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miR-155-5p介导PIK3R1负调控PI3K/AKT信号通路促进原发性干燥综合征人唾液腺上皮细胞增殖
1
作者 张玉如 万磊 +5 位作者 方昊翔 李方泽 王丽文 李柯霏 闫佩文 姜辉 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第1期65-71,共7页
目的探讨miR-155-5p靶向作用于PIK3R1调控PI3K/AKT信号通路对原发性干燥综合征人唾液腺上皮细胞(pSSHSGECs)的影响。方法通过双荧光素酶验证miR-155-5p与PI3K/AKT通路的靶向关系。利用TRAIL及INF-γ刺激细胞,模拟pSS-HSGECs细胞模型;空... 目的探讨miR-155-5p靶向作用于PIK3R1调控PI3K/AKT信号通路对原发性干燥综合征人唾液腺上皮细胞(pSSHSGECs)的影响。方法通过双荧光素酶验证miR-155-5p与PI3K/AKT通路的靶向关系。利用TRAIL及INF-γ刺激细胞,模拟pSS-HSGECs细胞模型;空白组:HSGECs,模型组:TRAIL+INF-γ+HSGECs,空转组:TRAIL+INF-γ+HSGECs+miR-155-inhibitor-NC;miR-155抑制组:TRAIL+INF-γ+IHSGECs+miR-155-inhibitor;CKK-8法、流式细胞术、平板克隆形成实验分别检测细胞活力、细胞周期及凋亡率、细胞增殖能力。ELISA、RT-PCR方法分别检测相关细胞因子、miR-155-5p表达。蛋白质免疫印迹法检测PI3K/AKT信号通路蛋白表达。结果双荧光素酶检测结果表明,miR-155-5p与PI3K/AKT通路存在靶向关系,且PIK3R1mRNA为二者的结合位点。与空白组相比,模型组细胞活力、细胞克隆形成能力、IL-10、IL-4水平降低;细胞凋亡率、细胞周期G2期比例、TNF-α、IL-6、miR-155-5p、PIK3R1 mRNA表达、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT比率、PIK3R1mRNA蛋白相对表达显著升高(P<0.01)。与模型组及空转组相比,miR-155抑制组细胞活力、G1期比例、克隆形成能力、IL-10和IL-4水平上升;同时细胞凋亡率、细胞周期G2期比例、TNF-α、IL-6、miR-155-5p、PIK3R1 mRNA表达、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT比率及PIK3R1蛋白相对表达下降(P<0.05)。结论miR-155-5p可靶向作用于PI3K1mRNA,负向调节PI3K/AKT信号通路的过表达,改善pSSHSGECs增殖与凋亡异常,调节炎症反应。 展开更多
关键词 原发性干燥综合征 miR-155-5p PIk3R1 PI3k/AkT信号通路 炎症因子
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LncRNA GS1-124K5.4靶向调控PRDX6对肺鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
2
作者 胡宇宁 戈艳蕾 +7 位作者 金叶 甘俊清 么伟楠 吴亚男 郑璇 刘子情 苏鑫 孙国贵 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第8期1531-1541,共11页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)GS1-124K5.4靶向调控PRDX6对肺鳞癌(lung squamous cell carcinoma,LUSC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法采用荧光原位杂交分析60例LUSC患者的肺癌组织和癌旁组织组织芯片中lncRNAGS1-124K5.4表... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)GS1-124K5.4靶向调控PRDX6对肺鳞癌(lung squamous cell carcinoma,LUSC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法采用荧光原位杂交分析60例LUSC患者的肺癌组织和癌旁组织组织芯片中lncRNAGS1-124K5.4表达水平,采用qRT-PCR测定人正常肺细胞和LUSC细胞中lncRNAGS1-124K5.4的表达水平,选择lncRNAGS1-124K5.4表达水平高的两种LUSC细胞(NCI-H1703和SK-MES-1)进行后续实验。采用荧光原位杂交实验和核质分离实验研究lncRNAGS1-124K5.4在细胞内的分布情况。构建敲减lncRNA GS1-124K5.4的LUSC细胞株,采用CCK-8实验和细胞克隆形成实验研究敲减lncRNA GS1-124K5.4对NCI-H1703和SK-MES-1细胞增殖的影响,采用细胞划痕实验和Transwell迁移实验研究lncRNA GS1-124K5.4对NCI-H1703和SK-MES-1细胞迁移的影响,采用Transwell侵袭实验研究lncRNA GS1-124K5.4对NCI-H1703和SK-MES-1细胞侵袭的影响。采用RNA pull-down联合质谱分析实验和免疫共沉淀检测lncRNAGS1-124K5.4结合蛋白质,并进行蛋白免疫印迹验证。构建敲减lncRNA GS1-124K5.4和PRDX6的LUSC细胞株,检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。结果(1)LUSC患者组织芯片中lncRNA GS1-124K5.4荧光强度高于癌旁组织(P<0.05),并且lncRNA GS1-124K5.4高表达与淋巴结转移和临床分期相关(P<0.05);(2)LUSC细胞株NCI-H1703、NCI-H520和SK-MES-1细胞中lncRNA GS1-124K5.4表达水平均明显升高(P<0.05),选择lncRNA GS1-124K5.4表达水平最高的NCI-H1703和SK-MES-1细胞进行后续实验;(3)细胞荧光原位杂交实验和核质分离实验显示lncRNA GS1-124K5.4主要分布于细胞核;(4)敲减lncRNA GS1-124K5.4的NCI-H1703和SK-MES-1细胞株,细胞增殖能力、迁移能力和侵袭能力均明显降低(P<0.05);(5)采用RNA pull-down联合质谱分析实验和免疫共沉淀检测lncRNAGS1-124K5.4可结合PRDX6蛋白;(6)NCI-H1703和SK-MES-1细胞过表达lncRNAGS1-124K5.4后增殖能力、迁移能力和侵袭能力明显增强(P<0.05),敲减PRDX6后增殖能力、迁移能力和侵袭能力减弱(P<0.05),同时,过表达lncRNAGS1-124K5.4和敲减PRDX6增殖能力、迁移能力和侵袭能力无明显变化(P>0.05)。结论LncRNA GS1-124K5.4在LUSC组织中高表达,可能通过靶向调控PRDX6蛋白表达而促进LUSC细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 肺鳞癌 LncRNA GS1-124k5.4 PRDX6蛋白 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭
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α-常春藤皂苷通过调控PI3K/Akt信号通路对乳腺癌4T1细胞增殖、迁移和凋亡的影响
3
作者 王倩 马春宇 《中成药》 北大核心 2025年第5期1502-1508,共7页
目的 探讨α-常春藤皂苷对乳腺癌4T1细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法 用不同浓度α-常春藤皂苷(0、10、20、30、40、50、60μmol/L)处理4T1细胞,MTT法检测α-常春藤皂苷对4T1细胞增殖的影响。用不同浓度α-常春藤皂苷(0、10、20、30... 目的 探讨α-常春藤皂苷对乳腺癌4T1细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法 用不同浓度α-常春藤皂苷(0、10、20、30、40、50、60μmol/L)处理4T1细胞,MTT法检测α-常春藤皂苷对4T1细胞增殖的影响。用不同浓度α-常春藤皂苷(0、10、20、30、40μmol/L)处理4T1细胞,观察细胞形态;克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡情况;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;细胞划痕实验观察细胞迁移能力;Western blot法检测细胞PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、Bax、Bcl-2、cleaved Caspase3、cleaved PARP、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达。结果 10~60μmol/L α-常春藤皂苷呈浓度依赖性地抑制4T1细胞增殖(P<0.01),其作用24 h的IC_(50)值约为29.8μmol/L。与对照组(0μmol/L)比较,α-常春藤皂苷30、40μmol/L组4T1细胞形态改变;细胞克隆形成能力下降(P<0.01);凋亡细胞数量增加(P<0.01);细胞凋亡率升高(P,<0.01);细胞迁移能力降低(P<0.01);p-PI3K、p-Akt、Bcl-2、N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低(P<0.01),Bax、cleaved Caspase3、cleaved PARP、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.01)。结论 常春藤皂苷可能通过抑制PI3K/Akt信号通路激活抑制乳腺癌4T1细胞增殖、迁移,并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 α-常春藤皂苷 乳腺癌4T1细胞 PI3k/AkT信号通路 增殖 迁移 凋亡
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慢性间歇低氧和复氧对大鼠胰岛素抵抗及骨骼肌miR-27a-3p/PPARγ/IRS1/PI3K/AKT表达的影响 被引量：3
4
作者 周雪利 李华 +5 位作者 陈青宇 靳美娜 李海波 白炜 贾楚璇 魏翠英 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1729-1737,共9页
目的探讨慢性间歇低氧(CIH)和复氧对大鼠胰岛素抵抗(IR)及骨骼肌miR-27a-3p/PPARγ/IRS1/PI3K/AKT表达的影响。方法从基因表达数据库(GEO)中下载CIH条件下miRNA数据集,运用DESeq2筛选差异表达最显著的miRNA作为研究对象,使用miRNA walk... 目的探讨慢性间歇低氧(CIH)和复氧对大鼠胰岛素抵抗(IR)及骨骼肌miR-27a-3p/PPARγ/IRS1/PI3K/AKT表达的影响。方法从基因表达数据库(GEO)中下载CIH条件下miRNA数据集,运用DESeq2筛选差异表达最显著的miRNA作为研究对象,使用miRNA walk网站对差异miRNA的靶基因进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,并Cytoscape软件构建miRNA-mRNA-pathway调控网络。将48只雄性SD大鼠随机分为对照(CON)组和CIH组,24只/组,CON组常氧环境饲养12周,CIH组先予CIH环境饲养8周,再恢复常氧饲养4周。两组均在基线、8周、12周时留取血样和骨骼肌组织,检测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)水平,HE染色观察骨骼肌病理改变并计算肌纤维横截面积,实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blotting法检测骨骼肌miR-27a-3p、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、胰岛素受体1(IRS1)、p-IRS1、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸激酶B(AKT)、p-AKT表达,比较组间差异。结果生信分析发现,GEO数据库未筛选出CIH状态下肌肉组织相关的miRNA数据集,仅得到肾脏组织差异表达miRNA的GSE202480数据集,从CON组和CIH组样本中筛选出165个差异表达的miRNA,选最显著miR-27a-3p作为研究对象。GO和KEGG分析显示,差异miRNA的靶基因主要参与肌肉调节和胰岛素信号传导。miRNA-mRNA-pathway调控网络显示miR-27a-3p是PPAR信号通路和PI3K/AKT信号通路的关键调控因子。动物实验发现,基线时,两组各项观察指标均无统计学意义(P>0.05);8周时,与CON组相比,CIH组FBG、FINS、HOMA-IR、PPARγ显著升高(P<0.05或P<0.01),肌纤维排列疏松,肌纤维横截面积、miR-27a-3p、p-IRS1/IRS1、PI3K、p-AKT/AKT显著降低(P<0.05或P<0.01),GLUT4表达呈升高趋势但无统计学意义(P>0.05);12周时,两组各项观察指标均无统计学意义(P>0.05)。结论CIH可导致大鼠IR增加和骨骼肌病理改变,而复氧可以逆转;CIH可致骨骼肌miR-27a-3p表达下调,PPARγ表达上调,IRS1/PI3K/AKT胰岛素信号转导受到抑制,而复氧干预可以逆转;miR-27a-3p可能通过调控PPARγ/IRS1/PI3K/AKT信号通路参与了CIH所致的IR。 展开更多
关键词 慢性间歇低氧-复氧 胰岛素抵抗 GEO miR-27a-3p IRS1/PI3k/AkT通路
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黄柏碱-11-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的制备及对胰岛素抵抗HepG2细胞糖脂代谢的影响
5
作者 欧沛思 古洺赫 +1 位作者 林爱华 刘奕明 《南京中医药大学学报》 北大核心 2025年第7期926-935,共10页
目的建立黄柏碱(PHE)代谢产物黄柏碱-11-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(M1)的制备方法,探讨M1调节胰岛素抵抗(IR)-HepG2细胞糖脂代谢紊乱的作用及机制。方法利用肠微粒体体外孵育法结合高效液相、质谱、核磁共振(NMR)等技术完成对M1的制备、提取... 目的建立黄柏碱(PHE)代谢产物黄柏碱-11-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(M1)的制备方法,探讨M1调节胰岛素抵抗(IR)-HepG2细胞糖脂代谢紊乱的作用及机制。方法利用肠微粒体体外孵育法结合高效液相、质谱、核磁共振(NMR)等技术完成对M1的制备、提取、分离纯化及鉴定。以二甲双胍为阳性对照,考察M1低(25μmol·L^(-1))、中(50μmol·L^(-1))、高(100μmol·L^(-1))剂量给药IR-HepG2细胞24 h对其葡萄糖消耗量、糖吸收、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的影响。通过分子对接技术探讨M1与IRS1/PI3K/AKT通路各关键因子胰岛素表面受体(INSR)、胰岛素受体底物1(IRS1)、PI3K、AKT2的结合能力。采用qPCR法及Western blot法分别检测M1对IRS1/PI3K/AKT通路各关键因子mRNA及蛋白表达的影响。结果经NMR确认分离纯化所得产物为黄柏碱-11-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(纯度为95%)。与模型组相比,M1在各给药浓度均可显著提高IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量(P<0.01,P<0.001)及糖吸收水平(P<0.001),且作用比PHE更强(P<0.001);在中、高给药浓度可显著降低细胞TG及TC含量(P<0.001),其中在TG水平上其改善作用优于PHE(P<0.01);在各浓度均明显降低LDL-C含量(P<0.001),提高HDL-C含量(P<0.01,P<0.001)。分子对接结果显示M1与通路关键因子INSR、IRS1、PI3K、AKT2具有良好结合活性。与模型组相比,M1给药组不同程度提高INSR、IRS1、PI3K、AKT2、GLUT2 mRNA的表达,并且下调p-IRS1/IRS1蛋白表达(P<0.001),上调PI3K、p-AKT/AKT、p-GSK3β/GSK3β蛋白表达(P<0.05,P<0.001)。结论建立的方法可用于制备高纯度M1,M1通过调控IRS1/PI3K/AKT信号通路改善糖脂代谢紊乱,从而缓解IR。 展开更多
关键词 黄柏碱-11-O-β-D-葡萄糖醛酸苷 制备方法 IR-HepG2细胞 糖脂代谢 IRS1/PI3k/AkT信号通路 分子对接
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MicroRNA-141-5p/ABCG1逆转慢性粒细胞白血病K562细胞对伊马替尼的耐药性
6
作者 许晗 许婷婷 +1 位作者 汪万杰 鲍静 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第11期1887-1896,共10页
目的探究miR-141-5p在慢性粒细胞白血病(CML)的作用机制及其对甲磺酸伊马替尼(IM)耐药性的影响。方法qRT-PCR检测IM耐药和敏感患者miR-141-5p mRNA水平;Western blot法分别检测K562和K562/G01细胞转染前后MMP-3、MMP-9、Bcl-2等蛋白的... 目的探究miR-141-5p在慢性粒细胞白血病(CML)的作用机制及其对甲磺酸伊马替尼(IM)耐药性的影响。方法qRT-PCR检测IM耐药和敏感患者miR-141-5p mRNA水平;Western blot法分别检测K562和K562/G01细胞转染前后MMP-3、MMP-9、Bcl-2等蛋白的表达情况;CCK-8检测K562和K562/G01细胞活性;荧光素酶实验检测miR-141-5p与ABCG1的结合情况;裸鼠成瘤验证miR-141-5p在体内对肿瘤的影响。结果miR-141-5p在IM耐药的CML患者和K562/G01细胞中下调,且miR-141-5p的过表达可以抑制IM耐药CML细胞的生长并促进其凋亡。对荷瘤小鼠的研究表明,miR-141-5p在体内抑制肿瘤生长。miR-141-5p可以直接靶向作用于IM耐药CML细胞中的ABCG1调控CML发生。结论miR-141-5p和ABCG1形成竞争性内源性RNA(ceRNA)网络,在IM耐药性中发挥作用,从而抑制CML的进展。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 miR-141-5p 伊马替尼 ABCG1 耐药 k562
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近滨海区鲁梅克斯K-1杂交酸模的引种及耐盐性研究 被引量：13
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作者 董宝娣 刘小京 +3 位作者 董文琦 李登顺 山崎.素直 但野.利秋 《干旱地区农业研究》 CSCD 北大核心 2000年第4期120-126,共7页
通过引种试验 ,对鲁梅克斯 K- 1杂交酸模的生长发育规律、营养成分、耐盐力等进行了研究。结果表明 ,该杂交酸模在肥水充足的条件下 ,营养价值高 ,蛋白质含量高达 2 0 %～ 38% ;繁殖力强 ,一年可刈割 4茬～ 5茬 ,每公顷收获鲜草 1 50 t... 通过引种试验 ,对鲁梅克斯 K- 1杂交酸模的生长发育规律、营养成分、耐盐力等进行了研究。结果表明 ,该杂交酸模在肥水充足的条件下 ,营养价值高 ,蛋白质含量高达 2 0 %～ 38% ;繁殖力强 ,一年可刈割 4茬～ 5茬 ,每公顷收获鲜草 1 50 t左右。按照抗逆半衰减定义 ,该牧草耐盐力为 0 .32 5% ,只能抗中等盐碱。但收获携盐能力较强 ,从平均盐离子含量来看 ,每种植 1 hm2鲁梅克斯 ,通过牧草收割 ,一年可携走土壤中的盐分 1 50 kg～ 2 0 0 展开更多
关键词 鲁梅克斯k-1杂交酸模 营养 牧草 引种 耐盐性
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鲁梅克斯K-1杂交酸模在盐渍化土地适应性栽培效果分析 被引量：5
8
作者 贺访印 杨自辉 +2 位作者 胡明贵 刘虎俊 纪永福 《草业科学》 CAS CSCD 2002年第5期33-35,共3页
对临泽盐渍化土地栽培的鲁梅克斯K - 1杂交酸模 ,进行了植物学特征、耐盐碱、抗寒性、营养价值、根系及土壤含盐量等性状的分析 ,发现鲁梅克斯K - 1杂交酸模在含盐量 1 15 %土壤环境生长良好 ,其根组织能耐盐碱 ,且 0～ 5cm土层含盐量... 对临泽盐渍化土地栽培的鲁梅克斯K - 1杂交酸模 ,进行了植物学特征、耐盐碱、抗寒性、营养价值、根系及土壤含盐量等性状的分析 ,发现鲁梅克斯K - 1杂交酸模在含盐量 1 15 %土壤环境生长良好 ,其根组织能耐盐碱 ,且 0～ 5cm土层含盐量可下降 37 0 3%～ 5 0 5 8% ,年可收获优质干草 12 .4t hm2 。 展开更多
关键词 鲁梅克斯k-1杂交酸模 盐渍化土地 适应性 栽培效果 牧草 新品种
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鲁梅克斯K-1杂交酸模主要害虫种类及其发生和防治研究初报 被引量：2
9
作者 赵莉 石定燧 +3 位作者 安沙舟 杨茁萌 李卫军 古丽玛丽 《草业科学》 CAS CSCD 2002年第3期27-29,共3页
研究报道了危害鲁梅克斯K— 1杂交酸模的主要害虫种类及 3种主要害虫的生物学特性和防治方法。蓼龟象甲 1年发生 2代 ,主要以成虫在寄主根部附近土层中越冬 ,亦有少数蛹及老熟幼虫在寄主根内越冬 ,成虫咬食叶片 ,幼虫钻蛀于根部危害 ;... 研究报道了危害鲁梅克斯K— 1杂交酸模的主要害虫种类及 3种主要害虫的生物学特性和防治方法。蓼龟象甲 1年发生 2代 ,主要以成虫在寄主根部附近土层中越冬 ,亦有少数蛹及老熟幼虫在寄主根内越冬 ,成虫咬食叶片 ,幼虫钻蛀于根部危害 ;黎叶蜂 1年发生 3代 ,以老熟幼虫在土内作茧越冬 ;甘蓝夜蛾 1年发生 2代 ,以蛹在田埂和根部附近土下 5～ 10cm深度越冬。可采取轮作、诱杀。 展开更多
关键词 鲁梅克斯k-1 杂交酸模 害虫 种类 防治
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鲁梅克斯K-1杂交酸模对荷斯坦乳牛产奶量及乳品质的影响 被引量：3
10
作者 张英来 程起方 +10 位作者 刘文奇 杨建尧 王学功 王立安 马德友 闫方泽 杨茁萌 陈荆芬 刘伯堂 魏全意 李胜利 《中国奶牛》 北大核心 2003年第3期24-26,共3页
鲁梅克斯K-1试验日粮比对照日粮显著(p<0.05)、极显著(p<0.01)增加了奶牛头日乳产量(1.58千克)和标准乳产量(2.46千克),分别提高6.2%和10.5%;试验日粮乳脂率显著高于对照日粮(p<0.05);试验日粮头日乳脂量和乳干物质量极显著高... 鲁梅克斯K-1试验日粮比对照日粮显著(p<0.05)、极显著(p<0.01)增加了奶牛头日乳产量(1.58千克)和标准乳产量(2.46千克),分别提高6.2%和10.5%;试验日粮乳脂率显著高于对照日粮(p<0.05);试验日粮头日乳脂量和乳干物质量极显著高于对照日粮(p<0.01),乳蛋白量和乳糖量显著高于对照日粮(p<0.05);经济效益分析表明投入利润比为1:4.14。 展开更多
关键词 鲁梅克斯k-l杂交酸模 荷斯坦乳牛 产奶量 乳品质 饲用价值 饲料
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正则表达式分组的1/(1-1/k)-近似算法 被引量：12
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作者 柳厅文 孙永 +2 位作者 卜东波 郭莉 方滨兴 《软件学报》 EI CSCD 北大核心 2012年第9期2261-2272,共12页
对正则表达式集合进行分组是解决DFA状态膨胀问题的一种重要方法.已有的分组算法大都是启发式的或蛮力的,分组效果很差.分析了DFA状态膨胀的原因,总结了某些正则表达式间的冲突状况.证明了当冲突非负和冲突独立时,正则表达式集合的最优... 对正则表达式集合进行分组是解决DFA状态膨胀问题的一种重要方法.已有的分组算法大都是启发式的或蛮力的,分组效果很差.分析了DFA状态膨胀的原因,总结了某些正则表达式间的冲突状况.证明了当冲突非负和冲突独立时,正则表达式集合的最优k分组问题可归结为最大k割问题,从而说明该问题是NP-Hard的.基于局部搜索的思想,提出了一种分组算法GRELS来解决分组问题,并证明对最大k割问题,该算法的近似比是1/(1-1/k).与已有的分组算法相比,当分组数目相同时,GRELS算法分组结果的状态总数最少,并且集合发生变化时所需的更新时间最短. 展开更多
关键词 正则表达式 深度包检测 分组算法 局部搜索 1/(1-1/k)近似
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鲁梅克斯k-1杂交酸模及野生酸模遗传多态性分析 被引量：1
12
作者 张玉玲 鞠晓峰 +2 位作者 杨青川 李柏林 杨茁萌 《草地学报》 CAS CSCD 2004年第4期298-302,共5页
利用 RAPD技术对鲁梅克斯 k- 1杂交酸模的 3个繁育世代和野生酸模进行遗传多态性分析 ,结果表明 :3个世代之间不存在多态性位点差异 ,3个世代是稳定遗传的 ;不同种和不同地点的同一个野生种之间存在着多态性位点差异 ;在合格种的 12个... 利用 RAPD技术对鲁梅克斯 k- 1杂交酸模的 3个繁育世代和野生酸模进行遗传多态性分析 ,结果表明 :3个世代之间不存在多态性位点差异 ,3个世代是稳定遗传的 ;不同种和不同地点的同一个野生种之间存在着多态性位点差异 ;在合格种的 12个单株间具有明显的遗传多态性 ;采用混合取样可消除品种内的个体遗传差异性 ,较好地代表群体遗传特征 ;从 OPA组选出 7个能扩增出清晰且稳定带谱的引物 ,7个引物共检测出 4 5个位点 ,DNA片段的大小在 30 0～2 5 0 0 bp之间。 展开更多
关键词 草原学 鲁梅克斯k-1杂交酸模 野生酸模 遗传多样性 RAPD
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长春新碱对K562细胞plk1和γ-微管蛋白表达影响的研究 被引量：12
13
作者 黄伟 张瑶珍 +1 位作者 周剑锋 刘文励 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期295-298,共4页
目的研究长春新碱对K562细胞周期及plk1和γ微管蛋白影响。方法分析长春新碱处理后K562细胞周期变化,检测长春新碱及plk1反义寡核苷酸处理后plk1andγ微管蛋白表达。结果长春新碱诱导K562细胞G2/M期阻滞。长春新碱影响plk1的聚集和γ微... 目的研究长春新碱对K562细胞周期及plk1和γ微管蛋白影响。方法分析长春新碱处理后K562细胞周期变化,检测长春新碱及plk1反义寡核苷酸处理后plk1andγ微管蛋白表达。结果长春新碱诱导K562细胞G2/M期阻滞。长春新碱影响plk1的聚集和γ微管蛋白形成中心体,plk1反义寡核苷酸同样可影响γ微管蛋白形成中心体。结论长春新碱诱导K562细胞G2/M期阻滞的机制可能是通过抑制plk1的聚集和γ微管蛋白形成中心体来实现的。 展开更多
关键词 PLk1 Γ-微管蛋白 长春新碱 k562
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鲁梅克斯K-1杂交酸模世代间遗传稳定性研究 被引量：2
14
作者 鞠晓峰 张玉玲 +2 位作者 于开源 曲善民 杜广明 《黑龙江八一农垦大学学报》 2013年第4期25-28,共4页
研究鲁梅克斯K-1杂交酸模3个世代性状遗传稳定性,结果表明:在形态特征、产草量和粗蛋白含量等11个性状间差异不显著,遗传稳定。OPDTSIS法分析表明,合格种世代Ci值最小,排序为3。
关键词 鲁梅克斯k-1杂交酸模 世代 遗传稳定性 DTOPSIS
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甲基化抑制剂5-aza-2′-deoxycytidine对K562细胞SHP-1基因表达及细胞增殖与凋亡的影响 被引量：7
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作者 罗建民 李燕 +6 位作者 杨琳 刘小军 温树鹏 王福旭 张敬宇 张学军 董作仁 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第2期309-314,共6页
本研究探讨5-氮杂胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-aza-CdR)对K562细胞中抑癌基因SHP-1的转录调控作用及对K562细胞增殖凋亡的生物学影响,为寻找肿瘤治疗新靶点提供实验依据。采用MSP方法检测SHP-1基因甲基化状态,MTT法检测不同剂量(0.5... 本研究探讨5-氮杂胞苷(5-aza-2′-deoxycytidine,5-aza-CdR)对K562细胞中抑癌基因SHP-1的转录调控作用及对K562细胞增殖凋亡的生物学影响,为寻找肿瘤治疗新靶点提供实验依据。采用MSP方法检测SHP-1基因甲基化状态,MTT法检测不同剂量(0.5,1,2μmol/L)5-aza-CdR作用K562细胞1,3,5天时对K562细胞存活率的影响,流式细胞术(FCM)分析5-aza-CdR作用1,3,5天时细胞周期及凋亡率的变化,实时定量PCR(FQ-PCR)和Westernblot方法检测5-aza-CdR处理前后SHP-1mRNA及蛋白表达水平、p-STAT5蛋白表达变化。结果表明,K562细胞中存在SHP-1基因的甲基化,5-aza-CdR作用使K562细胞中SHP-1mRNA和蛋白重新表达,而p-JAK2蛋白表达随之呈下降趋势;5-aza-CdR明显抑制K562细胞增殖,并与药物浓度及作用时间呈正相关。JAK2特异性抑制剂AG490明显抑制K562细胞增殖;5-aza-CdR可使K562细胞凋亡率增加,且作用也呈时间依赖性,用药1,3,5天细胞凋亡率分别为9.3%,24.2%,37.7%。2μmol/L的5-aza-CdR处理24小时后,G0/G1期细胞逐渐增多,G2/M期细胞逐渐减少,细胞阻滞在G0/G1期。5-aza-CdR作用1,3,5天时G2/M期细胞比例分别为30.7%,23.4%,19.3%。结论:特异性甲基化转移酶抑制剂5-aza-CdR能使K562细胞中沉默的SHP-1基因重新表达,并可能通过JAK/STAT路径活化抑制白血病细胞增殖并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 甲基化抑制剂 5-氮杂脱氧胞苷 k562细胞 SHP-1基因 白血病 细胞增殖
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4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯通过PTEN/PI3K/Akt抑制YAC-1细胞增殖和诱导其分化 被引量：6
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作者 彭晓清 陈飞虎 +3 位作者 葛金芳 汪楠 潘春晓 雷静 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期60-65,共6页
目的研究新型维甲酸衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯（4-amino-2-trifluoromethyl—phenylretinate，ATPR）对鼠淋巴瘤YAC-1细胞增殖和分化的作用及其可能机制。方法不同浓度的ATPR作用鼠淋巴瘤YAC-1细胞后，MTT检测细胞生长抑制率... 目的研究新型维甲酸衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯（4-amino-2-trifluoromethyl—phenylretinate，ATPR）对鼠淋巴瘤YAC-1细胞增殖和分化的作用及其可能机制。方法不同浓度的ATPR作用鼠淋巴瘤YAC-1细胞后，MTT检测细胞生长抑制率；LDH法检测细胞毒性；瑞氏-吉姆萨染色法检测细胞形态；NBT检测细胞分化阳性率；RT—PCR和Westernblot法检测维甲酸受体mRNA和蛋白表达变化；Westernblot法检测FFEN／P13K／Akt和cyclinD的蛋白表达。结果ATPR（10^-5、10^-6、10^-7、10^-8、10^-9mol·L^-1）用药后72h明显抑制YAC-1细胞增殖，其抑制作用随浓度和时间增加而逐渐增强；随着药物浓度升高，ATPR对YAC-1细胞毒性增强；ATPR（10^-5～10^-9mol·L^-1）作用72h后可诱导YAC-1细胞形态呈现高分化趋势，且NBT阳性率升高；ATPR（10^-5mol·L^-1）体外用药72h可诱导RARα的mR—NA和蛋白表达升高，但RARβ和RARγ表达无明显变化；而且可诱导PTEN表达升高并下调p-Akt和cyclinD的蛋白表达。结论ATPR可明显抑制YAC-1细胞增殖并诱导其分化，其机制可能是与RARα结合后参与调节PTEN／P13K／Akt信号通路，从而抑制cyclinD的过表达。 展开更多
关键词 4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯 淋巴瘤 细胞增 殖 细胞分化 YAC-1细胞 维甲酸衍生物 PTEN P13k AkT
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人纤溶酶原K1-3区基因在大肠杆菌中的表达 被引量：5
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作者 陆幸妍 盛节 +1 位作者 张添元 罗进贤 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期63-65,共3页
将人纤溶酶原kringle 1- 3 (K1- 3)基因插入融合表达载体pET - 17b ,获得重组质粒pET -K13 ,转化E coliBL2 1(DE3) ,在IPTG诱导下 ,人纤溶酶原K1- 3基因在E coliBL2 1(DE3,pET -K13)中获得高效融合表达 ,表达量占菌体总蛋白的 2 4% ,表... 将人纤溶酶原kringle 1- 3 (K1- 3)基因插入融合表达载体pET - 17b ,获得重组质粒pET -K13 ,转化E coliBL2 1(DE3) ,在IPTG诱导下 ,人纤溶酶原K1- 3基因在E coliBL2 1(DE3,pET -K13)中获得高效融合表达 ,表达量占菌体总蛋白的 2 4% ,表达产物以包涵体存在 ,Westernblot证明重组蛋白对人纤溶酶原抗血清有特异免疫原性 . 展开更多
关键词 人纤溶酶原k1-3 基因表达 大肠杆菌 WESTERN BLOT 肿瘤 血管生成抑制素
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SDF-1通过PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路对人微血管内皮细胞功能产生影响 被引量：6
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作者 高静 朱红霞 +2 位作者 王敏哲 苟静 张丽 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1205-1210,共6页
目的 :观察基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)对人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cell line-1,HMEC-1)功能的影响,并对相关机制进行初步探讨,从而明确SDF-1在糖尿病血管病变中的作用。方法:... 目的 :观察基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)对人微血管内皮细胞(human microvascular endothelial cell line-1,HMEC-1)功能的影响,并对相关机制进行初步探讨,从而明确SDF-1在糖尿病血管病变中的作用。方法:体外培养HMEC-1,分别在培养基中加入不同浓度的SDF-1(0、25、50、100μg/L),Western blot检测HMEC-1中PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路的活化情况,MTT和流式细胞分析检测HMEC-1增殖和凋亡能力的变化情况,划痕愈合实验检测HMEC-1迁移能力的变化情况。采用PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路抑制剂LY294002和U0126阻断HMEC-1中PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路后,再以SDF-1处理HMEC-1,MTT和流式细胞分析检测HMEC-1增殖和凋亡能力的变化情况;划痕愈合实验检测HMEC-1迁移能力的变化情况。结果:Western blot结果显示,25μg/L的SDF-1处理即可显著活化HMEC-1中的PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路,且随着SDF-1处理浓度的升高,PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路活化水平逐渐升高。同0μg/L的SDF-1处理组相比,25、50、100μg/L的SDF-1均可显著加强HMEC-1的增殖和迁移能力(P<0.01),并抑制HMEC-1的凋亡水平(P<0.01),且这种作用具有剂量依赖性。当采用LY294002和U0126阻断HMEC-1中的PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路后,SDF-1促HMEC-1增殖和迁移能力及抑制HMEC-1凋亡的能力均显著降低(P<0.01)。结论:SDF-1可通过活化PI3K/Akt和MAPK/Erk信号通路,进而促进HMEC-1的增殖和迁移,并抑制HMEC-1的凋亡水平,从而在糖尿病血管病变中发挥一定的作用。 展开更多
关键词 基质细胞衍生因子-1 信号通路 糖尿病 人微血管内皮细胞 PI3k/AkT MAPk/ERk
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MGMT和IDH1、KI-67与非小细胞肺癌脑转移的疗效和预后分析 被引量：2
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作者 霍燃 陈雪 +4 位作者 苏雷 王悦 李小芳 贾友超 段敏丹 《世界中医药》 CAS 2016年第B03期989-990,共2页
目的探讨MGMT和IDHI、KI-67与非小细胞肺癌脑转移的疗效和预后的关系。方法：选取我院所收治的经病理检查确诊为非小细胞肺癌脑转移患者作为研究对象，通过免疫组织化学的方法对患者体内MGMT、IDHl和KI-67的表达情况进行检测，并对其与... 目的探讨MGMT和IDHI、KI-67与非小细胞肺癌脑转移的疗效和预后的关系。方法：选取我院所收治的经病理检查确诊为非小细胞肺癌脑转移患者作为研究对象，通过免疫组织化学的方法对患者体内MGMT、IDHl和KI-67的表达情况进行检测，并对其与治疗和预后之间的关系进行分析。结果：患者胶质肿瘤中的MGMT、IDHI和KI-67之间呈正相关的关系；当病理级别越高的时候，三种蛋白的表达就越强。结论：MGMT、IDHI和KI-67之间具有内在的一致性联系，且其与非小细胞肺癌脑转移的疗效和预后具有十分紧密的联系。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌脑转移 MGMT IDHI k1-67 预后
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鲁梅克斯K-1杂交酸模三个世代农艺性状研究 被引量：2
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作者 张玉玲 杨茁萌 《草地学报》 CAS CSCD 2007年第6期609-612,616,共5页
研究鲁梅克斯K-1(Rumex patientia×R.tianschanicuscv.Rumex K-1)杂交酸模3个世代的生育期、形态特征、产草量及种子产量。结果表明:在生育期、形态特征、产草量及种子产量间差异不显著,各农艺性状的遗传比较稳定;种子产量与分株... 研究鲁梅克斯K-1(Rumex patientia×R.tianschanicuscv.Rumex K-1)杂交酸模3个世代的生育期、形态特征、产草量及种子产量。结果表明:在生育期、形态特征、产草量及种子产量间差异不显著,各农艺性状的遗传比较稳定;种子产量与分株数和花序分枝数呈极显著正相关,为提高种子产量提供了依据。 展开更多
关键词 鲁梅克斯k-1杂交酸模 农艺性状 显著性检验
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