检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

RLM-RACE法扩增獐茅液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白基因5′-cDNA末端序列被引量：3: 1; 作者王景艳张高华 +2 位作者苏乔安利佳刘兆普《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期903-907,共5页; 根据已获得的盐生植物獐茅(Aeluropus littoralisvar.sinensisDebeaux)液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白(Na+/H+antiporter)基因部分cDNA片段,设计2条特异引物(GSP1、GSP2),采用RLM-RACE(RNA ligase-medi-ated rapid amplification of 5′and 3... 展开更多; 关键词獐茅 NA^+/H^+逆向转运蛋白 rlm-race 5-′cDNA末端转录起始位点; 在线阅读下载PDF 职称材料

绿色巴夫藻脂肪酸去饱和酶的克隆和初步研究(英文) 被引量：1: 2; 作者元冬娟周克元 +1 位作者康景轩江黎明《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期732-739,共8页; 在高等植物中,Δ9脂肪酸去饱和酶引入第一个双键到饱和的脂肪酸链中,导致单不饱和脂肪酸的形成。我们通过RT-PCR、RNA ligase mediated RACE(RLM-RACE)and Overlap-PCR方法从海洋微藻绿色巴夫藻中克隆到一个命名为PvfadA的脂肪酸去饱和... 展开更多; 关键词硬脂酰-ACP Δ9去饱和酶 rlm-race PCR 绿色巴夫藻 GC-MS; 在线阅读下载PDF 职称材料

用cDNA末端扩增法克隆柞蚕攻击素(attacin)基因及序列分析被引量：5: 3; 作者张波王林美 +3 位作者叶博李树英赵振军范琦《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期333-339,共7页; 利用cDNA末端扩增(RLM-RACE)方法,克隆了柞蚕攻击素(attac in)基因cDNA序列(GenBank登陆号:AY960680)。柞蚕攻击素基因cDNA序列全长912 bp,其中699 bp的蛋白质编码区可编码233个氨基酸。预测蛋白质分子量为25 kD,等电点(pI)为7.54。柞... 展开更多; 关键词柞蚕攻击素末端扩增; 在线阅读下载PDF 职称材料

cDNA末端快速扩增技术及其方法的改进被引量：2: 4; 作者贺斌黄兴奇 +4 位作者余腾琼钟巧芳王玲仙张秀程在全《浙江农业科学》 2012年第9期1352-1357,共6页; cDNA末端快速扩增(RACE)技术可以快速扩增mRNA3'和5'末端,从而获得全长的cDNA序列,为分离和研究新的基因提供了一个快速简便的方法。从RACE的原理出发,综述RACE技术的优缺点,阐述RACE技术的改良,并对其应用现状和发展前景进行... 展开更多; 关键词 CDNA末端快速扩增 RACE原理 RACE的优化 TdT加尾 rlm-race; 在线阅读下载PDF 职称材料

葡萄microRNA156b和microRNA172c及其靶基因在冬芽二次成花过程中的表达特性研究被引量：4: 5; 作者王晨张演义 +3 位作者房经贵宋长年刘洪王西成《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期59-64,共6页; 利用半定量RT-PCR与实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)技术检测‘藤稔’葡萄microRNA156b(Vv-miR156b)和microRNA172c(Vv-miR172c)及其靶基因(Vv-SPL9和Vv-AP2)在摘心处理(5月14日、5月20日、5月28日)后不同发育时期冬芽中的表达情况,并利用R... 展开更多; 关键词葡萄 microRNAs 靶基因冬芽实时荧光定量RT-PCR RLM-5'-RACE; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗人CD25嵌合抗体基因的构建及其瞬时表达研究被引量：1: 6; 作者胡迪超张爱华 +2 位作者潘勇兵詹珊珊杨晓明《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期648-653,共6页; 目的:构建抗人CD25嵌合抗体基因并在哺乳动物细胞中进行瞬时表达和初步鉴定。方法:采用RLM-RACE法克隆WuTac抗体可变区和信号肽序列,并利用基因拼接法构建嵌合抗体基因。用脂质体法瞬时转染三种哺乳动物细胞,并使用ELISA、FCM、WB、Dot ... 展开更多; 关键词 CD25 RLM—RACE 基因拼接嵌合抗体瞬时表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

microRNA靶基因检测技术研究进展被引量：3: 7; 作者郭晓琴孙红正《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第4期11-13,18,共4页; microRNA是真核生物基因表达调控的重要因子,对其靶基因的验证是研究microRNA功能必不可少的环节。验证microRNA与其靶基因的相互作用,可以根据能否进行靶基因切割、能否造成目标靶基因RNA表达量或蛋白表达量降低以及能否形成RISC-mRNA... 展开更多; 关键词 MICRORNA 5’RLM—RACE target—mimic 靶基因降解组免疫共沉淀; 在线阅读下载PDF 职称材料

赤桉eca-miRn33及其靶基因EcaICE1的鉴定与表达分析: 8; 作者刘艳张紫阳 +2 位作者谭芷茵周茜林元震《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2023年第6期800-805,共6页; 以赤桉组培苗为材料,通过PCR扩增eca-miRn33前体基因序列,结合5′RLM-RACE和烟草瞬时表达分析其对靶基因EcaICE1的剪切特征,并利用实时荧光定量PCR分析叶片和茎干中eca-miRn33与靶基因EcaICE1在低温胁迫下的表达模式。结果显示:赤桉eca-... 展开更多; 关键词赤桉 miRn33 ICE1 低温胁迫 5′rlm-race; 在线阅读下载PDF 职称材料

梅PmmiR319a与靶基因PmTCP2的验证与表达分析被引量：1: 9; 作者王万许侍婷 +2 位作者高志红倪照君蔡斌华《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1908-1916,共9页; 为验证PmmiR319a与PmTCP2基因的靶标关系,并研究PmmiR319a在梅花芽发育过程中的作用,本研究以梅品种‘大嵌蒂’为试验材料,克隆梅PmmiR319a前体序列及其靶基因PmTCP2,采用5'RACE技术对两者之间的靶标关系进行验证,并进一步分析在花... 展开更多; 关键词梅 miR319a TCP2 荧光定量PCR RLM-5'RACE; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名RLM-RACE法扩增獐茅液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白基因5′-cDNA末端序列被引量：3: 1; 作者王景艳张高华苏乔安利佳刘兆普; 机构南京农业大学资源与环境科学学院大连理工大学生物科学与工程系; 出处《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期903-907,共5页; 基金国家海洋863计划(2003AA627040) 辽宁省科技基金(2001101001); 文摘根据已获得的盐生植物獐茅(Aeluropus littoralisvar.sinensisDebeaux)液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白(Na+/H+antiporter)基因部分cDNA片段,设计2条特异引物(GSP1、GSP2),采用RLM-RACE(RNA ligase-medi-ated rapid amplification of 5′and 3′cDNA ends)法获得了其5-′cDNA末端序列,并找出了转录起始位点。该片段长816 bp,与芦苇液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因序列同源性最高达91%,与拟南芥、盐角草、水稻、大麦、小麦的同源性分别为81%、82%、86%、87%和81%,为该基因全长的克隆及启动子的研究奠定了基础。与其它测定基因转录起始位点的方法相比,RLM-RACE方法更快捷、简便、准确。; 关键词獐茅 NA^+/H^+逆向转运蛋白 rlm-race 5-′cDNA末端转录起始位点; Keywords Aeluropus littoralis Na^＋/H6＋ antiporter rlm-race 5＇-cDNA end transcription initiation site; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名绿色巴夫藻脂肪酸去饱和酶的克隆和初步研究(英文) 被引量：1: 2; 作者元冬娟周克元康景轩江黎明; 机构广东医学院生物化学与分子生物学教研室哈佛大学医学院麻省总医院; 出处《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期732-739,共8页; 基金 supported in part by grants from the Guangdong Technology Plan Program (Grant 2005B10401011) Guangdong Science Foundation (Grant 5011595); 文摘在高等植物中,Δ9脂肪酸去饱和酶引入第一个双键到饱和的脂肪酸链中,导致单不饱和脂肪酸的形成。我们通过RT-PCR、RNA ligase mediated RACE(RLM-RACE)and Overlap-PCR方法从海洋微藻绿色巴夫藻中克隆到一个命名为PvfadA的脂肪酸去饱和酶候选基因。通过将PvfadA基因在大肠杆菌表达系统中成功表达,PvFadA可以特异性地将C18∶0脂肪酸转变成C18∶1脂肪酸。PvFadA的氨基酸序列中存在一个存在于acyl-ACP去饱和酶的特异性金属离子结合区段(D/E)X2HX～100(D/E)X2H。通过同源模建PvFadA的3D结构显示,其包含了11个α螺旋,其中α3、α4、α6和α7组成了一个4个螺旋桶的核心结构,预测其可能是酶的活性中心。PvFadA的3D结构类似于蓖麻和结核分枝杆菌H37Rv的acyl-ACP去饱和酶。; 关键词硬脂酰-ACP Δ9去饱和酶 rlm-race PCR 绿色巴夫藻 GC-MS; Keywords Stearoyl-ACP △9 desaturase rlm-race PCR Pavlova viridis GC-MS; 分类号 Q176 [生物学—水生生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名用cDNA末端扩增法克隆柞蚕攻击素(attacin)基因及序列分析被引量：5: 3; 作者张波王林美叶博李树英赵振军范琦; 机构辽宁省农业科学院大连生物技术研究所辽宁省野蚕重点实验室; 出处《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期333-339,共7页; 文摘利用cDNA末端扩增(RLM-RACE)方法,克隆了柞蚕攻击素(attac in)基因cDNA序列(GenBank登陆号:AY960680)。柞蚕攻击素基因cDNA序列全长912 bp,其中699 bp的蛋白质编码区可编码233个氨基酸。预测蛋白质分子量为25 kD,等电点(pI)为7.54。柞蚕攻击素基因中包含2个内含子。S ignal P 3.0 Server程序分析结果显示,柞蚕攻击素第1-17位氨基酸为信号肽序列。蛋白质功能区分析预测,柞蚕攻击素在第47-112氨基酸之间为攻击素-N(attac in-N)功能区,第113-233位氨基酸之间为攻击素-C(attac in-C)功能区。以邻接法(ne igh-bor-join ing,NJ)建立了与其它昆虫攻击素的系统关系图。; 关键词柞蚕攻击素末端扩增; Keywords Antheraea pernyi Attacin rlm-race; 分类号 S885.1 [农业科学—特种经济动物饲养] Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名cDNA末端快速扩增技术及其方法的改进被引量：2: 4; 作者贺斌黄兴奇余腾琼钟巧芳王玲仙张秀程在全; 机构云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所云南农业大学; 出处《浙江农业科学》 2012年第9期1352-1357,共6页; 基金国家转基因专项项目(2009ZX08001-007B) 云南省科技攻关项目(2010BB004); 文摘 cDNA末端快速扩增(RACE)技术可以快速扩增mRNA3'和5'末端,从而获得全长的cDNA序列,为分离和研究新的基因提供了一个快速简便的方法。从RACE的原理出发,综述RACE技术的优缺点,阐述RACE技术的改良,并对其应用现状和发展前景进行了分析。; 关键词 CDNA末端快速扩增 RACE原理 RACE的优化 TdT加尾 rlm-race; 分类号 S513 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名葡萄microRNA156b和microRNA172c及其靶基因在冬芽二次成花过程中的表达特性研究被引量：4: 5; 作者王晨张演义房经贵宋长年刘洪王西成; 机构南京农业大学园艺学院聊城大学农学院; 出处《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期59-64,共6页; 基金中央高校基本科研业务费专项(KYJ200909); 文摘利用半定量RT-PCR与实时荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)技术检测‘藤稔’葡萄microRNA156b(Vv-miR156b)和microRNA172c(Vv-miR172c)及其靶基因(Vv-SPL9和Vv-AP2)在摘心处理(5月14日、5月20日、5月28日)后不同发育时期冬芽中的表达情况,并利用RLM-5'-RACE验证了miRNAs作用其靶基因的方式。结果表明:仅5月28日摘心处理的冬芽能够进行花芽分化并形成花序,而其他处理及对照未能花芽分化。2种RT-PCR检测结果基本一致,5月28日摘心处理的2条miRNAs表达水平明显下降,且花序中有最低表达。相应的靶基因在冬芽二次成花过程中的表达水平呈现出与其miRNAs相反的变化趋势。RLM-5'-RACE结果显示,2条miRNAs介导靶基因裂解,裂解位点均在miRNAs 5'端的第10和11位碱基之间。表明microRNA156b和microRNA172c通过介导相应靶基因的裂解调控其靶基因的表达,从而影响葡萄冬芽的二次成花。; 关键词葡萄 microRNAs 靶基因冬芽实时荧光定量RT-PCR RLM-5'-RACE; Keywords grapevine microRNAs target genes winter buds quantitative real-time RT-PCR RLM-5′-RACE; 分类号 S663.1 [农业科学—果树学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗人CD25嵌合抗体基因的构建及其瞬时表达研究被引量：1: 6; 作者胡迪超张爱华潘勇兵詹珊珊杨晓明; 机构武汉生物制品研究所; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期648-653,共6页; 文摘目的:构建抗人CD25嵌合抗体基因并在哺乳动物细胞中进行瞬时表达和初步鉴定。方法:采用RLM-RACE法克隆WuTac抗体可变区和信号肽序列,并利用基因拼接法构建嵌合抗体基因。用脂质体法瞬时转染三种哺乳动物细胞,并使用ELISA、FCM、WB、Dot blot和免疫荧光法进行检测。结果:成功克隆WuTac抗体可变区和信号肽序列,并构建了抗人CD25嵌合抗体表达质粒。瞬时转染结果表明所表达的嵌合抗体保留了亲本抗体WuTac的抗原结合力。结论:成功构建了抗人CD25嵌合抗体基因,为其进一步研究打下基础。; 关键词 CD25 RLM—RACE 基因拼接嵌合抗体瞬时表达; Keywords CD25 rlm-race Gene splicing Chimeric antibody Transient expression; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名microRNA靶基因检测技术研究进展被引量：3: 7; 作者郭晓琴孙红正; 机构中州大学河南农业大学; 出处《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2013年第4期11-13,18,共4页; 基金国家青年科学基金资助项目(31200973); 文摘 microRNA是真核生物基因表达调控的重要因子,对其靶基因的验证是研究microRNA功能必不可少的环节。验证microRNA与其靶基因的相互作用,可以根据能否进行靶基因切割、能否造成目标靶基因RNA表达量或蛋白表达量降低以及能否形成RISC-mRNA复合体等特征进行检测。基于此,从以上三方面对验证microRNA靶基因的技术进行了综述。; 关键词 MICRORNA 5’RLM—RACE target—mimic 靶基因降解组免疫共沉淀; Keywords microRNA 5＇rlm-race target-mimic target gene degradome coimmuniprecipi- tation; 分类号 Q341 [生物学—遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名赤桉eca-miRn33及其靶基因EcaICE1的鉴定与表达分析: 8; 作者刘艳张紫阳谭芷茵周茜林元震; 机构华南农业大学林学与风景园林学院; 出处《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2023年第6期800-805,共6页; 基金国家自然科学基金项目(31470673)。; 文摘以赤桉组培苗为材料,通过PCR扩增eca-miRn33前体基因序列,结合5′RLM-RACE和烟草瞬时表达分析其对靶基因EcaICE1的剪切特征,并利用实时荧光定量PCR分析叶片和茎干中eca-miRn33与靶基因EcaICE1在低温胁迫下的表达模式。结果显示:赤桉eca-miRn33前体基因序列全长60 bp,可形成典型的发卡结构,eca-miRn33成熟序列位于其前体的5′端;5′RLM-RACE和农杆菌介导的烟草瞬时表达试验结果表明eca-miRn33可靶向剪切EcaICE1;eca-miRn33表达量与EcaICE1表达量之间呈显著负相关。; 关键词赤桉 miRn33 ICE1 低温胁迫 5′rlm-race; Keywords Eucalyptus camaldulensis miRn33 ICE1 low temperature stress 5′RLM⁃RACE; 分类号 S718.46 [农业科学—林学] Q943.2 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名梅PmmiR319a与靶基因PmTCP2的验证与表达分析被引量：1: 9; 作者王万许侍婷高志红倪照君蔡斌华; 机构南京农业大学园艺学院秦皇岛市林业局; 出处《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1908-1916,共9页; 基金江苏省六大人才高峰项目(NY-068) 江苏省自然基金(BK20151426 BK20150679); 文摘为验证PmmiR319a与PmTCP2基因的靶标关系,并研究PmmiR319a在梅花芽发育过程中的作用,本研究以梅品种‘大嵌蒂’为试验材料,克隆梅PmmiR319a前体序列及其靶基因PmTCP2,采用5'RACE技术对两者之间的靶标关系进行验证,并进一步分析在花芽发育过程中的表达模式。结果表明,梅PmmiR319a前体序列含有茎环结构,通过序列比对和系统发育分析发现,不同物种的miR319a前体序列的茎环发卡结构和成熟体区域表现出较高的保守性。梅PmTCP2基因全长1 500 bp,编码499个氨基酸。荧光定量PCR分析结果表明,PmmiR319a在梅花发育的前期表达量高,而PmTCP2在梅花发育的中期和后期表达量较高,PmmiR319a与预测靶基因PmTCP2的表达模式呈负相关,表明二者存在负调控的关系,与预测的靶标关系一致。RLM-5'RACE技术验证结果表明,PmmiR319a对其靶基因PmTCP2的mRNA进行了切割,切割位点位于第10和第11个碱基之间。由此可知,PmmiR319a通过调控靶基因PmTCP2影响花的发育。本研究结果为阐明梅花中miR319a的功能提供了一定的理论依据。; 关键词梅 miR319a TCP2 荧光定量PCR RLM-5'RACE; Keywords Prunus mume miR319a TCP2 real-time PCR RLM-5＇RACE; 分类号 S662.4 [农业科学—果树学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	RLM-RACE法扩增獐茅液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白基因5′-cDNA末端序列	王景艳张高华苏乔安利佳刘兆普	《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	绿色巴夫藻脂肪酸去饱和酶的克隆和初步研究(英文)	元冬娟周克元康景轩江黎明	《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	用cDNA末端扩增法克隆柞蚕攻击素(attacin)基因及序列分析	张波王林美叶博李树英赵振军范琦	《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心	2006	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	cDNA末端快速扩增技术及其方法的改进	贺斌黄兴奇余腾琼钟巧芳王玲仙张秀程在全	《浙江农业科学》	2012	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	葡萄microRNA156b和microRNA172c及其靶基因在冬芽二次成花过程中的表达特性研究	王晨张演义房经贵宋长年刘洪王西成	《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	4	在线阅读下载PDF 职称材料
6	抗人CD25嵌合抗体基因的构建及其瞬时表达研究	胡迪超张爱华潘勇兵詹珊珊杨晓明	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	microRNA靶基因检测技术研究进展	郭晓琴孙红正	《河南农业科学》 CSCD 北大核心	2013	3	在线阅读下载PDF 职称材料
8	赤桉eca-miRn33及其靶基因EcaICE1的鉴定与表达分析	刘艳张紫阳谭芷茵周茜林元震	《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2023	0	在线阅读下载PDF 职称材料
9	梅PmmiR319a与靶基因PmTCP2的验证与表达分析	王万许侍婷高志红倪照君蔡斌华	《核农学报》 CAS CSCD 北大核心	2018	1	在线阅读下载PDF 职称材料