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调节破骨细胞分化的RANK特异性cDNA片段的研究
被引量：
3
1
作者
许多荣
罗绍凯
+3 位作者
苏畅
方荸荠
黄珊
李娟
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期1-5,共5页
【目的】在生理条件下寻找调节破骨细胞(OC)分化的核转录因子NF-κB受体激动剂(RANK)的特异性cDNA功能片段,为研究OC分化机制提供理论基础。【方法】先将RANK膜内部分的1.2kb大小的cDNA分成20个片段,用缺失突变的方法构建出20个由肿瘤...
【目的】在生理条件下寻找调节破骨细胞(OC)分化的核转录因子NF-κB受体激动剂(RANK)的特异性cDNA功能片段,为研究OC分化机制提供理论基础。【方法】先将RANK膜内部分的1.2kb大小的cDNA分成20个片段,用缺失突变的方法构建出20个由肿瘤坏死因子受体1和RANK跨膜和膜内部分组成的TNFR1/RANK嵌合体的突变体,每一个突变体在RANK膜内部分含60bp缺失。再将RANK-cDNA第1561～1680bp之间的120bp片段分为10个片段,构建10个新的TNFR1/RANK突变体,每一个突变体在其RANK膜内部分含12bp缺失。用包装细胞PlatE分别将各突变体包装成逆转录病毒,通过感染分别将这些逆转录病毒转染到肿瘤坏死因子受体1和2基因敲除小鼠的骨髓巨噬细胞(BMM)中。用TNFɑ刺激后、观察哪一个突变体不能诱导OC形成。【结果】首先发现表达TNFR1/RANK1561-1620或TNFR1/RANK1621-1680的逆转录病毒感染的BMM不能分化成OC,然后在RANK-cDNA第1561～1680bp这个大的片段中又发现表达TNFR1/RANK1597-1608、TNFR1/RANK1609-1620、TNFR1/RANK1621-1632或TNFR1/RANK1633-1644的逆转录病毒感染的BMM也不能分化成OC。【结论】RANK-cDNA第1597～1644bp之间的48bp片段(5′-gggcaggtgatgaacttcaagggtgacatcatcgtggtgtatgtcagc-3′)对OC形成起决定性作用。
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关键词
rank特异性cdna片段
嵌合体
破骨细胞
分化
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职称材料
长白山白眉蝮蛇类凝血酶基因特异片段的制备与分析
被引量：
3
2
作者
房凯
赵彦艳
孙开来
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第3期164-165,168,共3页
目的 :分离和纯化长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段 ,为克隆全长类凝血酶cDNA奠定基础。方法 :应用RT -PCR方法获得长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段 ,克隆于pGEM T载体上 ,进行测序和NCBI数据库同源性分析。结果 :获得长白山白眉蝮蛇类...
目的 :分离和纯化长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段 ,为克隆全长类凝血酶cDNA奠定基础。方法 :应用RT -PCR方法获得长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段 ,克隆于pGEM T载体上 ,进行测序和NCBI数据库同源性分析。结果 :获得长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段长度为 2 89bp ,该片段与其他种蝮蛇类凝血酶DNA片段有同源性。结论 :本实验克隆了长白山白眉蝮蛇类凝血酶基因片段。根据不同种属蛋白质家族成员的保守性和同源性设计引物可以有效地克隆家族成员的DNA片段。
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关键词
类凝血酶
基因克隆
蛇毒
基因
特
异性
cdna
片段
制备
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职称材料
题名
调节破骨细胞分化的RANK特异性cDNA片段的研究
被引量：
3
1
作者
许多荣
罗绍凯
苏畅
方荸荠
黄珊
李娟
机构
中山大学附属第一医院血液科
出处
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第1期1-5,共5页
基金
国家自然科学基金(30670997)
教育部归国人员启动基金(2005546)
+2 种基金
广东省自然科学基金(5300754)
广东省自然科学基金(06021319)
中山大学附属第一医院优秀青年人才支持计划项目(18700108)
文摘
【目的】在生理条件下寻找调节破骨细胞(OC)分化的核转录因子NF-κB受体激动剂(RANK)的特异性cDNA功能片段,为研究OC分化机制提供理论基础。【方法】先将RANK膜内部分的1.2kb大小的cDNA分成20个片段,用缺失突变的方法构建出20个由肿瘤坏死因子受体1和RANK跨膜和膜内部分组成的TNFR1/RANK嵌合体的突变体,每一个突变体在RANK膜内部分含60bp缺失。再将RANK-cDNA第1561～1680bp之间的120bp片段分为10个片段,构建10个新的TNFR1/RANK突变体,每一个突变体在其RANK膜内部分含12bp缺失。用包装细胞PlatE分别将各突变体包装成逆转录病毒,通过感染分别将这些逆转录病毒转染到肿瘤坏死因子受体1和2基因敲除小鼠的骨髓巨噬细胞(BMM)中。用TNFɑ刺激后、观察哪一个突变体不能诱导OC形成。【结果】首先发现表达TNFR1/RANK1561-1620或TNFR1/RANK1621-1680的逆转录病毒感染的BMM不能分化成OC,然后在RANK-cDNA第1561～1680bp这个大的片段中又发现表达TNFR1/RANK1597-1608、TNFR1/RANK1609-1620、TNFR1/RANK1621-1632或TNFR1/RANK1633-1644的逆转录病毒感染的BMM也不能分化成OC。【结论】RANK-cDNA第1597～1644bp之间的48bp片段(5′-gggcaggtgatgaacttcaagggtgacatcatcgtggtgtatgtcagc-3′)对OC形成起决定性作用。
关键词
rank特异性cdna片段
嵌合体
破骨细胞
分化
Keywords
special functional
cdna
fragment in receptor activator of nuclear factor kappa B
chimera
osteoelast
differentiation
分类号
R336 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
长白山白眉蝮蛇类凝血酶基因特异片段的制备与分析
被引量：
3
2
作者
房凯
赵彦艳
孙开来
机构
中国医科大学基础医学院分子遗传学教研室
出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第3期164-165,168,共3页
基金
辽宁省自然科学基金资助项目
9680 3 0 0 8
+1 种基金
辽宁省教委科研基金资助项目
972 612 14 0 7
文摘
目的 :分离和纯化长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段 ,为克隆全长类凝血酶cDNA奠定基础。方法 :应用RT -PCR方法获得长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段 ,克隆于pGEM T载体上 ,进行测序和NCBI数据库同源性分析。结果 :获得长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段长度为 2 89bp ,该片段与其他种蝮蛇类凝血酶DNA片段有同源性。结论 :本实验克隆了长白山白眉蝮蛇类凝血酶基因片段。根据不同种属蛋白质家族成员的保守性和同源性设计引物可以有效地克隆家族成员的DNA片段。
关键词
类凝血酶
基因克隆
蛇毒
基因
特
异性
cdna
片段
制备
Keywords
thrombin-like enzyme
gene cloning
snake venom
分类号
R392－33 [医药卫生—免疫学]
R977.3 [医药卫生—药品]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
调节破骨细胞分化的RANK特异性cDNA片段的研究
许多荣
罗绍凯
苏畅
方荸荠
黄珊
李娟
《中山大学学报（医学科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2009
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
长白山白眉蝮蛇类凝血酶基因特异片段的制备与分析
房凯
赵彦艳
孙开来
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001
3
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