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人参皂苷Rb1抑制NETs形成防治动脉粥样硬化的作用及分子机制
1
作者 杨祯妮 张自龙 +5 位作者 崔金刚 杜霄烨 徐静 熊敏琪 陈瑜 张腾 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2025年第10期2889-2898,共10页
目的 旨在探讨人参皂苷Rb1(Ginsenoside Rb1,Rb1)调控中性粒细胞胞外诱捕网(Neutrophil extracellular traps,NETs)干预动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)的作用及分子机制。方法 体内实验:以ApoE基因敲除小鼠叠加饲喂高脂饮食构建AS模... 目的 旨在探讨人参皂苷Rb1(Ginsenoside Rb1,Rb1)调控中性粒细胞胞外诱捕网(Neutrophil extracellular traps,NETs)干预动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)的作用及分子机制。方法 体内实验:以ApoE基因敲除小鼠叠加饲喂高脂饮食构建AS模型,通过HE染色、油红O染色分别观察主动脉根部斑块病理形态学改变;免疫荧光标记主动脉根部斑块部位中性粒细胞、瓜氨酸化组蛋白(Cit-H3)和巨噬细胞以及白细胞介素1β以评估病理部位炎症浸润情况。体外实验:分别采用肉豆蔻酸佛波酯和胆固醇结晶诱导的NETs为模型,通过Sytox染色和Cit-H3、髓过氧化物酶免疫荧光染色评估Rb1抗NETs形成的直接作用。通过DCFH-DA评估Rb1干预细胞活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平的作用。通过蛋白质印迹法评估Rb1对组蛋白H3瓜氨酸修饰的作用。结果 体内实验:Rb1显著抑制斑块形成和斑块内脂质沉积(P<0.05),显著降低斑块内炎症浸润(P<0.05)。体外实验:Rb1显著抑制NETs形成(P<0.05),显著抑制中性粒细胞ROS水平(P<0.05),显著抑制组蛋白H3瓜氨酸修饰水平(P<0.05)。结论 Rb1通过抑制斑块NETs形成显著抑制AS进程,其机制可能是部分通过抑制中性粒细胞氧化应激通路激活导致的组蛋白H3瓜氨酸化。 展开更多
关键词 人参皂苷rb1 中性粒细胞胞外诱捕网 动脉粥样硬化 胆固醇结晶 氧化应激 组蛋白瓜氨酸化
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静息期精原前体细胞Rb1基因敲除致精原干细胞特化异常机制初探
2
作者 陈新玲 龙旖璇 杜桂花 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第1期82-91,共10页
目的探讨静息期精原前体细胞Rb1敲除致雄鼠精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)特化异常的调控机制。方法①用R对在基因表达综合数据库(gene expression omnibus,GEO)(GEO登记号:GSE124904)获取的出生后0.5 d(postnatal day 0.5... 目的探讨静息期精原前体细胞Rb1敲除致雄鼠精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)特化异常的调控机制。方法①用R对在基因表达综合数据库(gene expression omnibus,GEO)(GEO登记号:GSE124904)获取的出生后0.5 d(postnatal day 0.5,P0.5)雄鼠精原前体细胞单细胞测序数据进行分析。②用Vasa-Cre工具鼠与Rb1^(flox/flox)(或Id4-gfpTg;Rb1^(flox/flox))小鼠配繁构建静息期精原前体细胞Rb1条件性敲除(conditional knock out,cKO)雄鼠或带ID4绿色荧光(ID4-GFP)的Rb1 cKO雄鼠,通过PCR基因鉴定判断生殖细胞Rb1敲除情况以区分cKO雄鼠与对照(Con)。采集出生后数天内的小鼠(n=3~8)睾丸,利用流式细胞术基于细胞荧光强度将ID4‐GFP细胞均分为3个群落,检测各个群落细胞数量和细胞周期。③免疫荧光染色检测生殖细胞增殖(Ki67+)、SSCs特化(FOXO1胞核转换)和生殖细胞分化(STRA8+)情况。④TUNEL染色检测细胞凋亡。结果①单细胞测序数据分析显示:在P0.5精原前体细胞的2类细胞中,与细胞增殖相关的基因在将特化为精原干细胞的那一群细胞中富集表达。②生殖细胞增殖情况检测表明:P2.5时,对照[(11.22±3.27)%]与cKO小鼠[(46.10±6.21)%)]小鼠睾丸横切面生殖细胞Ki67+占比差异具有统计学意义(P<0.01)。③流式细胞术分析表明:P2.5对照[(5.05±1.46)%]与cKO[(12.05±2.22)%]小鼠睾丸ID4‐GFP荧光强度最强的那群细胞处于S期的占比差异具有统计学意义(P<0.05)。④TUNEL染色显示cKO组而非对照组小鼠睾丸横切面检测到细胞发生凋亡。⑤SSCs特化标志检测结果显示对照[(20.57±2.15)%]和cKO[(45.08±2.45)%]小鼠睾丸横切面生殖细胞FOXO1位于细胞质的占比差异具有统计学意义(P<0.01)。结论静息期精原前体细胞Rb1敲除使其出生后细胞周期恢复紊乱、凋亡发生,导致SSCs特化异常。 展开更多
关键词 精原前体细胞 rb1 精原干细胞 特化 细胞增殖 细胞凋亡
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人参皂苷Rb1通过ERK通路改善新生小鼠缺血缺氧性脑损伤
3
作者 杨飞鸿 林超 +5 位作者 孙翔宇 王永强 李贺 李利利 雍玥 宋建钢 《神经解剖学杂志》 北大核心 2025年第3期261-271,共11页
目的:研究人参皂苷Rb1对新生小鼠缺血缺氧(HI)的神经保护作用,并分析其可能的分子机制。方法:选取7日龄C57BL/6新生小鼠,随机分为假手术组(Sham)、缺血缺氧模型组(HI)和HI模型+人参皂苷Rb1干预组(HI+Rb1),每组10只。采用改良Rice-Vannu... 目的:研究人参皂苷Rb1对新生小鼠缺血缺氧(HI)的神经保护作用,并分析其可能的分子机制。方法:选取7日龄C57BL/6新生小鼠,随机分为假手术组(Sham)、缺血缺氧模型组(HI)和HI模型+人参皂苷Rb1干预组(HI+Rb1),每组10只。采用改良Rice-Vannucci法建立缺血缺氧模型,并在手术后通过腹腔注射人参皂苷Rb1(20 mg/kg),连续7 d,每天1次。术后7 d和14 d对小鼠脑损伤程度进行评估,检测大脑皮质神经元、少突胶质细胞数量以及ERK信号通路的激活状态。同时,利用子宫电转(IUE)技术在大脑皮质过表达ERK信号通路,观察ERK信号通路对胶质细胞发育的影响。进一步通过IUE方法,在P0小鼠大脑皮质过表达ERK,7 d后制作HI模型,分析增强ERK信号对少突胶质细胞发育和髓鞘再生的作用。结果:与HI组相比,HI+Rb1干预组小鼠运动能力显著改善,脑损伤面积缩小,成熟神经元丢失减少,而新生神经元增多。同时,大脑皮质少突胶质细胞数量增加,ERK信号通路的激活得到增强。过表达ERK信号通路的小鼠大脑皮质中,少突胶质细胞显著增多。在过表达ERK信号的HI模型小鼠中,脑损伤区周围的少突胶质前体细胞增多,与人参皂苷Rb1干预后的结果一致。结论:人参皂苷Rb1具有改善新生小鼠缺血缺氧性脑损伤的作用,可能通过增强ERK信号通路,促进少突胶质细胞的增殖和髓鞘再生。 展开更多
关键词 缺血缺氧性脑病 人参皂苷rb1 少突胶质细胞 髓鞘再生 ERK信号通路 小鼠
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基于网络药理学及体外实验探讨人参皂苷Rb1治疗脑缺血再灌注损伤的作用机制
4
作者 黄鹏 吴斌 +5 位作者 董若彤 余学成 高增祥 曹艳 艾中柱 曹国胜 《中成药》 北大核心 2025年第7期2434-2440,共7页
目的探讨人参皂苷Rb1治疗脑缺血再灌注损伤(CIRI)的作用靶点及潜在机制。方法采用网络药理学预测人参皂苷Rb1的潜在靶基因并筛选出治疗CIRI的交集靶点,构建“人参皂苷Rb1-靶点-通路”网络并富集相关通路,分子对接预测人参皂苷Rb1与核心... 目的探讨人参皂苷Rb1治疗脑缺血再灌注损伤(CIRI)的作用靶点及潜在机制。方法采用网络药理学预测人参皂苷Rb1的潜在靶基因并筛选出治疗CIRI的交集靶点,构建“人参皂苷Rb1-靶点-通路”网络并富集相关通路,分子对接预测人参皂苷Rb1与核心靶点的结合能力。体外构建小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)模型,验证人参皂苷Rb1治疗CIRI的关键靶点途径。结果共获得78个人参皂苷Rb1治疗CIRI的潜在靶点。人参皂苷Rb1治疗CIRI主要参与对异种刺激的反应、基因表达的正向调节等过程,通过脂质与动脉粥样硬化、MAPK信号通路等治疗CIRI。分子对接显示,人参皂苷Rb1与MAPK1/3/8/14及MMP-2/9均具有较高的结合能力。人参皂苷Rb1可提高OGD/R诱导的bEnd.3细胞存活率(P<0.05,P<0.01),升高ZO-1、Occludin蛋白表达(P<0.05,P<0.01),降低MMP-2、MMP-9蛋白表达(P<0.05,P<0.01),抑制MAPK通路相关蛋白p38、JNK、ERK的磷酸化水平(P<0.05,P<0.01)。结论人参皂苷Rb1改善CIRI的作用机制可能与抑制MAPK信号通路激活,降低MMP-2、MMP-9蛋白表达,从而减少对ZO-1、Occludin蛋白的降解有关。 展开更多
关键词 人参皂苷rb1 脑缺血再灌注损伤 网络药理学 体外实验 紧密连接蛋白 MAPK信号通路
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人参皂甙Rb1和黄芪多糖对微血管内皮细胞分泌NO、IL-6和TNF-α的影响 被引量：23
5
作者 解慧梅 胡格 +6 位作者 索占伟 刘易通 尹龙 于同泉 路平 穆祥 黄会岭 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期903-907,共5页
取中药提取物人参皂甙Rb1和黄芪多糖作用于体外培养大鼠肠黏膜微血管内皮细胞,用硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)、ELISA法测定白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的变化,为分析其免疫作用机制提供试验依据。微血管内皮细胞在... 取中药提取物人参皂甙Rb1和黄芪多糖作用于体外培养大鼠肠黏膜微血管内皮细胞,用硝酸还原酶法测定一氧化氮(NO)、ELISA法测定白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的变化,为分析其免疫作用机制提供试验依据。微血管内皮细胞在人参皂甙Rb1和黄芪多糖的作用下,细胞分泌NOI、L-6和TNF-α均增多,并且随着浓度的增加内皮细胞分泌量也增加。 展开更多
关键词 黄芪多糖 人参皂甙rb1 微血管内皮细胞 NO IL-6 TNF—α
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人参皂苷Rb1对H_2O_2诱导新生大鼠心肌细胞凋亡的保护作用 被引量：30
6
作者 许浩 葛亚坤 +2 位作者 邓同乐 王天楠 郑筱祥 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期803-806,共4页
目的观察人参皂苷Rb1对H2O2诱导的新生大鼠心肌细胞凋亡的保护作用,并探讨其可能作用机制。方法在培养的新生大鼠心肌细胞上建立H2O2损伤模型,观察不同剂量组人参皂苷Rb1(20、40、80mg·L-1)对心肌细胞凋亡率、丙二醛(MDA)含量,超... 目的观察人参皂苷Rb1对H2O2诱导的新生大鼠心肌细胞凋亡的保护作用,并探讨其可能作用机制。方法在培养的新生大鼠心肌细胞上建立H2O2损伤模型,观察不同剂量组人参皂苷Rb1(20、40、80mg·L-1)对心肌细胞凋亡率、丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性,以及细胞内钙离子变化的影响。结果不同剂量组人参皂苷Rb1可以减少心肌细胞凋亡率、降低MDA含量、增加SOD活性、减少细胞内钙超载。结论人参皂苷Rb1可以抑制H2O2引起的新生大鼠心肌细胞凋亡,其作用机制可能与其抗脂质氧化和减少细胞内钙超载有关。 展开更多
关键词 人参皂苷rb1 心肌细胞 过氧化氢 凋亡 钙离子
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人参皂苷Rb1通过抑制NF-κB p65介导的炎症和氧化应激改善内皮细胞复制性衰老 被引量：22
7
作者 周彬 吴琳 +6 位作者 凌叶盛 余舒杰 刘定辉 柯世业 刘勇 郝宝顺 钱孝贤 《中山大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期835-843,共9页
【目的】本研究旨在探讨人参皂苷Rb1对内皮细胞复制性衰老的作用和机制。【方法】建立人原代脐静脉内皮细胞(HUVEC)复制性衰老模型,根据细胞形态的变化、衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色阳性率和纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)的... 【目的】本研究旨在探讨人参皂苷Rb1对内皮细胞复制性衰老的作用和机制。【方法】建立人原代脐静脉内皮细胞(HUVEC)复制性衰老模型,根据细胞形态的变化、衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色阳性率和纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)的表达水平评估HUVEC衰老;将复制性衰老模型细胞分为0、20、40、80、100μmol/L Rb1组,不同浓度人参皂苷Rb1处理衰老细胞48 h后观察衰老指标SA-β-Gal染色和PAI-1蛋白变化,每组3个复孔;采用Western blot方法检测对照组(CPDL 2的HUVEC)、模型组(衰老细胞组)及人参皂苷Rb1组核因子κB p65(NF-κB p65)的活性,每组3个复孔;检测对照组、模型组及人参皂苷Rb1组细胞培养液中氧化应激和炎症指标,每组3个复孔。【结果】累计细胞群体倍增值(CPDL)16的HUVEC可作为复制性衰老模型;与0μmol/L Rb1组相比,80μmol/L Rb1组SA-β-Gal染色阳性细胞数和PAI-1蛋白表达均明显降低(P <0.001);复制性衰老细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的活力明显低于对照组(P <0.001),而丙二醛(MDA)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量及NF-κB p65的活性均明显高于对照组(P <0.001),80μmol/L人参皂苷Rb1处理后SOD活力明显增加(P <0.05),MDA、IL-6、TNF-α的产量明显减少(P <0.05),NF-κB p65活性降低(P <0.001)。【结论】人参皂苷Rb1可通过抑制NF-κB p65介导的氧化应激和炎症反应延缓复制性内皮细胞衰老。 展开更多
关键词 人参皂苷rb1 炎症 氧化应激 NF-ΚBP65 复制性细胞衰老
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视网膜母细胞瘤基因1(RB1)研究进展 被引量：21
8
作者 刘双虎 王守志 +1 位作者 张慧 李辉 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1097-1104,共8页
视网膜母细胞瘤基因1(Retinoblastoma1,RB1)是人类第一个分离克隆的抑癌基因。RB1基因是细胞周期的负调控因子,通过与转录因子结合调节细胞增殖和分化所需基因的表达,从而维持细胞生长发育的平衡。因此,该基因的功能与细胞周期、细胞衰... 视网膜母细胞瘤基因1(Retinoblastoma1,RB1)是人类第一个分离克隆的抑癌基因。RB1基因是细胞周期的负调控因子,通过与转录因子结合调节细胞增殖和分化所需基因的表达,从而维持细胞生长发育的平衡。因此,该基因的功能与细胞周期、细胞衰老、细胞凋亡、细胞分化和生长抑制等有关。文章对RB1基因的结构、表达及其功能的研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 rb1基因 结构 表达 细胞周期 细胞分化 生长抑制
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人参皂甙Rb1抗新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡研究 被引量：24
9
作者 聂荣庆 李扣华 +4 位作者 胡国柱 张进 文珠 吴东风 杨新跃 《中国康复理论与实践》 CSCD 2004年第12期723-725,共3页
目的探讨人参皂甙Rb1对体外培养的新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡的保护机理。方法应用“Neurobasal加B2 7Supplement”体外培养大鼠大脑皮层神经细胞 ,并在缺氧条件下使用台盼蓝拒染法、Hoechst 3 3 3 42荧光染色法、免疫细胞化... 目的探讨人参皂甙Rb1对体外培养的新生大鼠大脑皮层神经细胞缺氧性凋亡的保护机理。方法应用“Neurobasal加B2 7Supplement”体外培养大鼠大脑皮层神经细胞 ,并在缺氧条件下使用台盼蓝拒染法、Hoechst 3 3 3 42荧光染色法、免疫细胞化学染色法观察人参皂甙Rb1对原代神经细胞的抗凋亡保护作用。结果在 10— 10 0 μg/ml的浓度范围内 ,人参皂甙Rb1能降低缺氧诱导的神经细胞凋亡率 (10 0 μg/ml组 ,P <0 .0 5 ) ,增加缺氧神经细胞Bcl 2蛋白的表达 (5 0— 10 0 μg/ml组 ,P <0 .0 5 ) ,同时减少Bax蛋白的表达 (5 0— 10 0 μg/ml组 ,P <0 .0 5—P <0 .0 0 1) ,提高Bcl 2 /Bax比值 (5 0— 10 0 μg/ml组 ,P <0 .0 5 )。 结论在 5 0— 10 0μg/ml的浓度范围内 ,人参皂甙Rb1通过上调缺氧神经细胞Bcl 2表达和下调Bax表达 ,避免缺氧神经细胞凋亡。 展开更多
关键词 人参皂甙rb1 大鼠 神经细胞 缺氧 原代培养 凋亡
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人参皂甙单体Rb1对多药耐药细胞系K562/HHT的耐药逆转作用 被引量：56
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作者 史曦凯 张翼军 赵春景 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第11期825-827,共3页
目的：探讨中药钙离子通道拮抗剂人参皂甙单体Ｒｂ１，对白血病多药耐药细胞系（Ｋ－５６２／ＨＨＴ）的耐药逆转作用。方法：药物敏感试验采用四唑氮盐（ＭＴＴ）比色试验法。结果：Ｒｂ１在０～８０ μｍ ｏｌ／Ｌ浓度范围内对Ｋ５６... 目的：探讨中药钙离子通道拮抗剂人参皂甙单体Ｒｂ１，对白血病多药耐药细胞系（Ｋ－５６２／ＨＨＴ）的耐药逆转作用。方法：药物敏感试验采用四唑氮盐（ＭＴＴ）比色试验法。结果：Ｒｂ１在０～８０ μｍ ｏｌ／Ｌ浓度范围内对Ｋ５６２／ＨＨＴ未见明显毒性作用；２０ μｍ ｏｌ／Ｌ、４０ μｍ ｏｌ／ＬＲｂ１ 耐药逆转倍数分别为４．４、７．９ 倍。结论：Ｒｂ１ 可以逆转Ｋ５６２／ＨＨＴ的多药耐药性。 展开更多
关键词 多药耐药 耐药逆转 人参皂甙rb1 白血病
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三七皂甙单体Rb1对心肌细胞膜钙离子通道的影响 被引量：29
11
作者 张斌 金士翱 +3 位作者 况铣 姚伟星 夏国谨 江明性 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期33-35,共3页
Ｒ２８４．１；Ｒ３３１．３８；Ｒ９７２．２；Ｒ９７２．４摘要目的观察Ｒｂ１对豚鼠心肌细胞膜Ｌ－型电压依赖性钙通道的影响。方法采用标准全细胞膜片钳技术（ｗｈｏｌｅ－ｃｅｌｐａｔｃｈｃｌａｍｐｒｅｃｏｒｄｉｎｇｔｅｃｈｎ... Ｒ２８４．１；Ｒ３３１．３８；Ｒ９７２．２；Ｒ９７２．４摘要目的观察Ｒｂ１对豚鼠心肌细胞膜Ｌ－型电压依赖性钙通道的影响。方法采用标准全细胞膜片钳技术（ｗｈｏｌｅ－ｃｅｌｐａｔｃｈｃｌａｍｐｒｅｃｏｒｄｉｎｇｔｅｃｈｎｉｑｕｅ）。结果在保持电位－４０ｍＶ，细胞去激化至＋４０ｍＶ，刺激频率０．５Ｈｚ，时程１５０ｍｓ条件下，Ｒｂ１１０μｍｏｌＬ－１和３０μｍｏｌＬ－１分别使ＢａｙＫ８６４４和ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ敏感的钙内向电流减少１６．２％±３．７％（Ｐ＜０．０５，ｎ＝５）和３８．３％±１０．４％（Ｐ＜０．０１，ｎ＝５），且在３～１０００μｍｏｌＬ－１范围内，其抑制作用呈浓度依赖关系。结论实验证明Ｒｂ１为一钙通道阻滞剂。 展开更多
关键词 三七皂甙 rb1 心肌细胞膜 钙通道
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CRISPR/Cas9介导RB1基因敲除及其在鸡前脂肪细胞分化、增殖中的功能研究 被引量：9
12
作者 张琦 黄娇娇 +4 位作者 杨彩侠 王宇祥 张慧 赵建国 李辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1775-1784,共10页
旨在研究RB1基因在鸡前脂肪细胞分化和增殖过程中的功能,本研究利用CRISPR/Cas9系统在鸡前脂肪细胞中敲除RB1基因,检测鸡前脂肪细胞的分化和增殖能力及相关标志基因的表达水平。结果表明,CRISPR/Cas9系统能够有效介导RB1基因的敲除并引... 旨在研究RB1基因在鸡前脂肪细胞分化和增殖过程中的功能,本研究利用CRISPR/Cas9系统在鸡前脂肪细胞中敲除RB1基因,检测鸡前脂肪细胞的分化和增殖能力及相关标志基因的表达水平。结果表明,CRISPR/Cas9系统能够有效介导RB1基因的敲除并引起RB1基因翻译的提前终止,敲除效率可以达到10%。油红O提取比色和CCK-8的结果显示,敲除RB1基因后,鸡前脂肪细胞的分化能力减弱、增殖能力增强;qRT-PCR结果显示,RB1基因敲除之后脂肪细胞分化标志基因G0S2、FAS、A-FABP的mRNA表达水平下降,尤其是G0S2基因的表达水平在前脂肪细胞分化的各个阶段都表现为显著的下降。同时RB1基因敲除还引起细胞周期相关基因CyclinD1、E2F1、Ki67、PCNA的mRNA表达水平升高。初步推断,RB1基因可能是调控鸡前脂肪细胞分化和增殖的关键调节因子。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 rb1 鸡 脂肪沉积 分化 增殖
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HIF-1α介导人参皂甙Rb1对缺氧心肌细胞葡萄糖代谢的调节 被引量：12
13
作者 孔宏亮 侯爱洁 +2 位作者 陈晓明 石蕴琦 赵红岩 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1621-1626,共6页
目的:探讨人参皂甙Rb1(Gs-Rb1)是否通过缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和(或)AMP激活的蛋白激酶α(AMPKα)调节缺氧心肌细胞的葡萄糖代谢而改善其生存能力。方法:将乳鼠心肌细胞随机分为对照组、缺氧组(1%O_2、94%N_2和5%CO_2)和缺氧干预组(... 目的:探讨人参皂甙Rb1(Gs-Rb1)是否通过缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和(或)AMP激活的蛋白激酶α(AMPKα)调节缺氧心肌细胞的葡萄糖代谢而改善其生存能力。方法:将乳鼠心肌细胞随机分为对照组、缺氧组(1%O_2、94%N_2和5%CO_2)和缺氧干预组(即Gs-Rb1组、Ara-A组、Gs-Rb1+Ara-A组、YC-1组、Gs-Rb1+YC-1组、Ara-A+YC-1组和Gs-Rb1+YC-1+Ara-A组),Gs-Rb1、Ara-A和YC-1浓度分别为200μmol/L、500μmol/L和5μmol/L,均干预8 h。MTT法检测细胞存活率;Western blot法半定量检测AMPKα、p-AMPKα、HIF-1α和葡萄糖转运体4(GLUT-4)的蛋白水平;ELISA检测己糖激酶(HK)、磷酸果糖激酶(PFK)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性。结果:Gs-Rb1显著改善缺氧心肌细胞的生存能力,该作用可被Ara-A和YC-1抑制,且YC-1和Ara-A具有协同效应。Gs-Rb1增加缺氧心肌细胞AMPK活性的效应可被Ara-A或YC-1抑制。Ara-A和YC-1能不同程度抑制Gs-Rb1上调缺氧心肌细胞HIF-1α表达的效应。Gs-Rb1显著上调缺氧心肌细胞膜GLUT-4的表达,但该作用可被Ara-A或YC-1抑制,Ara-A和YC-1联用时尤为显著。Gs-Rb1显著增加缺氧心肌细胞HK、PFK和LDH等的活性,但该作用可被Ara-A和YC-1抑制,且YC-1和Ara-A具有协同抑制效应。结论:人参皂甙Rb1改善缺氧心肌细胞生存能力与其促进葡萄糖摄取和增强葡萄糖糖酵解有关,这些效应可被HIF-1α和(或)AMPK调节,且HIF-1α和AMPK对此的调节具有协同作用。 展开更多
关键词 心肌细胞 人参皂甙rb1 缺氧 缺氧诱导因子1Α 糖酵解
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SIRT1/eNOS/NO通路在人参皂苷Rb1抗内皮细胞复制性衰老中的作用 被引量：14
14
作者 周彬 余舒杰 +7 位作者 刘定辉 吴琳 王敏 柯世业 刘勇 郝宝顺 朱洁明 钱孝贤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1762-1768,共7页
目的:观察人参皂苷Rb1延缓人脐静脉内皮细胞(HUVECs)复制性衰老的作用,并探讨SIRT1/e NOS/NO通路在其中的作用机制。方法:建立原代HUVECs复制性衰老模型,根据细胞形态的变化、衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色阳性率和纤溶酶原激... 目的:观察人参皂苷Rb1延缓人脐静脉内皮细胞(HUVECs)复制性衰老的作用,并探讨SIRT1/e NOS/NO通路在其中的作用机制。方法:建立原代HUVECs复制性衰老模型,根据细胞形态的变化、衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色阳性率和纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)的表达水平评估HUVECs衰老情况;采用real-time PCR方法和Western blot法检测沉默SIRT1前后衰老细胞中e NOS和PAI-1的mRNA和蛋白表达,并检测细胞上清NO的含量。结果:累积细胞群体倍增水平(CPDL)为16的HUVECs可作为复制性衰老模型; 80μmol/L人参皂苷Rb1处理后衰老细胞内SIRT1和eNOS的mRNA及蛋白表达水平增加,NO含量增加(P <0. 05),而PAI-1的mRNA和蛋白表达水平下降(P <0. 05);沉默SIRT1后,衰老细胞内e NOS的mRNA及蛋白表达减少,PAI-1的mRNA及蛋白表达增加,NO含量减少(P <0. 05);与SIRT1沉默组比较,在沉默SIRT1基础上加用人参皂苷Rb1后,e NOS和PAI-1表达水平及NO的含量未见明显变化。结论:人参皂苷Rb1可通过调控SIRT1/e NOS/NO通路延缓HUVECs复制性衰老。 展开更多
关键词 人参皂苷rb1 SIRT1/eNOS/NO信号通路 人脐静脉内皮细胞 复制性衰老 纤溶酶原激活物抑制剂1
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人参皂甙Rb1对禽流感疫苗的免疫佐剂作用 被引量：9
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作者 呼显生 马玉敏 +2 位作者 马明颖 吴斌 姜成, 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2005年第12期79-81,共3页
用人参皂甙Rb1作佐剂,利用禽流感油苗作媒介,研究了人参皂甙Rb1对鸡的免疫增强效果。结果表明:人参皂甙Rb1对禽流感油乳剂灭活苗有较强的免疫增强作用,能够诱导雏鸡产生更高的抗禽流感抗体效价,疫苗的保护率提高,对鸡胸腺、脾的发育均... 用人参皂甙Rb1作佐剂,利用禽流感油苗作媒介,研究了人参皂甙Rb1对鸡的免疫增强效果。结果表明:人参皂甙Rb1对禽流感油乳剂灭活苗有较强的免疫增强作用,能够诱导雏鸡产生更高的抗禽流感抗体效价,疫苗的保护率提高,对鸡胸腺、脾的发育均有一定的促进作用;T淋巴细胞花环率提高10%以上。 展开更多
关键词 人参皂甙rb1 禽流感 油乳剂灭活疫苗 佐剂
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液相色谱-质谱联用技术结合多探针底物法研究人参皂苷Rb1的体外代谢 被引量：8
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作者 王一博 肖丹 +3 位作者 李晓宇 戴雨霖 越皓 刘淑莹 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1894-1899,共6页
以奥美拉唑、苯妥英、卡马西平和非那西丁为检测肝药酶细胞色素P450酶(CYP450)亚型的专属探针药物,通过原型药物减少量测定法考察药物体外代谢的变化,评价人参皂苷Rb1对CYP450不同亚型酶的作用.结果表明,P2C9,P2C19和P3A4实验组与对照... 以奥美拉唑、苯妥英、卡马西平和非那西丁为检测肝药酶细胞色素P450酶(CYP450)亚型的专属探针药物,通过原型药物减少量测定法考察药物体外代谢的变化,评价人参皂苷Rb1对CYP450不同亚型酶的作用.结果表明,P2C9,P2C19和P3A4实验组与对照组差异不显著,P1A2实验组与对照组差异显著,表明人参皂苷Rb1能诱导P1A2亚型酶的活性,促进底物与酶反应,加快底物的代谢,而对P2C9,P2C19和P3A4三个亚型酶有弱的诱导或无诱导作用.根据快速分离液相色谱-质谱联用(RRLC-MS/MS)检测结果推断,人参皂苷Rb1在CYP450酶中的代谢产物可转化为人参皂苷Rb1氧化产物(Rb1+O)及人参皂苷Rd和F2. 展开更多
关键词 人参皂苷rb1 细胞色素P450酶 液相色谱-质谱联用 体外代谢
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人参皂甙Rb1对小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬及细胞因子和NO分泌的影响 被引量：12
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作者 吕梦捷 曾耀英 宋兵 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期242-244,248,共4页
目的:研究人参皂甙Rb1(Ginsenoside Rb1)对小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬及细胞因子和一氧化氮(NO)分泌的影响。方法:分离制备小鼠腹腔巨噬细胞悬液;MTT法检测不同终浓度的人参皂甙Rb1对巨噬细胞的毒性;流式细胞术检测Rb1对巨噬细胞吞噬直径... 目的:研究人参皂甙Rb1(Ginsenoside Rb1)对小鼠腹腔巨噬细胞体外吞噬及细胞因子和一氧化氮(NO)分泌的影响。方法:分离制备小鼠腹腔巨噬细胞悬液;MTT法检测不同终浓度的人参皂甙Rb1对巨噬细胞的毒性;流式细胞术检测Rb1对巨噬细胞吞噬直径1μm微球的影响;用Griess试剂盒检测Rb1对巨噬细胞NO量的影响;使用流式液相蛋白定量检测技术Cytometric Bead Array(CBA)检测Rb1对LPS刺激巨噬细胞分泌细胞因子的影响。结果:终浓度为5、10、20μmol/L的Rb1对巨噬细胞的吞噬功能具有促进作用,明显抑制LPS诱导的吞噬作用(P<0.05);Rb1能抑制巨噬细胞NO的产生(P<0.01);Rb1能够调节LPS诱导的细胞因子的产生。结论:Rb1对巨噬细胞可能具有双向调节作用,通过抑制LPS信号的转导,调节巨噬细胞因子的分泌,抑制其活化,使NO减少;对于未活化的巨噬细胞,可能通过上调其吞噬功能,增强固有免疫系统来抵御病原体侵入。 展开更多
关键词 人参皂甙rb1 巨噬细胞 吞噬 一氧化氮 细胞因子
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人参皂苷Rb1抗小鼠脑自然衰老及其对mTOR/p70S6K通路的影响 被引量：14
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作者 彭沛 宋志明 +9 位作者 刘勇 郝宝顺 余舒杰 周彬 刘定辉 牛海名 熊肇军 朱洁明 吴伟康 钱孝贤 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期176-180,共5页
【目的】观察人参皂苷Rb1对小鼠脑组织自然衰老的作用,并探讨mTOR/p70S6K通路在其中的作用。【方法】27只C57/B6雌性小鼠购于中山大学实验动物中心,其中7只3月龄C57/B6雌性小鼠为青年组,20只22月龄C57/B6雌性小鼠为老年组,青年组小鼠予... 【目的】观察人参皂苷Rb1对小鼠脑组织自然衰老的作用,并探讨mTOR/p70S6K通路在其中的作用。【方法】27只C57/B6雌性小鼠购于中山大学实验动物中心,其中7只3月龄C57/B6雌性小鼠为青年组,20只22月龄C57/B6雌性小鼠为老年组,青年组小鼠予生理盐水(PBS)腹腔注射,老年组小鼠分别予PBS(对照)、低剂量Rb1(10 mg·kg-1·d-1)、高剂量Rb1(20 mg·kg-1·d-1)腹腔注射。6周后处死小鼠,取脑组织匀浆,检测丙二醛(MDA)含量、单胺氧化酶(MAO)活性,western blot技术检测血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)、p-m TOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K蛋白表达情况。【结果】与青年小鼠比较,老年对照组小鼠脑组织中的MDA含量增多,MAO活性增加,PAI-1蛋白表达增多,m TOR蛋白、p70S6K蛋白磷酸化水平增加。与老年对照组比较,注射Rb1的两组小鼠脑组织MAO活性,m TOR蛋白、p70S6K蛋白磷酸化水平均降低;此外,高剂量Rb1组MDA含量、PAI-1蛋白的表达降低。【结论】高剂量(20 mg·kg-1·d-1)人参皂苷Rb1可以减轻小鼠脑自然衰老;人参皂苷Rb1的这一抗衰老作用可能与m TOR/p70S6K通路密切相关。 展开更多
关键词 人参皂苷rb1 自然衰老 小鼠 脑组织 mTOR/p70S6K
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炎症诱导的新型大鼠动脉粥样硬化模型的建立及Rb1的防治作用 被引量：12
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作者 樊继山 刘丹宁 +1 位作者 何翠瑶 李晓辉 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2014年第6期60-65,I0007,共7页
目的通过激发大鼠炎症反应建立新型动脉粥样硬化(AS)动物模型并观察人参皂苷Rb1的抗AS作用。方法模型组采用酵母多糖混悬液(20 mg/kg)每隔3d腹腔注射一次,引发大鼠持续性炎症;相同方法注射无菌石蜡液作为对照组;Rb1组同时腹腔注射Rb1(40... 目的通过激发大鼠炎症反应建立新型动脉粥样硬化(AS)动物模型并观察人参皂苷Rb1的抗AS作用。方法模型组采用酵母多糖混悬液(20 mg/kg)每隔3d腹腔注射一次,引发大鼠持续性炎症;相同方法注射无菌石蜡液作为对照组;Rb1组同时腹腔注射Rb1(40 mg/kg);所有大鼠均喂食高脂饲料,实验共10周。分别通过苏丹染色、透射电镜、real time PCR、免疫组化、ELISA观察大鼠主动脉壁大体标本、超微结构、NFκB、TNFα、IL6的表达。结果模型组可见红染的脂纹、斑块形成,电镜显示内膜下层出现吞噬脂滴的泡沫细胞,NFκB/P65高表达于主动脉壁的内膜层,TNFα、IL6水平均明显高于对照组,经Rb1干预后大体标本可见AS病变明显减轻,电镜下未见泡沫细胞,NFκB、TNFα、IL6水平均较模型组显著降低。结论在高脂喂饲的基础上持续炎症刺激能够成功诱导大鼠AS模型,人参皂苷Rb1能够通过抑制炎症反应抗AS。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 炎症 动物模型 rb1
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人RB1及其突变体的表达与定位 被引量：6
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作者 潘林鑫 李新颖 +5 位作者 徐南 李克娟 乔正 耿慧武 刘晓颖 范礼斌 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第8期853-858,共6页
目的研究人RB1及其缺失突变体蛋白在细胞内的表达与定位。方法以含人RB1全长cDNA序列的质粒为模板,通过PCR方法分别扩增出RB1全长及其三段缺失突变体序列,然后分别构建其表达载体,利用Western blot法和免疫荧光法检测其在细胞株中的表... 目的研究人RB1及其缺失突变体蛋白在细胞内的表达与定位。方法以含人RB1全长cDNA序列的质粒为模板,通过PCR方法分别扩增出RB1全长及其三段缺失突变体序列,然后分别构建其表达载体,利用Western blot法和免疫荧光法检测其在细胞株中的表达与定位。结果成功构建了pCDNA3.1-FLAG-RB1及其缺失突变体的表达载体,Western blot法结果证明其在细胞中都能有效地表达,免疫荧光的结果显示了RB1主要分布在细胞核,但其缺失突变体在细胞质中也有分布。结论人RB1在HEK 293T、COS7细胞中均有表达,且主要分布在细胞核内,其缺失突变体在胞质中也有分布,这为进一步了解人RB1的功能提供了一定的基础。 展开更多
关键词 rb1 转染 基因表达 细胞定位
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