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猴泡沫病毒(SFV)RT-nestedPCR检测方法的建立及初步应用
1
作者
栗景蕊
付瑞
+1 位作者
李晓波
贺争鸣
《中国比较医学杂志》
CAS
2010年第1期46-51,I0003,共7页
目的建立实验猴群及相关生物制品猴泡沫病毒(SFV)的PCR检测方法。方法选择SFV-1、SFV-3、SFVCPZ前病毒序列的pol基因同源性较高的区域设计嵌套引物对SFV-1毒种进行RT-nestedPCR扩增并克隆测序,以确定其准确性,通过验证方法的特异性和敏...
目的建立实验猴群及相关生物制品猴泡沫病毒(SFV)的PCR检测方法。方法选择SFV-1、SFV-3、SFVCPZ前病毒序列的pol基因同源性较高的区域设计嵌套引物对SFV-1毒种进行RT-nestedPCR扩增并克隆测序,以确定其准确性,通过验证方法的特异性和敏感性,初步应用该方法对恒河猴外周血淋巴细胞(PBLs),常用猴肾传代细胞及猴源性生物制品进行检测。结果经RT-nestedPCR扩增出的片断与SFV-1 cDNA序列同源性达到99%,对10只恒河猴的检测结果为5只阳性,5只阴性,对常用猴肾传代细胞及脊髓灰质炎疫苗的检测结果均为阴性。结论所建立的SFV RT-nestedPCR检测方法能准确的检测出恒河猴SFV的感染情况,对控制实验猴群的质量具有重要意义。该方法可用于检测猴源性生物制品中SFV的污染情况,为保证生物制品应用的安全性提供一定依据。
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关键词
猴泡沫病毒
逆转录-巢式PCR
外周血淋巴细胞
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职称材料
猪瘟病毒RT-nested PCR检测方法的优化和应用
被引量：
14
2
作者
朱小甫
张志
+2 位作者
李晓成
陈德坤
吴旭锦
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007年第6期11-14,共4页
为了优化猪瘟病毒的RT-nested PCR检测方法,对福建省猪瘟流行情况进行了调查。根据GenBank上发表的猪瘟病毒Shimen株基因序列设计并合成了2对引物,优化了猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)的RT-nested PCR检测方法,并对所优化...
为了优化猪瘟病毒的RT-nested PCR检测方法,对福建省猪瘟流行情况进行了调查。根据GenBank上发表的猪瘟病毒Shimen株基因序列设计并合成了2对引物,优化了猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)的RT-nested PCR检测方法,并对所优化的RT-nested PCR特异性进行了检验。结果表明,该方法检测CSFV cDNA含量的最低极限为1×10-7ng/mL,只有CSFV扩增出了272 bp的目的条带,从猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流感病毒(SIV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪细小病毒(PPV)阳性毒和健康猪脾、肝组织及阴性PK-15细胞均未扩增出特异性条带,说明该方法特异性强。应用此方法对福建省133份病料进行检测,结果有60份病料为阳性,阳性率为45.1%。结果提示优化的检测方法灵敏度高,特异性强;福建省猪群CSFV感染率高,需要加强CSF预防控制工作。
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关键词
猪瘟病毒
rt-nestedpcr
检测方法
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职称材料
题名
猴泡沫病毒(SFV)RT-nestedPCR检测方法的建立及初步应用
1
作者
栗景蕊
付瑞
李晓波
贺争鸣
机构
中国药品生物制品检定所
出处
《中国比较医学杂志》
CAS
2010年第1期46-51,I0003,共7页
文摘
目的建立实验猴群及相关生物制品猴泡沫病毒(SFV)的PCR检测方法。方法选择SFV-1、SFV-3、SFVCPZ前病毒序列的pol基因同源性较高的区域设计嵌套引物对SFV-1毒种进行RT-nestedPCR扩增并克隆测序,以确定其准确性,通过验证方法的特异性和敏感性,初步应用该方法对恒河猴外周血淋巴细胞(PBLs),常用猴肾传代细胞及猴源性生物制品进行检测。结果经RT-nestedPCR扩增出的片断与SFV-1 cDNA序列同源性达到99%,对10只恒河猴的检测结果为5只阳性,5只阴性,对常用猴肾传代细胞及脊髓灰质炎疫苗的检测结果均为阴性。结论所建立的SFV RT-nestedPCR检测方法能准确的检测出恒河猴SFV的感染情况,对控制实验猴群的质量具有重要意义。该方法可用于检测猴源性生物制品中SFV的污染情况,为保证生物制品应用的安全性提供一定依据。
关键词
猴泡沫病毒
逆转录-巢式PCR
外周血淋巴细胞
Keywords
Simian foamy virus
rt-nestedpcr
Peripheral blood lymphocytes
分类号
Q939.47 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
猪瘟病毒RT-nested PCR检测方法的优化和应用
被引量：
14
2
作者
朱小甫
张志
李晓成
陈德坤
吴旭锦
机构
西北农林科技大学动物科技学院
中国动物卫生与流行病学中心
出处
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007年第6期11-14,共4页
文摘
为了优化猪瘟病毒的RT-nested PCR检测方法,对福建省猪瘟流行情况进行了调查。根据GenBank上发表的猪瘟病毒Shimen株基因序列设计并合成了2对引物,优化了猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)的RT-nested PCR检测方法,并对所优化的RT-nested PCR特异性进行了检验。结果表明,该方法检测CSFV cDNA含量的最低极限为1×10-7ng/mL,只有CSFV扩增出了272 bp的目的条带,从猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流感病毒(SIV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)和猪细小病毒(PPV)阳性毒和健康猪脾、肝组织及阴性PK-15细胞均未扩增出特异性条带,说明该方法特异性强。应用此方法对福建省133份病料进行检测,结果有60份病料为阳性,阳性率为45.1%。结果提示优化的检测方法灵敏度高,特异性强;福建省猪群CSFV感染率高,需要加强CSF预防控制工作。
关键词
猪瘟病毒
rt-nestedpcr
检测方法
Keywords
classical swine fever virus
RT-nested PCR
detection method
分类号
S852.651 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猴泡沫病毒(SFV)RT-nestedPCR检测方法的建立及初步应用
栗景蕊
付瑞
李晓波
贺争鸣
《中国比较医学杂志》
CAS
2010
0
在线阅读
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职称材料
2
猪瘟病毒RT-nested PCR检测方法的优化和应用
朱小甫
张志
李晓成
陈德坤
吴旭锦
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007
14
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职称材料
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0
条
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参考文献
引证文献
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