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吉祥草中甾体皂苷RCE-4对宫颈癌裸鼠移植瘤的抑制作用 被引量:13
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作者 杨小姣 白彩虹 +5 位作者 邹坤 贺海波 尉小琴 覃慧林 张永峰 汪鋆植 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期476-482,共7页
目的观察吉祥草中甾体皂苷RCE-4对宫颈癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法采用传统方法分离鉴定RCE-4。将0.3 m L Caski(4×107/m L)细胞悬液接种于裸鼠右侧后腿背部皮下,建立宫颈癌移植瘤模型,然后按瘤体积大小随机分为模型组、紫杉醇(1... 目的观察吉祥草中甾体皂苷RCE-4对宫颈癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法采用传统方法分离鉴定RCE-4。将0.3 m L Caski(4×107/m L)细胞悬液接种于裸鼠右侧后腿背部皮下,建立宫颈癌移植瘤模型,然后按瘤体积大小随机分为模型组、紫杉醇(10 mg/kg)和RCE-4(25、50、100 mg/kg)组,1次/d给药,连续4周,末次给药的次日处死裸鼠,称量裸鼠体质量、瘤质量,测量肿瘤体积,计算抑瘤率。光镜下观察移植瘤组织形态学变化,TUNEL染色测定细胞凋亡率,免疫组化检测肿瘤组织中COX-2表达,荧光定量PCR测定移植瘤组织中Bcl-2、Bax、Caspase-3和Caspase-9 mRNA表达,计算Bcl-2/Bax值,Western blot检测移植瘤组织中Survivin蛋白表达。结果 RCE-4(25、50、100 mg/kg)可明显降低宫颈癌裸鼠移植瘤的体积和瘤质量(P<0.05,P<0.01),上调Bax、Caspase-3和Caspase-9 mRNA表达,下调Bcl-2 mRNA表达和COX-2、Survivin蛋白表达及Bcl-2/Bax值(P<0.05,P<0.01)。结论RCE-4对宫颈癌裸鼠移植瘤的生长具有显著抑制作用,其机制可能与其上调Bax、Caspase-9、Caspase-3的表达和下调Survivin、Bcl-2、COX-2的表达有关。 展开更多
关键词 甾体皂苷rce-4 吉祥草 宫颈癌 CASKI细胞 裸鼠 细胞凋亡
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吉祥草中甾体皂苷RCE-4对人宫颈癌Caski细胞Ras/Erk和p16/cyclinD1/CDK4通路的影响 被引量:7
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作者 颜为红 邹坤 +6 位作者 贺海波 张永峰 李小妹 李小琴 杨小姣 汪鋆植 邓张双 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2018年第3期247-254,共8页
目的:研究吉祥草中甾体皂苷RCE-4影响Ras/Erk和p16/cyclin D1/CDK4信号通路促进Caski细胞凋亡的作用机制。方法:体外培养人宫颈癌Caski细胞株,用RCE-4作为处理因素,MTT法检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞周期分布;Real-time PCR检测... 目的:研究吉祥草中甾体皂苷RCE-4影响Ras/Erk和p16/cyclin D1/CDK4信号通路促进Caski细胞凋亡的作用机制。方法:体外培养人宫颈癌Caski细胞株,用RCE-4作为处理因素,MTT法检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞周期分布;Real-time PCR检测p16、cyclin D1和CDK4m RNA表达水平;Western blot检测Ras/Erk信号通路总蛋白和磷酸化蛋白表达水平。结果:RCE-4呈剂量依赖性抑制Caski细胞增殖,其作用24 h的IC50值为12.33μmol/L;升高G0/G1期细胞比例,降低S期细胞比例;抑制Ras、p-Raf、p-Mek1/2和p-Erk1/2蛋白表达,降低p-Raf/Raf、p-Mek1/2/Mek1/2和p-Erk1/2/Erk1/2比值,上调p16的m RNA表达,下调cyclin D1和CDK4的m RNA表达。结论:RCE-4可抑制Caski细胞的增殖,诱导细胞在G0/G1期阻滞,其诱导作用与其抑制Ras/Erk和p16/cyclin D1/CDK4信号通路激活有关。 展开更多
关键词 rce-4 细胞周期 CASKI细胞 Ras/Erk信号通路 p16/cyclinD1/CDK4信号通路
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吉祥草活性成分RCE-4抑制宫颈癌Ca Ski细胞增殖、侵袭和迁移的活性及机制研究 被引量:4
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作者 陈重旭 游方芳 +5 位作者 金桂兰 程凡 邹坤 邢翔飞 奚炜 陈剑锋 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2021年第9期1558-1571,共14页
本文探讨吉祥草活性单体RCE-4对宫颈癌Ca Ski细胞增殖、侵袭和迁移的影响及机制。采用MTT法和克隆形成实验检测RCE-4对Ca Ski细胞增殖的影响,划痕实验及Transwell小室实验研究RCE-4对Ca Ski细胞的迁移和侵袭的影响,间接免疫荧光实验和We... 本文探讨吉祥草活性单体RCE-4对宫颈癌Ca Ski细胞增殖、侵袭和迁移的影响及机制。采用MTT法和克隆形成实验检测RCE-4对Ca Ski细胞增殖的影响,划痕实验及Transwell小室实验研究RCE-4对Ca Ski细胞的迁移和侵袭的影响,间接免疫荧光实验和Western blot法检测RCE-4对β-catenin和YAP/TAZ蛋白入核转运的影响,采用Western blot法检测RCE-4对Wnt/β-catenin、Hippo/YAP信号路通及下游靶蛋白表达的影响。结果显示,RCE-4可以显著抑制Ca Ski细胞的增殖、迁移和侵袭;RCE-4处理后,β-catenin和YAP/TAZ蛋白入核减弱,GSK3β、p-β-catenin、p-YAP、p-LATS1的蛋白表达量增加,PAK4、p-GSK3β、β-catenin、MST1、LATS1、NUAK2、YAP/TAZ、YAP的蛋白表达量减少,下游靶蛋白MMPs、c-Myc、SOX2、CYR61、VCAM-1、ICAM-1的表达被抑制,提示RCE-4体外可能通过对Wnt/β-catenin和Hippo/YAP信号通路的调控发挥其抗Ca Ski细胞侵袭和迁移的作用。 展开更多
关键词 rce-4 侵袭 迁移 WNT/Β-CATENIN Hippo/YAP
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吉祥草活性成分RCE-4触发内质网应激调控人宫颈癌Ca Ski细胞周期阻滞 被引量:2
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作者 牟丽云 邢翔飞 +4 位作者 陈重旭 张晶 金桂兰 奚伟 陈剑锋 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 2021年第9期1224-1231,共8页
目的探索吉祥草活性成分RCE-4抑制宫颈癌Ca Ski细胞增殖的机制。方法四甲基偶氮唑蓝法(MTT法)和克隆形成实验考察RCE-4对Ca Ski细胞生长的影响,并计算其半抑制浓度(IC_(50));流式细胞术检测细胞周期的变化;Western blot检测内质网应激... 目的探索吉祥草活性成分RCE-4抑制宫颈癌Ca Ski细胞增殖的机制。方法四甲基偶氮唑蓝法(MTT法)和克隆形成实验考察RCE-4对Ca Ski细胞生长的影响,并计算其半抑制浓度(IC_(50));流式细胞术检测细胞周期的变化;Western blot检测内质网应激及细胞周期相关分子蛋白水平的表达。结果RCE-4对人宫颈癌Ca Ski细胞的增殖具有明显抑制作用,作用24、48、72 h的IC_(50)值分别为8.61、4.69、4.34μmol·L^(-1)。Western blot结果显示RCE-4激活了内质网应激PERK/eIF2α/ATF4/CHOP信号通路。流式细胞术结果显示RCE-4可明显诱导细胞G 2/M期阻滞,细胞内CDK1、cdc25C、p-cdc25C、CyclinB1、Chk2、p-Chk2、GADD45α、MDM2蛋白水平明显降低,p21、p27和ATM蛋白水平明显升高。结论RCE-4可能通过触发内质网应激诱导Ca Ski细胞G 2/M期阻滞从而抑制人宫颈癌Ca Ski细胞增殖。 展开更多
关键词 吉祥草 rce-4 宫颈癌 内质网应激 细胞周期阻滞 细胞增殖
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吉祥草甾体皂苷RCE-4诱导人宫颈癌Ca Ski细胞凋亡与自噬相互作用的分子机制 被引量:3
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作者 游方芳 程凡 +2 位作者 邹坤 张晶 陈剑锋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1727-1735,共9页
目的解析RCE-4诱导的凋亡和自噬在其抑制人宫颈癌Ca Ski细胞增殖中的作用并探索增强其抗肿瘤活性的方法。方法应用各种自噬和凋亡抑制剂、siRNA质粒作为工具,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot分析凋亡和自噬相... 目的解析RCE-4诱导的凋亡和自噬在其抑制人宫颈癌Ca Ski细胞增殖中的作用并探索增强其抗肿瘤活性的方法。方法应用各种自噬和凋亡抑制剂、siRNA质粒作为工具,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot分析凋亡和自噬相关蛋白的表达。结果自噬抑制剂Baf A1与RCE-4协同效果最佳,联用后RCE-4对Ca Ski细胞的半数抑制浓度IC_(50)由4.669μmol·L^(-1)减小到1.368μmol·L^(-1),细胞凋亡率由49.96%增长到91.08%。Beclin 1 siRNA、Bcl-2 siRNA与RCE-4联用可使IC_(50)由4.669μmol·L^(-1)分别减小到1.536和1.582μmol·L^(-1)。凋亡抑制剂Z-VAD-FMK不影响RCE-4对Ca Ski细胞的敏感性。结论凋亡在RCE-4抑制Ca Ski细胞增殖中起主导地位,而自噬则起着保护细胞、拮抗凋亡的作用。可通过联用Baf A1或者抑制Beclin 1、Bcl-2表达来增强Ca Ski细胞对RCE-4的敏感性。 展开更多
关键词 rce-4 凋亡 自噬 相互作用 凋亡和自噬抑制剂 SIRNA质粒
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