其ARC1蛋白编码序列只有一个单一的开放阅读框 ,无内含子存在。甘蓝的ARC1Boler基因编码的氨基酸序列与油菜和拟南芥的同源性分别为 85 %和 5 2 %。这说明ARC1基因的属间差异明显大于种间差异。此外 ,在ARC1Boler、ARC1和ARC1At基因编码的蛋白质中均存在 ,Ubox结构和臂重复结构。Ubox结构均位于氨基酸序列的中间区域 ,这个区域有可能是蛋白质发生二聚化的区域。在ARC1Boler和ARC1基因编码的蛋白质C端存在 5个臂重复区段 ,而在ARC1At基因编码的蛋白质中只有 1个。这种差异的存在 ,也可能是ARC1At与ARC1Boler和ARC1功能不同的根本原因。 展开更多
关键词 甘蓝 自交不亲和性 信号传导 ARC1蛋白 基因克隆 序列分析 s基因 s受体激酶
在线阅读 下载PDF
甘蓝自交不亲和信号传导元件ARC1的体外表达及其与SRK相互作用验证 被引量：3
5
作者 牛义 王志敏 +3 位作者 高启国 宋明 王小佳 朱利泉 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1202-1208,共7页
在甘蓝自交不亲和信号传导中ARC1和上游因子SRK之间可能存在相互作用。为进一步证实该相互作用,以甘蓝E1为材料,采用RT-PCR技术扩增ARC1的编码序列,构建ARC1原核表达质粒pET43.1a-ARC1,转化宿主菌大肠杆菌BL21,通过SDS-PAGE检测该蛋白... 在甘蓝自交不亲和信号传导中ARC1和上游因子SRK之间可能存在相互作用。为进一步证实该相互作用,以甘蓝E1为材料,采用RT-PCR技术扩增ARC1的编码序列,构建ARC1原核表达质粒pET43.1a-ARC1,转化宿主菌大肠杆菌BL21,通过SDS-PAGE检测该蛋白的表达。利用免疫共沉淀原理及pET43.1a-ARC1融合蛋白序列中的6×His标签与Ni+结合的特点建立了体外检测蛋白质相互作用的新方法,并用该方法对ARC1与SRK的相互作用进行了检测。结果表明,在体外ARC1能与SRK相互作用并形成复合体,这为深入分析ARC1与SRK相互作用机理以及探讨ARC1与下游传导元件的相互作用提供了理论和技术基础。 展开更多
关键词 甘蓝 信号传导 s-位点受体激酶(srk) 臂重复蛋白1(ARC1)
在线阅读 下载PDF
甘蓝SCR、THL与SRK交替相互作用的酵母双杂交检测 被引量：2
6
作者 杨永军 张贺翠 +3 位作者 杨昆 薛丽琰 常登龙 朱利泉 《中国蔬菜》 北大核心 2012年第12X期14-26,共13页
eSRK(S位点受体激酶胞外域)、SCR/SP11(S位点富含半胱氨酸蛋白-S位点蛋白11)和THL1(类硫氧还蛋白)是甘蓝自交不亲和性信号传导过程重要的3个元件。利用PCR技术获得两种甘蓝SCR2(class-Ⅱ)、eSRK2(class-Ⅱ)、THL1、SRKJ(class-Ⅰ,SRK6... eSRK(S位点受体激酶胞外域)、SCR/SP11(S位点富含半胱氨酸蛋白-S位点蛋白11)和THL1(类硫氧还蛋白)是甘蓝自交不亲和性信号传导过程重要的3个元件。利用PCR技术获得两种甘蓝SCR2(class-Ⅱ)、eSRK2(class-Ⅱ)、THL1、SRKJ(class-Ⅰ,SRK6激酶域)和eSRK28(class-Ⅰ)的编码序列,并分别构建以pGBKT7为载体的SCR2、THL1的重组诱饵质粒和以pGADT7为载体的eSRK2、eSRK28、SRKJ的重组猎物质粒。利用酵母双杂交系统验证eSRK2-SCR2、eSRK28-SCR2、SRKJ-THL1的相互作用。重组质粒在宿主细胞中未产生毒性及自激活作用,表明重组表达载体构建成功;组合Y2HGold〔pGBKT7-SCR2〕×Y187〔pGADT7-eSRK2〕在三缺平板(SD/-Trp-Leu-His/x-α-gal/AbA,TDO/x/A)上生长出蓝色克隆,激活了报告基因AUR1-C、MEL1、HIS3;组合Y2HGold〔pGBKT7-SCR2〕×Y187〔pGADT7-eSRK28〕能够在二缺平板(SD/-Trp-Leu)上生长,但在三缺平板上不生长,表明不同单倍型SRK-SCR可能不发生相互作用;组合Y187〔pGADT7-SRKJ〕×Y2HGold〔pGBKT7-THL1〕能够在四缺平板上生长,激活了4种报告基因(AUR1-C、MEL1、HIS3、ADE2)。相同的单倍型SRK与SCR之间能够相互作用,不同的单倍型之间不会发生相互作用;酵母中报告基因表达的数目和类型的差异反映了class-Ⅱ型内部的SCR-SRK和class-Ⅰ的SCR-SRK互作强度,Ⅰ型高于Ⅱ型;THL与SRK之间存在较高的互作强度。这为Ⅰ型和Ⅱ型不同的自交不亲和性表型所依赖的3个起始信号传导元件之间的识别程度差异提供了直接证据和新内容。 展开更多
关键词 甘蓝 s位点受体激酶(srk) s位点富含半胱氨酸蛋白(sCR) 类硫氧还蛋白(THL) 蛋白质互作 酵母双杂交
在线阅读 下载PDF
甘蓝型油菜半体外授粉方法的建立以及应用
7
作者 张琴 梁晓梅 +2 位作者 赵雪梅 戴成 马朝芝 《中国油料作物学报》 北大核心 2025年第3期575-583,共9页
为研究自交亲和性,快速挖掘甘蓝型油菜自交(不)亲和的调控因子,改进拟南芥以及白菜中的花粉体外萌发培养基和培养条件,研究出适于甘蓝型油菜半体外授粉的培养基及最适花粉萌发条件,建立适于甘蓝型油菜的半体外授粉方法。结果表明,在温度... 为研究自交亲和性,快速挖掘甘蓝型油菜自交(不)亲和的调控因子,改进拟南芥以及白菜中的花粉体外萌发培养基和培养条件,研究出适于甘蓝型油菜半体外授粉的培养基及最适花粉萌发条件,建立适于甘蓝型油菜的半体外授粉方法。结果表明,在温度为22~23℃,湿度为48%~53%的条件下,半体外授亲和花粉后4 h,可见成束的花粉管,授不亲和花粉几乎没有花粉可以萌发,表明该半体外授粉系统可以用于油菜自交(不)亲和性的研究;在培养基中添加自交(不)亲和关键识别基因BnaSRK和BnaEXO70A1的反义寡核苷酸,半体外授不亲和花粉后4 h,分别有55.7%和27.4%油菜花粉可以粘附并且萌发,表明抑制这两个关键基因的表达可以影响自交(不)亲和;在培养基中添加10 mmol/L乙烯利,半体外授粉结果中约有77.4%油菜花粉可以萌发,表明乙烯可以打破油菜的自交不亲和性。利用该半体外授粉方法,将有利于挖掘和验证与甘蓝型油菜自交(不)亲和性相关的基因。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 自交不亲和 半体外授粉 s位点受体激酶srk基因 EXO70A1基因
在线阅读 下载PDF
羽衣甘蓝自交不亲和系的选育及S_(13b)单倍型的鉴定 被引量：6
8
作者 蓝兴国 解莉楠 +1 位作者 于晓敏 李玉花 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第S2期31-39,共9页
该文采用亲和指数法(种子数/自交授粉花朵数)分别在羽衣甘蓝‘赤兔’和‘白波’栽培品种的自交后代中,经过3年的自交选育获得1个自交不亲和系4·1·1和一个自交亲和系3·2·3·由于在芸苔属植物F1代杂交种的生产和... 该文采用亲和指数法(种子数/自交授粉花朵数)分别在羽衣甘蓝‘赤兔’和‘白波’栽培品种的自交后代中,经过3年的自交选育获得1个自交不亲和系4·1·1和一个自交亲和系3·2·3·由于在芸苔属植物F1代杂交种的生产和自交不亲和分子机制的研究方面S单倍型鉴定是必要的,因此在该文中我们采用了PCR方法利用引物PK1和PK4获得了BoSRKx的基因组序列,此序列的大小为919bp.经过数据库检索比对后发现BoSRKx的序列与BoSRK13b的序列完全一致.通过反转录PCR的方法获得了BoSRKx的cDNA序列,结果发现BoSRKx和BoSRK13b的序列在转录水平上也是完全一致的;另一方面,我们采用SCR保守信号肽编码区和NotⅠ-oligo(dT)设计的引物获得了BoSCRx的cDNA序列,经过数据库的检索比对后发现BoSCRx的序列比BoSCR13的序列只多出3个连续的碱基.根据上述结果我们推断出Sx单倍型就是S13b单倍型;最后,通过遗传分析结合PCR-RFLP方法和DNAblot方法对自交不亲和系进行了S13b纯合体的鉴定. 展开更多
关键词 羽衣甘蓝 自交不亲和 s位点受体蛋白激酶 s位点富含半胱氨酸蛋白 s13b单倍型
在线阅读 下载PDF
芸薹属植物自交不亲和性研究进展 被引量：3
9
作者 王春雷 赵宪坤 +2 位作者 高季平 叶蕴灵 赵贝贝 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第6期1442-1447,共6页
芸薹属包含多种重要农业和园艺作物,并且部分芸薹属作物表现为自交不亲和性。目前已经鉴定出芸薹属自交不亲和性雌蕊决定因子和花粉决定因子,明确了不亲和性花粉萌发抑制主要通过MLPK-ARC1-Exo70A1级联反应实现,并且花粉萌发抑制还涉及... 芸薹属包含多种重要农业和园艺作物,并且部分芸薹属作物表现为自交不亲和性。目前已经鉴定出芸薹属自交不亲和性雌蕊决定因子和花粉决定因子,明确了不亲和性花粉萌发抑制主要通过MLPK-ARC1-Exo70A1级联反应实现,并且花粉萌发抑制还涉及细胞水平上的相关变化,但是该级联反应在同属十字花科的拟南芥属植物中却没有被验证。本文详细综述了这些因子发现过程,以及相关结构特点;并根据以上研究结果指出今后研究的重点。 展开更多
关键词 芸薹属 自交不亲和性 s位点糖蛋白 s受体激酶 s位点富含半胱氨酸蛋白 拟南芥
在线阅读 下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
关于我们 | 版权声明 | 联系我们 | 帮助中心| 意见反馈
主办单位：上海市教育委员会
技术支持：重庆维普资讯有限公司
渝公网安备 50019002500403号
使用帮助 返回顶部