青蒿琥酯调节RhoA/ROCK信号通路对高糖诱导的滋养层细胞损伤的影响

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作者 吴晓茜 朱燕 +2 位作者 徐淋 刘艳 李敏 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第10期2318-2323,共6页

目的:探究青蒿琥酯(ART)对高糖(HG)诱导的滋养层细胞损伤的影响及其作用机制。方法:将人滋养层细胞HTR-8/SVneo分为对照组、HG组、ART低浓度组、ART高浓度组和ART高浓度+溶血磷脂酸(LPA)组。CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡... 目的:探究青蒿琥酯(ART)对高糖(HG)诱导的滋养层细胞损伤的影响及其作用机制。方法:将人滋养层细胞HTR-8/SVneo分为对照组、HG组、ART低浓度组、ART高浓度组和ART高浓度+溶血磷脂酸(LPA)组。CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,ELISA检测TNF-α、IL-1β和IL-10水平,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,Western blot检测细胞Bax、Bcl-2、Ras同源基因家族成员A(RhoA)、Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)1、ROCK2表达。结果:0.4~1.6μmol/L ART处理可增强HTR-8/SVneo细胞活力(P<0.05),ART显著增强HG诱导的HTR-8/SVneo细胞活力,且1.6μmol/L ART处理下细胞活力增强最显著(P<0.05)。与对照组相比,HG组HTR-8/SVneo细胞活力、IL-10、SOD、Bcl-2水平降低,凋亡率、TNF-α、IL-1β、LDH、MDA、Bcl-2、RhoA、ROCK1、ROCK2水平升高(P<0.05);与HG组相比,ART低、高浓度组HTR-8/SVneo细胞活力、IL-10、SOD、Bcl-2水平升高,凋亡率、TNF-α、IL-1β、LDH、MDA、Bcl-2、RhoA、ROCK1、ROCK2水平降低(P<0.05);与ART高浓度组相比,ART高浓度+LPA组HTR-8/SVneo细胞活力、IL-10、SOD、Bcl-2水平降低,凋亡率、TNF-α、IL-1β、LDH、MDA、Bcl-2、RhoA、ROCK1、ROCK2水平升高(P<0.05)。结论:ART能抑制滋养层细胞炎症反应和氧化应激,减少细胞凋亡,其作用机制可能与抑制RhoA/ROCK信号通路有关。 展开更多

关键词 滋养层细胞 高糖 青蒿琥酯 rhoa/rock信号通路

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基于RhoA/ROCK通路研究复方中药对腹水肉鸡心肌损伤的作用

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作者 康杰 王慧敏 +1 位作者 邓瑞强 段智变 《特产研究》 2025年第3期44-48,54,共6页

为分析RhoA/ROCK信号通路在肉鸡腹水综合征(Ascites syndrome, AS)心肌损伤中的作用及复方中药的防治机制,本研究选取100羽健康的罗斯肉鸡(7日龄)并随机分成5组(每组20只),即基础饲粮饲养对照组,多因素法构建的AS模型组,复方中药高、低... 为分析RhoA/ROCK信号通路在肉鸡腹水综合征(Ascites syndrome, AS)心肌损伤中的作用及复方中药的防治机制,本研究选取100羽健康的罗斯肉鸡(7日龄)并随机分成5组(每组20只),即基础饲粮饲养对照组,多因素法构建的AS模型组,复方中药高、低剂量治疗组以及L-精氨酸治疗组。观察临床症状和剖检变化,并通过HE染色和Masson染色分别观察35日龄肉鸡心脏组织结构变化和胶原纤维沉积;计算肉鸡腹水心脏指数(Ascites heart index, AHI);利用实时荧光定量PCR检测心脏组织MYPT1 mRNA的转录情况,ELISA法检测心脏组织RhoA/ROCK信号通路相关蛋白的表达。结果表明,与空白对照组相比,模型组肉鸡腹部膨大,触压有波动感,腹腔内呈现大量淡黄色液体,右心肥大,心脏组织结构排列紊乱,胶原纤维大量沉积,而且M组AHI显著升高(P <0.01);荧光定量PCR结果表明,心脏组织MYPT1 mRNA转录显著升高(P <0.01)。ELISA结果表明,RhoA、ROCK、P-MLC表达显著升高(P <0.01),而MLCP表达显著降低(P <0.01);与AS组相比,复方中药治疗组的肉鸡相关临床症状及上述指标明显改善。本研究发现,RhoA/ROCK通路介导的MLC磷酸化参与了AS中心肌损伤的发生,复方中药水提液可通过调节RhoA/ROCK抑制心肌损伤来有效防治AS。 展开更多

关键词 复方中药 肉鸡腹水综合征 心肌损伤 rhoa/rock通路

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Rho /Rock 信号转导通路中的关键因子 RhoA、RockⅠ、p-MLC在后发性白内障动物模型中的表达 被引量：1

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作者 杜文文 张凤妍 +2 位作者 杜珊珊 邵敬芝 祁颖 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2016年第2期105-109,共5页

目的建立SD大鼠后囊膜混浊(posterior capsular opacification,PCO)动物模型,检测Rho/Rock通路中的关键因子Rho A、Rho激酶Ⅰ(Rho associated coiledcoil forming protein kinase-Ⅰ,RockⅠ)和肌球蛋白轻链(phosphorylated myosin light... 目的建立SD大鼠后囊膜混浊(posterior capsular opacification,PCO)动物模型,检测Rho/Rock通路中的关键因子Rho A、Rho激酶Ⅰ(Rho associated coiledcoil forming protein kinase-Ⅰ,RockⅠ)和肌球蛋白轻链(phosphorylated myosin light chain,p-MLC)在PCO中的表达。探讨Rho/Rock通路在PCO形成过程中的作用。方法选用健康SD大鼠30只,随机分为对照组(0d)和实验组(3 d、7 d、14 d、28 d),每个时间点各6只。所有大鼠(右眼)均行晶状体囊外摘出术,显微镜下观察不同时间点术眼前节的炎症反应及PCO发生情况。ELISA法检测不同时间点房水中TGF-β的表达。处死大鼠后摘除眼球行组织病理学检查,免疫组织化学和Western Blot法检测Rho A、RockⅠ、p-MLC在晶状体后囊上的表达。结果随着术后观察时间的推移,PCO混浊程度逐渐增加,HE染色显示晶状体上皮细胞不同程度的增生、移行。对照组术后0 d、3 d、7 d、14 d、28 d房水中TGF-β的表达量分别为(37.28±1.31)μg·L-1、(40.29±3.17)μg·L-1、(42.12±3.45)μg·L-1、(60.42±4.75)μg·L-1、(68.69±8.06)μg·L-1,实验组各时间点与对照组相比,差异有统计学意义(F=137.158,P<0.05);不同时间点两两相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。术后0 d、3 d、7 d、14 d和28 d晶状体后囊膜上Rho A蛋白相对表达量(Rho A/GAPDH)分别为1.00±0.00、1.49±0.01、1.57±0.03、1.77±0.02和1.97±0.02,实验组各时间点与对照组相比,差异有统计学意义(F=94.546,P<0.05);不同时间点两两相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。RockⅠ蛋白的表达量(RockⅠ/GAPDH)分别为1.00±0.00、0.35±0.12、1.42±0.14、1.78±0.09和1.95±0.14,实验组各时间点与对照组相比,差异有统计学意义(F=30.942,P<0.05);不同时间点两两相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。p-MLC蛋白的相对表达量(p-MLC/GAPDH)分别为1.00±0.00、1.44±0.08、1.47±0.13、1.63±0.10和2.12±0.20,实验组各时间点与对照组相比,差异有统计学意义(F=34.313,P<0.05);不同时间点两两相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 Rho A、RockⅠ、p-MLC在PCO形成过程中表达逐渐增多,Rho/Rock信号转导通路可能与PCO的发生、发展有关。 展开更多

关键词 后发性白内障 转化生长因子-β Rho/rock信号转导通路

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贝母素乙调节RhoA/ROCK信号通路对膝骨关节炎大鼠软骨损伤的影响 被引量：1

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作者 彭博文 冯立 覃剑 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期980-984,共5页

目的 探讨贝母素乙调节Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关的卷曲螺旋激酶(ROCK)信号通路对膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)大鼠软骨损伤的影响。方法 以碘乙酸钠(MIA)法制备KOA大鼠模型,随机分为模型组、贝母素乙(3.5 mg/kg)组... 目的 探讨贝母素乙调节Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关的卷曲螺旋激酶(ROCK)信号通路对膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)大鼠软骨损伤的影响。方法 以碘乙酸钠(MIA)法制备KOA大鼠模型,随机分为模型组、贝母素乙(3.5 mg/kg)组、贝母素乙(3.5 mg/kg)+LPA(RhoA激活剂,1 mg/kg)组,每组10只,另选10只大鼠为对照组。机械刺激法和热辐射法检测大鼠膝关节疼痛症状;检测大鼠关节肿胀度、膝关节宽度并以步态评分评测其关节功能;透射电镜检测大鼠膝关节软骨细胞超微结构;TUNEL染色检测大鼠关节软骨细胞凋亡比;酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠血清和关节液促炎因子白细胞介素(IL)-18、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平;免疫印迹检测各组大鼠关节软骨组织凋亡(Cleaved caspase-3、Bax)和RhoA/ROCK通路相关蛋白表达。结果 贝母素乙可降低KOA大鼠关节肿胀度、膝关节宽度、步态评分、软骨细胞凋亡比、血清及关节液IL-18、MCP-1水平、软骨组织Cleaved caspase-3、Bax、RhoA、ROCK1、ROCK1蛋白表达,升高机械痛阈值、热痛阈值(P<0.05);LPA可减弱贝母素乙对KOA大鼠关节软骨损伤的改善作用。结论 贝母素乙可通过抑制RhoA/ROCK信号激活而抑制KOA大鼠关节炎症反应和关节软骨细胞凋亡,减轻软骨损伤。 展开更多

关键词 贝母素乙 rhoa/rock 膝骨关节炎 软骨损伤 信号通路

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桃叶珊瑚苷调控RhoA/ROCK信号通路对胃癌MGC803细胞上皮间质转化和血管生成拟态的影响 被引量：3

5

作者 宋鸣 周昕 +3 位作者 刘俊 胡伟 张敏 郑新 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期365-370,共6页

目的:探究桃叶珊瑚苷(AU)调控RhoA/ROCK信号通路对胃癌MGC803细胞上皮间质转化(EMT)进程和血管生成拟态(VM)形成的影响。方法:常规培养人胃癌MGC803细胞,将其随机分为对照组、AU-L组(20μmol/L AU)、AU-M组(40μmol/L AU)、AU-H组(80μm... 目的:探究桃叶珊瑚苷(AU)调控RhoA/ROCK信号通路对胃癌MGC803细胞上皮间质转化(EMT)进程和血管生成拟态(VM)形成的影响。方法:常规培养人胃癌MGC803细胞,将其随机分为对照组、AU-L组(20μmol/L AU)、AU-M组(40μmol/L AU)、AU-H组(80μmol/L AU)、AU-H+RhoA激活剂水仙环素(Nar)组(AU-H+Nar组,80μmol/L AU+30μmol/L Nar)。采用CCK-8法、Transwell实验、细胞划痕实验分别检测不同浓度AU对细胞增殖、迁移和侵袭的影响,三维细胞培养法观察不同浓度AU对细胞体外VM管腔结构形成的影响,WB法检测AU对各组细胞RhoA、ROCK、VM与EMT相关蛋白表达的影响。结果:与对照组相比,AU-M组、AU-H组MGC803细胞增殖率(48、72 h时)、细胞迁移率、细胞侵袭数目、VM管腔结构数,以及RhoA、ROCK1、N-cadherin、vimentin、VE-cadherin的蛋白表达均显著降低(均P<0.05),E-cadherin表达显著升高(P<0.05);同时,使用Nar处理显著减弱了AU对MGC803细胞EMT和VM形成的抑制作用(均P<0.05)。结论:AU通过下调RhoA/ROCK信号通路抑制胃癌MGC803细胞的增殖、迁移、侵袭、EMT和VM形成过程。 展开更多

关键词 桃叶珊瑚苷 rhoa/rock信号通路 胃癌 MGC803细胞 上皮间质转化 血管生成拟态

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糖肾宁含药血清对高糖刺激肾小管上皮细胞增殖作用及RhoA/ROCK信号通路影响的实验研究 被引量：6

6

作者 王婷 赵宗江 +2 位作者 张新雪 苗永辉 杨冠男 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 2017年第6期1066-1071,共6页

目的:探讨糖肾宁含药血清对高糖刺激肾小管上皮细胞增殖作用及Rho A/ROCK信号通路的影响。方法:10%FBS的RPMI 1640培养细胞,培养细胞分为正常组、模型组、厄贝沙坦组和糖肾宁组,按每孔3000个细胞接种于96孔板中。每组8个复孔,加入6%的... 目的:探讨糖肾宁含药血清对高糖刺激肾小管上皮细胞增殖作用及Rho A/ROCK信号通路的影响。方法:10%FBS的RPMI 1640培养细胞,培养细胞分为正常组、模型组、厄贝沙坦组和糖肾宁组,按每孔3000个细胞接种于96孔板中。每组8个复孔,加入6%的各组含药血清培养,分别于12、24、48、60 h观察细胞形态并应用MTT法检测细胞增殖情况;Western blotting检测Rho A、ROCK1、α-SMA和E-Cadherin蛋白的表达。结果:正常组细胞呈扁平不规则多角形,高糖刺激下,细胞呈梭型,加入含药血清后呈扁平不规则多角形。MTT:24、48 h,正常组与模型组比较,有极显著性差异(P<0.01),60 h,正常组与模型组比较,有显著性差异(P<0.05);24 h,糖肾宁组与厄贝沙坦组比较,有显著性差异(P<0.05);48 h,糖肾宁组与厄贝沙坦组、Y27632组比较,有极显著性差异(P<0.01);60 h,糖肾宁组与厄贝沙坦组、Y27632组比较,有显著性差异(P<0.05)。Western blotting:正常组与模型组、Y27632组比较Rho A蛋白表达减少,有极显著性差异(P<0.01);糖肾宁组与模型组比较,有极显著性差异(P<0.01);糖肾宁组与Y27632组比较,有显著性差异(P<0.05)。正常组与模型组比较ROCK1蛋白表达减少,有极显著性差异(P<0.01);Y27632组、各治疗组和模型组比较,有显著性差异(P<0.05)。正常组与模型组比较α-SMA蛋白表达减少,有极显著性差异(P<0.01);Y27632组、各治疗组和模型组比较,有显著性差异(P<0.05)。正常组与模型组组比较E-Cadherin蛋白表达增加,有显著性差异(P<0.05);Y27632组与糖肾宁组比较,有显著性差异(P<0.05);模型组与Y27632组、各治疗组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论:糖肾宁可抑制高糖培养肾小管上皮细胞增殖和Rho A/ROCK信号通路相关分子的表达,逆转肾小管上皮细胞转分化、减轻肾间质纤维化、延缓DKD进程。 展开更多

关键词 糖肾宁 肾痿 肾小管上皮细胞株 KKAY小鼠 细胞增殖 MTT EMT rhoa/rock信号通路

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miR-34b-5p上调抑制弥漫大B细胞淋巴瘤的侵袭及RhoA/ROCK信号通路 被引量：7

7

作者 李敬东 韩效林 +3 位作者 杨翠 高攀科 陈小双 梁勇会 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第2期186-190,共5页

目的研究miR-34b-5p过表达对弥漫大B细胞淋巴瘤的生长和运动以及RhoA/ROCK信号通路的影响。方法选择弥漫大B细胞淋巴瘤系中SU-DHL-4细胞进行研究。建立空白对照组、空载体转染组、miR-34b-5p转染组,采用qRT-PCR检测miR-34b-5p的表达量,... 目的研究miR-34b-5p过表达对弥漫大B细胞淋巴瘤的生长和运动以及RhoA/ROCK信号通路的影响。方法选择弥漫大B细胞淋巴瘤系中SU-DHL-4细胞进行研究。建立空白对照组、空载体转染组、miR-34b-5p转染组,采用qRT-PCR检测miR-34b-5p的表达量,采用菌落形成实验、流式细胞术和Transwell试验检测细胞增殖、凋亡及侵袭能力;采用Western blot检测E-cadherin、N-cadherin Vimentin、RhoA和ROCK蛋白的表达量。结果在转染miR-34b-5p的细胞内,miR-34b-5p的表达量上调。miR-34b-5p过表达能抑制弥漫大B细胞淋巴瘤SU-DHL-4细胞增殖,促进细胞凋亡,减轻细胞侵袭,抑制RhoA/ROCK信号通路。结论 miR-34b-5p过表达可以抑制弥漫大B细胞淋巴瘤的生长和运动以及RhoA/ROCK信号通路。 展开更多

关键词 miR-34b-5p 弥漫大B细胞淋巴瘤 增殖 凋亡 侵袭 rhoa/rock信号通路

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BKca下调RhoA/ROCK信号通路改善糖尿病大鼠阴茎勃起功能 被引量：3

8

作者 罗家宇 吴方昊 +2 位作者 曾李 赵亮 肖明朝 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1556-1560,共5页

目的:观察大电导钙激活钾通道(big conductance Ca2+-activated K+channel,BKca)对糖尿病勃起功能障碍(diabetes mellitus-induced erectile dysfunction,DMED)大鼠阴茎海绵体平滑肌Rho A/ROCK信号通路的影响。方法:实验大鼠分为空白对... 目的:观察大电导钙激活钾通道(big conductance Ca2+-activated K+channel,BKca)对糖尿病勃起功能障碍(diabetes mellitus-induced erectile dysfunction,DMED)大鼠阴茎海绵体平滑肌Rho A/ROCK信号通路的影响。方法:实验大鼠分为空白对照组8只,DMED组8只,NS1619组(DMED治疗组)7只,NS1619组大鼠采用特异性BKca激活剂(NS1619)阴茎海绵体注入2周。观察各组勃起行为,并电刺激检测阴茎海绵体内压(intracavernous pressure,ICP)/平均动脉压(mean arterial pressure,MAP),取各组阴茎海绵体平滑肌检测肌张力,采用Western blot和定量PCR(real-time PCR)方法检测Rho A、ROCK1、ROCK2表达,反应Rho A/ROCK信号通路差异,同时检测MYPT-1表达反应肌球蛋白轻链磷酸酶(myosin light chain phosphatase,MLCP)磷酸化程度。结果:成功构建DMED大鼠模型,NS1619组大鼠与DMED组大鼠比较,勃起次数和ICP/MAP明显改善(P=0.025、0.024),阴茎海绵体平滑肌舒缩顺应性提高(P=0.031、0.024)并且Rho A、ROCK2以及肌球蛋白磷酸酶靶向结合亚基(myosin phosphatase target subunit,MYPT)-1蛋白和m RNA表达水平下调(P=0.029、0.003、0.002),但仍未达到正常对照组大鼠水平(P=0.018、0.040、0.003),ROCK1表达无明显差异(P=0.533)。结论:DMED大鼠因Rho A/ROCK信号通路上调和MLCP磷酸化增强导致阴茎海绵体平滑肌舒缩顺应性降低以致勃起功能障碍发生,激活BKca可以通过下调Rho A/ROCK信号通路和抑制MLCP磷酸化,改善勃起功能。 展开更多

关键词 勃起功能障碍 rhoa/rock信号通路 大电导钙激活钾通道 糖尿病

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糖肾平对糖尿病肾病KKAy小鼠肾脏保护作用及对RhoA/ROCK信号通路影响的研究 被引量：5

9

作者 苗永辉 赵宗江 +4 位作者 张新雪 杨美娟 杨冠男 吴阿敏 王婷 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 2017年第6期1038-1049,共12页

目的:探讨糖肾平对糖尿病肾病(Diabetic Kidney Disease,DKD)KKAy小鼠肾保护作用及其对Rho A/ROCK信号通路的影响。方法:雌性10周龄SPF级KKAy小鼠60只,KK鼠料诱导10周建立DKD模型,随机分为模型组、厄贝沙坦组、糖肾平低(0.525 g·kg... 目的:探讨糖肾平对糖尿病肾病(Diabetic Kidney Disease,DKD)KKAy小鼠肾保护作用及其对Rho A/ROCK信号通路的影响。方法:雌性10周龄SPF级KKAy小鼠60只,KK鼠料诱导10周建立DKD模型,随机分为模型组、厄贝沙坦组、糖肾平低(0.525 g·kg(-1))、中(1.05 g·kg^(-1))、高(2.1 g·kg(-1))剂量组,10只雌性C57BL/6J小鼠为正常组。各治疗组灌胃给药,正常组、模型组灌胃等体积去离子水,每4周称体质量并测24 h尿蛋白定量。第26周小鼠麻醉后摘眼球取血,称肾质量、测空腹血糖(Fasting Blood Glucose,FBG)、血尿素氮(BloodUrea Nitrogen,BUN)、血肌酐(Serum creatinine,Scr)和甘油三酯(Triglyceride,TG)含量;HE、Mallory和PAS染色观察肾组织病理;免疫组化、原位杂交测肾组织转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Ras同源基因家族成员A(Ras homolog gene familymember A,Rho A)、Rho相关卷曲蛋白激酶(Rho-associatedcoiled-coil-containing protein kinase 1,ROCK1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-Smooth Muscle Actin,α-SMA)、E-钙黏素(E-Cadherin,E-Cad)m RNA及蛋白表达。结果:与模型组相比,各治疗组体质量、肾质量/体质量、尿蛋白降低,糖肾平中、高剂量组有显著性差异(P<0.01);肾病理损害明显减轻,FBG、BUN、Scr、TG含量降低(P<0.01),E-Cadherin m RNA及蛋白表达增加,TGF-β1、Rho A、ROCK1和α-SMA m RNA和蛋白表达减少,糖肾平中、高剂量组差异显著(P<0.01)。结论:糖肾平对DKD KKAy小鼠肾的保护作用及抑制肾小管上皮细胞转分化的作用,可能与调节Rho A/ROCK信号通路有关。 展开更多

关键词 糖尿病肾病糖肾平 肾痿 KKAy小鼠rhoa/rock通路 肾小管上皮细胞转分化

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黄芩苷通过ROS依赖性调节RhoA/ROCK通路保护氯化钴诱导心肌细胞损伤的实验研究 被引量：6

10

作者 沈艳玲 刘承红 +3 位作者 王世魁 徐尧 张云波 顾申红 《海南医学院学报》 CAS 北大核心 2024年第7期481-488,共8页

目的:本研究旨在探讨黄芩苷(Baicalin)对氯化钴(CoCl_(2))诱导H9c2心肌细胞缺氧损伤的作用机制。方法:采用CoCl_(2)建立心肌细胞缺氧损伤模型,并分别加入不同浓度的黄芩苷培养。将正常氧培养设置为对照组,CoCl_(2)培养H9c2心肌细胞设置... 目的:本研究旨在探讨黄芩苷(Baicalin)对氯化钴(CoCl_(2))诱导H9c2心肌细胞缺氧损伤的作用机制。方法:采用CoCl_(2)建立心肌细胞缺氧损伤模型,并分别加入不同浓度的黄芩苷培养。将正常氧培养设置为对照组,CoCl_(2)培养H9c2心肌细胞设置为CoCl_(2)组;Baicalin、Y27632(Rho激酶抑制剂)预处理的H9c2缺氧心肌细胞设置为CoCl_(2)+Baicalin组、CoCl_(2)+Y27632组、CoCl_(2)+Baicalin+Y27632组。通过细胞毒性检测试剂盒(CCK8)检测细胞活性;荧光探针测定细胞中活性氧(ROS)的表达;WST-8检测心肌细胞超氧化歧化酶(SOD)活力;TBA法测定丙二醇(MDA)浓度;同时采用WesternBlot方法分析RhoA、ROCK1、ROCK2、TNF-α、IL-1β蛋白表达情况。结果:处理H9c2细胞24 h后,1 000μmol/L的CoCl_(2)和75μmol/L黄芩苷对治疗心肌细胞缺氧损伤具有较好的细胞活力。CoCl_(2)组细胞活性明显低于对照组,加入黄芩苷后可显著提高细胞活性(P<0.05);与对照组相比,CoCl_(2)组心肌细胞可上调ROS、MDA表达,下调SOD活力,升高RhoA、ROCK1、ROCK2、TNF-α、IL-1β蛋白表达水平,加入Baicalin后可逆转上诉蛋白的表达水平;与CoCl_(2)组相比,CoCl_(2)+Baicalin可抑制ROS、MDA的表达,上调SOD含量,下调RhoA、ROCK1、ROCK2、TNF-α、IL-1β蛋白表达水平,而加入Y27632(Rho激酶抑制剂)后则可显著增强Baicalin带来的保护作用。结论:Baicalin可减轻CoCl_(2)诱导H9c2心肌细胞缺氧损伤的炎症、氧化应激反应,其机制与抑制ROS依赖性RhoA/ROCK通路有关。 展开更多

关键词 黄芩苷 rhoa/Rho相关激酶(rock)信号通路 缺氧损伤模型

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糖肾平含药血清对高糖诱导肾小管上皮细胞增殖作用及RhoA/ROCK信号通路影响的研究 被引量：3

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作者 苗永辉 赵宗江 +3 位作者 杨冠男 王婷 黄雅薇 张紫嫣 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 2017年第6期1050-1056,共7页

目的:探讨糖肾平含药血清对高糖刺激肾小管上皮细胞增殖作用及Rho A/ROCK信号通路的影响。方法:制备鼠含药血清;培养肾小管上皮细胞分为:正常组,高糖组,抑制剂(Y27632)组,厄贝沙坦组,糖肾平低、中、高剂量组,3000细胞/孔种于96孔板,每组... 目的:探讨糖肾平含药血清对高糖刺激肾小管上皮细胞增殖作用及Rho A/ROCK信号通路的影响。方法:制备鼠含药血清;培养肾小管上皮细胞分为:正常组,高糖组,抑制剂(Y27632)组,厄贝沙坦组,糖肾平低、中、高剂量组,3000细胞/孔种于96孔板,每组8个复孔,12、24、48、60 h观察细胞,MTT法检测细胞增殖。Western blotting检测肾小管上皮细胞中Rho A、ROCK1、α-SMA和E-Cadherin蛋白的表达。结果:高糖诱导后细胞呈梭型或不规则三角形;含药血清干预后,细胞呈扁平不规则多角形。MTT:12 h,与正常组比,各组OD值升高;24、48、60 h,与正常组比,高糖组OD值显著升高(P<0.01);与高糖组比,各治疗组OD值有不同程度降低(P<0.05),48 h,与Y27632组、厄贝沙坦组和糖肾平高剂量组比,糖肾平低、中剂量组OD值降低(P<0.05);60 h,与Y27632组比,糖肾平中剂量组降低;与厄贝沙坦组比,糖肾平各剂量组OD值降低(P<0.05);与糖肾平高剂量组比,糖肾平低剂量组升高(P<0.05)。Western blotting,与正常组比,高糖组E-Cadherin蛋白表达减少,Rho A、ROCK1和α-SMA蛋白表达增加(P<0.01);与高糖组比,各组E-Cadherin蛋白表达增加,Rho A、ROCK1和α-SMA蛋白表达减少,高剂量组有显著差异(P<0.01);与Y27632组比,糖肾平高剂量组ROCK1、E-Cadherin和α-SMA蛋白表达无统计学差异(P>0.05),Rho A蛋白表达减少(P<0.01);与厄贝沙坦组比,糖肾平高剂量组Rho A、ROCK1、E-Cadherin和α-SMA蛋白表达无统计学差异(P>0.05)。结论:糖肾平通过抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖和Rho A/ROCK信号通路相关分子的表达,从而逆转上皮-间质转分化,抑制肾间质纤维化,延缓糖尿病肾病病情进展。 展开更多

关键词 糖肾平 肾痿 肾小管上皮细胞株 KKAY小鼠 细胞增殖 MTT EMT rhoa/rock信号通路

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基于RhoA/ROCK1信号通路探讨抗纤益心方对扩张型心肌病大鼠心肌纤维化的影响 被引量：5

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作者 杨凤鸣 边汝涛 +2 位作者 王冰 王振涛 吴鸿 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2022年第9期89-93,I0023,I0024,共7页

目的通过RhoA/ROCK1信号通路探讨抗纤益心方对扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)大鼠心肌纤维化的作用机制。方法将4周龄Wistar雄性大鼠100只随机选取10只作为正常组,其余90只通过呋喃唑酮诱导DCM大鼠模型,将造模成功大鼠随机... 目的通过RhoA/ROCK1信号通路探讨抗纤益心方对扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)大鼠心肌纤维化的作用机制。方法将4周龄Wistar雄性大鼠100只随机选取10只作为正常组,其余90只通过呋喃唑酮诱导DCM大鼠模型,将造模成功大鼠随机分为模型组,抗纤益心方高(3.6 g·kg^(-1)·d^(-1))、中(1.8 g·kg^(-1)·d^(-1))、低剂量(0.9 g·kg^(-1)·d^(-1))及卡托普利组(10.125 mg·kg^(-1)·d^(-1))。连续给药4周后,超声检测大鼠心脏功能,HE、Masson检测心肌组织病理变化,Western blot、Real-time PCR检测心肌组织中Ras同源蛋白家族成员A(ras homologous family member A,RhoA)、Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1(rho associated coiled coil forming protein kinase 1,ROCK1)、肌球蛋白轻链(myosin light chain,MLC)、p-MLC、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、COI-I、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)蛋白和mRNA表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠心脏功能明显降低(P<0.01),心肌组织结构异常、心肌纤维化明显,纤维化因子α-SMA、COI-1、CTGF的表达升高(P<0.01),RhoA/ROCK1信号通路表达上调(P<0.01);与模型组比较,抗纤益心方高、中剂量和卡托普利组大鼠心功能明显改善(P<0.05,P<0.01),心肌结构和心肌纤维化明显减轻,纤维化因子表达降低,RhoA/ROCK1信号通路表达下调(P<0.05,P<0.01);而低剂量组改善不明显(P>0.05)。结论抗纤益心方可以通过下调RhoA/ROCK1信号通路的来抑制扩张型心肌病大鼠心肌纤维化的发展。 展开更多

关键词 扩张型心肌病 心肌纤维化 rhoa/rock1信号通路 抗纤益心方

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RhoA/ROCK信号通路相关疾病的研究进展 被引量：24

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作者 刘建兵 刘敏丽 《海南医学院学报》 CAS 2019年第6期472-476,共5页

RhoA属于RhoGTP亚家族蛋白。RhoA能够激活下游的ROCK激酶,进而影响细胞分子的生成和分泌,并产生相应的生物学效应。这一系列反应构成RhoA/ROCK信号通路。因此该通路的激活和抑制与多种疾病的发生发展密切相关。对其中所涉及的分子机制... RhoA属于RhoGTP亚家族蛋白。RhoA能够激活下游的ROCK激酶,进而影响细胞分子的生成和分泌,并产生相应的生物学效应。这一系列反应构成RhoA/ROCK信号通路。因此该通路的激活和抑制与多种疾病的发生发展密切相关。对其中所涉及的分子机制的研究可能会对临床治疗及疾病的预后有所启发和帮助。本文结合近年来的研究对RhoA/ROCK信号通路所涉及的相关典型疾病进行综述。 展开更多

关键词 rhoa rock rhoa/rock通路 磷酸化

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RhoA-ROCK信号通路介导缺氧所致乳腺癌细胞肌动蛋白细胞骨架重构

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作者 姬红平 戈应滨 +3 位作者 李迎春 范玲玲 宋鸣子 顾洛 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期19-22,F0002,共5页

目的:探讨缺氧对乳腺癌细胞(MDA-MB-435细胞)肌动蛋白细胞骨架重构和细胞形态改变与RhoA-ROCK信号通路的关系。方法:对体外培养的MDA-MB-435细胞进行缺氧16h处理,或在缺氧前用ROCK的特异性抑制剂Y-2763(210μmol/L)预处理细胞1h,再进行... 目的:探讨缺氧对乳腺癌细胞(MDA-MB-435细胞)肌动蛋白细胞骨架重构和细胞形态改变与RhoA-ROCK信号通路的关系。方法:对体外培养的MDA-MB-435细胞进行缺氧16h处理,或在缺氧前用ROCK的特异性抑制剂Y-2763(210μmol/L)预处理细胞1h,再进行缺氧处理。用共聚焦激光扫描显微镜研究缺氧或使用Y-27632对MDA-MB-435细胞肌动蛋白细胞骨架重构的影响和细胞形态的改变。结果:乳腺癌细胞经16h缺氧处理,肌动蛋白细胞骨架发生解聚,应力纤维的排列和分布以及细胞形态明显改变;事先使用Y-27632再进行缺氧处理,可防止缺氧所致乳腺癌细胞内肌动蛋白细胞骨架解聚,同时应力纤维在细胞内排列和分布恢复正常。结论:RhoA-ROCK信号通路可能参与缺氧所致乳腺癌细胞内肌动蛋白细胞骨架的重构和细胞形态的改变。 展开更多

关键词 缺氧 rhoa—rock信号通路 肌动蛋白 乳腺癌细胞 细胞骨架

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四逆汤抑制RhoA/ROCK信号通路改善大鼠心肌纤维化 被引量：15

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作者 杨瑶 徐萍 石月萍 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1342-1347,共6页

目的探究四逆汤(附子、干姜、甘草)对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌纤维化的影响。方法 40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、卡托普利组[100 mg/(kg·d)]、四逆汤组[3.8 g/(kg·d)],每组10只。除空白组外,其余大鼠皮下注射异丙肾上... 目的探究四逆汤(附子、干姜、甘草)对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌纤维化的影响。方法 40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、卡托普利组[100 mg/(kg·d)]、四逆汤组[3.8 g/(kg·d)],每组10只。除空白组外,其余大鼠皮下注射异丙肾上腺素[5 mg/(kg·d)]制备心肌纤维化模型,连续给药4周。末次给药后20 h,检测心脏血流动力学变化,计算心脏质量指数,苏木精-伊红(HE)染色及Masson染色观察心肌病理形态学变化,硝酸还原酶法检测血清中NO水平,黄嘌呤氧化酶法检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力,硫代巴比妥酸法检测血清中丙二醛(MDA)水平,Western blot法检测心肌组织中Rho A、ROCK1、内皮型一氧化氮合酶(e NOS)蛋白的表达。结果与模型组比较,四逆汤组大鼠心脏功能明显改善,心肌胶原含有量明显减少,血清中MDA水平明显降低,NO水平及SOD活力显著提高,心肌组织中Rho A和ROCK1蛋白的表达显著下降,e NOS蛋白的表达显著升高。结论四逆汤能改善异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化,其机制可能与抑制了Rho A/ROCK信号通路,进而上调了e NOS的表达后,导致氧化应激减少有关。 展开更多

关键词 四逆汤 心肌纤维化 rhoa/rock信号通路 ENOS

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柚皮素通过下调RhoA/ROCK信号通路改善糖尿病肾病小鼠肾纤维化 被引量：8

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作者 谢发江 冉茂霞 +3 位作者 冯健 李燕 李家富 邓莉 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1637-1643,1703,共8页

为探讨柚皮素对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)小鼠肾纤维化的影响及其机制。将32只C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、柚皮素组、法舒地尔组。DN模型复制成功后分别予柚皮素及法舒地尔处理,正常组、模型组予生理盐水对照,连续1... 为探讨柚皮素对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)小鼠肾纤维化的影响及其机制。将32只C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、柚皮素组、法舒地尔组。DN模型复制成功后分别予柚皮素及法舒地尔处理,正常组、模型组予生理盐水对照,连续12周,处死小鼠,观察血肌酐(serum creatinine,Scr)、24 h尿蛋白定量(24-hour urinary protein quantity,24 h Upro)、血糖、体重的变化;HE及Masson染色观察肾脏形态学改变;免疫组化观察肾脏RhoA、ROCK1、ROCK2、I型胶原蛋白(type-I collagen,Col1)、III型胶原蛋白(type-III collagen,Col3)的水平;Western blot测定肾脏RhoA、ROCK1、ROCK2、p-MYPT1、层粘连蛋白(laminin,LN)、纤连蛋白(fibronectin,FN)的水平。结果显示肾脏形态学观察可见正常组间质少许胶原纤维,模型组间质大量胶原纤维,处理组间质少量胶原纤维。与正常组相比,模型组24 h Upro、Scr升高(P<0.05);与模型组相比,处理组24 h Upro、Scr降低(P<0.05),血糖、体重差异无统计学意义(P>0.05)。与正常组相比,模型组RhoA、ROCK1、ROCK2、Col1、Col3、p-MYPT1 Thr853、LN、FN的水平升高(P<0.05);与模型组比较,处理组RhoA、ROCK1、ROCK2、Col1、Col3、p-MYPT1 Thr853、LN、FN的水平降低(P<0.05)。与柚皮素组相比,法舒地尔组各指标差异无统计学显著性(P>0.05)。柚皮素具有改善DN小鼠肾纤维化的作用,其机制可能与下调RhoA/ROCK信号通路有关。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 肾纤维化 柚皮素 rhoa/rock信号通路

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孕酮通过RhoA/ROCK信号通路促进子宫平滑肌收缩的机制研究 被引量：5

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作者 严小丽 陈诚 +1 位作者 王丹 常青 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1199-1206,共8页

目的 探讨孕酮通过RhoA/ROCK信号通路影响子宫平滑肌收缩的作用机制。方法 收集临产与未临产人子宫平滑肌组织各5例,采用Western blot和免疫组化检测肌球蛋白轻链20磷酸化(phosphorylation of myosin light chain 20,p-MLC20)、ROCK1、R... 目的 探讨孕酮通过RhoA/ROCK信号通路影响子宫平滑肌收缩的作用机制。方法 收集临产与未临产人子宫平滑肌组织各5例,采用Western blot和免疫组化检测肌球蛋白轻链20磷酸化(phosphorylation of myosin light chain 20,p-MLC20)、ROCK1、ROCK2的表达;分离培养子宫平滑肌细胞并经免疫荧光技术鉴定,激光共聚焦显微镜检测细胞内游离Ca;浓度([Ca;]i);孕酮受体拮抗剂米非司酮及孕酮(P4)干预子宫平滑肌细胞,Western blot检测细胞中p-MLC20及ROCK1、ROCK2的表达,以及ROCK抑制剂Y-27632与孕酮干预后子宫平滑肌细胞中p-MLC20的表达。结果 与未临产组织相比,临产子宫平滑肌组织中p-MLC20、ROCK1、ROCK2表达明显上升(P<0.05);孕酮诱导子宫平滑肌细胞后,细胞内ROCK1、ROCK2、p-MLC20水平增加(P<0.05);Y-27632与孕酮干预子宫平滑肌细胞后,细胞内p-MLC20水平下降(P<0.05)。结论 孕酮通过RhoA/ROCK信号通路调控p-MLC20水平,促进子宫平滑肌细胞收缩。 展开更多

关键词 孕酮 rhoa/rock信号通路 肌球蛋白轻链20磷酸化 子宫收缩 平滑肌细胞

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OSBPL2介导RhoA/ROCK2信号通路调控听觉细胞肌动蛋白细胞骨架

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作者 张城 杨倩 +1 位作者 姚俊 曹新 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2023年第5期648-654,共7页

目的:探索氧化固醇结合蛋白样蛋白2(oxysterol binding protein-like 2,OSBPL2)对听觉细胞肌动蛋白骨架形态和功能的影响及其相关分子机制。方法:采用OSBPL2基因敲除(Osbpl2-KO)HEI-OC1细胞探讨OSBPL2缺陷对听觉细胞肌动蛋白细胞骨架形... 目的:探索氧化固醇结合蛋白样蛋白2(oxysterol binding protein-like 2,OSBPL2)对听觉细胞肌动蛋白骨架形态和功能的影响及其相关分子机制。方法:采用OSBPL2基因敲除(Osbpl2-KO)HEI-OC1细胞探讨OSBPL2缺陷对听觉细胞肌动蛋白细胞骨架形态和功能的影响;扫描电镜观察Osbpl2-KO小鼠毛细胞静纤毛形态;Western blot实验检测HEI-OC1细胞和耳蜗内Rho/ROCK信号通路关键效应因子Rho激酶2(Rho-associated coiled-coil-containing protein kinase 2,ROCK2)、Lim激酶1(LIM domain kinase 1,LIMK1)、肌动蛋白解聚因子/丝切蛋白1(actin depolymerizing factor/cofilin 1,ADF/CFL-1)的表达水平。结果:Osbpl2-KO HEI-OC1细胞微丝骨架中纤维肌动蛋白(F-actin)的分布明显减少,细胞外周微刺突和丝状伪足明显减少,细胞迁移能力明显减弱;扫描电镜下观察发现Osbpl2敲除导致小鼠耳蜗内毛细胞静纤毛变短且排列紊乱;Western blot检测结果表明,在HEI-OC1细胞和小鼠耳蜗中OSBPL2-KO均导致RhoA/ROCK2信号通路的抑制。结论:在听觉细胞中OSBPL2介导的RhoA/ROCK2信号通路在维持肌动蛋白细胞骨架形态和功能的过程中发挥重要的调控作用。 展开更多

关键词 氧化固醇结合蛋白样蛋白2 肌动蛋白细胞骨架 rhoa/rock2信号通路 肌动蛋白解聚因子 丝切蛋白1

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醛固酮通过激活RhoA/ROCK信号通路诱导大鼠肝星状细胞迁移 被引量：4

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作者 姬宏利 姬宏娟 王保健 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期812-816,共5页

目的探讨醛固酮(ALD)诱导大鼠肝星状细胞系HSC-T6细胞迁移的作用及其机制。方法HSC-T6细胞分为阴性对照组、ALD单独处理组、安体舒通预处理组、Y27632预处理组。对照组仅用无血清DMEM培养,其余各组给予1 nmol/L ALD刺激24 h,但安体舒通... 目的探讨醛固酮(ALD)诱导大鼠肝星状细胞系HSC-T6细胞迁移的作用及其机制。方法HSC-T6细胞分为阴性对照组、ALD单独处理组、安体舒通预处理组、Y27632预处理组。对照组仅用无血清DMEM培养,其余各组给予1 nmol/L ALD刺激24 h,但安体舒通和Y27632预处理分别在ALD刺激前,分别给予10 nmol/L安体舒通或Y27632预处理1 ho TransweU™实验观察细胞迁移情况、罗丹明标记的鬼笔环肽染色观察细胞纤维型肌动蛋白(F-actin)的分布、激光共聚焦显微镜观察细胞骨架的变化;Western blot法检测细胞Rh。激酶通路上肌球蛋白轻链(MLC)、膜突蛋白(moesin)磷酸化水平。结果ALD处理的HSC-T6细胞迁移增加、F-actin数量增加、MLC和moesin蛋白的磷酸化增强。安体舒通和Y27632均可显著抑制以上作用并抑制MLC和moesin蛋白的磷酸化,两组的抑制效应无明显差别。结论ALD诱导的肝星状细胞的迁移可能与Ras同源蛋白A/Rh。相关卷曲蛋白激酶(RhoA/ROCK)信号通路的激活有关。 展开更多

关键词 醛固酮 Ras同源蛋白A/Rho相关卷曲蛋白激酶(rhoa/rock)信号通路 细胞迁移

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RhoA/ROCK信号系统对血管外膜炎症介导的大鼠颈动脉平滑肌细胞增殖和表型变化的影响 被引量：2

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作者 程木秋 霍海洋 张海山 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期220-223,共4页

目的探讨RhoA/ROCK信号系统在血管外膜炎症介导的大鼠颈动脉平滑肌细胞(VSMC)增殖和表型变化中的作用机制。方法将20只Wistar大鼠按随机数字表法均分为模型组(用硅胶管包裹大鼠颈动脉1周,造成血管外膜的慢性炎性损伤)和对照组,取材后HE... 目的探讨RhoA/ROCK信号系统在血管外膜炎症介导的大鼠颈动脉平滑肌细胞(VSMC)增殖和表型变化中的作用机制。方法将20只Wistar大鼠按随机数字表法均分为模型组(用硅胶管包裹大鼠颈动脉1周,造成血管外膜的慢性炎性损伤)和对照组,取材后HE染色,分别观察2组血管形态学变化,采用RT-PCR和Western blot检测血管组织中SMα-actin与ROCK2的表达。结果与对照组相比,模型组颈动脉血管外膜增厚,炎性细胞浸润,中膜平滑肌细胞增生,排列紊乱,VSMC中SMα-actin mRNA水平和蛋白表达水平均增高,ROCK2 mRNA水平与对照组相比无显著差异,蛋白表达水平均明显增高。结论RhoA/ROCK信号系统可能参与血管外膜炎症介导的大鼠颈动脉VSMC增殖和表型变化的调控。 展开更多

关键词 血管外膜 硅胶管 颈动脉损伤 rhoa/rock信号转导通路

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