Roundup Ready~大豆外源基因在食品加工过程中的降解变化 被引量：10

1

作者 陈颖 王媛 +1 位作者 徐宝梁 葛毅强 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期10-14,共5页

采用定性PCR检测技术,通过分析豆腐、豆奶、豆粉3种大豆加工食品中磨浆、煮浆、调配、均质、杀菌、喷雾干燥等关键工艺对RoundupReady大豆外源基因EPSPS的影响,揭示外源基因在不同加工过程中降解程度的变化规律。研究结果表明,外源基因E... 采用定性PCR检测技术,通过分析豆腐、豆奶、豆粉3种大豆加工食品中磨浆、煮浆、调配、均质、杀菌、喷雾干燥等关键工艺对RoundupReady大豆外源基因EPSPS的影响,揭示外源基因在不同加工过程中降解程度的变化规律。研究结果表明,外源基因EPSPS在3种大豆加工食品的各个工艺过程中均会受到不同程度的破坏和影响。在豆腐、豆奶、豆粉的加工过程中,片段大小为1512bp及807bp的外源基因仅能在原料中检测到;当原料经过磨浆后,EPSPS基因的片段大小骤然降至800bp以下;点浆、加热等工艺又使得外源基因继续降解至400bp左右;随着挤压成型、高温杀菌及喷雾干燥工艺的完成,3种大豆终产品中目的基因片段大小仅为190bp左右。 展开更多

关键词 抗除草剂大豆 加工工艺 外源基因 降解

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转基因大豆Roundup Ready的高通量PCR检测 被引量：1

2

作者 王恒波 陈平华 +1 位作者 陈如凯 郭晋隆 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期633-637,共5页

以转基因大豆标准品（BF410f）为材料，以标准PCR检测方法为基础，根据不同标准检测参数的兼容性和PCR对引物退火温度的要求，设计高通量的PCR检测方法，从大豆中快速准确地检测出Lectin、CaMV35S、CP4-PSPS、NOS等转基因元件，提高了PC... 以转基因大豆标准品（BF410f）为材料，以标准PCR检测方法为基础，根据不同标准检测参数的兼容性和PCR对引物退火温度的要求，设计高通量的PCR检测方法，从大豆中快速准确地检测出Lectin、CaMV35S、CP4-PSPS、NOS等转基因元件，提高了PCR检测效率，节约了时间。另通过梯度PCR仪摸索出合适的反应体系t预变性T=94℃，5min；变性温度T=94℃，30s；退火温度T=58℃，30s；延伸温度T=72℃，延伸40s。35个循环后，所有受试元件均得到了扩增，很大程度地提高检测效率，该方法对于引物理论退火温度在50—60℃范围内具有广泛的适用性。 展开更多

关键词 转基因大豆 高通量 PCR检测

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LAMP在检测转基因抗草甘膦大豆cp4-epsps基因上的应用 被引量：21

3

作者 兰青阔 王永 +2 位作者 赵新 朱珠 程奕 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第24期10377-10378,10390,共3页

以转基因抗草甘膦大豆为主要研究对象,利用环介导等温扩增技术(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP),针对cp4-epsps合成酶基因(5-enolpyruvlshimimate-3-phosphate synthase)的6个区域设计4条特异性引物,利用一种链置换DNA聚... 以转基因抗草甘膦大豆为主要研究对象,利用环介导等温扩增技术(Loop-Mediated Isothermal Amplification,LAMP),针对cp4-epsps合成酶基因(5-enolpyruvlshimimate-3-phosphate synthase)的6个区域设计4条特异性引物,利用一种链置换DNA聚合酶(BstDNA polymerase),在65℃保温30 min,通过荧光显色即可完成对转基因的检测工作。结果显示,该LAMP方法能够特异性检测cp4-epsps基因,其检测灵敏度是常规定性PCR方法的10倍。建立了针对转基因大豆cp4-epsps基因的LAMP检测方法,其具有高度的特异性及稳定性,结果可靠,适合转基因抗草甘膦大豆的快速检测。 展开更多

关键词 转基因抗草甘膦大豆 cp4-epsps IAMP 检测

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实时荧光定量PCR技术检测转基因大豆方法的建立 被引量：55

4

作者 陈颖 徐宝梁 +3 位作者 苏宁 王媛 王丙武 葛毅强 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期65-69,共5页

采用实时荧光定量PCR技术 ,通过使用特异的引物和探针 ,对大豆中的内源基因Lectin和转基因大豆中的外源基因EPSPS进行了定量检测 ,建立了Monsanto公司生产的商业化转基因大豆Roundup Ready○R的定量PCR检测方法。该方法的检测灵敏度 <... 采用实时荧光定量PCR技术 ,通过使用特异的引物和探针 ,对大豆中的内源基因Lectin和转基因大豆中的外源基因EPSPS进行了定量检测 ,建立了Monsanto公司生产的商业化转基因大豆Roundup Ready○R的定量PCR检测方法。该方法的检测灵敏度 <0 0 1% ,是国际上设定的转基因最低限量的 10 展开更多

关键词 实时荧光定量PCR技术 检测 转基因大豆 内源基因Lectin 外源基因NEPSPS

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抗草甘膦转基因大豆(RRS)对根际微生物和土壤氮素转化的影响 被引量：20

5

作者 刘佳 刘志华 +1 位作者 徐广惠 王宏燕 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1341-1345,共5页

采用室外小区试验方法,研究了抗草甘膦转基因大豆(RRS)对根际土壤细菌、真菌、放线菌、氨化细菌、硝化细菌和反硝化细菌的氨化作用强度、硝化作用强度和反硝化作用强度的影响。结果显示,RRS显著降低了根际土壤细菌和放线菌的数量,提高... 采用室外小区试验方法,研究了抗草甘膦转基因大豆(RRS)对根际土壤细菌、真菌、放线菌、氨化细菌、硝化细菌和反硝化细菌的氨化作用强度、硝化作用强度和反硝化作用强度的影响。结果显示,RRS显著降低了根际土壤细菌和放线菌的数量,提高了根际土壤真菌的数量;RRS根际土壤氨化细菌、硝化细菌和反硝化细菌低于其亲本非转基因大豆和部分栽培大豆;RRS对根际土壤氨化作用强度和硝化作用强度有显著影响,但对反硝化作用强度的影响不显著(P<0.05)。研究表明,RRS不同程度上降低了根际土壤微生物的数量和生化强度,并对根际土壤真菌生长有一定的促进作用。 展开更多

关键词 抗草甘膦转基因大豆 根际土壤 微生物 生化强度

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抗草甘膦转基因大豆(RRS)对根际土壤细菌数量和多样性的影响 被引量：28

6

作者 徐广惠 王宏燕 刘佳 《生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期4535-4541,共7页

为深入研究种植抗草甘膦转基因大豆的黑土生态区根际土壤中细菌数量及多样性的变化,试验采用DGGE-cloning测序技术与传统培养相结合的方法,研究了抗草甘膦转基因大豆(RRS)对根际土壤细菌数量以及细菌群落多样性的影响。传统培养试验结果... 为深入研究种植抗草甘膦转基因大豆的黑土生态区根际土壤中细菌数量及多样性的变化,试验采用DGGE-cloning测序技术与传统培养相结合的方法,研究了抗草甘膦转基因大豆(RRS)对根际土壤细菌数量以及细菌群落多样性的影响。传统培养试验结果为RRS显著降低了土壤细菌的数量;DGGE图谱分析表明,RRS根际土壤细菌16SrDNA条带数、多样性指数及均匀度指数均要低于其他处理,聚类分析显示RRS带谱与RRS-S和Y-S差异较大,相似性分别为64%和64.4%;DGGE-cloning测序结果表明,在RRS处理中缺失条带1和条带12分别属于Unculturedbacterium和Nitrospira门Nitrospira属,其中条带1与其他切取条带最小遗传距离达0.4,与其他处理相比表现出弱势差异的条带2、4、5和条带11均属于Unculturedbacterium。研究表明,RRS不同程度上降低了根际土壤细菌的数量和细菌群落的多样性,并对根际土壤中Nitrospira属细菌有一定的抑制作用。 展开更多

关键词 抗草甘膦转基因大豆 根际土壤 细菌多样性 DGGE-cloning

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野生大豆抗草甘膦基因漂移的初步研究 被引量：21

7

作者 陈新 严继勇 高兵 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期89-91,共3页

田间种植从阿根廷引进的抗草甘膦大豆,并在其四周50m范围内种植野生大豆Y—8104,野生大豆收获后第二年继续种植,通过喷施高剂量草甘膦,发现一株抗草甘膦野生大豆,对该抗草甘膦大豆在田间种植,取其叶片提取DNA,再经过PCR检测,确认为阳性... 田间种植从阿根廷引进的抗草甘膦大豆,并在其四周50m范围内种植野生大豆Y—8104,野生大豆收获后第二年继续种植,通过喷施高剂量草甘膦,发现一株抗草甘膦野生大豆,对该抗草甘膦大豆在田间种植,取其叶片提取DNA,再经过PCR检测,确认为阳性,初步判定该株野生大豆为基因漂移植株。 展开更多

关键词 野生大豆 基因 漂移 抗草甘膦

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抗草甘膦转基因大豆AG5601对根际微生物群落功能多样性的影响 被引量：8

8

作者 张卓 刘茂炎 +4 位作者 王培 黄文坤 刘二明 彭焕 彭德良 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期17-24,共8页

明确抗草甘膦转基因大豆AG5601对根际土壤微生物群落功能多样性的影响,为转基因大豆的安全性评价提供基础数据。采用BIOLOG的方法,对抗草甘膦转基因大豆AG5601、亲本大豆SNK500和普通栽培大豆中黄13成熟期和残茬期的根际土壤微生物的碳... 明确抗草甘膦转基因大豆AG5601对根际土壤微生物群落功能多样性的影响,为转基因大豆的安全性评价提供基础数据。采用BIOLOG的方法,对抗草甘膦转基因大豆AG5601、亲本大豆SNK500和普通栽培大豆中黄13成熟期和残茬期的根际土壤微生物的碳源利用特征进行比较分析。AG5601成熟期的根际土壤微生物群落碳源利用能力显著高于SNK500,但与中黄13无显著差异;在残茬期,AG5601、SNK500和中黄13的根际土壤微生物群落碳源利用能力均无显著差异。功能多样性分析发现,成熟期的AG5601与中黄13在根际土壤微生物McIntosh指数和Simpson指数均显著高于SNK500,而残茬期,3种大豆的根际土壤微生物多样性差异不显著。主成分分析表明,AG5601与SNK500成熟期和残茬期的根际土壤微生物碳源利用在两主成分轴上的差异较小,碳源利用模式基本相同。本研究表明,抗草甘膦转基因大豆AG5601对根际微生物群落功能多样性无长期、显著性影响。 展开更多

关键词 抗草甘膦转基因大豆 根际微生物 光密度 微生物多样性

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转基因大豆质粒DNA标准物质的研制 被引量：8

9

作者 梁文 许丽 +5 位作者 李兰英 李妍 闻艳丽 徐勤 任淑贞 刘刚 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2016年第5期18-21,45,共5页

为了方便、快速地检测大豆及其加工食品中的转基因成分,准确定量转基因大豆的转基因含量,构建含常用转基因插入元件花椰菜花叶病毒Ca MV35S启动子、NOS终止子、新霉素磷酸转移酶基因NPTⅡ、玄参花叶病毒FMV35S启动子和大豆内源基因Lecti... 为了方便、快速地检测大豆及其加工食品中的转基因成分,准确定量转基因大豆的转基因含量,构建含常用转基因插入元件花椰菜花叶病毒Ca MV35S启动子、NOS终止子、新霉素磷酸转移酶基因NPTⅡ、玄参花叶病毒FMV35S启动子和大豆内源基因Lectin-1的质粒DNA标准物质,质粒DNA中靶基因元件均为单拷贝。开展了质粒DNA标准物质的均匀性、稳定性、检测适用性、定值及不确定度评价。结果表明,在实时荧光定量PCR(q PCR)检测中,质粒DNA的4种转基因插入元件分别与大豆内源基因Lectin-1的比值为0.98±0.06(Ca MV35S:L-1),0.95±0.06(FMV35S:L-1),1.05±0.08(NOS:L-1),1.11±0.08(NPTII:L-1)(k=2),靶基因扩增的标准曲线R2>0.99,可用于转基因检测实验室的结果质量控制,能力验证等活动。 展开更多

关键词 转基因大豆 质粒标准物质 不确定度评定

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抗草甘膦转基因大豆基因漂移的研究Ⅰ大豆风媒介传粉的基因漂移研究 被引量：17

10

作者 刘琦 李希臣 +2 位作者 刘昭军 李铁 雷勃钧 《黑龙江农业科学》 2008年第1期14-16,共3页

田间生殖隔离状态下,将野生大豆和栽培大豆种植在抗草甘膦转基因大豆周围,按固定距离收获。每年对一部分实施喷施高剂量草甘膦进行鉴定筛查,另一部分收获留待下年继续鉴定筛查。对每年连续筛查中存活植株提取DNA,进行对目的基因CP4-EPSP... 田间生殖隔离状态下,将野生大豆和栽培大豆种植在抗草甘膦转基因大豆周围,按固定距离收获。每年对一部分实施喷施高剂量草甘膦进行鉴定筛查,另一部分收获留待下年继续鉴定筛查。对每年连续筛查中存活植株提取DNA,进行对目的基因CP4-EPSPS的PCR检测,结果为阴性。初步判断在监测的三年时间内没有发现抗草甘膦转基因大豆通过风媒介使花粉传播,对田间大豆及其近缘种野生大豆产生明显的基因漂移。 展开更多

关键词 抗草甘膦大豆 风媒介 基因漂移

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南繁条件下转基因大豆对根际土壤可培养微生物的影响 被引量：5

11

作者 杜伟 黄启星 +3 位作者 左娇 罗丰 王旭初 郭安平 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2012年第3期417-421,共5页

以常规大豆品种中黄13为对照,研究了抗草甘膦转基因大豆AG5601对根际土壤可培养微生物的数量影响。经过大豆2个生长周期的研究发现:在相同时段内,转基因大豆AG5601和对照对根际土壤细菌、真菌和放线菌的数量变化影响趋势基本一致;除在第... 以常规大豆品种中黄13为对照,研究了抗草甘膦转基因大豆AG5601对根际土壤可培养微生物的数量影响。经过大豆2个生长周期的研究发现:在相同时段内,转基因大豆AG5601和对照对根际土壤细菌、真菌和放线菌的数量变化影响趋势基本一致;除在第2生长周期的第30～100天(20100618～20100908)时转基因大豆极显著地抑制了根际土壤真菌数量(p<0.01)外,转基因大豆对根际土壤微生物数量的影响呈不规律变化;转基因大豆对根际土壤微生物有一定的影响,但无明显规律可循。此研究结果为在我国南繁地区开展转基因大豆AG5601安全评价提供数据支持。 展开更多

关键词 抗草甘膦大豆 转基因 根际微生物

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抗草甘膦大豆与非转基因大豆营养组成对比研究进展 被引量：9

12

作者 夏义苗 陈复生 郝莉花 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期25-30,共6页

营养组成对比研究是评判转基因作物安全性的重要组成部分。抗草甘膦大豆是当前全球种植面积最大、产量最高、消费量最多的转基因大豆,为了系统地掌握抗草甘膦基因转入对大豆关键营养素及抗营养因子的影响规律,从总体成分、蛋白质及氨基... 营养组成对比研究是评判转基因作物安全性的重要组成部分。抗草甘膦大豆是当前全球种植面积最大、产量最高、消费量最多的转基因大豆,为了系统地掌握抗草甘膦基因转入对大豆关键营养素及抗营养因子的影响规律,从总体成分、蛋白质及氨基酸、脂肪及脂肪酸、抗营养因子和矿物元素组成5大方面综述了抗草甘膦大豆与非转基因大豆当前对比研究结果,以期为抗草甘膦大豆安全性评价提供参考。 展开更多

关键词 抗草甘膦大豆 转基因大豆 非转基因大豆 营养组成 抗营养因子

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抗草甘膦转基因大豆对土壤微生物群落影响研究 被引量：1

13

作者 曹阳 田晓蕾 《绿色科技》 2020年第12期23-24,27,共3页

为了评估抗草甘膦转基因大豆对土壤生态系统的安全性,采用田间随机区组设计方法,研究了抗草甘膦转基因大豆对土壤细菌、放线菌、真菌数量的影响。结果表明:只有R1期抗草甘膦转基因大豆(喷洒1125.0 ga.i/hm^2草甘膦)根际土壤中细菌和真... 为了评估抗草甘膦转基因大豆对土壤生态系统的安全性,采用田间随机区组设计方法,研究了抗草甘膦转基因大豆对土壤细菌、放线菌、真菌数量的影响。结果表明:只有R1期抗草甘膦转基因大豆(喷洒1125.0 ga.i/hm^2草甘膦)根际土壤中细菌和真菌数量显著降低,R4期抗草甘膦转基因大豆(喷洒1125.0 ga.i/hm^2草甘膦)根际土壤中真菌数量显著降低。而抗草甘膦转基因大豆,抗草甘膦转基因大豆(喷洒1125.0 ga.i/hm^2草甘膦)与传统大豆东农50在VE、R8期,对根际土壤细菌、真菌、放线菌数量无显著影响。 展开更多

关键词 抗草甘膦转基因大豆 根际土壤 微生物群落

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