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水牛RNA聚合酶III启动子的克隆与鉴定
被引量:
1
1
作者
张晓溪
刘庆友
+3 位作者
邓彦飞
罗婵
崔奎青
石德顺
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期858-863,共6页
【目的】获得有效的水牛RNA聚合酶III启动子序列,为开展水牛源细胞的基因特异沉默研究奠定基础。【方法】通过启动子上、下游保守序列对水牛源启动子7SK、U6进行克隆和启动子关键顺式作用元件识别,利用一段针对EGFP的shRNA片段(shEGFP)...
【目的】获得有效的水牛RNA聚合酶III启动子序列,为开展水牛源细胞的基因特异沉默研究奠定基础。【方法】通过启动子上、下游保守序列对水牛源启动子7SK、U6进行克隆和启动子关键顺式作用元件识别,利用一段针对EGFP的shRNA片段(shEGFP)对水牛7SK、U6启动子进行功能性分析,然后分别在水牛源及鼠源细胞中与pEGFP-N1共转染,转染48h后用荧光显微镜检测EGFP的表达情况,并用流式细胞仪和荧光实时定量PCR检测EGFP沉默表达情况。【结果】克隆获得水牛7SK、U6启动子序列分别为430和357bp,其OCT-1(或CACCC盒)及TATA盒高度保守。连接shEGFP后与pEGFP-N1共转染细胞,通过荧光显微镜可观察到细胞发生了明显的荧光表达沉默现象;通过流式细胞分析,发现水牛7SK和U6启动子引导的shEGFP在水牛源细胞中沉默效率高达93.82%和87.45%;荧光实时定量PCR检测结果显示,在转染bu7SK-shEGFP和buU6-shEGFP的水牛源BFF细胞中,EGFP表达水平均显著低于其他物种启动子的细胞转染组(P<0.05),而在鼠源PT67细胞中,水牛启动子的启动效率与其他物种启动子差异不显著(P>0.05)。【结论】水牛7SK和U6启动子可高效启动shRNA表达,且具有一定的物种特异性。
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关键词
水牛
rna聚合酶ⅲ
启动子
7SK
U6
克隆
鉴定
基因沉默
在线阅读
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职称材料
真核生物RNA聚合酶的结构和功能概述
2
作者
严意华
林颖韬
胡雪峰
《生物学教学》
北大核心
2018年第11期2-4,共3页
真核生物中存在三种RNA聚合酶,它们对基因的表达起着十分重要的作用。本文概述三种RNA聚合酶的结构和功能。
关键词
rna
聚合
酶
Ⅰ
rna
聚合
酶
Ⅱ
rna聚合酶ⅲ
转录
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职称材料
增加tRNA_i^(Met)合成促进细胞增殖与癌性转化
3
作者
贺惠娟
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期1204-1204,共1页
关键词
蛋白质合成
细胞增殖
细胞转化
rna聚合酶ⅲ
癌性
产物表达
T
rna
细胞生长
在线阅读
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职称材料
DNA识别受体的研究进展
4
作者
徐丽(综述)
曹雪涛(审阅)
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期99-103,共5页
作为生命物质基础的DNA主要通过内体TLR9和胞质识别受体来启动免疫应答。近年来TLR9受体研究的新进展主要体现在以下四个方面:(1)TLR9与其配体相互作用的决定因素;(2)TLR9由内质网到内体的转位机制及其重要性;(3)内体的酸化成熟和TLR9...
作为生命物质基础的DNA主要通过内体TLR9和胞质识别受体来启动免疫应答。近年来TLR9受体研究的新进展主要体现在以下四个方面:(1)TLR9与其配体相互作用的决定因素;(2)TLR9由内质网到内体的转位机制及其重要性;(3)内体的酸化成熟和TLR9的剪切在信号转导中的作用;(4)TLR9区分自体与外源DNA的可能机制。同时,有关TLR9拮抗剂和TLR9缺陷小鼠的一系列实验有力地证实了TLR9非依赖性胞质DNA受体的存在,到目前为止共发现了3个分子:DAI、AIM2、RNA聚合酶Ⅲ。
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关键词
DNA
识别受体
TLR9
DAI
AIM2
rna聚合酶ⅲ
在线阅读
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职称材料
题名
水牛RNA聚合酶III启动子的克隆与鉴定
被引量:
1
1
作者
张晓溪
刘庆友
邓彦飞
罗婵
崔奎青
石德顺
机构
广西大学动物科学技术学院
出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第5期858-863,共6页
基金
国家“863”计划项目(2011AA100607)
国家转基因重大专项项目(2011ZX08007-003)
文摘
【目的】获得有效的水牛RNA聚合酶III启动子序列,为开展水牛源细胞的基因特异沉默研究奠定基础。【方法】通过启动子上、下游保守序列对水牛源启动子7SK、U6进行克隆和启动子关键顺式作用元件识别,利用一段针对EGFP的shRNA片段(shEGFP)对水牛7SK、U6启动子进行功能性分析,然后分别在水牛源及鼠源细胞中与pEGFP-N1共转染,转染48h后用荧光显微镜检测EGFP的表达情况,并用流式细胞仪和荧光实时定量PCR检测EGFP沉默表达情况。【结果】克隆获得水牛7SK、U6启动子序列分别为430和357bp,其OCT-1(或CACCC盒)及TATA盒高度保守。连接shEGFP后与pEGFP-N1共转染细胞,通过荧光显微镜可观察到细胞发生了明显的荧光表达沉默现象;通过流式细胞分析,发现水牛7SK和U6启动子引导的shEGFP在水牛源细胞中沉默效率高达93.82%和87.45%;荧光实时定量PCR检测结果显示,在转染bu7SK-shEGFP和buU6-shEGFP的水牛源BFF细胞中,EGFP表达水平均显著低于其他物种启动子的细胞转染组(P<0.05),而在鼠源PT67细胞中,水牛启动子的启动效率与其他物种启动子差异不显著(P>0.05)。【结论】水牛7SK和U6启动子可高效启动shRNA表达,且具有一定的物种特异性。
关键词
水牛
rna聚合酶ⅲ
启动子
7SK
U6
克隆
鉴定
基因沉默
Keywords
buffalo
rna
polymerase
ⅲ
promoter
7SK
U6
cloning
identification
gene silencing
分类号
S823.83 [农业科学—畜牧学]
在线阅读
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职称材料
题名
真核生物RNA聚合酶的结构和功能概述
2
作者
严意华
林颖韬
胡雪峰
机构
福建师范大学生命科学学院
福建教育学院
出处
《生物学教学》
北大核心
2018年第11期2-4,共3页
基金
国家自然科学基金项目"BMP/Wnt信号内稳态破坏导致小鼠肺气肿的机制"
No.81570036
+3 种基金
国家自然科学基金项目"成牙诱导潜能的分子构成及再生牙的制备"
No.81771034
福建省科技厅重点项目"心脏起搏细胞的体外诱导及其功能验证"
No.2015I0011
文摘
真核生物中存在三种RNA聚合酶,它们对基因的表达起着十分重要的作用。本文概述三种RNA聚合酶的结构和功能。
关键词
rna
聚合
酶
Ⅰ
rna
聚合
酶
Ⅱ
rna聚合酶ⅲ
转录
分类号
Q55 [生物学—生物化学]
在线阅读
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职称材料
题名
增加tRNA_i^(Met)合成促进细胞增殖与癌性转化
3
作者
贺惠娟
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期1204-1204,共1页
关键词
蛋白质合成
细胞增殖
细胞转化
rna聚合酶ⅲ
癌性
产物表达
T
rna
细胞生长
分类号
R995 [医药卫生—毒理学]
R285.5 [医药卫生—中药学]
在线阅读
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职称材料
题名
DNA识别受体的研究进展
4
作者
徐丽(综述)
曹雪涛(审阅)
机构
第二军医大学免疫学研究所
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第1期99-103,共5页
文摘
作为生命物质基础的DNA主要通过内体TLR9和胞质识别受体来启动免疫应答。近年来TLR9受体研究的新进展主要体现在以下四个方面:(1)TLR9与其配体相互作用的决定因素;(2)TLR9由内质网到内体的转位机制及其重要性;(3)内体的酸化成熟和TLR9的剪切在信号转导中的作用;(4)TLR9区分自体与外源DNA的可能机制。同时,有关TLR9拮抗剂和TLR9缺陷小鼠的一系列实验有力地证实了TLR9非依赖性胞质DNA受体的存在,到目前为止共发现了3个分子:DAI、AIM2、RNA聚合酶Ⅲ。
关键词
DNA
识别受体
TLR9
DAI
AIM2
rna聚合酶ⅲ
Keywords
DNA
TLR9
DAI
AIM2
rna
polymerase
ⅲ
分类号
R392.1 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
水牛RNA聚合酶III启动子的克隆与鉴定
张晓溪
刘庆友
邓彦飞
罗婵
崔奎青
石德顺
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
真核生物RNA聚合酶的结构和功能概述
严意华
林颖韬
胡雪峰
《生物学教学》
北大核心
2018
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
增加tRNA_i^(Met)合成促进细胞增殖与癌性转化
贺惠娟
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
4
DNA识别受体的研究进展
徐丽(综述)
曹雪涛(审阅)
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2010
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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