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敲低鞘氨醇激酶1增强人结肠癌RKO细胞对顺铂的敏感性
被引量：
3
1
作者
覃琳
刘诗权
+6 位作者
覃蒙斌
伍文红
覃楠
符振华
徐春燕
黄杰安
赖铭裕
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第5期623-629,共7页
目的探讨沉默结肠癌RKO细胞鞘氨醇激酶1(SphK1)基因对顺铂(DDP)敏感性的影响及作用机制。方法构建靶向SphK1基因的慢病毒载体并感染RKO细胞后,实时定量PCR检测SphK1的mRNA水平,Western blot法检测SphK1蛋白水平。然后将RKO细胞分为SphK...
目的探讨沉默结肠癌RKO细胞鞘氨醇激酶1(SphK1)基因对顺铂(DDP)敏感性的影响及作用机制。方法构建靶向SphK1基因的慢病毒载体并感染RKO细胞后,实时定量PCR检测SphK1的mRNA水平,Western blot法检测SphK1蛋白水平。然后将RKO细胞分为SphK1低表达组(sh SphK1组)、阴性感染对照组(sh Control组)和空白对照组。培养24、48、72 h,MTT法检测细胞增殖活性;(0、2、4、8、16、32)μg/m L DDP处理细胞后,MTT法再次检测细胞增殖活性,TUNEL检测细胞凋亡,Western blot法检测KI-67抗原(ki67)、Bcl-2、胱天蛋白酶9(caspase-9)和caspase-3蛋白的水平。结果敲低SphK1基因能抑制RKO细胞的增殖,促进细胞凋亡。DDP呈时间和浓度依赖性抑制各组细胞的增殖,与对照组和sh Control组相比,敲低SphK1的细胞增殖能力显著降低;DDP呈剂量依赖性诱导细胞凋亡,且敲低SphK1的细胞凋亡率明显高于对照组和sh Control组。此外,敲低SphK1后,抑制ki67和Bcl-2的表达,增加caspase-9和caspase-3的表达,经DDP处理后,ki67和Bcl-2蛋白的表达水平明显下降,caspase-9和caspase-3蛋白的表达水平显著增加。结论敲低SphK1基因降低Bcl-2水平、增加caspase-9、caspase-3水平,抑制RKO结肠癌细胞增殖并促进其凋亡,并增强RKO细胞对DDP的敏感性。
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关键词
鞘氨醇激酶1(SphK1)
顺铂(DDP)
rko结肠癌细胞
细胞
增殖
细胞
凋亡
化疗敏感性
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职称材料
题名
敲低鞘氨醇激酶1增强人结肠癌RKO细胞对顺铂的敏感性
被引量：
3
1
作者
覃琳
刘诗权
覃蒙斌
伍文红
覃楠
符振华
徐春燕
黄杰安
赖铭裕
机构
广西医科大学第一附属医院消化内科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第5期623-629,共7页
基金
国家自然科学基金(81460380)
广西省自然科学基金(2011GXNSFA018182)
文摘
目的探讨沉默结肠癌RKO细胞鞘氨醇激酶1(SphK1)基因对顺铂(DDP)敏感性的影响及作用机制。方法构建靶向SphK1基因的慢病毒载体并感染RKO细胞后,实时定量PCR检测SphK1的mRNA水平,Western blot法检测SphK1蛋白水平。然后将RKO细胞分为SphK1低表达组(sh SphK1组)、阴性感染对照组(sh Control组)和空白对照组。培养24、48、72 h,MTT法检测细胞增殖活性;(0、2、4、8、16、32)μg/m L DDP处理细胞后,MTT法再次检测细胞增殖活性,TUNEL检测细胞凋亡,Western blot法检测KI-67抗原(ki67)、Bcl-2、胱天蛋白酶9(caspase-9)和caspase-3蛋白的水平。结果敲低SphK1基因能抑制RKO细胞的增殖,促进细胞凋亡。DDP呈时间和浓度依赖性抑制各组细胞的增殖,与对照组和sh Control组相比,敲低SphK1的细胞增殖能力显著降低;DDP呈剂量依赖性诱导细胞凋亡,且敲低SphK1的细胞凋亡率明显高于对照组和sh Control组。此外,敲低SphK1后,抑制ki67和Bcl-2的表达,增加caspase-9和caspase-3的表达,经DDP处理后,ki67和Bcl-2蛋白的表达水平明显下降,caspase-9和caspase-3蛋白的表达水平显著增加。结论敲低SphK1基因降低Bcl-2水平、增加caspase-9、caspase-3水平,抑制RKO结肠癌细胞增殖并促进其凋亡,并增强RKO细胞对DDP的敏感性。
关键词
鞘氨醇激酶1(SphK1)
顺铂(DDP)
rko结肠癌细胞
细胞
增殖
细胞
凋亡
化疗敏感性
Keywords
sphingosine kinase 1
cisplatin （DDP）
colon cancer cells
rko
cell proliferation
apoptosis
chemosensitivity
分类号
R735.3 [医药卫生—肿瘤]
R965 [医药卫生—药理学]
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1
敲低鞘氨醇激酶1增强人结肠癌RKO细胞对顺铂的敏感性
覃琳
刘诗权
覃蒙斌
伍文红
覃楠
符振华
徐春燕
黄杰安
赖铭裕
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
3
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