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外泌体共载牛血清白蛋白联合异槲皮苷纳米体系对高糖诱导人RPE细胞的保护作用及机制
1
作者
王梦华
胡芷柔
《中华实验眼科杂志(中英文)》
北大核心
2025年第9期794-800,共7页
目的构建外泌体(EXO)共载牛血清白蛋白联合异槲皮苷(BSA@ISO)纳米体系,并研究该纳米体系对高糖诱导人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)损伤模型的保护机制。方法采用超速离心法提取ARPE-19细胞EXO,透射电子显微镜(TEM)观察结构并采用Western...
目的构建外泌体(EXO)共载牛血清白蛋白联合异槲皮苷(BSA@ISO)纳米体系,并研究该纳米体系对高糖诱导人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)损伤模型的保护机制。方法采用超速离心法提取ARPE-19细胞EXO,透射电子显微镜(TEM)观察结构并采用Western blot检测EXO标志物表达。通过振荡合成法制备BSA@ISO纳米颗粒。采用膜挤出仪器制备ROS响应性EXO共载BSA@ISO纳米体系(BSA@ISO@EXO)。测定BSA@ISO@EXO粒径和Zeta电位并采用TEM观察形态;采用分光光度计和红外光谱分析化学结构;采用差量法计算包封率和负载率。将细胞分为对照组、模型组、低剂量ISO纳米体系组(载药ISO为5μmol/L)、中剂量ISO纳米体系组(载药ISO为10μmol/L)、高剂量ISO纳米体系组(载药ISO为20μmol/L)、单纯ISO组。采用CCK-8法测定各组不同时间点细胞活性;采用流式细胞仪测定各组培养48 h细胞凋亡率;采用ELISA法测定各组培养上清液中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平,采用生化试剂盒法测定细胞抗氧化酶谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及上清液中氧化应激标志物丙二醛(MDA)水平。结果BSA@ISO@EXO纳米体系呈均匀球形,平均粒径约39.6 nm;紫外可见光谱和红外光谱显示该纳米体系存在BSA、ISO和EXO的特征吸收峰;该纳米体系的包封率为(76.6±5.0)%,负载率为(10.3±0.6)%,24 h药物释放率达75.1%。CCK-8实验显示,各不同ISO浓度纳米体系组培养48 h细胞活力均优于单纯ISO组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。中剂量ISO纳米体系组细胞ROS水平明显低于单纯ISO组,差异有统计学意义(P<0.01)。中剂量ISO纳米体系组细胞上清中TNF-a、IL-1β和MDA水平明显低于模型组和高剂量ISO纳米体系组,GSH-PX和SOD活性明显高于模型组和高剂量ISO纳米体系组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论成功构建稳定的BSA@ISO@EXO纳米体系。该体系通过提高ISO生物利用度增强抗氧化和抗炎作用,为糖尿病视网膜病变治疗提供新策略。
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关键词
糖尿病视网膜病变
ros响应性外泌体
BSA@ISO纳米
体
系
抗氧化
抗炎
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题名
外泌体共载牛血清白蛋白联合异槲皮苷纳米体系对高糖诱导人RPE细胞的保护作用及机制
1
作者
王梦华
胡芷柔
机构
郑州大学第一附属医院眼科
出处
《中华实验眼科杂志(中英文)》
北大核心
2025年第9期794-800,共7页
文摘
目的构建外泌体(EXO)共载牛血清白蛋白联合异槲皮苷(BSA@ISO)纳米体系,并研究该纳米体系对高糖诱导人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)损伤模型的保护机制。方法采用超速离心法提取ARPE-19细胞EXO,透射电子显微镜(TEM)观察结构并采用Western blot检测EXO标志物表达。通过振荡合成法制备BSA@ISO纳米颗粒。采用膜挤出仪器制备ROS响应性EXO共载BSA@ISO纳米体系(BSA@ISO@EXO)。测定BSA@ISO@EXO粒径和Zeta电位并采用TEM观察形态;采用分光光度计和红外光谱分析化学结构;采用差量法计算包封率和负载率。将细胞分为对照组、模型组、低剂量ISO纳米体系组(载药ISO为5μmol/L)、中剂量ISO纳米体系组(载药ISO为10μmol/L)、高剂量ISO纳米体系组(载药ISO为20μmol/L)、单纯ISO组。采用CCK-8法测定各组不同时间点细胞活性;采用流式细胞仪测定各组培养48 h细胞凋亡率;采用ELISA法测定各组培养上清液中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平,采用生化试剂盒法测定细胞抗氧化酶谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及上清液中氧化应激标志物丙二醛(MDA)水平。结果BSA@ISO@EXO纳米体系呈均匀球形,平均粒径约39.6 nm;紫外可见光谱和红外光谱显示该纳米体系存在BSA、ISO和EXO的特征吸收峰;该纳米体系的包封率为(76.6±5.0)%,负载率为(10.3±0.6)%,24 h药物释放率达75.1%。CCK-8实验显示,各不同ISO浓度纳米体系组培养48 h细胞活力均优于单纯ISO组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。中剂量ISO纳米体系组细胞ROS水平明显低于单纯ISO组,差异有统计学意义(P<0.01)。中剂量ISO纳米体系组细胞上清中TNF-a、IL-1β和MDA水平明显低于模型组和高剂量ISO纳米体系组,GSH-PX和SOD活性明显高于模型组和高剂量ISO纳米体系组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论成功构建稳定的BSA@ISO@EXO纳米体系。该体系通过提高ISO生物利用度增强抗氧化和抗炎作用,为糖尿病视网膜病变治疗提供新策略。
关键词
糖尿病视网膜病变
ros响应性外泌体
BSA@ISO纳米
体
系
抗氧化
抗炎
Keywords
Diabetic retinopathy
ros
-responsive exosomes
BSA@ISO nanosystem
Antioxidant
Antiinflammatory
分类号
R587.2 [医药卫生—内分泌]
R774.1 [医药卫生—眼科]
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作者
出处
发文年
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1
外泌体共载牛血清白蛋白联合异槲皮苷纳米体系对高糖诱导人RPE细胞的保护作用及机制
王梦华
胡芷柔
《中华实验眼科杂志(中英文)》
北大核心
2025
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