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果蝇RNA m^(6)A修饰通路因子的筛选 被引量:1
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作者 高舒阳 陆厚光 +1 位作者 王艳花 严冬 《遗传》 北大核心 2025年第4期476-488,共13页
N^(6)-甲基腺嘌呤(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)是mRNA中含量最丰富的化学修饰之一,在动植物发育和各种生理病理过程中发挥关键性的作用。先前的研究已经发现了m^(6)A甲基转移酶复合体、去甲基化酶以及m^(6)A结合蛋白,但作为一条相对... N^(6)-甲基腺嘌呤(N^(6)-methyladenosine,m^(6)A)是mRNA中含量最丰富的化学修饰之一,在动植物发育和各种生理病理过程中发挥关键性的作用。先前的研究已经发现了m^(6)A甲基转移酶复合体、去甲基化酶以及m^(6)A结合蛋白,但作为一条相对较新的RNA修饰通路,可能还存在新的m^(6)A修饰因子。为了探究m^(6)A修饰对组织和器官的影响,本研究在果蝇(Drosophila melanogaster)眼成虫盘中过表达m^(6)A结合蛋白基因Ythdc1。结果显示,过表达Ythdc1导致雄性异位表达Sxl蛋白,雌雄均出现粗糙眼表型,同时也激活了JNK和细胞凋亡通路。为了利用粗糙眼表型进行m^(6)A修饰因子的筛选,本研究进一步构建了过表达Ythdc1的稳定果蝇品系。通过对1,500多个果蝇RNAi品系的筛选,成功鉴定到多个可能参与m^(6)A修饰的抑制子和增强子。这些基因目前在m^(6)A中的研究较少,因此进一步对它们进行了验证和初步的机制探索。总之,本研究发现了m^(6)A修饰通路的多个潜在因子,丰富了对m^(6)A修饰通路调控网络的认知,为探索m^(6)A修饰通路新的调控机制提供了思路和方向。 展开更多
关键词 果蝇 n6-甲基腺嘌呤 Ythdc1 Sxl 修饰因子筛选
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一个遗传性凝血因子XⅢ缺乏症家系FXⅢA链基因5’-端短串联重复序列[AAAG]n多态性分析
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作者 肖德乾 王巍 +1 位作者 蔡望伟 周克元 《海南医学院学报》 CAS 2004年第4期223-225,共3页
目的:分析一个遗传性凝血因子XⅢ缺乏症家系FXⅢA基因5’-端非翻译区STR多态性,对该亚基的突变位点进行遗传分离分析。方法:应用PCR扩增、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染法技术分析一个经测序确诊的凝血因子XⅢ基因缺乏的家系的凝血因子X... 目的:分析一个遗传性凝血因子XⅢ缺乏症家系FXⅢA基因5’-端非翻译区STR多态性,对该亚基的突变位点进行遗传分离分析。方法:应用PCR扩增、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染法技术分析一个经测序确诊的凝血因子XⅢ基因缺乏的家系的凝血因子XⅢA亚基基因5’-端侧翼非翻译区短串联重复序列AAAGn。结果:在该家系中检测出两种基因型,先证者及其弟XⅢA亚基基因5’-端侧翼非翻译区短串联重复序列AAAGn的基因型为L2/L2基因型,先证者的父亲、母亲及其妹的基因型为L1/L2,先证者的XⅢA链基因的突变位点分别与父源的L2和母源的L2位点连锁。结论:根据家系XⅢA亚基基因5’-端侧翼非翻译区短串联重复序列AAAGn与FXⅢA基因突变位点的连锁关系可确定突变的遗传分离特点。 展开更多
关键词 遗传性凝血因子XⅢ缺乏症 家系 FXⅢA链基因5’- 短串联 重复序列 [AAAG]n 基因多态性
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小麦-玉米轮作田与菜地N_2O排放的对比研究 被引量:15
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作者 于亚军 高美荣 朱波 《土壤学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期96-103,共8页
应用静态箱/气相色谱法对旱地小麦-玉米轮作田和种菜历史超过20a的菜地进行了N2O排放的定位观测,分析了旱地和菜地生态系统N2O排放特征的差异,及施氮、土壤温度、土壤湿度和作物参与对两种农田系统N2O排放的不同影响。结果表明,不施氮... 应用静态箱/气相色谱法对旱地小麦-玉米轮作田和种菜历史超过20a的菜地进行了N2O排放的定位观测,分析了旱地和菜地生态系统N2O排放特征的差异,及施氮、土壤温度、土壤湿度和作物参与对两种农田系统N2O排放的不同影响。结果表明,不施氮情况下,旱地和菜地N2O排放通量分别为17.8±5.6和50.7±13.3μg m-2h-1,菜地N2O排放通量是旱地农田的3.1倍。在施氮(N 150 kg hm-2)情况下,菜地N2O排放系数较旱地高39.0%。粮食作物参与和蔬菜作物参与对增加各自农田生态系统N2O排放量的贡献无明显差异。旱地和菜地不同作物季N2O排放量的差异主要是由于作物生育期长短不同造成单位时间施肥强度存在差异。所以,根据作物生育期特点调节施肥量可能会减少农田生态系统N2O排放量,并且由于菜地各蔬菜生育期长短的差异更大,因此,菜地若能实现精量施肥,其N2O减排的潜力可能大于旱地农田。 展开更多
关键词 n2O排放 菜地生态系统 小麦-玉米轮作系统 影响因子
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胰岛素样生长因子结合蛋白-7在急性心力衰竭所致呼吸困难诊断中的应用 被引量:7
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作者 赵楠 薛晖 +1 位作者 苏晗 吴伟 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第2期110-114,共5页
目的探讨血浆胰岛素样生长因子结合蛋白-7(IGFBP7)以及IGFBP7联合N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)在急性心力衰竭所致呼吸困难中的诊断价值。方法选取2018年3月至2020年9月中国医科大学附属第一医院急诊科就诊的154例急性呼吸困难患者为研... 目的探讨血浆胰岛素样生长因子结合蛋白-7(IGFBP7)以及IGFBP7联合N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)在急性心力衰竭所致呼吸困难中的诊断价值。方法选取2018年3月至2020年9月中国医科大学附属第一医院急诊科就诊的154例急性呼吸困难患者为研究对象,根据临床诊断结果,将患者分为非急性心力衰竭组(n=93)和急性心力衰竭组(n=61)。2组患者均进行血常规,肝、肾功能,胸部X线片、心电图和超声心动图检查及左心室射血分数(LVEF)、血浆IGFBP7和NT-proBNP水平检测。采用t检验或χ2检验比较2组各项临床指标的差异,对有统计学意义(P<0.05)指标采用logistic回归分析急性心力衰竭的危险因素。采用受试者操作特征(ROC)曲线分析IGFBP7、NT-proBNP以及二者联合对急性心力衰竭患者呼吸困难的诊断价值。结果与非急性心力衰竭组比较,急性心力衰竭组患者合并高血压、冠状动脉疾病、心房颤动比例,血浆IGFBP7和NT-proBNP水平显著增高,而合并哮喘/慢性阻塞性肺疾病(COPD)比例、LVEF和肾小球滤过率估算值(eGFR)则显著降低(均P<0.05)。logistic回归分析结果显示,IGFBP7、NT-proBNP升高及LVEF降低是急性心力衰竭的危险因素(均P<0.05)。ROC曲线分析表明,IGFBP7的ROC曲线曲线下面积(AUC)为0.878(0.821~0.935)。IGFBP7最佳截断值为98.4 ng/mL,诊断心力衰竭性呼吸困难的灵敏度为85.2%,特异度为82.8%。NT-proBNP的ROC曲线AUC为0.879(0.818~0.940)。NT-proBNP的最佳截断值为1366 ng/L,诊断心力衰竭性呼吸困难的灵敏度为85.2%,特异度为89.2%。二者联合诊断的AUC为0.952(0.918~0.986),灵敏度为88.5%,特异度92.5%。结论单独使用IGFBP7或联合NT-proBNP是诊断急性心力衰竭所致呼吸困难的有效方法,IGFBP7可作为一种新型的急性心力衰竭的生物学标志物。 展开更多
关键词 急性心力衰竭 呼吸困难 胰岛素样生长因子结合蛋白-7 n末端脑钠肽前体 诊断
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(a,b,n)-临界图的几个充分条件(英文) 被引量:2
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作者 李建湘 《应用数学》 CSCD 北大核心 2004年第3期450-455,共6页
设G是一个图 .设g和f是两个定义在V(G)上的整值函数使得对V(G)所有顶点x有g(x) ≤f(x) .图G被称为 (g ,f,n) 临界图 ,如果删去G的任意n个顶点后的子图都含有G的 (g ,f) 因子 .本文给出了图是 (a ,b ,n) 临界图几个充分条件 ,即度和... 设G是一个图 .设g和f是两个定义在V(G)上的整值函数使得对V(G)所有顶点x有g(x) ≤f(x) .图G被称为 (g ,f,n) 临界图 ,如果删去G的任意n个顶点后的子图都含有G的 (g ,f) 因子 .本文给出了图是 (a ,b ,n) 临界图几个充分条件 ,即度和邻域条件 .进一步指出这些条件是最佳的 . 展开更多
关键词 (G F)-因子 (g f n)-临界图 整值函数 度条件 邻域条件
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关于图是(r,n)-临界图的一个邻域条件(英文)
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作者 李建湘 马英红 《运筹学学报》 CSCD 北大核心 2005年第4期31-36,共6页
设n,m和r是满足r≥2,n≥0,m≥3的整数,且当r是奇数时,假设 r≥m-1.称一个图为K1,m-free,如果它不包含以K1,m为导出的子图.称一个图G为一个(r,n)-临界图,如果在删去G的任意n个点后,剩下G的子图都有一个r-因子.设G是一个K1,m-free的(n+... 设n,m和r是满足r≥2,n≥0,m≥3的整数,且当r是奇数时,假设 r≥m-1.称一个图为K1,m-free,如果它不包含以K1,m为导出的子图.称一个图G为一个(r,n)-临界图,如果在删去G的任意n个点后,剩下G的子图都有一个r-因子.设G是一个K1,m-free的(n+1)-连通图,且阶为|G|以及r(|G|≥n)是偶数.证明了: 如果G的最小度至少是r+n+m-1,阶|G|≥8r5+n,并且对V(G)的任意独立点集{x1,x2}都有|NG(x1)∪NG(x2)|≥(|G|+n)/2,那么G是一个(r,n)-临界图.关于 G的最小度和|NG(x1)∪NG(x2)|的下界是紧的. 展开更多
关键词 运筹学 r-因子 (r n)-临界图
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无K_(3)子图的图中1-因子计数
7
作者 杨利民 年四洪 《大连理工大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期546-550,共5页
1-因子或完美匹配的计数是NP-难的,利用S^((n))-因子的表示公式和分支分析方法研究1-因子或完美匹配具有理论和实际意义.首先,得到无K_(3)子图的图中1-因子计数公式和组合恒等式;其次,导出1-因子或完美匹配存在和不存在的充分必要条件;... 1-因子或完美匹配的计数是NP-难的,利用S^((n))-因子的表示公式和分支分析方法研究1-因子或完美匹配具有理论和实际意义.首先,得到无K_(3)子图的图中1-因子计数公式和组合恒等式;其次,导出1-因子或完美匹配存在和不存在的充分必要条件;最后,得出一个结论:存在连通图使得它的1-因子的个数大于任意的自然数N. 展开更多
关键词 n(G k) 色多项式 S^((n))-因子 1-因子
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血清反应因子N端片段对鼻咽癌细胞增殖及迁移能力的影响 被引量:2
8
作者 袁建玲 邵钟铭 +6 位作者 邹园 伍彩霞 郑阿秀 邢敬慈 白建荣 揭伟 申志华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期535-542,共8页
目的:探讨血清反应因子N端剪切片段(SRF-N)对鼻咽癌(NPC)细胞增殖和迁移能力的影响与机制。方法:应用SRF全长(SRF-Full,1~508 aa)、SRF-N(1~254 aa)及阴性对照(NC)慢病毒颗粒感染人NPC细胞系6-10B,经嘌呤霉素抗性筛选结合Western blot检... 目的:探讨血清反应因子N端剪切片段(SRF-N)对鼻咽癌(NPC)细胞增殖和迁移能力的影响与机制。方法:应用SRF全长(SRF-Full,1~508 aa)、SRF-N(1~254 aa)及阴性对照(NC)慢病毒颗粒感染人NPC细胞系6-10B,经嘌呤霉素抗性筛选结合Western blot检测Flag标签化融合蛋白的表达获得单克隆细胞株,CCK-8实验分析细胞活力的改变,划痕损伤修复实验和Transwell实验分析细胞迁移能力,细胞-基质黏附实验分析细胞黏附能力,Western blot检测细胞增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(PCNA)和上皮-间充质转化(EMT)相关指标的表达,双萤光素酶报告基因实验检测SRF-Full和SRF-N对Snail1启动子的调节效应。结果:成功用SRF-Full、SRF-N及NC慢病毒感染6-10B细胞,经嘌呤霉素抗性筛选结合Flag标签蛋白的表达获得相应的单克隆细胞株,分别标记为6-10B^(SRF-Full)、6-10B^(SRF-N)和6-10B^(NC)。与6-10B^(NC)细胞相比,6-10B^(SRF-Full)细胞活力、迁移能力和与基质的黏附能力均显著增强(P<0.01),而6-10B^(SRF-N)细胞较6-10B^(SRF-Full)细胞活力、迁移能力及黏附能力均显著下降(P<0.01)。6-10B^(SRF-Full)细胞中波形蛋白(vimentin)、神经钙黏素(N-cadherin)和Snail1的表达水平较6-10B^(NC)细胞显著升高(P<0.01),上皮钙黏素(Ecadherin)表达水平显著下降(P<0.01);而6-10B^(SRF-N)细胞中vimentin、N-cadherin和Snail1的表达水平较6-10B^(SRF-Full)细胞显著下降(P<0.05),E-cadherin表达水平显著上升(P<0.05)。双萤光素酶活性实验结果表明,与NC相比,SRFFull显著激活Snail1启动子(P<0.001);与SRF-Full相比,SRF-N显著抑制Snail1启动子活性(P<0.01)。结论:SRF-Full促进而SRF-N抑制NPC细胞的增殖和迁移;SRF-N抑制Snail1启动子活性而介导NPC的EMT;SRF-N具有潜在的抗NPC作用。 展开更多
关键词 鼻咽癌 血清反应因子n端片段 细胞增殖 细胞迁移 上皮-间充质转化
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沉默GCN5或SOX9基因对Thy-1肾炎大鼠肾组织中TGF-β1生成的影响 被引量:1
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作者 吴志皎 张志伟 +7 位作者 刘龙飞 夏露 谢梦晓 罗灿 邱文 张婧 赵聃 王迎伟 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期360-366,共7页
目的:研究沉默大鼠肾组织中通用控制核苷酸合成5(general control nonderepressible 5,GCN5)基因、性别决定区Y框蛋白9(SRY related HMG box-9,SOX9)基因对Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)大鼠肾组织内转化生长因子-β1(transforming... 目的:研究沉默大鼠肾组织中通用控制核苷酸合成5(general control nonderepressible 5,GCN5)基因、性别决定区Y框蛋白9(SRY related HMG box-9,SOX9)基因对Thy-1肾炎(Thy-1 nephritis,Thy-1N)大鼠肾组织内转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)生成的影响。方法:分别用慢病毒(lentivirus,LV)包装GCN5和SOX9发夹状小干扰RNA(shRNA),即制备LV-shGCN5和LV-shSOX9重组病毒。然后行大鼠肾动脉灌注术将LV-shGCN5和LV-shSOX9分别导入大鼠肾脏,再经尾静脉注射兔抗大鼠胸腺细胞抗血清(anti-thymocyte serum,ATS)复制Thy-1N模型。在注射ATS后3 h,取大鼠肾组织,用RTPCR和Western blot检查各组大鼠肾组织中GCN5和SOX9的mRNA及蛋白表达水平,以验证干扰效果及GCN5、SOX9对TGF-β1产生的影响。结果:利用肾动脉灌注术将LV-shGCN5或LV-shSOX9重组病毒导入大鼠肾组织后,不仅能有效沉默相应的靶基因,而且还能下调TGF-β1的表达。结论:沉默大鼠肾组织中GCN5或SOX9基因后能显著抑制Thy-1N大鼠肾内TGF-β1的生成。 展开更多
关键词 Thy-1肾炎(Thy-1n) 通用控制核苷酸合成5(GCn5) 性别决定区Y框蛋白9(SOX9) 转化生长因子-β1(TGF-β1) 基因沉默
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SSAT2通过抑制HIF-1α表达增强肾癌Caki-1细胞化疗敏感性 被引量:2
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作者 曹进 张献全 +2 位作者 曾维威 宋梦龙 王关嵩 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1083-1086,共4页
目的探讨转染精脒/精胺N1乙酰基转移酶2(spermidine/spermine N1-acetyltransferase 2,SSAT2)在低氧条件下对肾癌Caki-1细胞增殖、凋亡和阿霉素敏感性的影响及机制。方法经X-treme GENE HP介导将真核表达质粒pcDNA3.1(D)/V5-His-SSAT2... 目的探讨转染精脒/精胺N1乙酰基转移酶2(spermidine/spermine N1-acetyltransferase 2,SSAT2)在低氧条件下对肾癌Caki-1细胞增殖、凋亡和阿霉素敏感性的影响及机制。方法经X-treme GENE HP介导将真核表达质粒pcDNA3.1(D)/V5-His-SSAT2转入肾癌Caki-1细胞,细胞在1%氧浓度下培养,Western blot法检测SSAT2蛋白和低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha,HIF-1α)蛋白表达;流式细胞仪检测细胞的凋亡率、死亡率;MTT法检测细胞的增殖,以及不同浓度阿霉素对细胞的抑制率。结果 SSAT2成功转入肾癌Caki-1细胞,与空白细胞组及空载体组比较,转染SSAT2组HIF-1α蛋白表达明显下调(P<0.01),细胞增殖受到明显抑制(P<0.01),细胞凋亡率和死亡率均增加(P<0.05)。阿霉素浓度为2μg/ml时,转染组细胞抑制率可达(67.5±3.7)%,对空白细胞和空载体细胞的抑制率为(54.7±8.4)%、(56.8±7.7)%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论转染SSAT2可以通过下调HIF-1α蛋白表达,减少肾癌细胞的增殖,增加肾癌Caki-1细胞的凋亡率、坏死率和对阿霉素的敏感性,针对SSAT2的基因治疗可能成为逆转肾癌耐药的方法之一。 展开更多
关键词 精脒/精胺n1乙酰基转移酶2 缺氧诱导因子- 肾肿瘤 肿瘤细胞 培养的 阿霉素
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ZK-1注射液抗大鼠肝纤维化作用的实验研究 被引量:1
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作者 罗胜勇 叶寿山 +3 位作者 马征 李心伟 贾德云 倪光玉 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2011年第1期18-21,共4页
目的:观察ZK-1注射液对N,N-二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化形成的抑制作用。方法:采用N,N-二甲基亚硝胺建立大鼠肝纤维化模型,血生化分析仪检测大鼠肝功能,酶联免疫吸附(ELISA)法测血清中透明质酸(HA)、转化生长因子β-1(TGFβ-1)含量,... 目的:观察ZK-1注射液对N,N-二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化形成的抑制作用。方法:采用N,N-二甲基亚硝胺建立大鼠肝纤维化模型,血生化分析仪检测大鼠肝功能,酶联免疫吸附(ELISA)法测血清中透明质酸(HA)、转化生长因子β-1(TGFβ-1)含量,测定组织中羟脯氨酸(HYP)含量,并行肝脏组织病理学检查。结果:与模型组比较,ZK-1注射液可明显降低大鼠谷草、谷丙转氨酶水平,明显提高血清总蛋白和白蛋白含量;明显降低血清HA、TGFβ-1含量和肝组织中HYP的水平。组织病理学检查显示,对肝组织纤维化病变有一定程度的改善作用。结论:ZK-1注射液对N,N-二甲基亚硝胺诱导大鼠肝纤维化形成具有一定的抑制作用,其机制可能与抑制TGFβ-1产生有关。 展开更多
关键词 n n-二甲基亚硝胺 透明质酸 羟脯氨酸 转化生长因子-Β1
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以3-甲氧基苄胺改性聚乙烯基胺制备CO_2分离膜 被引量:3
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作者 王树清 乔志华 王志 《膜科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期1-7,共7页
为提高CO_2分离膜高压下的渗透选择性能,利用含苯环小分子胺3-甲氧基苄胺与聚乙烯基胺(PVAm)制备了PVAm-3-甲氧基苄胺涂膜液,并将其涂敷到聚砜(PSf)超滤膜上制备了PVAm-3-甲氧基苄胺/PSf固定载体复合膜.PVAm-3-甲氧基苄胺/PSf膜的红外... 为提高CO_2分离膜高压下的渗透选择性能,利用含苯环小分子胺3-甲氧基苄胺与聚乙烯基胺(PVAm)制备了PVAm-3-甲氧基苄胺涂膜液,并将其涂敷到聚砜(PSf)超滤膜上制备了PVAm-3-甲氧基苄胺/PSf固定载体复合膜.PVAm-3-甲氧基苄胺/PSf膜的红外谱图结果显示,3-甲氧基苄胺的伯胺基能与PVAm的伯胺基或酰胺基形成氢键交联网络.利用模拟烟道气组成的CO_2/N2混合气(体积比20/80),考察了PVAm-3-甲氧基苄胺/PSf膜和PVAm/PSf膜的渗透选择性能.结果表明,PVAm-3-甲氧基苄胺/PSf膜的CO_2渗透选择性能得到了大幅度提高,高压下更为显著. 展开更多
关键词 固定载体膜 3-甲氧基苄胺 CO2/n2分离因子 CO2渗透速率
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流感病毒-金黄色葡萄球菌共感染小鼠模型建立及达菲的干预作用研究 被引量:1
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作者 韩雨秀 赵良鑫 +3 位作者 杜宝香 孙启慧 杨勇 容蓉 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期463-470,共8页
目的 模拟临床常见的流感病毒+金黄色葡萄球菌(金葡菌)共感染建立小鼠模型,评价达菲干预后的药效及对淋巴细胞和炎症因子调控作用。方法 (1)通过筛选不同滴度的PR8流感病毒、金葡菌,建立共感染小鼠模型。(2)选用雄性BALB/c小鼠,随机分为... 目的 模拟临床常见的流感病毒+金黄色葡萄球菌(金葡菌)共感染建立小鼠模型,评价达菲干预后的药效及对淋巴细胞和炎症因子调控作用。方法 (1)通过筛选不同滴度的PR8流感病毒、金葡菌,建立共感染小鼠模型。(2)选用雄性BALB/c小鼠,随机分为6组。第0天滴鼻流感病毒(0.25 TCID_(50),每只20μL),第3天滴鼻感染2.5×10^(7)CFU金葡菌20μL。感染病毒24 h后灌胃给药达菲,连续7 d。末次给药24 h后处死,计算脏器指数,RT-qPCR检测流感病毒M基因相对表达量,流式细胞术检测CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T淋巴细胞含量及IL-6等13种炎症因子的分泌水平,以气泡图的形式显示每组促炎平均值和促炎细胞因子之和。结果 (1)0.25 TCID_(50)的流感病毒感染后体重下降相对平缓,小鼠没有出现死亡;(2)2.5×10^(7)CFU的金葡菌共感染后半数致死,体重下降相对平缓,作为后续共感染组的剂量;(3)共感染组小鼠体重下降较大,胸腺指数明显下降(P<0.05),肺指数明显升高(P<0.05)。与流感组相比,共感染组M基因表达量显著升高(P<0.05);与金葡组相比,细菌载量显著升高(P<0.05);与流感组和金葡组相比,小鼠淋巴细胞绝对含量明显降低(P<0.05),炎症因子含量显著增加(P<0.05)。达菲及时干预共感染小鼠后延缓了体重的下降,显著升高了胸腺指数(P<0.05),降低了肺指数(P<0.05);显著降低了M基因的表达和细菌载量(P<0.05);淋巴细胞含量显著升高(P<0.05);显著降低炎症因子的表达(P<0.05)。气泡图显示共感染组小鼠体内促炎症因子的平均值以及促炎因子之和均远远高于其他各组,达菲及时干预后有较好的回调作用。结论 本研究建立了符合临床特征的共感染小鼠模型,采用达菲干预治疗,可以减轻后续继发病毒-细菌混合感染对机体的损伤。 展开更多
关键词 甲型H1n1流感病毒 金黄色葡萄球菌 流感病毒-金黄色葡萄球菌共感染 炎症因子调控 T淋巴细胞 达菲
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METTL16在多发性骨髓瘤患者中的临床应用价值 被引量:1
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作者 汪万杰 许晗 +2 位作者 许婷婷 鲍静 夏瑞祥 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第4期690-697,共8页
目的探究甲基转移酶样蛋白16(METTL16)在多发性骨髓瘤(MM)患者临床诊断及对预后预测的应用价值。方法在多发性骨髓瘤研究基金会(MMRF)及基因型-组织表达项目(GTEx)数据库中分析参与N6-甲基腺苷(m6A)修饰的各基因在MM中表达水平及预后潜... 目的探究甲基转移酶样蛋白16(METTL16)在多发性骨髓瘤(MM)患者临床诊断及对预后预测的应用价值。方法在多发性骨髓瘤研究基金会(MMRF)及基因型-组织表达项目(GTEx)数据库中分析参与N6-甲基腺苷(m6A)修饰的各基因在MM中表达水平及预后潜力。分别收集26例初次诊断MM患者及19例标准方案治疗后MM患者骨髓标本和24例正常人外周血标本,采用qRT-PCR技术测定m6A各基因表达量;同时收集MM初诊患者各实验室及临床指标:血红蛋白(Hb)、白细胞数(WBC)、血小板数(PLT)、血肌酐(Scr)、血清钙离子(Ca^(2+))、β-微球蛋白(β-MG)、骨破坏、ISS分期、分型、生存期(OS),对上述指标进行METTL16相关性分析。进一步检测标本中:白细胞介素(IL)-4、IL-6、IL-10、IL-18及趋化因子(CCL)2、CCL3、CCL4表达水平,并对其与METTL16表达的相关性进行分析。结果数据库分析提示METTL16在MM患者样本中较正常对照表达显著升高,与不良预后相关。qRT-PCR结果显示,MM初诊患者骨髓中METTL16表达水平显著高于治疗后患者以及正常对照组。其表达与血红蛋白、白细胞、骨破坏及分期、生存期等均有相关性,且其表达与CCL4表达呈正相关。结论METTL16在MM患者中高表达,其表达水平与贫血、更严重的骨质破坏及更晚的分期等相关,可能提示不良预后。METTL16与CCL4表达有显著相关性,提示其可能通过相关通路发挥相应致病作用。METTL16在MM的诊疗中将具有重要临床价值。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 n6-甲基腺苷 甲基转移酶样蛋白16 炎症因子 趋化因子 CCL4
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METTL3通过IGF2BP2依赖性方式参与m6A修饰调控HBV复制的机制
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作者 余玲 张自力 +3 位作者 曾蓉 张节 王鹏 潘万龙 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期442-449,共8页
目的探究胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 2,IGF2BP2)协助甲基转移酶样3(methytransferase like 3,METTL3)通过N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰调控HBV复制的分子机制。... 目的探究胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白2(insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 2,IGF2BP2)协助甲基转移酶样3(methytransferase like 3,METTL3)通过N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰调控HBV复制的分子机制。方法以HBV稳定复制细胞系HepG2.2.15及其亲本细胞HepG2为模型,斑点杂交分析m6A修饰水平,RT-qPCR和Western blot检测METTL3、IGF2BP2表达。生物信息学及免疫共沉淀分析METTL3与m6A阅读蛋白及其相互作用。将METTL3质粒、METTL3 siRNA和(或)IGF2BP2 siRNA转染至HepG2.2.15细胞,分别记为OE-METTL3、si-METTL3、si-IGF2BP2、OE-METTL3+si-IGF2BP2、si-METTL3+si-IGF2BP2、Control组;qPCR检测HBV DNA、HBV rcDNA、HBV cccDNA拷贝数,RT-qPCR或Western blot检测HBV pgRNA、METTL3、IGF2BP2表达。结果与HepG2细胞相比,在HepG2.2.15细胞中m6A修饰富集,METTL3、IGF2BP2表达水平升高(P<0.05)。与Control组相比,在OE-METTL3组中m6A修饰富集增强,IGF2BP2表达水平升高(P<0.05),HBV复制相关指标(HBV DNA、HBV rcDNA、HBV cccDNA、HBV pgRNA)升高(P<0.01);在si-METTL3组中则相反。生物信息学分析及免疫共沉淀显示METTL3与IGF2BP2为互作蛋白。与Control组相比,在si-IGF2BP2组中m6A修饰富集减弱,METTL3表达水平降低(P<0.01),HBV复制相关指标降低(P<0.01)。在OE-METTL3+si-IGF2BP2组中,HBV复制相关指标较OE-METTL3组降低(P<0.001)。在si-METTL3+si-IGF2BP2组中,HBV复制相关指标较si-METTL3组、si-IGF2BP2组降低(P<0.05)。结论METTL3依赖IGF2BP2富集m6A通过增强HBV rcDNA转化为cccDNA,进而增强pgRNA逆转录复制病毒。 展开更多
关键词 甲基转移酶样3 胰岛素样生长因子2 mRnA结合蛋白2 n6-甲基腺苷 乙型肝炎病毒
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上海市苏州河与崇明岛河流沉积物反硝化速率及其影响因素 被引量:6
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作者 俞琳 王东启 +4 位作者 邓焕广 李杨杰 常思琦 叶晓 陈振楼 《生态与农村环境学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期100-105,共6页
使用乙炔抑制法对上海市苏州河以及崇明岛河流沉积物的反硝化速率进行测定,同时测定沉积物提取态硝酸盐和铵态氮含量、有机碳含量、容重、含水率以及上覆水的相关理化指标.结果表明,苏州河表层10 cm 深度单位面积沉积物的反硝化速率为12... 使用乙炔抑制法对上海市苏州河以及崇明岛河流沉积物的反硝化速率进行测定,同时测定沉积物提取态硝酸盐和铵态氮含量、有机碳含量、容重、含水率以及上覆水的相关理化指标.结果表明,苏州河表层10 cm 深度单位面积沉积物的反硝化速率为126. 22 μg·m^-2·h^-1,是崇明岛河流沉积物反硝化速率(105. 57 μg·m^-2 ·h^-1 )的1. 2 倍,城市区域污染河流沉积物的反硝化速率明显高于农村清洁河流.苏州河0~10 cm 深度沉积物的反硝化速率在0. 15~5. 07 ng·g^-1·h^-1之间,崇明岛河流0~10 cm 深度沉积物的反硝化速率在0. 39~2. 80 ng·g^-1 ·h^-1之间,且反硝化速率均表现出随着深度增加而降低的变化特征.对各环境因子与沉积物反硝化速率进行相关性分析发现,沉积物提取态硝酸盐含量与反硝化速率呈显著正相关(苏州河:r = 0. 699,P〈0. 05;崇明岛河流:r =0. 629,P〈0. 05),是影响沉积物反硝化过程的主要因素. 展开更多
关键词 反硝化速率 nO_(3)^(-n 沉积物 环境因子
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槐定碱对神经胶质瘤U87细胞增殖、侵袭及相关信号通路的影响 被引量:11
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作者 赵树鹏 靳彩玲 +3 位作者 高国军 赵新利 金保哲 周文科 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期360-365,共6页
目的:探讨槐定碱对神经胶质瘤U87细胞增殖和侵袭的抑制作用以及U87细胞DNA拓扑异构酶I(DNA TOP I)、EGFR-酪氨酸激酶(EGFR-TK)、基质金属蛋白酶2(MMP2)和氨肽酶N(APN)活性的影响。方法:将不同浓度槐定碱加入到神经胶质瘤U87细胞株中,利... 目的:探讨槐定碱对神经胶质瘤U87细胞增殖和侵袭的抑制作用以及U87细胞DNA拓扑异构酶I(DNA TOP I)、EGFR-酪氨酸激酶(EGFR-TK)、基质金属蛋白酶2(MMP2)和氨肽酶N(APN)活性的影响。方法:将不同浓度槐定碱加入到神经胶质瘤U87细胞株中,利用MTT法测定槐定碱对U87细胞和人脑正常星型胶质HEB细胞生长的抑制作用,酶标仪法检测槐定碱对细胞凋亡蛋白caspase-3活性,采用Transwell小室法分析U87细胞的侵袭能力;采用非放射性NF-κB EMSA试剂盒测定U87细胞中NF-κB表达。结果:随着槐定碱浓度的增加(5、10、25、50、100μmol/L),神经胶质瘤U87细胞生长抑制率不断的增加,但HEB细胞的生长并未受到明显的抑制[(11.23±1.18)%vs(2.43±0.29)%、(22.48±3.21)%vs(3.65±0.42)%、(43.21±4.09)%vs(4.03±0.55)%、(57.31±5.09)%vs(5.21±0.43)%、(77.98±6.98)%vs(7.22±0.78)%,均P<0.05];与空白组比较,槐定碱存在下的U87细胞侵袭能力明显降低[(87.43±7.33)%、(65.12±6.16)%、(50.63±4.56)%、(35.32±4.04)%、(23.46±2.32)%vs(120.32±9.32),均P<0.05]。槐定碱对DNA TOP I、EGFR-TK、APN和MMP-2的半抑制率IC_(50)分别为(22.43±2.21)、(31.25±3.09)、(6.32±0.32)和(8.23±0.63)μmol/L,但U87细胞中凋亡蛋白caspase-3活性呈增强趋势;槐定碱能够下调NF-κB信号的表达。结论:低毒性的槐定碱可能通过降低DNA TOP I、EGFR-TK、APN和MMP-2活性,并下调NF-κB信号通路和激活凋亡caspase-3酶联反应的方式,对神经胶质瘤U87细胞的侵袭、增殖和信号通路产生抑制作用。 展开更多
关键词 槐定碱 神经胶质瘤U87细胞 DnA拓扑异构酶I 表皮生长因子受体-酪氨酸激酶 基质金属蛋白酶2 氨肽酶n
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靶向HER2的抑制胃癌细胞功能性单抗的制备和鉴定 被引量:1
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作者 孙立新 冉宇靓 +4 位作者 胡海 遇珑 周转 赵西路 杨治华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第1期14-19,共6页
目的:制备可特异识别人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor-2,HER2)膜抗原的单克隆抗体,筛选出亲和力较高并对胃癌细胞有明显抑制作用的克隆。方法:以高表达HER2膜抗原的人胃癌细胞系NCI-N87免疫BABL/c小鼠,免... 目的:制备可特异识别人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor-2,HER2)膜抗原的单克隆抗体,筛选出亲和力较高并对胃癌细胞有明显抑制作用的克隆。方法:以高表达HER2膜抗原的人胃癌细胞系NCI-N87免疫BABL/c小鼠,免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,ELISA法筛选出HER2反应阳性克隆株,活细胞免疫荧光法检测获得膜阳性克隆株,使用抗体亚型鉴定试剂盒鉴定抗体亚型,MTT法检测抗体对NCI-N87细胞增殖的抑制,采用与群司珠单抗的夹心ELISA和竞争抑制ELISA鉴定单抗结合HER2抗原的表位,免疫组化、Westernblotting进一步检测抗HER2抗体在不同条件下与HER2抗原反应情况。结果:细胞融合产生1442个单个集落的杂交瘤,重组HER2抗原ELISA筛选出HER2反应阳性克隆79株,活细胞免疫荧光检测获得较强膜阳性克隆7株,并测定其亚型,其中命名为15C15的1株属IgG1κ类单抗,免疫竞争及结合实验显示15C15与群司珠人源化抗体识别不同的表位。细胞增殖筛选显示15C15能显著抑制人胃癌NCI-N87细胞的增殖,在80μg/ml时抑制率可达34.8%。免疫组化显示15C15能识别部分石蜡包埋的HER2抗原,Westernblotting显示15C15不能结合电泳条件下变性为线形结构的HER2抗原。结论:建立了高通量制备、筛选和鉴定靶向HER2抑制胃癌细胞生长的功能性单抗技术,获得1株可特异识别HER2抗原的明显抑制胃癌细胞增殖的IgG1类单抗15C15,具有人源化改造后用于治疗的应用潜力。 展开更多
关键词 胃癌 nCI n87细胞系 人表皮生长因子受体-2 单克隆抗体
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分数临界图的新韧度条件(英文) 被引量:2
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作者 彭波 高炜 《浙江大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期521-525,共5页
一个图G称为分数(g,f,n)-临界图如果满足从G中删除任意n个顶点,其剩余子图依然存在分数(g,f)-因子.得到分数(g,f,n)-临界图的新韧度条件,若t(G)≥b2-1-Δ+bn/a,则G是分数(g,f,n)-临界图,其中Δ=b-a.进一步地,给出分数(a,b,n)-临界图的... 一个图G称为分数(g,f,n)-临界图如果满足从G中删除任意n个顶点,其剩余子图依然存在分数(g,f)-因子.得到分数(g,f,n)-临界图的新韧度条件,若t(G)≥b2-1-Δ+bn/a,则G是分数(g,f,n)-临界图,其中Δ=b-a.进一步地,给出分数(a,b,n)-临界图的韧度条件. 展开更多
关键词 分数(G F)-因子 韧度 分数(a b n)-临界图 分数(g f n)-临界图
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奇图的匹配可扩性 被引量:1
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作者 翟绍辉 郭晓峰 《数学物理学报(A辑)》 CSCD 北大核心 2009年第2期365-372,共8页
设G是一个图,n,k和d是三个非负整数,满足n+2k+d≤|V(G)|-2,|V(G)|和n+d有相同的奇偶性.如果删去G中任意n个点后所得的图有k-匹配,并且任一k-匹配都可以扩充为一个亏d-匹配,那么称G是一个(n,k,d)-图.Liu和Yu首先引入了(n,k,d)-图的概念,... 设G是一个图,n,k和d是三个非负整数,满足n+2k+d≤|V(G)|-2,|V(G)|和n+d有相同的奇偶性.如果删去G中任意n个点后所得的图有k-匹配,并且任一k-匹配都可以扩充为一个亏d-匹配,那么称G是一个(n,k,d)-图.Liu和Yu首先引入了(n,k,d)-图的概念,并且给出了(n,k,d)-图的一个刻划和若干性质.(0,k,1)-图也称为几乎k-可扩图.在本文中,作者改进了(n,k,d)-图的刻划,并给出了几乎k-可扩图和几乎k-可扩二部图的刻划,进而研究了几乎k-可扩图与n-因子临界图之间的关系. 展开更多
关键词 (n k d)- k-可扩图 几乎k-可扩图 n-因子临界图.
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