目的研究人Plecstrin同源域家族A成员1(Pleckstrin homology like domain family A member 1,PHLDA1)与胶质瘤恶性表型关系。方法收集马鞍山市中心医院神经外科和上海新华医院神经外科2015年1月至2020年4月65例原发脑胶质瘤的速冻标本...目的研究人Plecstrin同源域家族A成员1(Pleckstrin homology like domain family A member 1,PHLDA1)与胶质瘤恶性表型关系。方法收集马鞍山市中心医院神经外科和上海新华医院神经外科2015年1月至2020年4月65例原发脑胶质瘤的速冻标本。从接受尸检的非胶质瘤患者中收集了5份脑组织样本作为对照。利用免疫组化方法检测样品中的PHLDA1表达。采用免疫荧光、流式细胞术、集落形成法、体外细胞迁移侵袭法对成人胶质瘤U87细胞系和U251细胞系进行胶质瘤表型分析。结果免疫组化结果显示,随着胶质瘤WHO分级的增加,PHLDA1染色强度增加(x^(2)趋势=24.145,P<0.01)。3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐比色法(MTT试验)结果显示,与空白对照组和阴性干扰组相比,当SiRNA干扰敲低PHLDA1后,U87和U251培养48 h后的增殖率显著降低(P<0.05)。流式细胞仪检测显示,PHLDA1干扰后,U87和U251细胞凋亡率高于对照组(P<0.01),G0-G1期细胞比例低于对照组(P<0.05)而S期比例高于对照组(P<0.01)。transwell试验显示,PHLDA1干扰组的U87和U251迁移率明显低于对照组(P<0.01)。结论PHLDA1在胶质瘤中过表达。功能分析显示PHLDA1在胶质瘤的迁移和侵袭中起重要作用。PHLDA1可能成为胶质瘤新的潜在治疗靶点。展开更多
综述Ras相关域家族成员4(Ras association domain family member 4,RASSF4)的分子结构、生物功能、基因启动子甲基化与肿瘤关系等研究进展,分析RASSF4具有调控细胞增殖、分化、凋亡等多个生物功能,其表达失调与多种肿瘤的发生发展的相...综述Ras相关域家族成员4(Ras association domain family member 4,RASSF4)的分子结构、生物功能、基因启动子甲基化与肿瘤关系等研究进展,分析RASSF4具有调控细胞增殖、分化、凋亡等多个生物功能,其表达失调与多种肿瘤的发生发展的相关性。阐述启动子甲基化是RASSF4基因表达失调的重要机制之一,但RASSF4基因启动子甲基化与肿瘤发生发展的关联及意义尚不明晰,讨论以逆转甲基化的方式治疗肿瘤的应用前景。通过阐明RASSF4生物学概况和在多种肿瘤中所扮演的角色,为人类开发以RASSF4作为特定肿瘤的检测和治疗靶点提供理论依据。展开更多
为探究7因子(Jdp2-Jhdm1b-Mkk6-Glis1-Nanog-Esrrb-Sall4)诱导的体细胞重编程机制,通过正向与反向遗传学方法、定量分析重编程关键分子事件及同时敲降同源异型盒C8(homeobox C8, Hoxc8)和SMAD家族成员6(SMAD family member 6, Smad6)等...为探究7因子(Jdp2-Jhdm1b-Mkk6-Glis1-Nanog-Esrrb-Sall4)诱导的体细胞重编程机制,通过正向与反向遗传学方法、定量分析重编程关键分子事件及同时敲降同源异型盒C8(homeobox C8, Hoxc8)和SMAD家族成员6(SMAD family member 6, Smad6)等方式解析Hoxc8在细胞多能性网络重建过程中的相关作用。结果表明:敲降Hoxc8可显著抑制7因子诱导的体细胞重编程,但过表达Hoxc8对其无影响。敲降Hoxc8既不影响重编程中多能性标记基因的上调与体细胞标记基因的下调,也不影响间质-上皮转化(mesenchymal-epithelial transition, MET)标记基因与细胞增殖标记基因的表达。同时敲降Hoxc8与Smad6可使单独敲降Hoxc8导致的重编程效率降低情况得到恢复。综上所述,Hoxc8在7因子诱导的体细胞重编程中具有重要作用,为进一步揭示Hoxc8调控细胞命运转变的机制提供了参考。展开更多
目的检测肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的相关抗原,并予以验证。方法分别提取15例HCC组织及其癌旁组织总蛋白。Western blot分别检测各总蛋白与其HCC患者自体血清的杂交情况。双向电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE...目的检测肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的相关抗原,并予以验证。方法分别提取15例HCC组织及其癌旁组织总蛋白。Western blot分别检测各总蛋白与其HCC患者自体血清的杂交情况。双向电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)技术将15例混合总蛋白中的各蛋白进行分离与染色。图像分析法比对染色胶上HCC组织及其癌旁组织蛋白的表达差异,基质辅助激光解吸/电离飞行时间二级质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization-time-of-flight with two mass analyzers for tandem mass spectrometry,MALDI-TOF MS/MS)技术及生物信息学网络数据库分别对表达差异蛋白予以分析鉴定与检索匹配,免疫组织化学与Western blot分别检测该差异蛋白在人HCC组织及其癌旁组织中的变化情况。结果 2-DE染色胶图像分析比对结果显示,HCC及其癌旁组织蛋白表达差异斑点共90个,MALDI-TOF MS/MS与数据库对其中19个蛋白斑点分析鉴定与检索匹配发现15个蛋白表达上调,4个蛋白表达下调。免疫组织化学与Western blot检测结果显示,与对照比较,上调蛋白中的Dna J同源B亚家族成员11(dna J homolog subfamily B member 11,DNAJB11)在HCC组织中的表达明显增强,下调蛋白中的蛋白酶体亚基α3(proteasome subunit alpha type 3,PSMA3)在HCC组织中的表达则相反。结论人原发性肝癌相关抗原DNAJB11在HCC组织中的表达上调,PSMA3在HCC组织中的表达下调。展开更多
目的:探究电针(EA)夹脊穴对脊髓损伤(SCI)大鼠后肢运动功能及蛋白激酶A(PKA)/Ras同源基因家族成员A(RhoA)通路表达的影响,并从PKA/RhoA通路初步探讨其机制。方法:将36只雌性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、SCI模型组(SCI)、电针干预组(S...目的:探究电针(EA)夹脊穴对脊髓损伤(SCI)大鼠后肢运动功能及蛋白激酶A(PKA)/Ras同源基因家族成员A(RhoA)通路表达的影响,并从PKA/RhoA通路初步探讨其机制。方法:将36只雌性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、SCI模型组(SCI)、电针干预组(SCI+EA)。运用钳夹法建立SCI模型,SCI+EA组电针干预T_(9)和T_(11)两对夹脊穴。利用脊髓功能评分(BBB量表)检测大鼠的后肢运动功能,HE染色观察脊髓组织形态学改变,同时运用免疫荧光染色、Western Blot及real time RT-PCR检测脊髓组织中蛋白激酶A(PKA)、Ras同源基因家族成员A(RhoA)及生长相关蛋白-43(GAP-43)的表达。结果:SCI模型大鼠后肢运动功能发生严重障碍,脊髓组织结构紊乱,伴较多出血点,而电针刺激后SCI大鼠脊髓组织结构较完整,出血点减少,后肢运动功能也得到明显改善。此外,夹脊电针刺激可显著提高SCI大鼠脊髓组织中PKA mRNA表达,(P<0.05)。同时,夹脊电针刺激后SCI大鼠脊髓组织中PKA、GAP-43蛋白以及磷酸化蛋白p-RhoA(ser188)表达均显著升高(P<0.05)。结论:夹脊电针能改善SCI大鼠后肢运动功能,减轻脊髓组织的病理学损伤;可能是通过调节PKA/RhoA信号通路实现的。展开更多
文摘目的研究人Plecstrin同源域家族A成员1(Pleckstrin homology like domain family A member 1,PHLDA1)与胶质瘤恶性表型关系。方法收集马鞍山市中心医院神经外科和上海新华医院神经外科2015年1月至2020年4月65例原发脑胶质瘤的速冻标本。从接受尸检的非胶质瘤患者中收集了5份脑组织样本作为对照。利用免疫组化方法检测样品中的PHLDA1表达。采用免疫荧光、流式细胞术、集落形成法、体外细胞迁移侵袭法对成人胶质瘤U87细胞系和U251细胞系进行胶质瘤表型分析。结果免疫组化结果显示,随着胶质瘤WHO分级的增加,PHLDA1染色强度增加(x^(2)趋势=24.145,P<0.01)。3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐比色法(MTT试验)结果显示,与空白对照组和阴性干扰组相比,当SiRNA干扰敲低PHLDA1后,U87和U251培养48 h后的增殖率显著降低(P<0.05)。流式细胞仪检测显示,PHLDA1干扰后,U87和U251细胞凋亡率高于对照组(P<0.01),G0-G1期细胞比例低于对照组(P<0.05)而S期比例高于对照组(P<0.01)。transwell试验显示,PHLDA1干扰组的U87和U251迁移率明显低于对照组(P<0.01)。结论PHLDA1在胶质瘤中过表达。功能分析显示PHLDA1在胶质瘤的迁移和侵袭中起重要作用。PHLDA1可能成为胶质瘤新的潜在治疗靶点。
文摘综述Ras相关域家族成员4(Ras association domain family member 4,RASSF4)的分子结构、生物功能、基因启动子甲基化与肿瘤关系等研究进展,分析RASSF4具有调控细胞增殖、分化、凋亡等多个生物功能,其表达失调与多种肿瘤的发生发展的相关性。阐述启动子甲基化是RASSF4基因表达失调的重要机制之一,但RASSF4基因启动子甲基化与肿瘤发生发展的关联及意义尚不明晰,讨论以逆转甲基化的方式治疗肿瘤的应用前景。通过阐明RASSF4生物学概况和在多种肿瘤中所扮演的角色,为人类开发以RASSF4作为特定肿瘤的检测和治疗靶点提供理论依据。
文摘为探究7因子(Jdp2-Jhdm1b-Mkk6-Glis1-Nanog-Esrrb-Sall4)诱导的体细胞重编程机制,通过正向与反向遗传学方法、定量分析重编程关键分子事件及同时敲降同源异型盒C8(homeobox C8, Hoxc8)和SMAD家族成员6(SMAD family member 6, Smad6)等方式解析Hoxc8在细胞多能性网络重建过程中的相关作用。结果表明:敲降Hoxc8可显著抑制7因子诱导的体细胞重编程,但过表达Hoxc8对其无影响。敲降Hoxc8既不影响重编程中多能性标记基因的上调与体细胞标记基因的下调,也不影响间质-上皮转化(mesenchymal-epithelial transition, MET)标记基因与细胞增殖标记基因的表达。同时敲降Hoxc8与Smad6可使单独敲降Hoxc8导致的重编程效率降低情况得到恢复。综上所述,Hoxc8在7因子诱导的体细胞重编程中具有重要作用,为进一步揭示Hoxc8调控细胞命运转变的机制提供了参考。
文摘目的检测肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的相关抗原,并予以验证。方法分别提取15例HCC组织及其癌旁组织总蛋白。Western blot分别检测各总蛋白与其HCC患者自体血清的杂交情况。双向电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)技术将15例混合总蛋白中的各蛋白进行分离与染色。图像分析法比对染色胶上HCC组织及其癌旁组织蛋白的表达差异,基质辅助激光解吸/电离飞行时间二级质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization-time-of-flight with two mass analyzers for tandem mass spectrometry,MALDI-TOF MS/MS)技术及生物信息学网络数据库分别对表达差异蛋白予以分析鉴定与检索匹配,免疫组织化学与Western blot分别检测该差异蛋白在人HCC组织及其癌旁组织中的变化情况。结果 2-DE染色胶图像分析比对结果显示,HCC及其癌旁组织蛋白表达差异斑点共90个,MALDI-TOF MS/MS与数据库对其中19个蛋白斑点分析鉴定与检索匹配发现15个蛋白表达上调,4个蛋白表达下调。免疫组织化学与Western blot检测结果显示,与对照比较,上调蛋白中的Dna J同源B亚家族成员11(dna J homolog subfamily B member 11,DNAJB11)在HCC组织中的表达明显增强,下调蛋白中的蛋白酶体亚基α3(proteasome subunit alpha type 3,PSMA3)在HCC组织中的表达则相反。结论人原发性肝癌相关抗原DNAJB11在HCC组织中的表达上调,PSMA3在HCC组织中的表达下调。
文摘目的:探究电针(EA)夹脊穴对脊髓损伤(SCI)大鼠后肢运动功能及蛋白激酶A(PKA)/Ras同源基因家族成员A(RhoA)通路表达的影响,并从PKA/RhoA通路初步探讨其机制。方法:将36只雌性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、SCI模型组(SCI)、电针干预组(SCI+EA)。运用钳夹法建立SCI模型,SCI+EA组电针干预T_(9)和T_(11)两对夹脊穴。利用脊髓功能评分(BBB量表)检测大鼠的后肢运动功能,HE染色观察脊髓组织形态学改变,同时运用免疫荧光染色、Western Blot及real time RT-PCR检测脊髓组织中蛋白激酶A(PKA)、Ras同源基因家族成员A(RhoA)及生长相关蛋白-43(GAP-43)的表达。结果:SCI模型大鼠后肢运动功能发生严重障碍,脊髓组织结构紊乱,伴较多出血点,而电针刺激后SCI大鼠脊髓组织结构较完整,出血点减少,后肢运动功能也得到明显改善。此外,夹脊电针刺激可显著提高SCI大鼠脊髓组织中PKA mRNA表达,(P<0.05)。同时,夹脊电针刺激后SCI大鼠脊髓组织中PKA、GAP-43蛋白以及磷酸化蛋白p-RhoA(ser188)表达均显著升高(P<0.05)。结论:夹脊电针能改善SCI大鼠后肢运动功能,减轻脊髓组织的病理学损伤;可能是通过调节PKA/RhoA信号通路实现的。
