RAVE （regulator of the H ^＋ -ATPase of the vacuolar and endosomal membranes）复合物由Rav1p、Rav2p和Skp1p3（DE3）中进行表达。通过IPTG诱导，SDS-PAGE分析重组菌在诱导后表达出目的蛋白。目的蛋白经Ni-NTA凝胶纯化后再经质谱...RAVE （regulator of the H ^＋ -ATPase of the vacuolar and endosomal membranes）复合物由Rav1p、Rav2p和Skp1p3（DE3）中进行表达。通过IPTG诱导，SDS-PAGE分析重组菌在诱导后表达出目的蛋白。目的蛋白经Ni-NTA凝胶纯化后再经质谱进一步验证确定为酿酒酵母的Rav2p蛋白。目前国际上还没有有关Rav2p的结构和性质以及RAVE亚基之间相互关系的研究。重组质粒pETDuet-R2的成功构建以及Rav2p的可溶性表达为研究RAVE亚基之间的相互作用以及V-ATP酶的活性调节机理打下基础。展开更多
文摘RAVE （regulator of the H ^＋ -ATPase of the vacuolar and endosomal membranes）复合物由Rav1p、Rav2p和Skp1p3（DE3）中进行表达。通过IPTG诱导，SDS-PAGE分析重组菌在诱导后表达出目的蛋白。目的蛋白经Ni-NTA凝胶纯化后再经质谱进一步验证确定为酿酒酵母的Rav2p蛋白。目前国际上还没有有关Rav2p的结构和性质以及RAVE亚基之间相互关系的研究。重组质粒pETDuet-R2的成功构建以及Rav2p的可溶性表达为研究RAVE亚基之间的相互作用以及V-ATP酶的活性调节机理打下基础。
